Reabilitação oral em pacientes com bulimia

A principal consequência da bulimia nervosa, na cavidade oral, é a erosão dentária. Segundo a literatura cientifica, para a resolução desta manifestação oral, a técnica de três passos é o melhor plano de tratamento. Esta técnica tem como objetivo alcançar a máxima preservação da estrutura dentária e ter um ótimo resultado estético e funcional. São realizadas restaurações diretas em resina composta nos dentes posteriores superiores, inferiores e anteriores mandibulares. Bem como restaurações indiretas por palatino nos dentes anteriores e por fim facetas de cerâmica por vestibular nos dentes anteriores maxilares, uma vez que estas têm um excelente comportamento quando colocadas com um método de aplicação otimizado de adesivo dentinário. Este plano de tratamento tem uma sequência lógica dividida em três etapas. Esta abordagem apenas pode ter sucesso a longo prazo, caso os pacientes a serem tratados não continuem com os episódios de regurgitação, que tanto caracterizam este distúrbio alimentar.The main consequence of bulimia nervosa in the oral cavity is tooth erosion. According to the scientific literature, for the resolution of this oral manifestation, the three-step technique is the best treatment plan. This technique aims to achieve maximum preservation of tooth structure and it has a great esthetic and functional result. Direct composite resin restorations are performed on mandibular upper, lower, anterior and posterior teeth. As well as indirect restorations by palatine in the anterior teeth and finally facets of ceramic by vestibular in the maxillary anterior teeth, since these have an excellent behavior when placed with a method of optimized application of dentin adhesive. This treatment plan has a logical sequence divided into three steps. This approach can only be successful in long-term if the patients to be treated do not continue with episodes of regurgitation, which characterize this eating disorder

Role of glutathione s-transferase pi in neuronal protection under oxidative stress and proteasome inhibition relevance to Parkinson’s disease

Tese de doutoramento, Farmácia (Bioquímica), Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2012Although the molecular mechanisms underlying DA neuronal death in Parkinson’s disease (PD) are still not completely understood, solid evidence has accumulated implicating mitochondrial dysfunction, oxidative stress and failure of proteolytic pathways in the pathogenesis of the disease. Glutathione S-Transferase pi (GSTP), whose expression is regulated by the nuclear factor-erythroid 2-related factor 2 (Nrf2), has been shown to protect cells from reactive oxygen species by modulating S-glutathionylation of proteins, following oxidative and nitrosative stress, altering the levels of glutathione, and also by acting as a ligand-binding protein controlling the catalytic activity of kinases involved in cell-signaling pathways. Experimental models of PD based on the use of the selective dopaminergic neurotoxin 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) are widely used as they recapitulate the neurological features of the disease, triggering a cascade of deleterious events that culminate with DA neuronal demise. The main objective of the present work was to characterize the putative neuroprotective role of GSTP against MPTP-induced oxidative stress and to contribute to the elucidation of the role of proteasome inhibition in the MPTP Parkinson’s disease mouse model. Moreover with this work we aimed to further investigate the molecular mechanisms underlying MPTP-induced DA neuronal death. In the first part of this work we have demonstrated in vivo that GSTP is an endogenous regulator of the activity of c-Jun N-terminal kinase (JNK). We show that in mice brain, GSTP is able to bind JNK, through direct protein-protein interaction, inhibiting its activation, and consequently preventing its downstream effects on triggering cell death pathways. Moreover, we showed that GSTP knockout mice display increased susceptibility to MPTP neurotoxicity. We have further characterized GSTP neuroprotective function by demonstrating for the first time that, in vivo GSTP potentiates Kelch ECH associating protein 1 (Keap1) Abstract xxiv S-glutathionylation following MPTP administration, in mice brain. As Keap1 is the major endogenous regulator of Nrf2, Keap1 S-glutathionylation results in the subsequent Nrf2 pathway activation, and increased expression of GSTP, in a positive feedback regulatory loop. Finally, as the ubiquitin-proteasome system (UPS) is also a critical player in several processes involved in the regulation of neuronal survival vs neuronal death pathways, and specifically in the regulation of the Nrf2-elicited antioxidant response, we investigated the modifications in UPS function, upon MPTP-induced oxidative stress and proteasome inhibition, in wild-type and GSTP knockout mice brain. We concluded that different components of the UPS have different susceptibilities to oxidative stress and, importantly GSTP knockout mice display increased susceptibility to UPS damage and inactivation upon MPTP-induced oxidative stress. In conclusion, our results provided new insights into the molecular mechanisms involved in DA neuronal loss and we identified novel mechanisms involved in GSTP-elicited neuronal protection. Overall our results demonstrate important GSTP roles, other than detoxification, namely in the regulation of kinase signaling pathways and consequently in the modulation of cell death cascades, and in the potentiating of S-glutathionylation, thus enhancing antioxidant responses. Therefore the regulation of GSTP expression constitutes a promising therapeutic target in the development of novel therapeutic strategies for the treatment of neurodegenerative diseases and other diseases in which oxidative stress is an important factor of progression.A doença de Parkinson (PD) é uma doença neurodegenerativa caracterizada pela degenerescência progressiva dos neurónios dopaminérgicos da substantia nigra pars compacta (SNpc) e pela presença de inclusões citoplasmáticas constituídas por agregados proteicos, denominadas corpos de Lewy. A depleção de dopamina, resultante da morte dos neurónios dopaminérgicos, origina perda dos mecanismos de neurotransmissão entre a SNpc e o estriado, onde se situam os terminais nervosos destes neurónios, e conduz à incapacidade de controlo dos movimentos voluntários. Embora se conheçam as características neuroquímicas e neuropatológicas da PD, a sua etiologia bem como os mecanismos moleculares subjacentes à morte dos neurónios dopaminérgicos não estão ainda completamente elucidados. No entanto, resultados de numerosos estudos apontam para um importante papel de factores como o stress oxidativo, a disfunção mitocondrial e a desregulação de vias de degradação proteica, na patogénese das formas familiar e esporádica da PD. O desencadeamento da disfunção do metabolismo proteico, nas formas esporádicas da PD, poderá resultar do stress oxidativo mediado por espécies reactivas de oxigénio (ROS). A isoforma pi da Glutationo S-transferase (GSTP) é um enzima de destoxificação de fase II, que para além de catalisar a reacção de adição nucleofílica do glutationo reduzido a um elevado número de substratos, participando assim na eliminação das ROS, tem sido sugerido como protector em situações de stress oxidativo devido à sua capacidade de estabelecer interacções proteína-proteína, modulando vias de sinalização celulares. Os modelos experimentais baseados na administração da neurotoxina 1-metil-4- fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridina (MPTP) a ratinhos mimetizam diversas características neuropatológicas da PD desencadeando uma cascata de eventos causadores de danos celulares, que culmina com a degenerescência selectiva dos neurónios dopaminérgicos. O presente trabalho teve como principal objectivo contribuir para a caracterização do potencial papel neuroprotector da GSTP, em resposta ao stress induzido pelo MPTP e Resumo xxvi à inibição do proteossoma. Mais especificamente foram estudados os mecanismos moleculares subjacentes à perda dos neurónios dopaminérgicos em situações de stress oxidativo induzido pelo MPTP e investigado o papel da inibição do proteossoma neste modelo de PD. Na fase inicial deste trabalho demonstrámos que a administração de MPTP a ratinhos C57BL/6 wild-type (wt) e GSTP knockout (ko) conduz à degenerescência selectiva dos neurónios dopaminérgicos da via nigro-estriado, com perda de densidade dos terminais nervosos no estriado e diminuição do número de neurónios dopaminérgicos no cérebro médio. Os nossos resultados mostraram que a degenerescência dos neurónios dopaminérgicos ocorre mais precocemente nos ratinhos GSTP ko do que nos wt, demonstrando que os ratinhos ko são mais susceptíveis à neurotoxicidade induzida pelo MPTP. Adicionalmente, observámos que o tratamento com MPTP conduz a um aumento da fosforilação da cinase N-terminal da c-Jun (JNK), bem como da sua actividade catalítica e consequentemente da fosforilação de c-Jun. A activação da cascata de sinalização da JNK despoleta vias de morte celular, pelo que os resultados obtidos indicam que esta será uma das vias envolvidas na morte dos neurónios dopaminérgicos induzida pelo MPTP. Os mecanismos moleculares subjacentes à regulação da actividade da JNK em condições de stress celular envolvem a activação de uma cascata de cinases bem como da regulação controlada de diversos repressores endógenos da JNK. Os nossos resultados demonstram que in vivo a GSTP actua como um regulador endógeno da resposta celular ao stress induzido pelo MPTP através da inibição directa da actividade da JNK, por interacção proteína-proteína. O factor de transcrição Nrf2 é um dos principais sensores e reguladores celulares da resposta ao stress oxidativo e a sua actividade é regulada maioritariamente pela proteína Keap1, que encaminha o Nrf2 para degradação pelo proteossoma. A indução da expressão de enzimas de fase II, nomeadamente a GSTP pelo factor de transcrição Nrf2, constitui um potencial mecanismo de defesa celular contra o stress oxidativo induzido pelo MPTP. Numa segunda parte deste trabalho procurámos por um lado clarificar de que forma a inibição do proteossoma, adicionalmente ao stress induzido pelo MPTP, influenciava a regulação da actividade do Nrf2 e quais as consequências na activação da GSTP, e por outro investigar o papel da GSTP na regulação dos mecanismos moleculares activados nestas condições experimentais. Resumo xxvii Os resultados obtidos demonstraram um aumento da formação de ROS bem como um aumento da acumulação de grupos carbonilo nas proteínas, indicando um aumento da quantidade de proteínas oxidadas no cérebro de ratinhos C57BL/6 wt tratados com MPTP e/ou com o inibidor do proteossoma, MG132. Verificou-se também um aumento da reactividade dos astrócitos e da microglia. Conjuntamente estes resultados sugerem uma activação inicial de vias de stress e inflamação, nas quais parece haver um efeito de sinergia resultante da administração simultânea dos dois compostos. Um dos marcadores de estado redox celular mais reconhecidos é o nível de glutationo intracelular, bem como o seu estado de oxidação. Os nossos resultados mostraram um decréscimo de glutationo, acompanhado de um aumento de actividade da peroxidase do glutationo e um decréscimo da actividade da reductase do glutationo, indicando um ambiente celular mais oxidante. No entanto não se verificou um aumento da forma oxidada livre do glutationo nestas condições, provavelmente porque o decréscimo observado nos níveis de glutationo livre se deve à sua conjugação com proteínas, visto que observámos um aumento dos níveis de proteínas S-glutationiladas nos ratinhos wt tratados com MPTP. Mais ainda, através de ensaios de co-imunoprecipitação verificámos a S-glutationilação específica da proteína Keap1, nos ratinhos wt mas não nos GSTP ko. A S-glutationilação conduz à dissociação do complexo entre a Keap1 e o Nrf2, evitando a degradação do Nrf2 pelo proteossoma e conduzindo à sua activação. Nos ratinhos wt tratados com MPTP, observámos ainda um aumento de expressão do Nrf2, bem como da sua translocação para o núcleo, indicativa da sua activação. Ainda de acordo com estes resultados, pudémos observar um aumento dos níveis de expressão da GSTP e da heme oxigenase (HO-1), ambas reguladas pelo Nrf2, nos ratinhos wt tratados com MPTP. No entanto, nos ratinhos ko não se verificou um aumento nos níveis de expressão para a HO-1. Tendo em conta que a GSTP foi sugerida como sendo um dos catalisadores da reacção de S-glutationilação, estes resultados indicam que, em resposta ao stress induzido pelo MPTP, a GSTP catalisa a reacção de S-glutationilação da Keap1, levando à dissociação do complexo Keap1-Nrf2 e à activação do Nrf2. O Nrf2 por sua vez é translocado para o núcleo onde regula a expressão de vários genes, nos quais se incluem GSTP e HO-1. Nos ratinhos GSTP ko, a ausência de GSTP inviabiliza este mecanismo. No seu conjunto, estes resultados demonstram a existência de um mecanismo de regulação por feedback positivo, em que a GSTP ao ser activada em condições de stress, poderá por sua vez deslocar o equilíbrio da reacção de S-glutationilação no sentido da Resumo xxviii glutationilação de diversas proteínas, nomeadamente da Keap1, levando à dissociação do complexo Keap1-Nrf2 e consequentemente a uma maior activação do Nrf2. O conjunto dos nossos resultados permitiu demonstrar pela primeira vez a S-glutationilação da Keap1 in vivo, e consequente activação do Nrf2, revelando um novo mecanismo de protecção neuronal pela GSTP. A disfunção das vias de degradação de proteínas é um dos factores envolvidos na degenerescência dopaminérgica na PD e em modelos experimentais. Por um lado a inibição das vias de degradação, nomeadamente do proteossoma, poderá causar a acumulação de proteínas danificadas por stress oxidativo, e por outro lado a acumulação de proteínas oxidadas poderá levar à sobrecarga e consequente inibição do proteossoma, criando assim uma potenciação cíclica dos danos oxidativos na célula. Na última parte deste trabalho procurámos clarificar de que forma a via da ubiquitina-proteossoma é alterada pela administração de MPTP e/ou MG132, e se existem diferenças entre ratinhos wt e GSTP ko no que diz respeito a esta via. Verificámos que, no cérebro de ratinhos wt e GSTP ko, diferentes componentes da via da ubiquitina proteossoma apresentam diferentes susceptibilidades ao stress induzido pelo MPTP ou ao tratamento com MG132. Mais importante, observámos que os ratinhos ko são mais susceptíveis à disfunção da via da ubiquitina proteossoma, após tratamento com MPTP, relativamente aos wt, apresentando menor capacidade de ubiquitinação e níveis de expressão do enzima de conjugação com a ubiquitina (E1) mais baixos. Uma vez que o aumento da proteólise pode de certo modo funcionar como um mecanismo antioxidante ao degradar proteínas oxidadas ou danificadas, impedindo a sua acumulação, o facto de os ratinhos GSTP ko terem défices nesta via pode contribuir para a sua maior susceptibilidade ao stress induzido pelo MPTP. Estes resultados sugerem que a GSTP pode também ter um papel na protecção/manutenção das vias de degradação proteica em condições de stress oxidativo. Em conclusão, com a realização deste trabalho contribuímos para a elucidação dos mecanismos implicados na degenerescência dos neurónios dopaminérgicos induzida pelo MPTP e identificámos alguns dos mecanismos subjacentes à neuroprotecção conferida pela GSTP. A expressão alterada de GSTP foi já descrita como estando relacionada com diversas patologias humanas. Os resultados aqui apresentados mostram que além de um importante papel na destoxificação, in vivo a GSTP tem a capacidade de regular a actividade catalítica da JNK, afectando a modulação de vias de morte celular, bem como de catalisar a S-glutationilação de proteínas envolvidas na resposta antioxidante. Assim, a regulação da expressão da GSTP revelou ser um importante alvo para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas para o tratamento de doenças neurodegenerativas e outras doenças nas quais o stress oxidativo seja um importante factor de progressão.Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT, SFRH/BD/39897/2007 e projetos PPCDT/SAU-FCF/58171/2004, PTDC/SAU-MMO/57216/2004, PEst-OE/SAU/UI4013/2011) e FEDER

Efeito de diferentes condições ambientais na incorporação de elementos em conchas larvares de Mytilus galloprovincialis

Mestrado em Biologia MarinhaA dispersão de organismos marinhos durante a sua fase larvar é determinante para a conectividade entre populações e o estabelecimento da complexa biogeografia das espécies marinhas. A determinação dos padrões de dispersão tem sido relevante para a conservação de espécies, a gestão de stocks de pesca e mesmo para a compreensão de processos ecológicos como a extinção e a recolonização de populações. As estruturas carbonatadas de organismos marinhos representam arquivos de informação ambiental. Através da análise geoquímica de estruturas como os otólitos de peixe e os estatólitos e conchas de invertebrados é possível descobrir as condições físico-químicas ambientais sob as quais se desenvolveram estes organismos e reconstruir padrões de dispersão e locais de origem de indivíduos. No entanto, a incorporação dos elementos químicos por estas estruturas é altamente regulado por um conjunto de fatores físico-químicos ambientais e biológicos que deverão ser ponderados para uma correta utilização de assinaturas geoquímicas como meio de identificação geográfica. Com o intuito de investigar como a composição química de conchas larvares do mexilhão Mytilus galloprovincialis é influenciada por algumas condições ambientais e temporais, indivíduos desta espécie foram submetidos a diferentes temperaturas, salinidades e concentrações de elementos. Pretendia-se verificar como difere a incorporação de elementos com os diferentes parâmetros de cada fator ambiental e se a mesma é influenciada pela idade do indivíduo. Com esse objetivo foram cultivadas larvas de M. galloprovincialis por um período de 6 e 14 dias e criados tratamentos combinados de temperatura (12, 17, 20 e 25°C) e de salinidade (26, 32 and 37). Foram quantificadas as concentrações dos elementos Mg, Mn, Ba, Sr, Cu e Zn pelo rácio de Ca através de análise de ICP-MS (inductively coupled plasma mass spectometry). Paralelamente um outro conjunto de indivíduos larvares foi submetido a concentrações de Cu e Zn durante aproximadamente 3 dias. Não foi encontrada variabilidade significativa nas assinaturas geoquímicas entre as larvas com 6 dias e 14 dias de idade, sugerindo uma composição química estável, para este período, que não foi afetada pelo desenvolvimento larvar. Numa outra abordagem, foi detetada a máxima incorporação destes elementos a uma temperatura de 17°C e a diferentes combinações de temperatura e salinidade, realçando uma interacção entre estes fatores. Estes resultados realçam a possível influência da temperatura sob a disponibilidade de cada elemento. Outro aspeto a ter em conta é o facto de a 17°C serem encontradas as condições ótimas para o desenvolvimento larvar, e por isso também da secreção da concha carbonatada do mexilhão, existindo uma maior incorporação dos elementos do ambiente. A incorporação de Cu, no entanto, não mostrou ser significativamente afetada pela temperatura nem pela salinidade. Relativamente ao Zn estes efeitos foram apenas significativos quando não combinados. Para além disso, e numa terceira abordagem, a disponibilidade destes últimos na água, não se mostrou determinante para a incorporação dos mesmos nas conchas, sugerindo-se um controlo da inclusão por parte de fatores fisiológicos do próprio organismo. Os resultados obtidos permitem compreender mais detalhadamente a relação que alguns fatores ambientais exercem sob a produção de assinaturas químicas em conchas larvares desta espécie de mexilhão e poderão contribuir para uma melhor interpretação de padrões de conectividade de populações no meio marinho.Larval dispersal is the main cause of connectivity between populations and the establishment of the complex biogeography of most marine species. The determination of dispersion patterns has been relevant to conservation studies of species, management of fisheries stocks and even for the understanding of ecological processes as the extinction and re-colonization of populations. Carbonate structures of marine organisms work as an archive of environmental information. Through geochemical analysis of fish otoliths, as well as statoliths and shells of invertebrates is possible to discover physical and chemical environmental conditions under which these organisms developed and trace dispersion patterns and natal habitats. However, the incorporation of trace elements in these structures is highly regulated by a range of physical and chemical environmental factors as well as physiological and biochemical. These factors should be considered for an accurate use of geochemical signatures as a means of geographical identification. In order to investigate how the geochemical composition of larval shells from the mussel species Mytilus galloprovincialis is influenced by environmental and temporal conditions, individuals were submitted to different temperatures, salinities and water elemental concentrations. The main objective was to understand how the elemental incorporation varies with different parameters of each environmental factor, and if the same is influenced by age. M. galloprovincialis larval were reared during 6 and 14 days under combined treatments of temperature (12, 17, 20 and 25° C) and salinity (26, 32, and 37). Concentrations of the elements Mg, Mn, Ba, Sr, Cu and Zn by the ratio of Ca were analyzed through ICP-MS (inductively wound couple plasma-mass spectrometry) analysis. Simultaneously another set of individuals were submitted to different concentrations of Cu and Zn for a period of approximately 3 days. No significant variability in chemical composition was found in larval shells between larval with 6 and 14 days of development, suggesting a stable geochemical signature, for this period, and no age effect on incorporation. On a second approach, was detected a maximum incorporation of these elements at 17° C and at different temperature-salinity combinations, suggesting an interaction between these factors. These results highlight the possible influence of temperature on each element’s availability. Another aspect is the fact that at 17° C larval seem to find optimum conditions for its development and for carbonate shell secretion, having a higher incorporation of the elements from the water. Cu incorporation, however, was not significantly affected by temperature or salinity. With regard to the Zn these effects were significant only when not interacting. Finally, the availability of the lastly mentioned elements in the water was not significant for elemental concentrations in shells, suggesting that certain elements incorporation might be specifically controlled by physiological mechanisms of the organism. Results obtained allow understanding in more detail the influence some environmental factors have on geochemical signature production in mussel larval shells of this species and may contribute to a better use of elemental fingerprinting in the interpretation of connectivity patterns

Can heterotrophic feeding improve coral thermal stress response? – The case study of Palythoa sp.

Os efeitos das alterações climáticas têm vindo a ser observados em todo o mundo, designadamente nos recifes de coral, o que pode impactar irremediavelmente a biodiversidade e os serviços ecossistémicos dos oceanos. Quando estão sob stress, os corais fotossintéticos podem perder os seus endossimbiontes (dinoflagelados do género Symbiodinium, usualmente designados como zooxantelas), sendo este processo classificado como branqueamento. O aumento da temperatura nas águas manifesta-se de duas maneiras, na água da superfície do mar e sob a forma de ondas de calor. A frequência das ondas de calor tem vindo a aumentar ao longo das últimas décadas, aumentando também a frequência com que os eventos de branqueamento de corais ocorrem. Como consequência, as espécies de corais mais suscetíveis a estes eventos sofrem danos irreversíveis, uma vez que, com a perda dos endossimbiontes fotossintéticos, ficam privadas de parte substancial da sua nutrição, o que pode levar à sua degradação e, em casos mais extremos, à sua morte. Para além da nutrição autotrófica, constituída pelos produtos da fotossíntese, os corais fotossintéticos têm também a capacidade de se alimentar heterotroficamente, sendo por isso classificados como animais mixotróficos. Segundo alguns estudos, esta estratégia de alimentação pode contribuir para tornar os corais mais resilientes ao stress térmico. Neste sentido, no presente trabalho pretendeu-se avaliar a resposta ao stress térmico de mini colónias de Palythoa sp. (subclasse Hexacorallia; ordem Zoantharia) após 4 meses de cultivo sem (NF) e com (F) fornecimento de alimento (dieta microencapsulada, anteriormente otimizada para a espécie). Após este período, procedeu-se ao teste de stress térmico: dois grupos (25NF e 25F) permaneceram com a temperatura de cultivo (25±1°C), enquanto outros dois grupos (30NF e 30F) foram sujeitos a uma subida gradual da temperatura da água, durante 24h até atingir os 30±1°C. Esta temperatura foi mantida durante oito dias. Corais alimentados foram comparados com corais não alimentados de modo a avaliar o efeito da dieta num cenário de stress. Foi efetuada uma avaliação dos parâmetros de fotobiologia, biomarcadores de stress térmico e oxidativo, dano oxidativo e reservas energéticas. Durante o ensaio não houve registo de mortalidade. Apesar dos corais não alimentados não se mostrarem significativamente mais suscetíveis ao stress, os corais alimentados apresentam um melhor estado metabólico. Este facto pode ser crucial no período de recuperação após eventos de stress. Assim, sugere-se que o alimento tem um efeito positivo na resistência dos corais ao aumento da temperatura da água, como consequência das ondas de calor, quando previamente bem suplementados

Comprehend the Optical, Morphological, and Electrical Characteristic of Air Processed Polymer Solar Cells

Solar energy via photovoltaic (PV) is a promising and freely accessible energy source that has become the main route for managing long term challenges in the energy crisis. Organic solar cells (OSCs) have raised interest in the scientific community due to their enormous potential in solar industry such as mechanical flexibility, exceptional processability, and capability of large-area roll-to-roll (R2R) manufacturing. In this work, we emphasize to understand the correlation between optical (absorbance and photoluminescence) and morphology properties of air processed photoactive layer, which are prepared at different spin-speeds (800 rpm, 1000 rpm, 1200 rpm, and 1500 rpm) and PC61BM concentration (1.0:0.6, 1.0:0.8 and 1.0:1.0 ratios) and its influence on the performance of OSCs devices. Here, OSCs devices have been fabricated in an inverted bulk heterojunction (BHJ) device configuration viz. sputtered Indium Thin Oxide (sITO)/Zinc oxide (ZnO)/P3HT:PC61BM/ Molybdenum trioxide (MoO3)/Silver (Ag). The sITO, ZnO, MoO3, and Ag were introduced as a transparent cathode electrode, electron transport layer (ETL), hole transport layer (HTL), and an anode electrode, respectively. The blend of regioregular poly(3-hexylthiophene-2,5-diyl) (rrP3HT), donor polymer, and [6,6] phenylC61-butyric acid methyl ester (PC61BM), acceptor molecule, is employed as a photoactive layer in the proposed devices. All the samples (for optical and morphological measurements) and solar cell devices were prepared via spin-coating technique without controlling the atmospheric conditions. A thin interface layer of MoO3 (10 nm, 0.2-0.5 Å/sec) and anode electrode (Ag, ≈ 150 nm, 1.5 Å/sec) were both deposited, sequentially, on the photoactive layer using thermal evaporation with a vacuum of 10-6 Torr. The photovoltaic performance parameters were explored by using current-voltage (J-V) characteristics. Furthermore, electrochemical impedance spectroscopy (EIS) was used to generate an electrical model for the extraction of charge transport parameters of air processed OSCs devices such as the chemical capacitance (Cμ), effective lifetime (τn), diffusion time (τd) and charge carrier mobility (μ). Additionally, the long-term stability of the produced photovoltaic devices is reported.A energia solar fotovoltaica é uma fonte promissora e acessível de energia que se tornou a rota principal para a gestão dos desafios impostos pela crise energética a longo termo. As Células Solares Orgânicas (CSOs) captaram o interesse da comunidade científica devido ao seu enorme potencial industral como a sua flexibilidade mecânica, o processamento exceptcional e a capacidade de produção roll-to-roll (R2R) a larga escala. Neste trabalho, deu-se ênfase à correlação entre as propriedades óticas (absorbância e fotoluminescência) e morfológicas das camadas activas processadas em atmosfera aberta, as quias preparadas a diferentes spin-speeds (800rpm, 1200rpm, 1500rpm), possuem diferentes concentrações de PC61BM (a 1.0:0.6, 1.0:0.8 e 1.0:1.0 proporções) e a sua influência na performance das CSOs. Aqui, as CSOs foram fabricadas numa configuração de dispositivo invertida baseda no principio de heterojunção (BHJ). O Óxido de Indio Estanho (ITO), preparado pela técnica Sputtering RF, sITO/Óxido de Zinco (ZnO)/P3HT:PC61BM/ Tróxido de molibdénio (MoO3)/Prata (Ag). sITO, ZnO, MoO3, e Ag foram introduzidos como cátodo (electrodo) transparente, camada transportadora de eletrões (ETL), camada de transportadora de buracos (HTL) e ânodo (electrodo), respetivamente. A mistura de regioregular poli (3-hexiltiofeno) (rrP3HT), polímero doador, e [6,6]-fenil-C61-ácido butírivo-metil ester (PC61BM), a molécula aceitadora, foi utilizada como camada ativa nos dispositivos propostos. Todas as amostras (para as avaliações óticas e morfológicas) e as células solares foram preparadas através da técnica de spin-coating , sem controlo das condições atmosféricas. Uma interface fina de MoO3 (10 nm, 0.2-0.5 Å/sec) e um ânodo (elétrodo) (Ag, ≈ 150 nm, 1.5 Å/sec) foram ambos depositados, sequencialmente, na camada activa através da sua evaporação térmica a vácuo de 10-6 Torr. Os parâmetros de performance fotovoltaica foram explorados através das curvas caracteristicas J-V. Além disso, a espectroscopia de impedância eletroquímica (EIS) foi utilizada para gerar um modelo elétrico para a extracção dos parâmetros de transporte de carga de dispositivos solares processados em atmosfera aberta, tais como capacitância química (Cμ), tempo de vida efetivo (τn), tempo de difusão (τd) e mobilidade global (μ). Adicionalmente a estabilidade de longo-termo das células produzidas é reportada

FATORES RELACIONADOS COM A PREVALÊNCIA DE LESÕES POR PRESSÃO EM CONTEXTO COMUNITÁRIO

Objetivo: identificar fatores relacionados com a prevalência de lesões por pressão. Método: estudo descritivo-correlacional, transversal, com usuários adultos dependentes em contexto comunitário. Os dados foram coletados em um formulário, mediante consulta de documentação no Sistema de Informação SClínico. No tratamento de dados foi utilizado o Statistical Package for the Social Sciences. Resultados: do total da amostra (n=771), a maioria era do sexo feminino (68,2%) e pertencia à faixa etária de 85 anos ou mais (45,1%). A maioria apresentava Alto Risco de desenvolver lesão por pressão (52,1%). A prevalência foi de 11,2%, diferindo significativamente entre as categorias do Grau de Risco e a dimensão Mobilidade da escala de Braden (X2:p<0,000). Conclusão: identificados fatores relacionados com a prevalência da lesão por pressão, entre os quais o Grau de Risco e a dimensão mobilidade.Descritores: Lesão por Pressão. Adulto. Diagnóstico. Saúde Pública. Enfermagem em Saúde Comunitári

Importância da mutação JAK2 V617F nas doenças mieloproliferativas clássicas

Mestrado em Biologia Molecular e CelularOs Síndromes Mieloproliferativos (SMP) são um grupo de doenças heterogéneas nas quais se verifica uma produção excessiva de células sanguíneas pelos precursores hematopoieticos. A Policitémia Vera (PV), a Trobocittémia Essencial (TE), a Mielofibrose Idiopática (MF) e a Leucemia Mielóide Crónica (LMC) são conseideradas SMP clássicas que apresentam características clínicas e biológicas comuns. Ao contrário da LMC, cuja etiologia está relacionada com a proteína constitutivamente activa BCR-ABL, o mecanismo molecular da PV, TE e MF permaneceu por muito tempo desconhecido. O grande número de estudos respeitantes ás SMP resultou em 2005 na descrição de uma mutação pontual no exão 14 do gene Janus Kinase 2 (JAK2), denominada JAK2 V617F, recorrente em pacientes com SMP clássicas BCR-ABL negativos. Esta mutação leva à activação constitutiva da proteína JAK2. Estudos recentes revelam que a mutação JAK2 V617F está presente em 83-95% de doentes com PV, 50 a 70% de doentes com TE e em cerca de 50% de doentes com MF. Os objectivos deste estudo consistem em determinar a frequência da mutação JAK2 V617F numa população de doentes dos HUC-EPE com diagnóstico de PV, TE e MF, comparar a frequência obtida com a literatura, avaliando deste modo a eficácia da metodologia usada e demonstrar que esta mutação é estatísticamente significativa nos SMP clássicos Ph-. O estudo incidiu sobre um grupo de 475 doentes aos quais foi solicitada a análise da mutação JAK2 V617F no periodo decorrente de Junho de 2006 e Maio de 2010. A metodologia usada consistiu na extracção de ADN genómico, seguida de uma reacção de PCR utilizando primers que permitiram a amplificação dos alelos normal e mutado, e sua subsequente identificação através de uma electroforese com posterior coloração utilizando nitrato de prata. Posterior análise dos resultados determinou uma frequência da mutação JAK2 V617F de 74%, 66% e 42% em pacientes com PV, TE e MF respectivamente. Utilizando o teste Qui-Quadrado de Pearson foi possivel demonstrar que: existe uma associação entre a mutação e o sexo feminino nos doentes com PV; relacionando a mutação com a doença verificou-se que a heterozigotia tem uma forte associação com a TE enquanto que a homozigotia tem associação com a PV. Por fim estabeleceu-se uma forte associação desta mutação com as SMP Ph-, ou seja, para α= 0,05 foi obtido P<0,001. Para provar estatísticamente a eficácia da metodologia usada efectuou-se o teste Qui-Quadrado de Aderência no qual X2(observado)= 4,69, inferior ao X2 (crítco)= 5,99. Este resultado é extremamente relevante pois determina que não existe necessidade de implementar outra técnica, que seria bastante mais dispendiosa, e no presente não seria vantajosa. Futuramente quando a terapía passar pelo uso de proteínas inibidoras de JAK2, será necessário efectuar um estudo semelhante para averiguar se a metologia qualitativa usada é suficiente para fazer a monitorização terapêutica.The Myeloproliferative Syndromes are a heterogeneous group of diseases in which there was an overproduction of blood cells by hematopoietic precursors. Polycythemia Vera (PV), the Essential Trobocittémia (TE), Idiopathic Myelofibrosis (MF) and Chronic Myelogenous Leukemia (CML) are classic SMP that have in common clinical and biological characteristics. Unlike the LMC, whose etiology is associated with the protein constitutively active BCR-ABL, the molecular mechanism of PV, ET and IM long still remain unknown. The large number of studies relating to SMP led in 2005, to the description of a point mutation in exon 14 of gene Janus Kinase 2 (JAK2), known as JAK2 V617F, in patients with recurrent classic SMP Ph-. This mutation leads to constitutive activation of JAK2 protein. Recent studies shown that JAK2 V617F is present in 83-95% of patients with PV, 50 to 70% of ET patients and in 50% of patients with IM. The objectives of this study were to determine the frequency of JAK2 V617F in a patient population of HUC-EPE diagnosed with PV, ET and MF, comparing the frequency obtained with the literature, thereby assessing the effectiveness of the methodology used. The study focused on a group of 475 patients who were asked to JAK2 V617F mutation analysis in the period from June 2006 to May 2010. The methodology used consisted in a extraction of genomic DNA, followed by a PCR reaction using primers that allowed the amplification of normal and mutated alleles, and their subsequent identification by an electrophoresis and staining using silver nitrate. Further analysis of the results determined a frequency of JAK2 V617F in 74%, 66% and 42% in patients with PV, ET and IM respectively. Using the Pearson chi-square test was possible to demonstrate that: the mutation has an association with female gender in PV patients, observing the relationship between the disease and the mutation was found that heterozygosity has a strong association with TE whereas homozygosity is associated with the PV. Finally we established a strong association of this mutation with Ph-SMP, to α= 0.05 was obtained a P<0,001. To statistically prove the effectiveness of the methodology was carried out a Chi-square test where X2 (observed) = 4.69 was lower than the X2 (insidious) = 5.99. This result is extremely important because it determines that there was no need to implement a quantitative technique, it would be far more expensive, and this would not be advantageous. In the future when therapy over the use of protein inhibitors of JAK2, we must perform a similar study to see whether the qualitative methodology used is enough to make the therapeutic monitorization

Accessible Tourism and Compliance

The concept of Accessible Tourism recognises that tourism is for everyone and, therefore, everyone should be able to enjoy tourism products and services. This concept not only translates into benefits for tourists, as it provides an improvement in the quality of life of the local population, who benefits from the creation of improved accessibility conditions. Promoting accessibility is a fundamental condition for the full exercise of citizenship rights enshrined in the Portuguese Constitution. Although there is growing awareness of the need to make spaces more accessible, translated into compliance with European guidelines and legal standards, there are still numerous gaps and examples of exclusion. The measures which are necessary to guarantee the enforcement of rights can be operationalised based on examples of good practices. In this sense, this paper analyses good practices of inclusion implemented in the Autonomous Region of Madeira. Even though these measures promote inclusion, it is still verified that they are insufficient to respond to the needs of citizens with disabilities, limitations or incapacity. Even so, it should be noted that Madeira has been increasingly strengthening its offer as an accessible destination, in order to boost demand for the region as an inclusive destination.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Beautiful geometry: a STEAM experience in a professional development course for mathematics teachers

Mathematics and art have a connection that goes far beyond proximity. In fact, they are two symbiotic areas shaping a beautiful, logical, systematic, and breathtaking world. One of the works that exposes their intrinsic connection, in a clear, rigorous and simple way, is the book Beautiful Geometry by Eli Maor and Eugen Jost. To a greater or lesser degree, we all feel the power that art exerts on our minds, both at a sensory and at a cognitive level. In fact, art is one of the privileged areas for the emergence of creativity. Combining beauty with rigor and reason, and based on the book mentioned above, we designed a professional development course for mathematics teachers, following a STEAM approach. The description of this course, illustrated with part of the graphic/artistic material produced by the participants, is the main object of this paper.publishe

A structured method for the optimization of the existing last mile logistic flows

Dissertation presented as the partial requirement for obtaining a Master's degree in Information Management, specialization in Knowledge Management and Business IntelligenceIn a fast-moving world some business exists due to the interconnectivity between countries. This happens because transports are able to reach the other side of the globe within few days and without being too expensive compensating the lower costs of production and competitive advantages. This is true for well-organized and big supply chains but even them can benefit from integration with disconnected and more complex supply chain as it is the case of e-commerce chains. The transaction of small packages from online shopping required in a totally distinct country of the place of production have very specific characteristics as they are spot flows, hard to predict and to combine with other goods owing to the fact that the destination of flows are different every time and it is not always worth it to dedicate a transport for such a small goods value and in addition most times, logistics have to answer to some challenging marketing requirements meaning they have time windows to fulfil. Last mile is a big part of logistics transports and is one important part of it that can really help companies having better prices and revenues for their transports. Last mile solutions need to be easy to implement and really have to translate in quick gains to logistic companies that are largely reducing their margins to increase competitiveness. In this context, the study aims to investigate and define a method following design Research Methodology hopping to draw some innovative solutions for the problem of last mile. In this respect, the work developed intends to study the solutions already implemented and extract insights on how distribution is made and how to maximize last mile profit through the mature of an algorithm able to reduce inefficiencies in a simple way without having to wiggle too much the structure of businesses as resources of last mile service providers are understood to be scarce as many last mile companies are small sized and running under big logistic players. The solution aims to attain the different marketing requirements exactly as it was defined without having to compromise anything but still being able to make good profit margins and perhaps make room for new opportunities to arise that previously were not profitable