Rip it up and start again: The rejection of a characterization of a phenomenon

In this paper, I investigate the nature of empirical findings that provide evidence for the characterization of a scientific phenomenon, and the defeasible nature of this evidence. To do so, I explore an exemplary instance of the rejection of a characterization of a scientific phenomenon: memory transfer. I examine the reason why the characterization of memory transfer was rejected, and analyze how this rejection tied to researchers’ failures to resolve experimental issues relating to replication and confounds. I criticize the presentation of the case by Harry Collins and Trevor Pinch, who claim that no sufficient reason was provided to abandon research on memory transfer. I argue that skeptics about memory transfer adopted what I call a defeater strategy, in which researchers exploit the defeasibility of the evidence for a characterization of a phenomenon

Rethinking the Role of Theory in Exploratory Experimentation

To explain their role in discovery and contrast them with theory-driven research, philosophers of science have characterized exploratory experiments in terms of what they lack: namely, that they lack direction from what have been called “local theories” of the target system or object under investigation. I argue that this is incorrect: it’s not whether or not there is direction from a local theory that matters, but instead how such a theory is used to direct an experiment that matters. Appealing to contemporary exploratory experiments that involve the use of experimental techniques – specifically, examples where scientists explore the interaction of neural activity and human behavior by magnetically stimulating brains – I argue that local theories of a target system can inform auxiliary hypotheses in exploratory experiments, which direct these experiments. These examples illustrate how local theories can direct the exploration of target systems where researchers do not aim to evaluate these theories

O Serviço social e a humanização do atendimento ao cliente hospitalizado: uma proposta para a Unimed Florianópolis

TCC (graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Sócio Econômico, Curso de Serviço Social

Raising cultural and diversity awareness in the primary english classroom

The present research project focuses on investigating how students’ cultural and diversity awareness can be raised while teaching a foreign language to young learners. Nowadays, key notions such as difference and diversity are being replaced by others of a more homogenizing, standardizing kind, typical of the globalised era in which we live. Simultaneously, and as a consequence of this tendency, the topic of intercultural awareness has been insufficiently developed, especially in the foreign language classroom in the primary school context in Portugal. As an example of this, primary course books resort more and more to symbols or icons in an unsuccessful attempt to show diversity, instead of presenting young learners with a deeper, more varied – in a word, more realistic – view of differences between people and cultures. It is my view, then, that the foreign language primary classroom is the ideal setting for this: that is, to learn about diversity while learning a new language, to acquaint children, who are naturally drawn to what is different, with various concepts of difference and otherness, and ultimately to raise better, more tolerant and inclusive human beings. To do so, I chose a small series of diversity related-topics which were dealt with in class, not in the traditional method, but with the aid of new materials produced by myself, specially aimed at simultaneously promoting the diversity awareness of young learners, and improving their language skills. The result was a more understanding, more open, and also more knowledgeable group of young learners – proof that, under the right circumstances, and with the correct motivation, the foreign language classroom is indeed an optimal place to change the current negative tendency of not thoroughly developing the teaching of diversity, difference and empathy in classrooms

Impacts of the COVID-19 pandemic on a non-governmental organization: the case of Sabine Plattner African Charities (SPAC) and the Odzala-Kokoua National Park, Republic of Congo

In the Republic of Congo, the first positive case of COVID-19 was confirmed in March 2020, forcing the government to take measures to protect the community, preventing the rapid spread of the disease. This study was carried out in the Odzala-Kokoua National Park, in northern Congo, to assess the impacts caused by the pandemic on the charity organization Sabine Plattner African Charities (SPAC). Semi-structured interviews were conducted with 29 respondents from 3 stakeholder groups: SPAC, Congo Conservation Company (CCC) and Mbomo Community (located on the outskirts of the Park). The impacts of the pandemic were studied in the 3 projects developed by SPAC: Conservation & Research, EduConservation and Early Childhood Development. Impacts were analyzed from various perspectives, with the main impacts being identified at the level of education and work. Perceptions towards the virus were also evaluated. Compared to the Ebola pandemic, which caused severe direct health impacts, the COVID-19 pandemic caused less fear in the community, and the impacts were mostly indirect, due to prevention measures and changes in economic activities. A SWOT analysis was carried out for each of the three main groups of stakeholders. The vaccine was accepted and desired by all groups of respondents. Regarding conservation, there were no negative impacts in the Park caused by the pandemic. Cooperation of human communities with ecosystems and organizations has very positive results for conservation in the face of a pandemic situation.Na República do Congo, o primeiro caso positivo de COVID-19 foi confirmado em março de 2020, obrigando o governo a tomar medidas que protegessem a comunidade, evitando a rápida propagação da doença. O presente estudo realizou-se no Parque Nacional de Odzala- Kokoua, no norte do Congo, permitindo avaliar os impactos causados pela pandemia na organização de caridade Sabine Plattner African Charities (SPAC). Foram realizadas entrevistas semi-estruturadas a 29 entrevistados de 3 grupos de stakeholders: SPAC, Congo Conservation Company (CCC) e Comunidade de Mbomo (localizada na periferia do Parque). Estudaram-se os impactos da pandemia nos 3 projetos desenvolvidos pelo SPAC: Conservation & Research, EduConservation e Early Childhood Development. Foram analisados os impactos em várias perceções, sendo que os principais foram identificados ao nível da educação e do trabalho. As perceções sobre o vírus também foram avaliadas. Em comparação com a pandemia do Ébola, que causou graves impactos diretos na saúde das comunidades e da vida selvagem, a pandemia COVID-19 causou menos medo na comunidade e os impactos foram na sua maioria indiretos, devido a medidas de prevenção e mudanças nas atividades económicas. Foi realizada uma análise SWOT para cada um dos três grupos principais de stakeholders. A vacina foi aceite e desejada por todos os grupos de entrevistados. Em relação à conservação, não houve impactos negativos no Parque causados pela pandemia. A cooperação das comunidades humanas com os ecossistemas e organizações provou causar resultados muito positivos para a conservação em situação de pandemia

Modelling the occurrence of Physalia physalis in the North Atlantic Ocean at different spatial and temporal scales

Frequent jellyfish blooms cause human health issues and closures of coastal areas, impacting different economic sectors like tourism, fisheries, aquaculture farms and industry. Understanding the drivers of jellyfish bloom and predicting their occurrence is therefore essential to develop effective management plans. The Portuguese Man-of-War (Physalia physalis) is a dangerous cosmopolitan siphonophore and its ecology remains largely understudied. The objective of this study is to understand the main environmental drivers (e.g., temperature, productivity, wind and ocean patterns) that explain the occurrence of P. physalis at a macroecological scale (the North Atlantic Ocean) and at a regional scale (Faial Island from the Azores archipelago), and to predict its distribution and temporal trends. We implemented machine learning modelling that fed on high-resolution environmental data and occurrence data describing its distribution in the North Atlantic Ocean and long-term temporal variability in the Faial Island (Azores). Models retrieved high accuracy scores and showed that the distribution of P. physalis is mainly explained by primary productivity, temperature and currents direction at the macroecological scale and by primary productivity and wind patterns at the regional scale. The models also showed a higher probability of occurrence on both Atlantic coasts and offshore North-northwest Atlantic. Models fed on temporal datasets demonstrate decadal fluctuations rather than significant increases over time, contradicting the previously established hypothesis that jellyfish blooms are increasing. By using species distribution modelling, we provide a better understanding on how environmental variability shapes the occurrence of P. physalis at different spatial and temporal scales (macroecological and regional), which can be considered in management plans and policies. In the future, projected global warming and decreased primary productivity in the North Atlantic may cause significant poleward shifting of this species, adversely affecting human health, socioeconomics and ecosystems in regions not currently used to deal with such impacts.Os frequentes blooms de medusas causam problemas de saúde humana e encerramentos de zonas costeiras, que têm impactos em diferentes sectores económicos como o turismo, pescas, explorações aquícolas e indústria. Compreender quais os factores ambientais que levam aos blooms de medusas e prever a sua ocorrência é, portanto, essencial para desenvolver planos de gestão eficazes. A caravela portuguesa (Physalia physalis) é um perigoso sifonóforo cosmopolita com um pneumatóforo flutuante e longos tentáculos com células urticantes cuja ecologia permanece pouco estudada. O objetivo deste estudo é compreender os principais fatores ambientais (por exemplo, temperatura, produtividade, vento e padrões oceânicos) que explicam a ocorrência da P. physalis à escala macroecológica (o Oceano Atlântico Norte) e à escala regional (Ilha do Faial do arquipélago dos Açores), e prever a sua distribuição e tendências temporais. Implementámos modelos de machine learning que se alimentam de dados ambientais de alta resolução e dados de ocorrência descrevendo a sua distribuição no Oceano Atlântico Norte e a variabilidade temporal a longo prazo na Ilha do Faial (Açores). Os modelos de alta precisão e mostraram que a distribuição de P. physalis é principalmente explicada pela produtividade primária, temperatura e direção das correntes à escala macroecológica e pela produtividade primária e padrões de vento à escala regional. Os modelos também mostraram uma maior probabilidade de ocorrência da espécie na costa e região Norte-noroeste do Atlântico Norte. Os modelos alimentados com conjuntos de dados temporais demonstram flutuações decadais em vez de aumentos significativos ao longo do tempo, contradizendo a hipótese previamente estabelecida de que os blooms de medusas estão a aumentar. Ao modelar a distribuição da espécie, fornecemos uma melhor compreensão de como a variabilidade ambiental molda a ocorrência de P. physalis em diferentes escalas espaciais e temporais (macroecológicas e regionais), o que pode ser considerado em planos e políticas de gestão. No futuro, o aquecimento global projetado e a diminuição da produtividade primária no Atlântico Norte podem causar deslocamentos significativos desta espécie em direção ao pólo, afetando negativamente a saúde humana, a socioeconómica e os ecossistemas em regiões que atualmente não estão habituadas a lidar com tais impactos

Pro-environmental messages have more effect when they come from less familiar brands

Purpose: This research aims to compare consumer responses to pro-environmental communication and appeals to recycle packaging when these messages come from a high-familiarity versus a low-familiarity brand. Design/methodology/approach: Two online between-subjects experimental studies evaluate consumer perceptions and the willingness to comply with recycling appeals in response to pro-environmental communications from a high-familiarity versus a low-familiarity brand. To test the hypotheses, the studies examine the moderating role of sustainability habits and the mediating role of shared environmental responsibility. Findings: Findings show that communicating a brand’s adoption of sustainable packaging is more salient to consumers when the appeal comes from a low-familiarity rather than a high-familiarity brand, especially when sustainability habits are weaker. The mediating role of shared environmental responsibility partly explains consumers’ commitment to act pro-environmentally. Research limitations/implications: Sustainability officials and policymakers should consider the impact of pro-environmental interventions that encourage collective recycling between brands and consumers. Practitioners are encouraged to examine revised waste management schemes such as extended producer responsibility programs to elicit the collaboration of consumers in initiatives that boost recycling and stimulate pro-environmental behaviors. Originality/value: Using the diagnosticity–accessibility framework and habit theory, to the best of the author’s knowledge, this research is among the first to empirically examine the role of sustainability habits in consumer responses to pro-environmental brand communications. It also highlights consumers’ willingness to comply with brands’ take-back programs in a shared effort to reduce plastic waste and encourage a circular economy.info:eu-repo/semantics/acceptedVersio

Digital Fabrication of Transparent Electrodes for Simultaneously Optical and Electrochemical Biosensor Applications

This dissertation proposes a pioneering biosensor for detecting cancer biomarkers that combines electrochemical and optical recognition in the same analyzing spot, by taking advantage of laser direct writing to pattern transparent and flexible electrodes. The bi-omarker, the carcinoembryonic antigen (CEA), is detected by an antibody-like biomi-metic material as recognizing agent. The sensing film over indium tin oxide (ITO) coated glass substrate consisted of a molecularly imprinted layer of polypyrrole (PPy). The im-printed film is assembled on a three-dimensional photonic crystal composed of silica na-noparticles (NPs), allowing optical detection. The molecularly imprinted polymer was obtained through electropolymerization of pyrrole in the presence of the biomarker as template. The interaction between the biomarker and the sensing material produces elec-trochemical signals generating quantitative data. In addition, it triggers a difference in the reflectance of the sensing photonic film matrix. The analytical features of the biosensor were assessed in PBS buffer by electrochemical impedance spectroscopy (EIS) and by reflectance of the opal-based photonic crystal. The response of the proposed biosensor was in the range of physiological relevant levels of CEA (from 2.5 ng/mL to 10 ng/mL). This sensor was assembled on an ITO substrate as proof of concept, the best substrate among the several conductive material produced on glass support, even if the first part of the work focuses on the preparation of aluminum doped zinc oxide (AZO) thin films by RF sputtering and laser direct writing. These processes were optimized for the fabrication of a highly conductive and transparent oxide capable of replacing ITO in the future as a main component in most transparent and flexible electronics applications. The developed sensing device showed promising features to become a much simpler, faster and low-cost point-of-care (POC) portable solution for the detection of CEA when compared to conventional immunoassay approaches, due to its high sensitivity, stability and dual detection method. At the same time, it may open new doors for other applications and foreseen improvement concerning the early diagnosis of diseases

Role of EGF mediated laminin y2 chain in uterine cervix carcinoma

Tese de mestrado em Biologia Molecular e Genética, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2017A carcinogénese é um processo complexo e gradual de transformação pelo qual as células normais originam células com potencial neoplásico. Durante este processo, as células cancerígenas adquirem características de malignidade, que resultam da acumulação de várias mutações genéticas e alterações epigenéticas, levando assim, à ativação de oncogenes e inativação de genes supressores de tumores. Essas caraterísticas são designadas de hallmarks do cancro, sendo que as principais são: autossuficiência em relação aos sinais de crescimento, insensibilidade aos sinais de anti-crescimento, resistência à apoptose, elevado potencial replicativo, aumento do potencial angiogénico, evasão ao controlo imunitário, reprogramação metabólica e capacidade de invasão tecidular e metastização. O microambiente que envolve células cancerígenas também atua neste processo como uma rede funcional, que inclui células normais, fatores mediadores e componentes da matriz extracelular. O carcinoma do colo útero é o quarto tipo de cancro mais comum em mulheres em todo o mundo, sendo diagnosticados anualmente 528 000 novos casos. Em 2012 ocorreram 266 000 mortes relacionadas com este tipo carcinoma. Em Portugal, a taxa de incidência e mortalidade é relativamente alta, sendo a incidência de 10,8 e a mortalidade de 4,9 (taxas por 100.000 indivíduos por ano). Existem vários tipos histológicos de cancro do colo do útero, no entanto, os dois tipos mais comuns são os adenocarcinomas e os carcinomas pavimento-celulares, que compreendem 75-90 e 10-25% de todos os casos, respetivamente. O vírus do papiloma humano (HPV- human papillomavirus) é transmitido sexualmente e está bem estabelecido o seu papel como agente etiológico de vários tipos de cancro na área anogenital, incluindo o cancro de colo do útero. Aproximadamente 70% dos cancros do colo do útero estão diretamente associados aos sorotipos HPV16 e HPV18. Os genes E6 e E7 dos HPV de alto risco são oncogenes que desregulam o controlo do ciclo celular, podendo originar a transformação maligna das células. A matriz extracelular (ECM – extracellular matrix) é um componente chave do microambiente tumoral, sendo que nos últimos anos foi reconhecido o seu papel no processo carcinogénico. A ECM é composta por uma rede complexa de macromoléculas como colagénios, lamininas, fibronectinas e proteoglicanos. A sua principal função é o suporte tecidular, no entanto, também participa no controlo de eventos celulares como proliferação celular, adesão, migração, invasão e apoptose. As lamininas são glicoproteínas extracelulares de elevado peso molecular, sendo um dos principais componentes estruturais dos filamentos de ancoragem presentes nas membranas basais (BM - basement membrane). Todas as lamininas são proteínas heterotriméricas, que contêm três cadeias, denominadas α, β e . Atualmente estão descritas 16 lamininas com diferentes propriedades que resultam da conjugação das diferentes subunidades. A sua expressão é altamente regulada durante o desenvolvimento e a sua distribuição é tecido-específica. A laminina-332 (anteriormente denominada laminina 5) é um subtipo de laminina específica das BM dos epitélios, sendo a sua forma trimérica constituída pelas cadeias α3, β3 e 2. Nos tecidos normais, a laminina-332 interage com as integrinas 31, 61 e 64. Esta interceção é muito importante na adesão celular e por essa razão também está envolvida na migração e a invasão celular. Atualmente, a importância da laminina-332 é um assunto de destaque em diversas revisões bibliográficas, onde foram descritas novas funções estruturais e reguladoras desta macromolécula em vários carcinomas. Os tumores epiteliais (carcinomas) muitas vezes secretam grandes quantidades de laminina-332 e frequentemente expressam o seu ligando, a integrina 64. O aumento da expressão da laminina-332 tem sido observado em vários tipos de cancro, tendo sido considerado um fator de mau prognóstico. Foi também relacionado com a capacidade invasiva de vários tumores, como o carcinoma do colo do útero. De facto, sabe-se que a laminina-332 pode ativar vias de sinalização, uma vez que, níveis elevados desta proteína podem estimular a ativação da proteína cinase ativada por mitogénio (MAPK -mitogen activated protein kinases) e da fosfatidilinositol 3-cinase (PI3K –phosphatidylinositide 3-kinase), levando assim a um aumento da capacidade proliferativa e invasiva das células e à estimulação do crescimento tumoral. A laminina γ2 humana (LAMC2) é produto da expressão do gene LAMC2 e, como as outras cadeias, possui duas variantes transcricionais, resultantes do splicing alternativo do exão terminal 3'. No entanto, esta é a cadeia que confere especificidade ao trímero da laminin-332. Vários estudos mostraram o aumento da expressão da LAMC2 em cancros humanos, incluindo adenocarcinomas de estômago, pâncreas, tiroide, língua, colo-retal, pulmão, colo do útero, esófago, cabeça e pescoço, pele e pulmão. Observou-se que a acumulação citoplasmática da LAMC2 ocorre frequentemente na frente invasiva dos tumores e está associada a uma diminuição da sobrevivência dos doentes, à recidiva e formação de metástases. Relativamente ao cancro do colo do útero, alguns estudos mostraram que existe uma elevada expressão da cadeia LAMC2 em lesões microinvasivas e invasivas. Apesar da expressão da cadeia LAMC2 ter sido descrita em adenocarcinoma e em carcinomas pavimento-celulares do colo do útero, a sua acumulação ocorre predominantemente nos carcinomas pavimento-celulares. A formação e remodelação da ECM são ativamente reguladas por proteólise, que contribui para a homeostase dos tecidos. Contudo, no contexto tumoral, podem ocorrer desequilíbrios na proteólise, levando assim, a um crescimento tumoral desregulado, remodelação do tecido, inflamação, invasão e metastização. As MMPs (matrix metalloproteinases) são a família de protéases mais relevante associada à carcinogénese. Estas enzimas estão descritas como moduladoras do microambiente tumoral, uma vez que tem um papel crucial na regulação da matriz extracelular e na regulação de vias de sinalização relevantes para a progressão tumoral. As gelatinases MMP2 e MMP9 são as MMPs mais proeminentemente envolvidas na degradação da BM e, consequentemente, estão envolvidas no desenvolvimento tumoral e na formação de metástases. A hidrólise da cadeia γ2 por MMPs parece estar relacionada com o aumento da migração e invasão celular em carcinomas, uma vez que o processamento da cadeia LAMC2 afeta a dinâmica da adesão celular. A hidrólise da cadeia LAMC2 tem sido associada à atividade da MMP2 em cancros da mama e do colo do útero. O fator de crescimento epidérmico (EGF-epidermal growth factor) compreende onze polipéptidos, que compartilham um domínio EGF conservado, sendo esta uma das famílias de fatores de crescimento mais relevantes na progressão tumoral. Os vários ligandos podem ser produzidos quer por células cancerígenas quer por células do estroma, e a sua ligação a recetores de cinase de tirosina, conhecidos como recetores do EGF (EGFRs), estimulam vias de sinalização intracelulares específicas. A ativação dos recetores cinase tirosina culminam na ativação as cascatas enzimáticas envolvidas no crescimento e na sobrevivência das células, sendo que as vias MAPK e PI3K são as mais ativadas. Em cancro, a maioria das mutações que afetam o EGFR são mutações nonsense que promovem a sua ativação constitutiva, tornando a sua ativação independente da presença do ligando-EGF. Contudo, os recetores EGFR e HER2 estão frequentemente sobre-expressos, podendo funcionar como oncogenes. No cancro do colo do útero, o EGFR parece ser o recetor do EGF mais relevante. O domínio III da laminina γ2 apresenta segmentos EGF-like, que podem interagir com os recetores de EGF, nomeadamente o EGFR, levado assim à ativação das cinases da via das MAPK. O principal objetivo deste trabalho foi esclarecer o papel da LAMC2 de laminina-332 na progressão mediada por EGF de carcinomas do colo uterino, utilizando modelos in vitro de carcinoma pavimento-celular (SiHa) e adenocarcinoma (HeLa). Para atingir este objetivo foram delineados 5 objetivos específicos no sentido de verificar: i) o efeito do EGF no ciclo celular e na proliferação; (ii) a relevância da estimulação pelo EGF na expressão da LAMA3, LAMB3, LAMC2, LAMC1 e da LAMC3; (iii) a importância da LAMC2 no efeito do EGF no ciclo celular, proliferação e migração/invasão; (iv) o efeito do knockdown da LAMC2 na expressão da LAMC1 e da LAMC3, e (v) os fatores de transcrição envolvidos na regulação da expressão da LAMC2 e da LAMC1, dependente de EGF. Para a primeira abordagem, foram usadas bases de dados com amostras de doentes, que confirmaram, como já tinha sido descrito por outros autores, que a LAMC2 é sobre-expressa em vários tipos de cancro, incluindo o cancro do colo do útero. De forma a validar o efeito do EGF nos modelos in vitro, foram feitos ensaios de ciclo celular. Estes resultados mostraram que ambas as linhas celulares são responsivas ao EGF, uma vez que proliferam mais após o estímulo. Além disso, os nossos resultados mostraram ainda que a estimulação com EGF resulta num encurtamento da duração da primeira fase do ciclo celular, G0/G1, levando ao aumento do número de células nas fases S+G2/M. Este facto é acompanhado pelo aumento concomitante dos níveis da ciclina D1. Verificou-se ainda, que o EGF também regula a expressão de LAMC2 nas duas linhas celulares (SiHa-carcinoma pavimento-celular e HeLa-adenocarcinoma). Os ensaios de imunoprecipitação da cromatina, deram-nos bons indícios de que o FOXM1 (em SiHa) e o STAT3 (em HeLa) são fundamentais na regulação de LAMC2 pelo EGF. De forma a compreender melhor o papel da LAMC2 no cancro do colo do útero, a expressão da LAMC2 foi silenciada com shRNA. Os ensaios de proliferação após o knockdown da LAMC2 mostraram que o EGF estimula a proliferação independentemente da LAMC2 nas células SiHa, mas curiosamente nas células HeLa, o efeito proliferativo do EGF é mais eficiente na ausência de LAMC2. Além disso, o silenciamento LAMC2 suprime a capacidade migratória e invasiva das células SiHa, mas não parece afetar a migração das células HeLa. Relativamente à atividade das MMPs, ambas MMP2 e 9 são reguladas pelo EGF e os níveis de atividade de MMP9 estão relacionados com os níveis de LAMC2, em ambas as linhas celulares. A atividade da MMP2 também é afetada pelos níveis da LAMC2, contudo, é afetada de forma oposta comparando ambas as linhas celulares. Nas células SiHa, o knockdown da LAMC2 diminui a atividade de MMP2, enquanto que nas células HeLa a atividade desta enzima é aumentada. Assim, parece que o fenótipo maligno dos carcinomas pavimento-celulares é mais depende da expressão da LAMC2 do que os adenocarcinomas. Além disso, o knockdown da LAMC2 resultou no aumento da transcrição da LAMC1 nas células SiHa. Em condições controlo, o mesmo resultado foi observado para a LAMC3, contudo, este efeito desaparecia após o estímulo com EGF. Portanto, devia às alterações mais significativas ocorrerem na regulação da LAMC1 esta foi a cadeia que apresentou mais interesse ao nível da carcinogénese. No entanto, nas linhas celulares wild type (WT) sob a influência de EGF os níveis da LAMC1 apenas aumentaram nas células HeLa. Isto sugere que esta cadeia pode desempenhar um papel no fenótipo maligno moderado em adenocarcinoma (perfil de baixa invasão) em microambientes ricos em EGF. Novamente, o EGF também desempenha um papel na expressão de LAMC1 em ambas as linhas celulares, que parece estar associado aos fatores de transcrição FOXM1 e STAT3. O real significado desta regulação há que ser estudado mais em pormenor. De forma a tentar entender o papel da LAMC1 em contexto tumoral analisámos as mesmas bases de dados. Observámos, contudo, que a associação entre a expressão de LAMC1 e cancro do colo do útero é muito controversa. Assim, esta tese fornece informações relevantes sobre o papel da dinâmica regulatória da expressão da cadeia LAMC2 pelo EGF, podendo explicar o fenótipo mais agressivo do carcinoma pavimento-celular do cancro do colo do útero. Além disso, também sugere que a expressão da LAMC1 pode ser um elemento chave na progressão do cancro do colo do útero. Portanto, novas perspetivas de investigação podem ser delineadas a partir dos nossos resultados, de forma a compreendermos melhor os mecanismos moleculares subjacentes às várias formas de progressão inerentes aos diferentes tipos histológicos do cancro.Carcinogenesis is a multistep transformation process of normal cells to a neoplastic state. The microenvironment that surrounds cancer cells also act on malignant transformation as a functional network. Uterine cervix carcinoma is the fourth most common malignancy in women worldwide, being diagnosed annually 528 000 new cases and 266 000 related-deaths were observed in 2012. In Portugal, the incidence and mortality rate are relatively high, being the incidence 10.8 and mortality 4.9 cases per 100,000 persons per year. There are several histological types of uterine cervix cancer, however the two most common are squamous cell carcinomas and adenocarcinomas, comprising 75–90 and 10–25 % of all cases, respectively. In last years, it has been given more importance to tumor microenvironment as an important factor in carcinogenesis and disease progression. Extracellular matrix (ECM) is a major component of microenvironment, being composed by a complex network of glycoproteins such as collagens, laminins, fibronectins and proteoglycans. Laminins are a group of large extracellular glycoproteins and a major constituent of the basement membrane (BM) compartment of ECM. Laminin-332 is a specific subtype of laminins in the BM, having a trimeric structure composed by α3, β3 and 2 chains. High levels of laminin-332 expression were found in several human cancers, being considered a poor prognosis factor and have been related to the invasive ability of several tumors, such as uterine cervix cancer. Furthermore, the cytoplasmic accumulation of 2 chain (LAMC2) has been implicated in uterine carcinoma progression and has been frequently found at the invasive front of tumors, being associated with a poor survival, recurrence, and metastasis. The proteolytic processing of LAMC2 chain affects the dynamics of cellular adhesion and expose the EGF-like repeats of this molecule. EGF is considered the main growth factor acting on uterine cervix cancer. This work aims to clarify the EGF mediated role of LAMC2 of laminin-332 in the progression of uterine cervix carcinomas, using in vitro models of squamous cell carcinoma (SiHa) and adenocarcinoma (HeLa). In order to achieve our aim, we defined five specific aims to verify: (i) the role of EGF in cell cycle and proliferation; (ii) the effect of EGF stimulation in the expression of LAMA3, LAMB3, LAMC2, LAMC1 and LAMC3; (iii) the role of LAMC2 in EGF effect in cell cycle, proliferation and migration/invasion; (iv) the effect of LAMC2 knockdown in the expression of LAMC1 and LAMC3, and (v) the transcription factors involved in EGF dependent regulation of LAMC2 and LAMC1 expression. The analyses of human cancer databases confirmed that LAMC2 is upregulated in several cancer types and its expression is also increased in uterine cervix cancer. The cell cycle analyses revealed that both cell lines are EGF-responsive, so we confirmed that EGF is a suitable growth factor to stimulate uterine cervix cancer cells. Our results showed that EGF stimulation results in a shortened duration of G0/G1 cell cycle phase and in an increased percentage of cells in S+G2/M phases, concomitant with increased cyclin D1 levels. It was also found that EGF regulates the expression of LAMC2 in both cell lines (squamous cell carcinoma and adenocarcinoma). Both FOXM1 (in SiHa) and STAT3 (in HeLa) seems to be crucial for LAMC2 regulation. To investigate the role of LAMC2 in uterine cervix carcinoma, it was performed a LAMC2 silencing through shRNA technology. LAMC2 knockdown showed that EGF stimulates proliferation independently of LAMC2 in SiHa cells, but interestingly in HeLa the pro-proliferative effect of EGF is more efficient in the absence of LAMC2. Moreover, the LAMC2 silencing suppresses SiHa ability to migrate and invade. The matrix metalloproteinases (MMPs) are the most relevant family of proteinases involved in extracellular matrix turnover, acting as tumor microenvironment modulators. The activity of MMP2 and 9 is regulated by EGF and the levels of activity of MMP9 is related to LAMC2 levels, in both cell lines. In SiHa, the MMP2 activity is most affected by LAMC2 knockdown, which results in a decrease of MMP2 activity. So, it seems that the malignant phenotype of squamous cell carcinoma relies more on LAMC2 than the malignant phenotype of adenocarcinoma. LAMC1 association with cancer is controversial, however, the LAMC2 knockdown induces the transcription of LAMC1 in SiHa at mRNA level. Under control conditions, the same result was observed for LAMC3, although it had a lower significance which disappeared with EGF treatment. In wild type (WT) cell lines upon EGF stimulus the protein levels of LAMC1 increases in HeLa not in SiHa. It seems that this laminin gene can play a role in an EGF rich microenvironment, conferring a mild malignant phenotype in adenocarcinoma (low invasive profile). Again, EGF also plays a role in LAMC1 expression in SiHa and HeLa cells and these regulation seems to be associated to FOXM1 and STAT3, though the real meaning of this action must be unraveled. We believe this thesis gives relevant insights on the role of regulatory dynamics of LAMC2 by EGF that accounts for the uterine cervix squamous cell carcinoma aggressive phenotype; and it also pointed LAMC1 as a putative key element in uterine cervix cancer progression