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Development of an In vitro, coupled transcription-to-translation system for analysis of the interactions between the ribosome and RNA polymerase
PhD ThesisThe various properties of actively transcribing RNA polymerase (RNAP) complexes with nucleic acids during different stages involve various types of regulation and different cross-talk with other cellular entities and with RNAP itself. For instance, transcription and translation are coupled in bacteria, meaning that translation takes place co-transcriptionally. The interactions of transcriptional apparatus with the translational machinery have been focused mainly in terms of gene expression, whereas the study of the physical interaction of the ribosome and the RNA polymerase remains obscure due to the lack of a system which allows such observations. In this study we have developed a pure, transcription-coupled-to-translation system in which the translocation of the ribosome can be performed in a step-wise manner towards RNAP allowing the observation of the outcomes of the interactions between the two machineries at colliding and non-colliding distances; the system also allows the positioning of RNAP in any desired elongation complex such as paused, roadblocked, backtracked, etc. We show the study of the interactions of the ribosome on different aspects of transcription elongation and also the effects on translation caused by RNAP
Colombian cacao, forests and peace initiative = Estudio de línea base de la cadena del cacao en Colombia.
Revelations of U.S. spying against Brazil have put relations between the two at arm’s length once again
Last October, evidence of spying by the U.S. National Security Agency against the Brazilian government was uncovered, which led to the cancellation of President Dilma Rousseff’s visit to the U.S. João Augusto de Castro Neves looks at the implications of the spying row, writing that while it has affected cooperation in areas such as defense and energy, the continuing links and interests between American and Brazilian companies operating in both countries mean that a full-blown trade war is unlikely
A pungent glimpse : the sad infallibility of guilt
"O crime do professor de matemática", by Clarice Lispector, addresses the unconscious need for punishment arising from the feeling of guilt, which is an inexorable element of the human psyche. The man's mirroring in his pet leads him to an approximation of a possible awareness of this disorder, which culminates in the unavoidable abandonment of the dog. Based on Sigmund Freud's essays "Das Unheimliche" and "Das Unbehagen in der Kultur", we aim at understanding the origin of the doleful identification between these two characters in the narrated story, as well as the corollary of the culture that is responsible for the human sadness which the teacher is inevitably part of"O crime do professor de Matemática", de Clarice Lispector, aborda a necessidade inconsciente de punição advinda do sentimento de culpa, que constitui elemento inexorável da psique humana. O espelhamento do homem em seu animal o conduz à aproximação de uma possível consciência deste transtorno, fato que culmina no irremissível abandono do cão. Com base nos ensaios "O estranho" e "O mal–estar na civilização", de Sigmund Freud, almeja–se entender a origem da dolente identificação entre estes dois personagens narrada no conto, bem como o corolário da cultura, responsável pela tristeza humana com a qual o professor irremediavelmente se coaduna
Teores de vibrios halófilos patogénicos humanos em ostras, por NMP-PCR
Mestrado em MicrobiologiaO presente estudo foi levado a cabo com o objectivo de determinar a
ocorrência e os níveis de Vibrio vulnificus, Vibrio parahaemolyticus (total e
potencialmente patogénico) em ostras naturalmente contaminadas, usando
dois métodos diferentes de Número Mais Provável (NMP) em conjugação com
a técnica de reacção em cadeia da polimerase (PCR) de modo a seleccionar o
mais apropriado para análise de rotina. As ostras foram adquiridas em lojas e
supermercados locais. Os valores de V. vulnificus (portador do gene que
codifica a hemolisina/citolisina da bactéria - vvhA), V. parahaemolyticus total
(portador do gene específico da espécie – toxR) e V. parahaemolyticus
potencialmente patogénico (portador dos genes que codificam as hemolisinas
directa termoestável – tdh e directa termoestável relacionada – trh) foram
determinados usando dois métodos de NMP-PCR: (1) enriquecimento em
água peptonada alcalina (APW) seguido de PCR (APW-PCR); e (2)
enriquecimento em APW e isolamento em agar de tiossulfato citrato bílis
sacarose (TCBS) seguido de confirmação das estirpes por PCR (TCBS-PCR).
Foi detectado V. vulnificus em quatro amostras de ostras pelo método APWPCR
e em três amostras pelo método TCBS-PCR, mas nunca nas mesmas
amostras. Foi possível encontrar V. parahaemolyticus em 14 amostras pelo
método APW-PCR e em 13 amostras pelo método TCBS-PCR. Quanto aos
factores de virulência, foi possível detectar o gene tdh em uma amostra
somente pelo método APW-PCR; o gene trh foi detectado em cinco amostras
por ambos os métodos, mas nem sempre na mesma amostra.
O método APW-PCR demonstrou ser o mais adequado para detectar a
presença de V. parahaemolyticus total em ostras, uma vez que gerou maior
número de amostras positivas e detectou teores mais elevados, no entanto,
recomenda-se o recurso a ambos os métodos para a detecção dos factores de
virulência do V. parahaemolyticus e para a detecção de V. vulnificus.
ABSTRACT: The present study was carried out to determine the occurrence and levels of
Vibrio vulnificus and total and potentially pathogenic Vibrio parahaemolyticus
bacteria in naturally contaminated oysters, using two Most Probable Number –
Polymerase Chain Reaction (MPN-PCR) different methods in order to select
the most appropriate for routine analysis. Oysters were collected from local
stores and supermarkets. V. vulnificus (carrying the hemolysin/ cytolysin vvhA
gene), total V. parahaemolyticus (carrying the species-specific toxR gene) and
potentially pathogenic (carrying the thermostable direct hemolysin - tdh and
TDH-related hemolysin - trh genes) V. parahaemolyticus were enumerated by
two MPN-PCR methods: (1) Alkaline Peptone Water (APW) enrichment
followed by PCR (APW-PCR); and (2) APW enrichment plus isolation on
Thiosulfate Citrate Bile Sucrose (TCBS) agar followed by PCR strain
confirmation (TCBS-PCR). V. vulnificus was found in four oyster samples by
the APW-PCR method and in three by the TCBS-PCR method, but never in the
same samples. V. parahaemolyticus was found in 14 oyster samples by the
APW-PCR method and in 13 by the TCBS-PCR method. Concerning virulence
factors, tdh positive organisms were only detected by the APW-PCR method in
one sample; trh positive organisms were found in five oyster samples by both
methods though not always in the same sample.
The APW-PCR method has shown to be more adequate for the detection of
total V. parahaemolyticus in oysters, since it yielded a larger number of positive
samples, however, for detection of V. parahaemolyticus virulence factors and
V. vulnificus, both methods should be used
O método de Castilho nas páginas da “Revista da Instrução Pública para Portugal e Brasil” (1857-1858)
Este texto analisa o método Castilho na Revista da Instrução Pública para Portugal e Brasil, publicada nos anos de 1857 e 1858, com o objetivo de estreitar as relações pedagógicas entre os dois países. Aborda-se e a importância desta materialidade para a escrita da História da Educação. Discorre-se sobre as suas características gráficas e os processos de circulação. Toma-se como referência as correspondências entre os redatores, António Feliciano de Castilho e Luiz Filipe Leite com os professores brasileiros, onde nas quais este método foi implantado. Conclui-se que esta fonte possibilita compreendermos as relações entre os educadores portugueses e brasileiros no Oitocentos.
A Palavra “Paulo Freire”
No presente texto, ensaiamos uma interpretação performativa da relação entre a obra e a vida de Freire, isto é, entre a interpretação de seu pensamento e a rememoração da vida do indivíduo por trás da obra. Por isso, nele não é problematizada propriamente a obra ou o pensamento de Paulo Freire ou qualquer aspecto de sua prática, mas a relação discursiva entre a memória de um autor e a interpretação de sua obra. Para tanto, recorremos a conceitos como autor, segundo abordado por Michel Foucault e por Roland Barthes, e arquivo, segundo Jacques Derrida
Propuesta de adecuación de la pista de aterrizaje y mejora de los servicios del Aeropuerto de Medina en Cundinamarca
Trabajo de investigaciónEl contenido del trabajo se basa en la investigación y el diseño de la pista del aeropuerto en medina Cundinamarca la cual incluye el presupuesto, también se incorporan diseños básicos de terminal para pasajeros áreas administrativas, cuartel de bomberos, campos de vuelos así como un estudio socioeconómico del sector en cual se plasma la viabilidad del proyecto realizado.INTRODUCCIÓN
1. GENERALIDADES
2. MARCOS DE REFERENCIA
3. METODOLOGÍA
4.RESULTADOS
5. ANÁLISIS DE RESULTADOS E IMPACTOS
6. CONCLUSIONES 113
7. NUEVAS ÁREAS DE ESTUDIO
8. BIBLIOGRAFIAEspecializaciónEspecialista en Gerencia de Obras Civile
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