Prenatal effects by exposing to amoxicillin on dental enamel in Wistar rats

Amoxicillin is an antibiotic widely prescribed; its most frequent side effects are gastrointestinal disorders and hypersensitivity reactions. Over the last 10 years studies have been published which suggest that amoxicillin may cause dental alterations similar to dental fluorosis. Never the less, the results are not conclusive, this is why it was planned the need to make controlled studies on test animals. Objectives: The purpose of this study was to determine the effect produced by amoxicillin prenatal administration on dental enamel in Wistar rats. Study Design: 12 pregnant adult rats were used distributed into five different groups: witness control (n=2) didn't get any treatment; negative control (n=2) they were prescribed with saline solution; positive control (n=3) they were prescribed with tetracycline 130 mg/kg, and two groups (n=3 and n=2) treated with amoxicillin doses of 50 and 100 mg/kg respectively. The treatments were daily administered by mouth, from the 6th gestation day to the end of gestation. Twenty five days after they were born, the offspring were sacrificed with a sodium pentobarbital overdose, the mandible was dissected and the first lower molars were gotten. The samples were fixed in 10% formaldehyde solution and clinically and histologically observed to determine any enamel disorders. Results: hypomineralization was observed in every single sample of the tetracyclic and amoxicillin treated group 100 mg/kg, meanwhile only 50% from the group administered with 50 mg/kg amoxicillin showed this histological disorder. Conclusions: the side effect caused by amoxicillin on dental enamel was doses dependent

Aloinjertos análogos de mucosa bucal en ratas no consanguíneas

Introduction: Although there are therapeutic options for the treatment of oral mucosa defects, the need for functional, anatomical and aesthetically similar substitutes persists, as well as for solutions to reduce autologous grafts morbidity.Objective: To determine clinical and histological compatibility of equivalent oral mucosa allografts generated through tissue engineering in non-consanguineous rats.Materials and methods: We used a sample of oral mucosa from Sprague Dawley rats to obtain a fibroblast culture and a keratinocytes and fibroblasts co-culture. In both cases, we used a commercial collagen membrane as “scaffold”. After ten weeks of culture, we grafted the resulting membranes into four Wistar rats. The first phase of the study was the development of the oral mucosa equivalents generated by tissue engineering. Then, we implanted them in immunocompetent Wistar rats, and finallywe evaluated the clinical and histological features of the allografts. Results: In vivo evaluation of mucosal substitutes showed a correct integration of artificial oral mucosa in immunocompetent hosts, with an increase in periodontal biotype and the creation of a zone with increased keratinization. Histologically, the tissue was similar to the control oral mucosa sample with no inflammatory reaction nor clinical or histological rejection signs.Conclusion: The equivalent oral mucosa allografts generated by tissue engineering showed clinical and histological compatibility.Introducción. A pesar de que existen opciones terapéuticas para el tratamiento de defectos de la mucosa bucal, persiste la necesidad de encontrar sustitutos funcionales, anatómicos y estéticamente similares al tejido que se va a reemplazar, así como soluciones que reduzcan la morbilidad de los injertos autólogos.Objetivo. Determinar la compatibilidad clínica e histológica de aloinjertos equivalentes de mucosa bucal elaborados mediante ingeniería tisular en ratas no consanguíneas.Materiales y métodos. Se utilizó una muestra de mucosa bucal de ratas Sprague Dawley para la obtención de un cultivo de fibroblastos y otro de queratinocitos y fibroblastos. En ambos casos, se usó una membrana de colágeno comercial como soporte. Después de diez semanas de cultivo, las membranas resultantes se injertaron en cuatro ratas Wistar. La primera fase del estudio consistió en la elaboración de los tejidos análogos de mucosa bucal mediante ingeniería tisular, los cuales se implantaron en ratas Wistar inmunocompetentes; posteriormente, se evaluaron las características clínicas e histológicas del aloinjerto.Resultados. La evaluación in vivo de los tejidos análogos demostró que se habían integrado correctamente en los huéspedes inmunocompetentes, y se había logrado el aumento del biotipo periodontal y la creación de una zona con mayor queratinización. Desde el punto de vista histológico, el tejido adquirió características similares a las de la muestra de mucosa bucal de control, sin ningún tipo de reacción inflamatoria ni signos clínicos o histológicos de rechazo.Conclusión. Hubo compatibilidad clínica e histológica de los aloinjertos equivalentes de mucosa bucal obtenidos mediante ingeniería tisular

Neonate Human Remains: A Window of Opportunity to the Molecular Study of Ancient Syphilis

Ancient DNA (aDNA) analysis can be a useful tool in bacterial disease diagnosis in human remains. However, while the recovery of Mycobacterium spp. has been widely successful, several authors report unsuccessful results regarding ancient treponemal DNA, casting doubts on the usefulness of this technique for the diagnosis of ancient syphilis. Here, we present results from an analysis of four newborn specimens recovered from the crypt of “La Ermita de la Soledad” (XVI–XVII centuries), located in the province of Huelva in the southwest of Spain. We extracted and analyzed aDNA in three independent laboratories, following specific procedures generally practiced in the aDNA field, including cloning of the amplified DNA fragments and sequencing of several clones. This is the most ancient case, reported to date, from which detection of DNA from T. pallidum subspecies pallidum has been successful in more than one individual, and we put forward a hypothesis to explain this result, taking into account the course of the disease in neonate individuals

Información Investigador: Solórzano Navarro, Eduvigis Adelina

Doctorado7408I - 2007; Candidato - 200565 - 2007; 64 - 20051. Genética de poblaciones humanas: Estudio de Poblaciones antiguas americanas y europeas. 2. Paleomicrobiología: Contribuciones de la Paleomicrobiología al estudio de la enfermedad en las poblaciones del pasado. Análisis de agentes bacterianos: T. pallidum, M. tuberculosis, M. leprae, S. mutans en restos humanos antiguos. 3. Alteraciones bucodentarias producidas por el consumo de drogas. 4. Ultraestructura de los tejidos duros del diente.Marzo de 2008Odontólogo+58 274 2402383Facultad de Odontologí[email protected]

Ciencia odontológica para los nuevos tiempos

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Restauración del tejido gingival a partir de fibroblastos autólogos

El interés de la investigación básica biomédica ha tenido un crecimiento vertiginoso en los últimos años y la odontología no escapa a esta motivación, es así como estamos en la búsqueda de alternativas de tratamiento a defectos de tejidos blandos y óseos que permitan resultados satisfactorios a nuestros pacientes desde el punto de vista estético y funcional, ya que en ocasiones, las limitaciones en la cantidad de tejido disponible para autoinjerto no permiten el éxito esperado, es por ello que la interdisciplinariedad ha permitido la exploración de nuevas fuentes de tejido bucal. Las investigaciones actuales se enfocan en el desarrollo y caracterización de tejidos equivalentes a la mucosa bucal y se ha demostrado que los fibroblastos del conectivo gingival participan eficientemente en la reparación de los tejidos, razón por la cual se están utilizando con mucho éxito en medicina regenerativa; así como también el aislamiento de células progenitoras mesenquimáticas a partir de diversos tejidos bucales, entre ellos el más utilizado, la pulpa dental

De la Mesoamérica Prehispánica a la Colonial: La huella del DNA antiguo

Este trabajo es una contribución al estudio de la diversidad genética en las poblaciones americanas antiguas. Se ha analizado el DNA procedente de restos humanos esqueléticos de yacimientos mesoamericanos de tres épocas distintas, con dataciones que se ubican desde la época azteca prehispánica (post-clásico tardío) a la colonia del Virreinato de la Nueva España, con la finalidad de inferir, desde la visión de los linajes maternos, la dinámica de las poblaciones del Valle Central de México y el posible aporte genético del contingente español y africano que llegó a tierras americanas, específicamente a México, desde finales del siglo XVI. Se estudiaron los marcadores del DNA mitocondrial (mtDNA) a partir de restricción enzimática de fragmentos en la región codificante y de la secuenciación de un segmento de la región hipervariable I. Los distintos análisis se realizaron observando un estricto control de los criterios de autenticidad en relación a las condiciones de laboratorio, el uso de controles, la caracterización de los investigadores, diversidad genética, sentido filogenético y total correspondencia entre los marcadores mitocondriales, concordancia que es reconocida como un criterio de autenticidad cuando se analiza el mtDNA proveniente de restos antiguos. De los ciento dos individuos estudiados, ochenta y siete fueron clasificados entre los cuatro principales haplogrupos descritos para nativos americanos (A, B, C y D) y tres no segregaron para ninguno de estos haplogrupos, ni siquiera para el quinto y menos frecuente linaje americano, el haplogrupo X; a la luz de los datos de que se dispone hasta el momento es probable de que se trate de individuos cuyo linaje maternal pertenezca a alguno de los haplogrupos africanos (L1, L2 y L3), siendo la primera evidencia genética del aporte africano en época colonial. En los doce individuos restantes no se lograron amplificaciones positivas para más de un sitio de restricción, por lo cual fueron excluidos de la investigación. Los análisis de comparación entre las tres series antiguas permiten deducir una continuidad entre los linajes mitocondriales anteriores al contacto europeo y los linajes de la época colonial, no observándose diferencias significativas entre ellas. Sin embargo, la presencia de secuencias únicas en la serie de contacto permite hipotetizar un colapso poblacional en algunos núcleos indígenas. Los resultados obtenidos tanto a nivel de haplogrupos como de secuencias también han sido comparados con datos de poblaciones actuales y antiguas de América y Asia obtenidos de la literatura; y de esta manera, situar en el contexto poblacional americano las muestras antiguas del Valle Central mexicano. Los procedimientos de reconstrucción filogenética nos permiten deducir que las series antiguas del Valle Central de México tienen un vínculo por vía matrilineal con el resto de las poblaciones americanas, y especialmente con la población mexicana contemporánea de referencia. Además, está virtualmente ausente el aporte europeo en las muestras analizadas, debido posiblemente, a que el proceso de mestizaje que se produjo durante los siglos XVI y XIX fue de tipo unidireccional, hombre europeo-mujer indígena y el mtDNA sólo nos permite el análisis del aporte genético materno.This paper is a contribution to the genetic diversity study in ancient American populations. DNA from Mesoamerican human skeletal remains from three different periods, which cover from the pre-Hispanic Aztec epoch (late post-classical) to the Viceroyalty of New Spain at the colonial period were analyzed, with the purpose to infer, with the information that the maternal lineages can provide us, Mexico's Central Valley population dynamics; and the possible genetic contribution of the Spanish and African contingents that arrived to the Americas, specifically to Mexico, since the last period of the XVIth century.Mitochondrial DNA (mtDNA) markers have been studied by both specific restriction enzyme analysis in the coding region and by sequencing of the hypervariable region I segment. The analyses were carried out with a strict control of the authenticity criteria, focusing on: laboratory conditions, use of blank controls, mtDNA characterization of laboratory researchers, genetic diversity, phylogenetic sense and total correspondence among mitochondrial markers, which is recognized as an authenticity criterium where mtDNA analysis from ancient remains is concerned. Of the hundred two individuals studied, eighty-seven were classified among the four major founding mtDNA haplogroups described for American natives (A, B, C, and D), three individuals didn't segregate for any of these haplogroups, not even for the fifth and less frequent American founding lineage, the haplogroup X; and it is probable that their maternal lineage belong to one of the African haplogroups (L1, L2 or L3), being the first genetic evidence of the African contribution in the colonial epoch. Finally, in twelve individuals positive amplifications were achieved in no more than one restriction site, reason by which they were excluded of the investigation. The analysis comparison among the three ancient series showed that there is continuity between mitochondrial lineages previous to the European contact and colonial lineages, and that there is not a significant difference among them. Nevertheless, the presence of exclusive lineages in contact series allows us to hypothesize a population collapse in some native groups. The results obtained using both methods of the mtDNA analysis have also been compared with ancient and current populations data from America and Asia available in the literature; and in this way, we have been able to place in the American context the Mexico's Central Valley samples. Phylogenetic reconstruction procedures permit to deduce that Mexico's Central Valley ancient series have a maternal link with the remaining American populations, and especially with the Mexican current population of reference. In addition the European contribution in the samples analyzed is virtually absent possibly owing to that the mestizaje process that was produced during the XVIth and XIXth centuries was of one-directional: European man - Native woman and mtDNA only permits maternal genetic analysis

De la Mesoamérica prehispánica a la colonial : la huella del DNA antiguo /

Consultable des del TDXA la coberta: Unitat d'Antropologia BiològicaTítol obtingut de la portada digitalitzadaEste trabajo es una contribución al estudio de la diversidad genética en las poblaciones americanas antiguas. Se ha analizado el DNA procedente de restos humanos esqueléticos de yacimientos mesoamericanos de tres épocas distintas, con dataciones que se ubican desde la época azteca prehispánica (post-clásico tardío) a la colonia del Virreinato de la Nueva España, con la finalidad de inferir, desde la visión de los linajes maternos, la dinámica de las poblaciones del Valle Central de México y el posible aporte genético del contingente español y africano que llegó a tierras americanas, específicamente a México, desde finales del siglo XVI. Se estudiaron los marcadores del DNA mitocondrial (mtDNA) a partir de restricción enzimática de fragmentos en la región codificante y de la secuenciación de un segmento de la región hipervariable I. Los distintos análisis se realizaron observando un estricto control de los criterios de autenticidad en relación a las condiciones de laboratorio, el uso de controles, la caracterización de los investigadores, diversidad genética, sentido filogenético y total correspondencia entre los marcadores mitocondriales, concordancia que es reconocida como un criterio de autenticidad cuando se analiza el mtDNA proveniente de restos antiguos. De los ciento dos individuos estudiados, ochenta y siete fueron clasificados entre los cuatro principales haplogrupos descritos para nativos americanos (A, B, C y D) y tres no segregaron para ninguno de estos haplogrupos, ni siquiera para el quinto y menos frecuente linaje americano, el haplogrupo X; a la luz de los datos de que se dispone hasta el momento es probable de que se trate de individuos cuyo linaje maternal pertenezca a alguno de los haplogrupos africanos (L1, L2 y L3), siendo la primera evidencia genética del aporte africano en época colonial. En los doce individuos restantes no se lograron amplificaciones positivas para más de un sitio de restricción, por lo cual fueron excluidos de la investigación. Los análisis de comparación entre las tres series antiguas permiten deducir una continuidad entre los linajes mitocondriales anteriores al contacto europeo y los linajes de la época colonial, no observándose diferencias significativas entre ellas. Sin embargo, la presencia de secuencias únicas en la serie de contacto permite hipotetizar un colapso poblacional en algunos núcleos indígenas. Los resultados obtenidos tanto a nivel de haplogrupos como de secuencias también han sido comparados con datos de poblaciones actuales y antiguas de América y Asia obtenidos de la literatura; y de esta manera, situar en el contexto poblacional americano las muestras antiguas del Valle Central mexicano. Los procedimientos de reconstrucción filogenética nos permiten deducir que las series antiguas del Valle Central de México tienen un vínculo por vía matrilineal con el resto de las poblaciones americanas, y especialmente con la población mexicana contemporánea de referencia. Además, está virtualmente ausente el aporte europeo en las muestras analizadas, debido posiblemente, a que el proceso de mestizaje que se produjo durante los siglos XVI y XIX fue de tipo unidireccional, hombre europeo-mujer indígena y el mtDNA sólo nos permite el análisis del aporte genético materno.This paper is a contribution to the genetic diversity study in ancient American populations. DNA from Mesoamerican human skeletal remains from three different periods, which cover from the pre-Hispanic Aztec epoch (late post-classical) to the Viceroyalty of New Spain at the colonial period were analyzed, with the purpose to infer, with the information that the maternal lineages can provide us, Mexico's Central Valley population dynamics; and the possible genetic contribution of the Spanish and African contingents that arrived to the Americas, specifically to Mexico, since the last period of the XVIth century. Mitochondrial DNA (mtDNA) markers have been studied by both specific restriction enzyme analysis in the coding region and by sequencing of the hypervariable region I segment. The analyses were carried out with a strict control of the authenticity criteria, focusing on: laboratory conditions, use of blank controls, mtDNA characterization of laboratory researchers, genetic diversity, phylogenetic sense and total correspondence among mitochondrial markers, which is recognized as an authenticity criterium where mtDNA analysis from ancient remains is concerned. Of the hundred two individuals studied, eighty-seven were classified among the four major founding mtDNA haplogroups described for American natives (A, B, C, and D), three individuals didn't segregate for any of these haplogroups, not even for the fifth and less frequent American founding lineage, the haplogroup X; and it is probable that their maternal lineage belong to one of the African haplogroups (L1, L2 or L3), being the first genetic evidence of the African contribution in the colonial epoch. Finally, in twelve individuals positive amplifications were achieved in no more than one restriction site, reason by which they were excluded of the investigation. The analysis comparison among the three ancient series showed that there is continuity between mitochondrial lineages previous to the European contact and colonial lineages, and that there is not a significant difference among them. Nevertheless, the presence of exclusive lineages in contact series allows us to hypothesize a population collapse in some native groups. The results obtained using both methods of the mtDNA analysis have also been compared with ancient and current populations data from America and Asia available in the literature; and in this way, we have been able to place in the American context the Mexico's Central Valley samples. Phylogenetic reconstruction procedures permit to deduce that Mexico's Central Valley ancient series have a maternal link with the remaining American populations, and especially with the Mexican current population of reference. In addition the European contribution in the samples analyzed is virtually absent possibly owing to that the mestizaje process that was produced during the XVIth and XIXth centuries was of one-directional: European man - Native woman and mtDNA only permits maternal genetic analysis

Molecular analysis of antique syphilis from neonatal human remains

Se han analizado a nivel molecular cuatro posibles casos de Treponematosis congénita en restos esqueléticos neonatales (de 0 a 6 meses de edad), que proceden de la excavación realizada durante el proceso de restauración de la Ermita de la Soledad (Huelva, España, siglo XVI). El ADN de tres de los cuatro especímenes analizados amplificaron para un segmento específico de T. pallidum y mostraron la diana de restricción, produciendo los fragmentos de tamaño previsto. Con ello se confirma que, al menos, dos recién nacidos de la población onubense inhumada sufrieron y probablemente murieron de sífilis congé[email protected] possible cases of congenital treponematosis have been submitted to molecular analysis. There remain bones that belonged to individuals between 0 and 6 months of age and were inhumated in the crypt of “La Ermita de la Soledad” (sixteenth century, Huelva, Spain). Three of the analyzed samples showed positive amplification for the T. Pallidum segment and were subjected to a restriction analysis producing the expected fragment size. This study confirms that at least two of the buried new born suffered and probably died of congenital syphilis

Nutritional and dental habits in students of Dentistry and Architecture of the Universidad de Los Andes

La caries dental es una enfermedad infecciosa, multifactorial, en la que intervienen: huésped, microflora bucal y sustrato, siendo los carbohidratos, los alimentos cariogénicos por excelencia. El objetivo de esta investigación fue comparar hábitos alimenticios, hábitos odontológicos y prevalencia de caries dental en estudiantes de las Facultades de Odontología y Arquitectura (U.L.A.), para lo cual se diseñó un estudio de corte transversal, se aplicó una encuesta de respuestas cerradas sobre hábitos alimenticios, odontológicos y un examen clínico para determinar el índice de caries dental (CPOD) en 57 estudiantes de Arquitectura y 56 de Odontología seleccionados aleatoriamente. Los resultados se analizaron mediante contraste de medias y chi-cuadrado, obteniéndose índices CPOD de 4,43±3,44 en Arquitectura y 4,80±4,05 en Odontología. Los carbohidratos más ingeridos fueron la pasta, el pan y las golosinas relacionados con el índice CPOD en Arquitectura, no encontrándose asociación entre consumo de pasta y CPOD en Odontología. No se encontraron diferencias significativas entre los índices de caries y hábitos odontológicos en ambos grupos. A pesar de ser grupos homogéneos, la presencia de mejores hábitos odontológicos en los estudiantes de Odontología pudiera deberse a los conocimientos y motivación adquiridas durante su [email protected]@[email protected]@ula.veDental caries is a multifactorial, infectious disease in which the host, oral microflora and diet are involved; being the carbohydrates the most cariogenic food. The objective of this study was to compare nutritional habits, dental habits and presence of dental caries in students of the schools of Architecture and Dentistry of the Universidad de Los Andes. For this matter, a transectional study was designed, a multiple choice questions survey about nutritional and dental habits was applied as well as a clinical examination to determine the index of dental caries (CPOD) on 57 students of Architecture and 56 students of Dentistry, chosen at random. The results were analyzed by comparison of averages and chi-squares, obtaining CPOD indexes of 4,43±3,44 in Architecture and 4,80±4,05 in Dentistry. The most consumed carbohydrates were pasta, bread and candies; related to CPOD indexes in Architecture, not finding any relation between the consumption of pasta and CPOD in Dentistry. No significant differences were found when comparing the indexes of caries and dental habits of the groups involved. Despite the groups were uniform, the presence of better dental habits in Dentistry students could be attached to the knowledge and motivation acquired on their careers