Introgressão assistida por diagnóstico molecular da mutação Booroola em rebanhos comerciais das raças Texel e Corriedale.

A alta prolificidade das ovelhas Booroola é causada por uma mutação que ocorreu naturalmente no gene do receptor para proteínas morfogenéticas de osso tipo1 B (BMPR1B). A partir de 2001 o desenvolvimento de testes genéticos possibilitou o diagnóstico desta mutação através de PCR-RFLP

Hereditary hyperferritinaemia-cataract syndrome: knowledge enables diagnosis

A síndrome hereditária hiperferritinemia-cataratas é um distúrbio genético autossómico dominante que resulta de uma mutação no gene FTL e que se carateriza por hiperferritinemia sem sobrecarga de ferro e cataratas de aparecimento precoce. Apresenta-se o caso clínico de um adolescente observado na consulta de pediatria por hiperferritinemia persistente (variável entre 947 e 1990 ng/mL), sem alterações no restante estudo da cinética do ferro e com cataratas diagnosticadas aos 9 anos. A mãe apresentava também hiperferritinemia e cataratas. O diagnóstico foi confirmado pelo estudo genético, tendo sido identificada a mutação c.-167C>A no gene FTL. Trata-se do primeiro caso diagnosticado em Portugal com a mutação identificada, pelo que se considera pertinente a sua publicação. A síndrome hereditária hiperferritinemia-cataratas deve ser considerada no diagnóstico diferencial de hiperferritinemia, pois o diagnóstico correto permite evitar tratamentos e abordagens diagnósticas desnecessárias, uma vez que é uma doença de prognóstico favorável.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Estudo da mutação do recetor do fator de crescimento epidérmico, durante 5 anos, numa população de doentes com cancro do pulmão de não pequenas células

ResumoIntroduçãoEm 2006, a Unidade de Pneumologia Oncológica do Serviço de Pneumologia do Centro Hospitalar de Vila Nova de Gaia/Espinho iniciou a sequenciação da mutação do recetor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) em doentes com CPNPC selecionados e desde 2010 realiza a sequenciação sistematicamente em todos os doentes, independentemente da histologia, hábitos tabágicos, idade ou sexo. O objetivo deste trabalho foi caracterizar o grupo de doentes que efetuou a sequenciação entre 2006-2010, determinar a frequência da mutação EGFR, avaliar as sobrevidas globais e após uso de inibidores da tirosina quinase (ITK), nos doentes que efetuaram esta terapêutica em 2.a e 3.a linha com conhecimento do estado da mutação do EGFR.MétodosAnálise estatística descritiva dos doentes que efetuaram sequenciação EGFR em 2006-2010 e sobrevida mediana global nos doentes que efetuaefetuaram ITK em 2.a e 3.a linha. Registo do material disponível para análise e demora média de resultado do exame, de acordo com o material enviado.ResultadosA sequenciação foi efetuada em 374 doentes, 71,1% sexo masculino, 67,1% não/ex-fumadores, 32,9% fumadores; 57,8% adenocarcinoma e 23,5% carcinoma epidermoide (CE). A mutação foi detetada em 49 doentes (13,1%). No total dos doentes estudados, a taxa de mutação foi de 9% no sexo masculino e 23% no sexo feminino. A sobrevida mediana global após o uso de erlotinib foi de 14 meses para os doentes com mutação positiva do EGFR versus 6 meses nos doentes não mutados (p = 0,003).ConclusãoO nosso grupo teve uma taxa de mutação global de 13,1%, com predomínio no sexo feminino, não fumadores, histologia adenocarcinoma. Em doentes selecionados (2006/2009), a taxa de mutação foi de 16%; nos doentes não selecionados (2010) foi de 10,4%. Este estudo tem vindo a permitir um melhor conhecimento da taxa de mutação do EGFR na população portuguesa, bem como avaliar os resultados das sobrevidas dos doentes após uso de inibidores da tirosina quinase (ITK), efetuada em 2.a e 3.a linha com conhecimento prévio do estado da mutação do EGFR, tendo sido encontradas diferenças nas sobrevidas nos 2 grupos de doentes (mutados e não mutados) com significado estatístico.A pesquisa mutação do EGFR deve ser efetuada em todos os doentes com CPNPC, dando possibilidade a um número considerável de doentes de poder efetuar um tratamento de 1.a linha com ITK (doentes mutados), bem como de poder usufruir de outros esquemas de quimioterapia, quando progredirem.AbstractIntroductionIn 2006, the Vila Nova de Gaia/Espinho Hospital Centre Pulmonary Oncology Unit started performing EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) mutation sequencing in selected patients with NSCLC and systematically in all patients since 2010, regardless of histology, smoking habits, age or sex. The aim of this study was to characterize the group of patients that carried out the sequencing between 2006-2010, to determine EGFR mutation frequency, to evaluate the overall survival and the survival after the use of tyrosine kinase inhibitors (TKI), in patients who performed this therapy in second and third line, knowing the EGFR mutation status.MethodsDescriptive statistical analysis of patients who did EGFR sequencing in 2006-2010 and of overall survival in patients treated with TKI as 2nd and 3rd line therapy. Record of the material available for analysis and average delay of exam results, according to the material submitted.ResultsThe sequencing was performed in 374 patients, 71,1% males, 67,1% non/ex-smokers, 32,9% smokers, 57,8% adenocarcinoma and 23,5% squamous cell carcinoma (SCC). The mutation was detected in 49 patients (13,1%). In all studied patients, the mutation rate was 9% in males and 23% in females. Median overall survival after erlotinib use of was 14 months for patients with positive EGFR mutation versus 6 months in not mutated patients (p = 0.003).ConclusionOur group had an overall mutation rate of 13.1% with female, non-smokers, adenocarcinoma histology predominance. In selected patients (2006/2009), the mutation rate was 16%, in not selected patients (2010) the mutation rate was 10.4%. This study has permitted a better understanding of the EGFR mutation rate in the Portuguese population as welll as an evaluation of the patients survival after the use of of tyrosine kinase inhibitors, in second and third line therapy with previous knowledge of the EGFR mutational status. Statistical significant differences in survival were found in the two patient groups (EGFR mutated and non mutated).The EGFR mutation research should be performed in all patients with NSCLC, giving the possibility to a considerable number of patients to perform a first line treatment with TKI (EGFR mutated patients) and the advantage of performing other chemotherapy schemes, when progression occurs

Doença de Wilson no sul do Brasil: correlação genotípica-fenotípica\ud e a descrição de duas novas mutações no gene ATP7B

OBJECTIVE:\ud \ud Wilson's disease (WD) is an inborn error of metabolism caused by abnormalities of the copper-transporting protein encoding gene ATP7B. In this study, we examined ATP7B for mutations in a group of patients living in southern Brazil.\ud \ud METHODS:\ud \ud 36 WD subjects were studied and classified according to their clinical and epidemiological data. In 23 subjects the ATP7B gene was analyzed.\ud \ud RESULTS:\ud \ud Fourteen distinct mutations were detected in at least one of the alleles. The c.3207C>A substitution at exon 14 was the most common mutation (allelic frequency=37.1%) followed by the c.3402delC at exon 15 (allelic frequency=11.4%). The mutations c.2018-2030del13 at exon 7 and c.4093InsT at exon 20 are being reported for the first time.\ud \ud CONCLUSION:\ud \ud The c.3207C>A substitution at exon 14, was the most common mutation, with an allelic frequency of 37.1%. This mutation is the most common mutation described in Europe.OBJETIVO:\ud \ud A doença de Wilson (DW) é um erro inato do metabolismo causado por abnormalidades no gene ATP7B, que codifica uma proteína transportadora de cobre. Neste estudo, avaliamos as mutações do gene ATP7B em um grupo de pacientes do sul do Brasil.\ud \ud MÉTODOS:\ud \ud Foram estudados 36 pacientes com DW e classificados do ponto de vista clínico e epidemiológico. Em 23 pacientes, o gene ATP7B foi analisado.\ud \ud RESULTADOS:\ud \ud A substituição c.3207C>A no éxon 14 foi a mutação mais comum seguida pela mutação c.3402delC no éxon 15 . A mutação c.2018-2030del13 no éxon 7 e a c.4093InsT no éxon 20 são relatadas pela primeira vez na literatura.\ud \ud CONCLUSÃO:\ud \ud A mutação do gene ATP7B, com a substituição c.3207C>A no éxon 14 foi a mais frequente. Esta mutação é a mais comumente encontrada em pacientes europeus

Crise ou mutação dos fundamentos da estratégia

Partindo da doutrina clássica sobre os fundamentos da estratégia, o artigo procura analisar e caracterizar o momento presente de crise conceptual, face às transformações operadas no sistema internacional, e apontar, em alternativa, uma interpretação mais evolucionista do fenómeno, no sentido de uma transformação natural da estratégia segundo os grandes processos da realidade internacional, sem que isso altere significativamente os seus fundamentos e as suas relações com a política

Investigation of the genetic etiology of sensorineural hearing loss in portuguese patients

Tese de mestrado. Biologia (Biologia Molecular e Genética). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2012About 2/1000 new born present hearing loss (HL) and of these, approximately 50% can be genetically explained. In this work, 70 Portuguese probands presenting nonsyndromic sensorineural HL were investigated for the presence of mutations in the DFNB1 locus. Mutation c.35delG, in the GJB2 gene, was first screened by restriction analysis. Two individuals were homozygous (2,9%) and five (7,1%) heterozygous for this mutation. The GJB2 coding exon was then analysed by sequencing in cases found to be negative or heterozygous for the c.35delG mutation. A novel mutation, p.Leu213X, was identified. This mutation wasn’t present in a random control sample of 480 individuals from the Portuguese population previously sequenced. Along with the two c.35delG homozygous, the genetic cause for HL due to GJB2 mutations could be determined for six more individuals, representing a total of 11,4% of the probands. The most frequent GJB6 deletions were further screened by multiplex PCR in individuals negative or monoallelic for GJB2 mutations. No mutation was found. Three common mitochondrial DNA mutations associated to HL were investigated by enzymatic restriction in 143 families, previously screened for DFNB1 and compatible with maternal inheritance. Only the m.1555A>G mutation was found, in one of the analysed families. Two cases of low-frequency sensorineural HL were investigated regarding the most relevant exons of WFS1 gene. A novel mutation, p.Asp171Asn, was found in exon 5 of WFS1 gene. This mutation wasn’t present in 100 Portuguese hearing controls later sequenced. Two cases of Pendred Syndrome were studied. No mutation was found in the relevant exons analysed. So, the genetic cause couldn´t yet be determined. This study represents a contribution for extending the knowledge on hereditary HL in the Portuguese population, either in the identification of the genetic etiology in affected families, or in the development of more accurate diagnostic protocols.Cerca de 2/1000 recém-nascidos apresentam surdez e, nestes, aproximadamente 50% têm uma causa genética. No presente trabalho, foram estudados 70 probandos Portugueses com surdez não- sindrómica neurosensorial. A análise iniciou-se com o estudo da mutação c.35delG no gene GJB2 através de restrição enzimática. Dois indivíduos apresentaram esta mutação em homozigotia (2,9%) e cinco em heterozigotia (7,1%). O exão codificante de GJB2 foi analisado por sequenciação em todos os casos negativos ou heterozigóticos para c.35delG. Uma nova mutação, p.Leu213X, foi descoberta. Esta mutação não foi encontrada numa amostra aleatória de 480 indivíduos da população Portuguesa. Juntamente com os indivíduos homozigóticos para c.35delG, a causa genética da surdez devida a GJB2 foi determinada para mais seis indivíduos, representando no conjunto 11,4% dos probandos. As deleções mais frequentes no gene GJB6 foram investigadas por PCR multiplex em indivíduos monoalélicos ou negativos para GJB2. Nenhum dos indivíduos apresentou deleções em GJB6. As três mutações mais comuns associadas a surdez no DNA mitocondrial foram investigadas por restrição enzimática em 143 famílias previamente testadas para GJB2 e compatíveis com hereditariedade materna. Apenas numa família foi encontrada a mutação m.1555A>G. Dois casos de surdez neurosensorial com perdas nas baixas frequências foram estudados através da análise dos exões mais relevantes do gene WFS1. Uma nova mutação, p.Asp171Asn, foi encontrada no exão 5 deste gene. Esta mutação não foi encontrada em 100 controlos Portugueses ouvintes posteriormente sequenciados. Dois casos esporádicos de Síndrome de Pendred foram estudados mas nenhuma mutação foi encontrada nos exões analisados, pelo que a causa genética não pôde ser ainda determinada. Este estudo constituiu uma contribuição para aprofundar o conhecimento sobre a surdez hereditária na população Portuguesa. A importância do estudo genético fica aqui patente, quer na identificação da etiologia genética da surdez em famílias afectadas, quer no desenvolvimento de protocolos de diagnóstico mais eficazes

Tuberculose: uma causa rara de trombose venosa cerebral?

Several infectious etiologies are related to cerebral venous thrombosis (CVT), but a review of literature showed only few cases related to tuberculosis (TB), and only one with neurological manifestations.We report an unusual case of CVT related to TB and mutation in prothrombin gene. A 38-man black presented abrupt right hemiparestesis, and hemiparesis. Investigations revealed CVT. Cerebral spinal fluid (CSF) examination evidenced a infection by Mycobacterium. He was heterozygous for G20210A prothrombin mutation. Probably, hypercoagulability mechanisms of TB, added to mutation of prothrombim gene increase the risk of CVT.As mais variadas etiologias infecciosas estão relacionadas a trombose venosa cerebral (TVC), mas revisando-se a literatura há apenas poucos relatos de casos que se devem à tuberculose (TB), sendo que em apenas um deles havia manifestações no sistema nervoso central.Relatamos um caso de TVC associado a TB e a mutação do gene da protrombina. Homem 38 anos, negro, apresentou hemiparestesia de instalação súbita à direita, evoluindo com hemiparesia homolateral. Durante a internação, foi coletado líquor que evidenciou infecção por micobactéria. A pesquisa de trombofilias mostrou positividade somente para mutação do gene da protrombina(G20210A). Provavelmente os mecanismos de hipercoagulabilidade intrínsecos à tuberculose somados à mutação do gene da protrombina, potencializam o risco de TVC.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Division of NeurologyUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Division of Haematology and TransfusionUNIFESP, Division of NeurologyUNIFESP, Division of Haematology and TransfusionSciEL

Caracterização agronômica e molecular de mutantes de bananeira 'Pacovan'.

A indução de mutação por raios gama, juntamente com as técnicas de cultivo in vitro, constitui uma ferramenta para os programas de melhoramento visando à redução do porte em bananeira. Essa técnica de mutação induzida tem como objetivo promover o melhoramento de uma única característica governada por um ou poucos genes, conservando as outras características do fenótipo original. Os ISSRs (Inter Simple Sequence Repeats) são marcadores dominantes e reproduzíveis, com a vantagem de gerar grandes quantidades de bandas, sendo amplamente distribuídos ao longo do genoma de eucariontes (FANG & ROOSE, 1997). O objetivo deste trabalho foi selecionar mutantes putativos com porte reduzido da cultivar Pacovan submetida a irradiação com raios gama e estimar a variabilidade genética mediante a utilização de marcadores moleculares ISSR.pdf 159

HLA and hemochromatosis disease association in São Miguel Island

Mestrado em Biologia Molecular e CelularA hemocromatose hereditária uma doença autossómica recessiva do metabolismo do ferro, geralmente associada à mutação C282Y no gene HFE. Presume-se que a origem desta mutação tenha ocorrido por acaso no haplótipo HLA-A*03-B*07 de um indivíduo do noroeste da Europa. O presente trabalho visou caracterizar a associação entre os alelos e haplótipos dos loci HLA-A e -B com a mutação C282Y na população da ilha de São Miguel (Açores). Este estudo englobou 130 indivíduos, negativos para as mutações HFE H63D e S65C, que foram classificados em dois grupos: grupo C282Y (48 homozigóticos ou portadores da C282Y) e grupo controlo (82 dadores de sangue sem as três mutações no gene HFE). Para todos os indivíduos, foi efectuado a genotipagem HLA-A e -B por PCR-SSP e a detecção das mutações HFE por PCR-RFLP. A análise estatística revelou que quatro alelos – A*03 (p=0.003, OR=3.33), A*26 (p=0.003, OR=8.38), A*29 (p<0.001, OR=19.18) e B*45 (p=0.003, OR=8.37) – encontram-se significativamente aumentados no grupo C282Y. Os resultados demonstram, igualmente, uma associação significativa com a mutação C282Y para o haplótipo ancestral HLA-A*03-B*07 (p=0.006, OR=8.96) e dois haplótipos não ancestrais: A*02-B*58 (p<0.001, OR=19.78) e A*29-B*45 (p<0.001, OR=27.57). Além disso, outro haplótipo A*24-B*15 foi detectado por inferência directa num doente homozigótico para o HLA-A-B e para a mutação C282Y. Provavelmente, o mecanismo genético de recombinação gerou esta diversidade de haplótipos; no entanto, não se pode excluir a hipótese de uma mutação C282Y de novo no gene HFE associada ao haplótipo HLA-A*24-B*15. Em conclusão, além do haplótipo ancestral A*03-B*07, três novos haplótipos – A*02-B*58, A*24-B*15 e A*29-B*45 – sugerem estar associados à mutação C282Y na população da ilha de São Miguel. A elevada diversidade genética observada na população açoriana pode explicar a associação entre a mutação C282Y e os haplótipos HLA.Hereditary hemochromatosis is an autosomal recessive disease of the iron metabolism, where HFE C282Y is commonly implicated. This mutation seems to have originated by chance on the HLA-A*03-B*07 haplotype in a northwestern European individual, and spread by migration. Given that recombination generates new haplotypes, the present investigation aimed to characterize the chromosomal background of C282Y in the São Miguel Island population (Azores). This study comprises 130 individuals, all negative for H63D and S65C, which were classified into two groups: 48 homozygous or carriers for C282Y, and 82 healthy individuals without these mutations. The subjects were HLA-A and -B genotyped by PCR-SSP, and HFE mutation detection was performed by PCR-RFLP. Statistical analysis revealed that four alleles – A*03 (p=0.003, OR=3.33), A*26 (p=0.003, OR=8.38), A*29 (p<0.001, OR=19.18) and B*45 (p=0.003 OR=8.37) – and the A*03-B*07 haplotype (p=0.006, OR=8.96) were significantly increased in the C282Y group. Two non-ancestral haplotypes were also significantly associated with C282Y: A*02-B*58 (p<0.001, OR=19.78) and A*29-B*45 (p<0.001, OR=27.57). This last haplotype showed the strongest association to the mutation in study, suggesting that it may be the principal hemochromatosis-haplotype in São Miguel Island population. Another haplotype – A*24-B*15 – was detected by direct inference in a C282Y and HLA-A-B homozygous patient. Recombination most probably generated these haplotypes, before or after the island settlement. However, we can not exclude the hypothesis of a recent de novo HFE C282Y mutation on the A*24-B*15 haplotype in an individual living in the São Miguel Island. Overall, in this population, besides the ancestral A*03-B*07, three new non-ancestral haplotypes – A*02-B*58, A*24-B*15 and A*29-B*45 – appear to be associated with C282Y. The association between this recessive mutation and these haplotypes undoubtedly reflects the high genetic diversity observed in the Azoreans