Ovine mesenchymal stromal cells: morphologic, phenotypic and functional characterization for osteochondral tissue engineering

[Abstract] Introduction. Knowledge of ovine mesenchymal stromal cells (oMSCs) is currently expanding. Tissue engineering combining scaffolding with oMSCs provides promising therapies for the treatment of osteochondral diseases. Purpose. The aim was to isolate and characterize oMSCs from bone marrow aspirates (oBMSCs) and to assess their usefulness for osteochondral repair using β-tricalcium phosphate (bTCP) and type I collagen (Col I) scaffolds. Methods. Cells isolated from ovine bone marrow were characterized morphologically, phenotypically, and functionally. oBMSCs were cultured with osteogenic medium on bTCP and Col I scaffolds. The resulting constructs were evaluated by histology, immunohistochemistry and electron microscopy studies. Furthermore, oBMSCs were cultured on Col I scaffolds to develop an in vitro cartilage repair model that was assessed using a modified International Cartilage Research Society (ICRS) II scale. Results. oBMSCs presented morphology, surface marker pattern and multipotent capacities similar to those of human BMSCs. oBMSCs seeded on Col I gave rise to osteogenic neotissue. Assessment by the modified ICRS II scale revealed that fibrocartilage/hyaline cartilage was obtained in the in vitro repair model. Conclusions. The isolated ovine cells were demonstrated to be oBMSCs. oBMSCs cultured on Col I sponges successfully synthesized osteochondral tissue. The data suggest that oBMSCs have potential for use in preclinical models prior to human clinical studies

Generation of osteoarthritic mesenchymal stromal cell lines.

ResumenXunta de Galicia; R2016/036Xunta de Galicia; R2014/050Xunta de Galicia; CN2012/142Xunta de Gaicia; GPC2014/048Instituto de salud Carlos III; PI17/0219

"Acción pedagógica de simulación de juicios". Metodología docente de Derecho Procesal en el EEES

12 páginasEl presente artículo tiene como fin poner en conocimiento de las disciplinas científicas perteneciente al campo jurídico el proyecto que el profesorado del Área de Derecho Procesal de la Facultad de Derecho de León desarrolla para sus alumnos desde hace varios años en esa Universidad, el cual lleva por nombre “ACCIÓN PEDAGÓGICA DE SIMULACIÓN DE JUICIOS”. Se trata de un proyecto de innovación docente que busca la motivación y el rápido aprendizaje de los alumnos por la asignatura de Derecho Procesal I y II y que, tras más de ocho años de desarrollo en la Universidad de León, ha aportado unos excelentes resultados para el alumnado, buena parte de ello debido a la gran acogida de la iniciativa por aquéllos, tal y como lo avala los altos niveles de participación de los mismos.S

Generation and Characterization of Human Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) From Hand Osteoarthritis Patient-Derived Fibroblasts

[Abstract] Knowledge and research results about hand osteoarthritis (hOA) are limited due to the lack of samples and animal models of the disease. Here, we report the generation of two induced pluripotent stem cell (iPSC)-lines from patients with radiographic hOA. Furthermore, we wondered whether these iPSC-lines carried single nucleotide polymorphisms (SNPs) within genes that have been associated with hOA. Finally, we performed chondrogenic differentiation of the iPSCs in order to prove their usefulness as cellular models of the disease. We performed a non-integrative reprogramming of dermal fibroblasts obtained from two patients with radiographic rhizarthrosis and non-erosive hOA by introducing the transcriptional factors Oct4, Sox2, Klf4 and c-Myc using Sendai virus. After reprogramming, embryonic stem cell-like colonies emerged in culture, which fulfilled all the criteria to be considered iPSCs. Both iPSC-lines carried variants associated with hOA in the four studied genes and showed differences in their chondrogenic capacity when compared with a healthy control iPSC-line. To our knowledge this is the first time that the generation of iPSC-lines from patients with rhizarthrosis and non-erosive hOA is reported. The obtained iPSC-lines might enable us to model the disease in vitro, and to deeper study both the molecular and cellular mechanisms underlying hOA.This study was carried out thanks to the funding from Fundación Española de Reumatología (Proyectos 2014), Proyectos de Investigación 2016 (PI16/02124) and 2017 (PI17/02197) from Instituto de Salud Carlos III-General Subdirection of Assesment and Promotion of the Research – European Regional Development Fund (FEDER) “A way of making Europe”, Rede Galega de Terapia Celular and Grupos con Potencial de Crecemento, Xunta de Galicia (R2016/036, R2014/050, CN2012/142 and GPC2014/048); Deputación da Coruña (BINV-CS/2015); University of A Coruña; Centro de Investigación Biomédica en Red-Bioingeniería, Biomateriales y Nanomedicina (CIBER-BBN). Rocío Castro-Viñuelas, María Piñeiro-Ramil and Silvia Rodríguez-Fernández are granted by a predoctoral fellowship from Xunta de Galicia and European Union (European Social Fund) and Clara Sanjurjo-Rodríguez is beneficiary of a postdoctoral fellowship from Xunta de GaliciaXunta de Galicia; R2016/036Deputación da Coruña; BINV-CS/2015Xunta de Galicia; R2014/050Xunta de Galicia; CN2012/142Xunta de Galicia; GPC2014/04

Aprendizaje integrado de lengua inglesa y contenidos en Educación Primaria: Análisis del logro y desarrollo de contenidos científicos del alumnado mediante AICLE

La presente tesis consiste en una investigación en el ámbito educativo que trata de conocer el desarrollo de contenidos curriculares científicos, por parte del alumnado de Educación Primaria, dentro de la enseñanza definida como Aprendizaje Integrado de Lengua Inglesa y Contenidos, genéricamente conocida como AICLE, y su comparación con la adquisición y desarrollo de los mismos en la enseñanza ordinaria (alumnado de escuelas sin programas lingüísticos). Para ello se ha desarrollado un proceso investigador eminentemente práctico consistente en el desarrollo de justificación teórica, elaboración de herramientas de investigación, recogida de datos, procesamiento de los mismos mediante análisis estadísticos (cuantitativos en este caso) y elaboración de discusión y conclusiones. Éstas fueron, principalmente, la superación de los mínimos curriculares en Ciencias por parte de ambos tipos de alumnado, AICLE y no AICLE. No obstante, se obtuvieron diferencias significativas en favor del alumnado no AICLE, lo que permite acotar un aspecto susceptible de mejora en aras de aumentar la potencialidad educativa demostrada por este enfoque en aspectos como los lingüísticos (en lengua adicional y lengua materna), psicolingüísticos o cognitivos

“ACCIÓN PEDAGÓGICA DE SIMULACIÓN DE JUICIOS” METODOLOGÍA DOCENTE DE DERECHO PROCESAL EN EL EEES

El presente artículo tiene como fin poner en conocimiento de las disciplinas científicas perteneciente al campo jurídico el proyecto que el profesorado del Área de Derecho Procesal de la Facultad de Derecho de León desarrolla para sus alumnos desde hace varios años en esa Universidad, el cual lleva por nombre “ACCIÓN PEDAGÓGICA DE SIMULACIÓN DE JUICIOS”. Se trata de un proyecto de innovación docente que busca la motivación y el rápido aprendizaje de los alumnos por la asignatura de Derecho Procesal I y II y que, tras más de ocho años de desarrollo en la Universidad de León, ha aportado unos excelentes resultados para el alumnado, buena parte de ello debido a la gran acogida de la iniciativa por aquéllos, tal y como lo avala los altos niveles de participación de los mismos.Innovación docente, simulación de juicios, motivación del alumno, participación activa de los alumnos, trabajo en equipo, Derecho Procesal, adquisición de competencias, EEES

Osteogenic differentiation of oBMSCs.

<p>(A) Ovine bone marrow mesenchymal stromal cells (oBMSCs, n = 4, passages 2^nd-5^th) at day 0 of differentiation (left) and after culture for 21 days in non-differentiation control medium (20% FBS/DMEM, middle) and osteogenic-differentiation medium (right) (Magnification x100). The presence of osteoblasts was assessed by detection of calcium deposits using Alizarin Red (AR) stain (Magnification x200). (B) Bar graph represents the percentage of area positively stained for AR expressed as the mean ± standard error. 1. * and # indicates p<0.05. (C) The osteogenic differentiation potential was confirmed by quantitative Real Time Polymerase Chain Reaction (qRT-PCR). The expressions of osteogenic- and multipotency-specific genes were analyzed. mRNA levels were measured in three independent samples (n = 3) by qRT-PCR as described in Materials and Methods. Data are expressed as mean ± standard error of the relative expression (REL). The results are normalized to values obtained for oBMSCs at day 0 of differentiation, considered to equal 1.</p