Structural and Functional Characterization of a New Bacterial Target Against Tuberculosis: The Phosphatase PtpA

Tuberculosis (TB) is one of the top causes of death remaining a major public health problem worldwide. Mycobacterium tuberculosis is the agent of TB, infecting the human respiratory tract. Its remarkable pathogenicity hinges upon the ability to challenge the immune system of the host by secreting phosphatases into macrophages. Among them, Protein Tyrosine Phosphatase A (PtpA) plays a key role on the infection process, preventing the phagosome-lysosome fusion and promoting the inhibition of phagosome acidification. Thus, PtpA becomes a promising target for the development of new anti-TB drugs. The aim of this work is to contribute to find new structure-based drug design approaches against TB, studying the inhibitory properties of three different families of compounds towards PtpA – chalcones, thiosemicarbazones and azaindoles. The protein was overexpressed in E. coli – final yield of 20 mg protein/ liter of culture – and successfully purified using affinity chromatography. To provide new insights into the binding mode of the studied compounds, molecular docking studies were performed suggesting thiosemicarbazones as non-competitive inhibitors and the chalcones and azaindoles with a preferential active site binding. The protein was also biophysically characterized. The oligomeric state was confirmed by SEC, proving that PtpA is a monomer in solution. The protein stability was assessed through TSA revealing that, with 10% glycerol, PtpA resists to the effects of 10% DMSO. TSA was also used to find a suitable protein storage condition (-80°C) and to confirm PEG400 as an alternative solvent for the inhibitors. In addition, distinct biophysical approaches – TSA, MST and urea-gel electrophoresis – were implemented to detect protein-ligand interactions but definitive evidence were not obtained. Ligand-free and co-crystallization assays were extensively explored and several crystals were tested at the ESRF, Diamond and MAX IV. Two crystal structures were obtained: a co-crystallization PtpA-Lap11 structure at 3.6 Å resolution and a soaking PtpA-C33 structure at 2.8 Å resolution. Despite the low/medium resolution obtained, both structures reveal the potential binding of the inhibitors with suspicious density blobs near His120B for Lap11 and at the active site for C33. The ligands were preliminarily modelled but further refinement cycles are required to elucidate the respective binding

A "saída do armário": um estudo exploratório com mães e pais de lésbicas e gays

Dissertação de mestrado integrado em Psicologia (área de especialização em Psicologia Escolar e da Educação)As reações parentais, em relação à “saída do armário”, envolvem percursos que, ainda, não estão totalmente compreendidos. A evolução social permitiu que emergissem novas conceções dos pais e mães em relação à orientação sexual dos progenitores, superando-se assim, as visões mais tradicionais de família. Este estudo empírico teve como principais objetivos avaliar o modo como pais e mães gerem a “saída do armário” dos seus filhos; as reações parentais que marcam este processo e que estratégias são utilizadas na aceitação e integração da orientação sexual dos filhos e filhas. Os participantes são seis figuras parentais (cinco mães e um pai) cujos filhos já tenham feito o coming out. A idade da amostra, no momento da entrevista, varia entre os 52 e os 70 anos (M=59.33; DP=7.37). O instrumento aplicado para a recolha de dados foi a entrevista semiestruturada, através da utilização de um guião, previamente estruturado. Este continha oito questões fundamentadas nas seguintes linhas: (1) avaliar se existe um padrão de resposta dos progenitores, no modo como gerem o coming out dos filhos e filhas; (2) que estratégias usam durante este processo e (3) que mudanças ocorrem nas relações da família nuclear, durante e após o processo de “saída do armário” dos filhos e filhas. As entrevistas foram analisadas seguindo os pressupostos da Análise temática. Os dados recolhidos sugerem que existem reações parentais comuns em quase todos os casos avaliados (negação, medos, aceitação). No entanto, verificaram-se diferenças individuais e situacionais, pelo facto das reações não ocorrerem segundo um continuum ou ordem específica, mas sim consoante o contexto/situação. O associativismo, a partilha de experiências e a procura de informação acerca da orientação sexual foram as estratégias mais recorrentes. Relativamente à mudança, a maioria das figuras parentais refere que ainda se encontra a adaptar às questões do casamento homossexual e da possibilidade da adoção. Finalmente sugere-se que em investigações futuras haja um maior enfoque no papel que a família nuclear desempenha na vida das minorias sexuais.The parental reactions in relation to "coming out", involve pathways that also are not fully understood. Social evolution has allowed the appearance of new concepts from parents regarding the sexual orientation of their descendents, thus surpassing more traditional views of family. The main purposes of this empirical study, is to show how the parents handle the out-coming of their descendants; parental reactions that characterize this process and strategies that are used in the acceptance and integration of the sexual orientation of their sons and daughters. Participants are six parental figures (five mothers and one father), who´s son´s or daughter’s already had done their own “coming out”. The age of the sample, at the time of interview, varies between 52 and 70 years old. The instrument used for collecting data was the semi-structured interview using a script, previously designed. This was composed by eight questions based on the fallowing guideline: (1) to evaluate whether there is a pattern of response of the parents, in the way they manage the “coming out” of the sons and daughters (2) what strategies do they use doing this process and (3). changes that occur in the relations of the nuclear family, during and after the process of "coming out" of their sons and daughters. The interviews were analyzed following the assumptions of Thematic Analysis. The data collected suggests that there are common parental reactions in all cases evaluated (denial, fears and acceptance). However, there were individual differences and situational, in that the reactions do not occur according to a continuum or specific order, but are influenced by the context/situation. Sharing the information, experiences in associations, and the search for information about the sexual orientation were the strategies more used. Regarding the change, most of the parental figures are still adapting to issues of gay marriage and the possibility of adoption. Finally it is suggested that in future investigations there is a greater focus on the role that the nuclear family plays in the lives of sexual minorities

A solidão nos idosos

Este trabalho final da Licenciatura em Gerontologia Social intitula-se: A solidão nos idosos. O presente trabalho tem como objetivos fazer uma abordagem sobre a solidão nos idosos, sobre os fatores e vertentes que podem proporcionar esse sentimento. Contudo este trabalho inicia-se com a dinâmica do envelhecimento e velhice, assim como, salienta as diferenças entre estes para uma melhor perceção da temática abordada. Como vamos poder observar ao longo deste trabalho, a solidão é um sentimento que atinge em particular os idosos devido a diversos fatores como o afastamento destes da Sociedade devido à entrada na reforma a problemas de saúde e/ou viuvez. A solidão não é sentida por todos da mesma forma. O estar só para alguns é sinónimo de solidão mas para outros o facto de terem família não afasta esse sentimento já que muitas vezes não vêm as suas vontades respeitadas e por norma os familiares querem comandar a vida do idoso criando neste um sentimento de revolta e solidão ao mesmo tempo. Esta ausência de respeito e de escassez de obrigatoriedade de uma sociedade cada vez mais egocêntrica levou a que esteja presente neste trabalho o Estatuto do Idoso para que seja feito algo em prol desta situação. Devemos tentar mudar este pensamento egoísta começando pelos mais jovens para que saibam respeitar os idosos de forma a lhes ser atribuído o devido valor, pois outrora já contribuíram para esta sociedade que hoje os despreza e ignora

Separação de enantiómeros de ácido mandélico usando sistemas aquosos bifásicos contendo seletores quirais bifásicos

Mestrado em Bioquímica - Métodos BiomolecularesA quiralidade é a uma propriedade importante na indústria farmacêutica, uma vez que um enantiómero de um fármaco pode exercer o efeito terapêutico desejado enquanto o outro pode ser inerte ou mesmo nefasto. Embora vários fármacos sejam comercializados na sua forma racémica, as entidades regulatórias aconselham o desenvolvimento de fármacos enantiomericamente puros e mais seguros. Neste contexto, a indústria farmacêutica procura formas baratas e eficientes de produzir fármacos enantiomericamente puros, sendo este o objetivo da presente tese. A separação enantiomérica do ácido mandélico (AM), aqui utilizado como um fármaco racémico modelo, será tentada recorrendo a sistemas aquosos bifásicos (SABs) constituídos por seletores quirais de origem natural (proteínas e açúcares). Serão usadas duas abordagens: (i) a introdução de proteínas como seletores quirais em diferentes tipos de SABs; e (ii) o uso de (D)-sacarose simultaneamente como seletor quiral e componente de fase em SABs. Na primeira abordagem, foram utilizados diferentes tipos de SABs (polímero+polímero, polímero+sal, sal+líquido iónico (LI), polímero+LI e polímero+açúcar) e duas proteínas (albumina de soro bovino – BSA – e citocromo C – Cit c). A escolha das proteínas assentou em resultados de molecular docking que indicaram interações distintas entre diferentes proteínas e os enantiómeros do AM. Nestas fases, os sistemas constituídos por PPG400+(D)-Sacarose+BSA (excesso enantiómerico de -5.9± 0.5%) e PPG400+dihidrogeno fosfato de colínio+Cit c (excesso enantiomérico de -9.0 ± 1.2%) revelaram-se os mais eficientes. As proteínas e os constituintes de fase dos SABs afetaram a separação enantiomérica de ácido mandélico. Uma vez que a docagem molecular não considera as interações com os componentes de fase, esta abordagem revelou ser incapaz de prever o desempenho das proteínas como seletores quirais em SABs. Com o objetivo de ultrapassar as limitações de seletividade enantiomérica e melhorar a simplicidade operacional da tecnologia proposta, a (D)-sacarose foi usada simultaneamente como formador de fase e seletor quiral em SABs. Depois de uma otimização cuidada, foi possível obter um excesso enantiomérico máximo de -12.3 ± 0.5% com um SAB constituído por polímero e (D)-sacarose.Chirality is an important property for the pharmaceutical industry, since one enantiomer of a drug can exert a therapeutic action, while the other may be inert or even nefarious. While several drugs are commercialized as racemates, regulatory bodies strongly encourage the development of safer enantiopure drugs. In this context, pharmaceutical industry seeks for cheap and efficient ways of obtaining enantiopure pharmaceuticals and this is the main objective of this thesis. The enantiomeric separation of mandelic acid (MA), here used as a model racemic drug, using aqueous biphasic systems (ABS) composed of natural chiral selectors (proteins and sugars) will be proposed. Two different approaches were used: (i) the introduction of proteins as chiral selectors in several types of ABS; and (ii) ABS formed by D-Sucrose as both phase former and chiral selector. Within the first approach, different types of systems (polymer+polymer, polymer+salt, polymer+sugar, and ionic liquids (ILs)+salt, ILs+polymer) and of proteins (bovine serum albumin –BSA - and cytochrome C – Cyt C) were used. These two proteins were chosen based on molecular docking results that shown distinctive interactions with the two MA enantiomers among eleven screened proteins. PPG400+(D)-sucrose+BSA system (enantiomeric excess of -5.9 ± 0.5%) and PPG+cholinium dihydrogenphosphate+Cyt C (enantiomeric excess of -9.0 ± 1.2% were the most efficient ABS developed up to this stage. Both the protein and ABS phase formers affected the enantioseparation of MA. Since molecular docking does not encompass the interactions with the ABS phase formers, it was limited at predicting the proteins’ performance as chiral selectors in ABS. In order to surpass the limited enantioselectivity displayed and to improve the operational simplicity of the proposed technology, (D)-sucrose was employed as both chiral selector and phase former in ABS. After a proper optimization, it was possible to achieve a maximum enantiomeric excess of -12.3 ± 0.5% with an ABS composed of polymer and (D)-sucrose

In vivo and in real-time mechanisms of synaptic bouton formation

Tese de mestrado, Biologia Molecular e Genética, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2017A functional nervous system relies on the communication between neurons via highly specialized structures, called synapses. During development, neuronal morphology and wiring establishment are genetically determined but neuronal structural and function can be altered by changing levels of activity, a process known as synaptic plasticity. Adult neuronal circuits remain plastic and this feature is what allows us to store information and adapt to the environment. Defects in synaptic connectivity and activity-dependent plasticity are characteristic of neurodevelopmental and neurodegenerative disorders. Notoriously, recent studies highlight a link between functional defects in the presynaptic elements of neurons, called synaptic boutons, and the origin of several of these diseases. Presynaptic boutons, round varicosities conserved from invertebrates to man, are highly dynamic structures where synapses are located and where neurotransmission occurs. Despite being one of the main synaptic compartments, very little is known about the mechanism and dynamics of their genesis. Several studies contributed to the understanding of this question, but detailed mechanistic information regarding bouton outgrowth is still lacking. The purpose of this work is to acquire fundamental knowledge regarding how presynaptic boutons are formed and integrated into wired neurons. The powerful model synapse of Drosophila neuromuscular junction (NMJ) was adopted to dissect the details of bouton outgrowth in vivo and in real-time since it exhibits robust structural plasticity and the synapses formed on particular muscles have characteristic shapes and discernible boutons. The analysis was performed on the 3rd instar larvae because developmental bouton addition is nearly complete, and at this stage acute structural plasticity can be induced by patterned stimulation of motor neurons (MNs) using a variety of stimuli (high K+ solution, electrical activity and optogenetics). Well-established protocols using spaced high K+ paradigms were adopted to induce the rapid addition of synaptic boutons at this synapse. Neuronal migration and growth are critical events for the correct development and wiring of the nervous system. To date, the mechanisms described to give rise to presynaptic boutons involve the formation of filopodia or lamellipodia structures. However, performing high temporal resolution time-lapse imaging of unanesthetized Drosophila larval NMJs revealed a new, unreported, mechanism of presynaptic bouton addition into mature neurons. It was found that addition of synaptic boutons in response to acute activity does not occur like in the embryonic stage, where a growth cone differentiates into round boutons. Instead, new boutons rapidly emerge in a manner strongly resembling a mechanism known-to-be used by some cells in migration and tissue invasion. Considering that the NMJ is deeply inserted into the muscle, for the MN to include new boutons it must further invade the muscle, which mechanistically is not very different from migration across other tissues. It is suggested that MNs have possibly adopted a strategy that combines this form of migration with activity-dependent signaling pathways to modulate the formation of synaptic boutons during intense muscular activity. Additionally, manipulating the pathways that regulate this mechanism exposed an intricate interplay between MNs and the muscle in the regulation of the number of activity-dependent boutons. Interestingly, the movies also showed a strong correlation between muscle contraction and bouton formation. This finding implied that the muscle mechanics probably has an active role on the MN, that can be either by setting up de formation of new boutons in primed sites or by increasing the dynamics of this process in situations of increased stress. It is proposed that a balance of mechanical forces and biochemical signaling are probably coordinated during structural plasticity upon intense muscle activity. This research further expands our understanding of the mechanisms that control presynaptic growth and assembly in mature neurons. Further dissection of this phenomenon will contribute to uncover general principles that link normal development and function to dysfunction and disease, providing new insights into neuronal disease etiology and opening new avenues for the development of strategies to promote neuronal complexity and possibly delay symptoms associated with neuronal diseases.O funcionamento do sistema nervoso depende do estabelecimento da associação e comunicação entre neurónios, que ocorre através de estruturas altamente especializadas, designadas de sinapses. Durante o desenvolvimento, a morfologia dos neurónios e a estrutura das redes neuronais são geneticamente programados, mas a estrutura e a função dos neurónios pode ser remodelada em resposta a alterações nos níveis de atividade, um processo conhecido como plasticidade sináptica. No adulto, os circuitos neuronais retêm características plásticas e é esta maleabilidade do tecido nervoso que nos permite adquirir e armazenar informação e adaptar a alterações no ambiente. Defeitos na conectividade sináptica e na plasticidade dependente da atividade são característicos de doenças neurodegenerativas, como a Doença de Alzheimer e a Esclerose Lateral Amiotrófica, e, usualmente precedem a morte neuronal, que é a última causa dos sintomas molestos que acompanham este tipo de doenças. Adicionalmente, alterações na plasticidade estrutural também são um mecanismo comum a contribuir para os defeitos cognitivos e funcionais observados em doenças do desenvolvimento neuronal, como o Autismo e a Deficiência intelectual. Notoriamente, estudos recentes salientam uma ligação entre defeitos funcionais observados nos elementos pré-sinápticos dos neurónios e a origem de várias doenças destes tipos. As sinapses consistem em junções intercelulares assimétricas nas quais é possível distinguir, morfológica e funcionalmente, dois compartimentos, um pré-sináptico e um pós-sináptico. Os terminais pré-sinápticos dos neurónios são constituídos por varicosidades redondas conhecidas como botões sinápticos, que são estruturas altamente conservadas desde os invertebrados até ao homem. Os botões sinápticos são o local onde as sinapses são organizadas e onde a transmissão nervosa ocorre. Estas estruturas são muito dinâmicas e estruturalmente plásticas, alterando o tamanho e o número em resposta a modificações na atividade. Apesar de constituírem um dos principais compartimentos sinápticos, pouco se sabe acerca dos mecanismos que regulam a sua formação. Durante o desenvolvimento, os axónios dos neurónios, que ainda não estabeleceram contactos sinápticos, têm estruturas altamente dinâmicas e móveis na sua extremidade distal designadas de cones de crescimento. Morfologicamente, os cones de crescimento têm uma forma cónica e formam dois tipos de protrusões celulares: filopódios e, entre estes, lamelipódios. Os cones de crescimento guiam os axónios até ao seu alvo-sináptico, que pode ser outro neurónio ou outro tipo de célula, e após chegada ao seu destino final os cones de crescimento diferenciam-se em botões redondos. Mas, durante o crescimento, os axónios pré-conectados devem continuar a alongar para acompanhar a mudança de tamanho do animal. Além disso, no adulto a formação de circuitos neuronais funcionais e a ocorrência de plasticidade sináptica são processos que dependem criticamente da montagem e desmontagem de sinapses. Assume-se que durante o crescimento dos organismos e durante a plasticidade sináptica a formação de novos botões segue os princípios do crescimento neuronal. Contudo, a visualização detalhada e informação sobre o mecanismo e a dinâmica do crescimento dos botões no adulto é quase inexistente. Este trabalho tem como propósito a aquisição de conhecimento básico, mas fundamental, acerca do mecanismo de formação e integração de novos botões pré-sinápticos em neurónios maduros e pré-conectados. Um dos exemplos mais estudados de uma sinapse química, a forma predominante de comunicação entre os neurónios, é a sinapse formada entre um neurónio motor e o músculo, a qual é designada de junção neuromuscular. As junções neuromusculares são estruturas especializadas para proporcionar excitação transiente e à prova de falhas da célula muscular pós-sináptica assegurando contração muscular sempre que o neurónio motor estiver ativo para suportar a geração de movimento, uma qualidade importante dos animais. Adotou-se a junção neuromuscular da Drosophila para estudar o mecanismo de formação dos botões sinápticos dado que esta sinapse exibe plasticidade estrutural robusta e as sinapses formadas em músculos particulares apresentam formas bem características e botões claramente discerníveis. A análise foi efetuada no terceiro estadio larvar uma vez que neste estadio a adição de botões que acompanha o desenvolvimento da junção neuromuscular está quase completa e é possível induzir plasticidade estrutural de forma aguda. A rápida adição de botões pré-sinápticos pode ser induzida em resposta a determinados padrões de atividade utilizando uma variedade de estímulos (solução com K+ elevado, atividade elétrica e optogenética). Neste estudo, para induzir plasticidade estrutural na junção neuromuscular adotou-se protocolos baseados em paradigmas de despolarização espaçada usando uma solução com K+ elevado. A observação dos novos botões (designados botões dependentes-da-atividade) foi efetuada em amostras vivas e em amostras fixadas de forma a extrair não só a dinâmica como também informação quantitativa a partir de larvas sujeitas a plasticidade estrutural A migração e o crescimento neuronal são eventos críticos para o desenvolvimento correto e estabelecimento dos circuitos neuronais. Até à data, os mecanismos descritos que participam na formação dos botões pré-sinápticos, envolvem a formação de filopódios ou lamelipódios. No entanto, a realização de microscopia confocal com lapso de tempo em junções neuromusculares de larvas de Drosophila submetidas a plasticidade estrutural revelou um novo mecanismo de adição de botões pré-sinápticos em neurónios maduros. Alterando dois parâmetros em relação a outros estudos, nomeadamente a taxa de aquisição em segundos e não bloquear a contração muscular, foi possível observar a formação de botões sinápticos in vivo e em tempo-real. Descobriu-se que a adição de botões pré-sinápticos em resposta a atividade aguda não ocorre como no período embrionário e não requer uma estrutura de crescimento especializada. Em vez disso, observou-se que os botões dependentes-da-atividade emergem de uma forma muito semelhante a um tipo de migração usado por algumas células na invasão de tecidos. Considerando que a junção neuromuscular não assenta apenas superficialmente no músculo, mas encaixa neste tecido, significa que os botões sinápticos estão embebidos no músculo. Assim, para que o neurónio motor forme botões funcionais é necessário que “invada” o músculo, o que não é muito diferente de mecanismos de migração através de outros tecidos. É possível que os neurónios motores tenham adotado uma estratégia em que combinam este mecanismo de migração com vias de sinalização dependentes-de-atividade para modular a adição de novos botões sinápticos durante a atividade muscular. Adicionalmente, observou-se a existência de uma elevada correlação entre a emergência de novos botões e a contração muscular, o que aponta para um possível papel mecânico do músculo durante este processo. Os vídeos analisados mostram pelo menos dois tipos de formação de botões: eventos rápidos associados com contração muscular intensa (“botão explosivo”) e fenómenos lentos que acompanham movimentos mais subtis (“botão gradual”). Notavelmente, ao manipular a via que regula este tipo de migração, possivelmente usado também pelos neurónios motores, expôs uma interação complexa entre os neurónios motores e o músculo na regulação do número de botões dependentes-da-atividade. Considerando a proximidade entre os dois tipos de células bem como as propriedades contractivas do músculo é plausível propor que a ação mecânica do músculo possa ter um papel ativo no neurónio motor para a formação de novos botões a partir de locais determinados ou mesmo acelerar o processo em situações de maior tensão. Sugere-se que a atividade do músculo pode ter um papel importante na modelação da frequência e dinâmica dos botões que emergem dos neurónios motores em resposta à atividade. Este estudo descreve um novo modo de crescimento neuronal, nomeadamente de formação de botões pré-sinápticos, que ainda não foi reportado em neurónios, mas que é bastante usado em migração em outros tipos celulares. De mencionar que as vias que levam à iniciação deste mecanismo são diversas sendo pouco provável que todas participem neste tipo de plasticidade, especialmente se o neurónio motor adaptar partes do mecanismo ou usar diferentes moléculas para atingir um resultado equivalente. Assim, o conhecimento dos genes ligados à formação de botões dependentes-da-atividade é necessário para compreender plenamente e de forma integrada o mecanismo de formação de botões num neurónio maduro. Por outro lado, este trabalho sugere que um balanço entre forças mecânicas e sinalização bioquímica são provavelmente coordenados durante a plasticidade estrutural em resposta a atividade muscular e expande a nossa compreensão dos mecanismos que regulam o crescimento e organização do terminal pré-sináptico. Uma análise mais aprofundada deste fenómeno, bem como das vias dependentes-da-atividade com papel no crescimento neuronal, irá contribuir para desvendar os princípios gerais que ligam o desenvolvimento e funcionamento normal à disfunção e à doença. Este conhecimento permitirá uma nova perceção e discernimento da etiologia da doença neuronal e o desenvolvimento de novas estratégias para promover a complexidade neuronal e possivelmente retardar os sintomas associados com doenças neuronais

Análise Biomecânica de Calo Ósseo usando Método Sem Malha

O osso é um tecido fisiologicamente dinâmico e que quando lesionado tem a capacidade de se reparar com o próprio tecido, não envolvendo um tecido cicatrizante, ao contrário de outros tecidos. Esta característica torna-o particularmente interessante para investigar os processos inerentes de fraturas ósseas. A maior parte das fraturas cicatriza através de uma sequência de processos de diferenciação de tecidos, desde os processos iniciais de hematoma, aos tecidos conjuntivos, e através da cartilagem ao osso. No entanto, qualquer falha neste processo pode resultar em uniões tardias, más uniões ou não uniões. A compreensão na totalidade deste processo ainda constitui um desafio. Os mecanismos que envolvem os processos de estimulação mecânica não se encontram bem compreendidos, em consequência da complexidade dos testes experimentais in vivo, que se tornam dependentes de dados in vitro, tornando difícil validar os pressupostos biológicos. Consequentemente, os modelos computacionais têm demonstrado serem bastante úteis e eficazes na investigação sobre a cicatrização óssea. Desta forma, com o presente trabalho foi possível analisar as condições mecânicas de um calo ósseo resultante de uma fratura, assim como compreender as metodologias de análise numérica aplicadas. O modelo teve por base um estudo in vivo de forma a obter uma variação temporal progressiva da forma do calo e das propriedades mecânicas durante a cicatrização óssea. Com este modelo obtiveram-se os campos de tensão e deformação nas diferentes fases do processo de regeneração, obtendo-se resultados que se encontram em conformidade com a literatura. Adicionalmente, foi aplicado um algoritmo de remodelação óssea em combinação com o Radial Point Interpolation Method (RPIM) que foi capaz de reproduzir as condições apresentadas pela respetiva imagem histológica nesta fase. Por último, espera-se que os trabalhos desenvolvidos neste âmbito possibilitem a conceção de estratégias mais precisas e eficazes tanto para o tratamento como para aceleração da cura. De forma complementar, encontram-se em desenvolvimento modelos específicos dos pacientes e que incorporam variabilidade genética.Bone is a physiologically dynamic tissue that, when injured, has the ability to repair itself, not involving scar tissue, unlike other tissues. This characteristic makes it particularly interesting for investigating the inherent processes of bone fractures. Most fractures heal through a sequence of tissue differentiation processes, from the initial hematoma, to connective tissues and through cartilage to bone. However, any failure in this process can result in a delayed union, mal-union or non-union. A complete understanding of this process is still a challenge. The mechanisms surrounding the mechanical stimulation processes are relatively poorly understood as a result of the complexity of in vivo experimental tests, which become dependent on in vitro data, making it difficult to validate the biological assumptions. Consequently, computational models have proven to be very useful and effective in the investigation of bone healing. Therefore, in the present work, it was possible to analyse the mechanical conditions of a bone callus as a consequence of a fracture and to understand the methodologies of numerical analysis applied. The model was based on an in vivo experimental study in order to obtain a progressive temporal variation of the callus shape and mechanical properties during bone healing. With this model, the stress and strain fields in the different phases of the regeneration process were obtained, where the results are in agreement with the literature. Additionally, a bone remodelling algorithm was applied in combination with the Radial Point Interpolation Method (RPIM), which was able to reproduce the conditions presented by the respective histological image at this stage. Finally, it is expected that the work developed in this area will enable the design of more accurate and effective strategies for both treatment and accelerating healing. Complementarily, patient-specific models and the incorporation of genetic variability are being developed

Orientações para o desenho instrucional de um Mooc : estudo de caso

Neste artigo pretendemos demonstrar como as diversas tentativas de construção de uma máquina de aprendizagem podem ser equacionadas no surgimento dos Massive Open Online Courses. Desde o início do século XX se almejou a criação de uma máquina que servisse os propósitos da educação. Com os Massive Open Online Courses, a tentativa permanece dado o seu carácter gratuito, massivo e online. Estas características permitiram a sua rápida disseminação e adesão por parte da comunidade científica do Ensino Superior. Neste contexto abordaremos a questão da relação da criação destes cursos com as Universidades, tendo como ponto de partida, os cenários delineados, em 2008, pela Organisation for Economic Co-operation and Development para os primeiros 30 anos do século XXI. Para melhor perceber as exigências na criação de um Massive Open Online Course será apresentado um estudo de caso - desenvolvido pelo Centro de Investigação para Tecnologias Interativas, unidade de investigação da Faculdade de Ciências Sociais e Humanas Universidade Nova de Lisboa. Este centro de investigação acompanhou a disseminação e multiplicação das iniciativas Massive Open Online Courses, tendo desde logo percebido as potencialidades desta nova modalidade. Uma das potencialidades que iremos analisar, mais detalhadamente, é o vídeo, devido ao seu carácter envolvente e de proximidade neste tipo de cursos.This paper aims to demonstrate how the various attempts to build a learning machine can be equated in the emergence of the Massive Open Online Courses. Since the beginning of 2 the twentieth century everyone longed to create a machine that would serve the purposes of education. With the Massive Open Online Courses, the attempt remains, given its free massive and online nature. These characteristics allowed its rapid spread and support by the scientific community of the Higher Education. In this context we will address the question of the relation of the creation of these courses with universities, having as a starting point, the scenarios outlined in 2008 by the Organization for Economic Co-operation and Development for the first 30 years of the twenty-first century. To better understand the requirements in creating a Massive Open Online Course will be presented a case study - developed by the Research Center for Interactive Technologies, a research unit of the Faculty of Social Sciences and Humanities, New University of Lisbon. This research center have accompanied the spread and multiplication of Massive Open Online Courses initiatives, and immediately realized the potential of this new modality. One of the potential that we will examine in more detail is the video, due to its proximity and surrounding nature in this type of course.Universidade Aberta; Pavilhão do Conhecimento; LEA

Estudo das propriedades psicométricas da escala de autocompaixão e autocriticismo situacional para a população portuguesa

Dissertação de mestrado em Psicologia Clínica e Saúde (Intervenções Cognitivo-Comportamentais nas Perturbações Psicológicas e de Saúde), apresentada à Faculdade de Psicologia e Ciências da Educação da Universidade de Coimbra.Ser autocompassivo implica ser sensível e estar aberto ao próprio sofrimento – não o evitando. Envolve o desejo de aliviar esse sofrimento e a adoção de uma postura de bondade e de compreensão imparcial para consigo mesmo; exige ainda que a própria experiência seja vista como parte da experiência humana comum e que o sofrimento, o fracasso e as inadequações sejam reconhecidos como fazendo parte dessa condição humana. Não esquecendo que todas as pessoas, incluído o próprio, são dignas de compaixão. Pelo contrário, o autocriticismo é uma forma de relação do Eu com o Eu, em que uma parte desse Eu descobre falhas e/ou imperfeições, critica ou até condena a outra parte. O autocriticismo pode assumir diferentes formas e funções e dirigir-se a diferentes aspetos do Eu. Essas diferentes formas e funções do autocriticismo podem estar associadas de forma diferente à psicopatologia. A presente investigação teve como objetivo primordial o estudo das características psicométricas da Escala de Autocompaixão e Autocriticismo Situacional (Falconer, King, & Brewin, 2015), para a população portuguesa. Esta escala baseia-se em cenários específicos para avaliar a forma como o sujeito é autocompassivo ou autocrítico. Foi realizada uma Análise de Componentes Principais com rotação direct oblimin, numa amostra composta por 374 sujeitos. Os resultados corroboram a estrutura encontrada no estudo original, apresentando de dois componentes: Autocompaixão Situacional e Autocriticismo Situacional. A escala apresenta uma boa consistência interna e uma validade temporal moderada para ambas as subescalas. As validades convergente e divergente mostraram-se aceitáveis. Desta forma, os resultados da escala permitem concluir que esta é um instrumento útil para avaliar estado de autocompaixão e autocriticismo simultaneamente.To be self-compassionate implies being sensitive and open to one’s own suffering – and not to avoid it. It involves the desire to relieve that suffering and adopting a posture of kindness and impartial understanding towards oneself. It also requires that one’s own experience is seen as part of the common human experience and that suffering, failure and inadequacies are recognized as part of the human condition. Not forgetting that all people, including oneself, are worthy of compassion. On contrary, self-criticism is a form of self-to-self relationship where one part of self finds fault and/or imperfection, accuses or even condemns the self. Self-criticism can have different forms and functions and can target different aspects of the self. Self-criticism different dimensions can be associated with different forms of psychopathology. The present study main aim was to study the psychometric characteristics of the Self-Criticism and Self-Compassion Scale (Falconer, King, & Brewin, 2015), in the Portuguese population. This scale is based on specific scenarios that evaluate how the subject is self-compassionate or self-critical. We conducted a Principal Component Analysis with a direct oblimin rotation in a sample of 374 participants. Results are in line with the original study, showing a two-component structure: State Self-Compassion and State Self-Criticism, with good internal consistency and moderate temporal validity for both scales. Convergent and divergent validities showed acceptable values. Thus, the findings reveal that this scale is a useful tool for assessing situational/or state self-compassion and self-criticism simultaneously

Work ethic and the legacies of political regimes

This article studies the cross-country differences in work ethic and claims that different political regimes transmitted different work ethics that still persist today. Using the World Values Survey and starting our political regime analysis in 1900, we find that Democratic regimes promote more effectively work relevance and competitiveness than Autocratic and Anocratic regimes, and that the political regime history of the country is more important than the present level of democracy. Moreover, we prove that this differences were transmitted through generations by parents, who optimally choose what work ethic to transmit taking into account their own values

PortFIR – An integrated data provider as support for the food policy-makers

Introduction: Portuguese Food Composition Table (TCA) is managed by the National Institute of Health Doutor Ricardo Jorge (INSA) and is publicly available on the Portuguese Food Information Resource (PortFIR) platform. PortFIR, besides food composition data, was designed to include data on food contamination and food consumption, in order to provide national data easily available in one platform. Objective:To compile and make widely available food-related data (food composition, food safety and food consumption), while providing science-based information, to support food policy-makers.info:eu-repo/semantics/publishedVersio