Exploração de Dados de Sensores com Aplicação de Cartas de Controlo Univariadas

A evolução que se tem vindo a assistir a nível económico leva a que, cada vez mais, pessoas e organizações sejam obrigadas a fazer mais com menos. A Marinha Portuguesa não é exceção e na área de manutenção, que é uma das áreas mais dispendiosas, tem visto o seu orçamento ser reduzido gradualmente, levando por vezes à prática de uma gestão de manutenção pouco equilibrada. A utilização de uma manutenção baseada na condição dos equipamentos ajuda o utilizador a compreender quais as variações que estão presentes no equipamento e as causas desses sintomas, possibilitando ainda a realização de estudos mais detalhados do comportamento dos equipamentos. As cartas de controlo, mais especificamente, são ferramentas poderosas na manutenção, que permitem facilmente detetar variações e avarias existentes no sistema. A sua utilização baseia-se em alguns pressupostos analisados neste estudo como a independência e Normalidade dos dados. Caso se verifique a falha de um dos pressupostos a utilização das cartas pode levar a conclusões erradas. Nesta dissertação foram utilizadas as cartas de Somas Acumuladas Modificadas e as cartas da Média Exponencialmente Amortecida Modificadas para a avaliação da condição do equipamento e estudar as respostas à degradação, utilizando dados gerados através da variação da média. As regras de intervenção de manutenção foram estabelecidas de acordo com a análise das cartas, tendo em vista o objetivo definido, maximizar a deteção de variações no sistema por se tratar de um equipamento crítico, ainda que existisse a hipótese de serem falsos avisos. A metodologia apresentada foi desenvolvida na Escola Naval, com o objetivo de implementar a utilização de métodos de monitorização contínua de equipamentos na Marinha Portuguesa por forma a melhorar o apoio às decisões de manutenção.The evolution that has been witnessing economically means that, increasingly, people and organizations are forced to do more with less. The Portuguese Navy is no exception and in the maintenance area, which is one of the most expensive areas, has seen its budget be reduced gradually, sometimes leading to the practice of unbalanced maintenance management. The use of a condition-based maintenance of equipment helps the user understand which variations are present in the equipment and the causes of these symptoms, even allowing for the realization of more detailed studies of the behavior of the equipment. The control charts, more specifically, are powerful tools of maintenance, allowing an easily detection of variations and existing faults in the system. Its use is based on certain assumptions that are analyzed in this study as the independence and normality of the data. If one of the assumptions is not verified the use the charts can lead to wrong conclusions. In this dissertation the Modified Cumulative Sums control charts and Modified Exponentially-Weighted Moving Average control charts are used for assessing equipment condition and were used to study the responses to degradation, using data generated by varying the average. The maintenance intervention rules were established according to the analysis of the charts, considering the defined objective, the maximization of the detection of variations in the system since it is critical equipment, though there were chances of being false warnings. The presented methodology was developed at the Naval School, with the aim of implementing the use of methods of continuous monitoring equipment in the Portuguese Navy in order to improve decision support for maintenance

Analysis of the Propensity to implement the Shingo and the EFQM Models in Portuguese organisations through Structural Equation Modelling

Markets have become more and more competitive. To cope with the daily challenges of organisations and the permanent and rapid transformation, organisations seek to achieve a threshold of excellence that not only increases their levels of quality and performance but also providessustainable results. Currently, there are numerous excellence models, including the EFQM Model and the Shingo Model. The EFQM model was created in Europe and is widely used in this continent, namely in Portugal, to the detriment of the Shingo model. In turn, this dissertation aims to analyse the criteria and assumptions on which the models were built, concluding on what potentially best fits the Portuguese context. Another focus of this dissertation is to investigate how the models are embedded and promote the three pillars of sustainability in organisations. In order to answer these research questions, a literature review was conducted on the topics. A total of 143 articles, mainly from the Web of Science platform, were analysed, from 27 November 2022 to 30 December 2022, following the PRISMA Methodology. Also, a bibliometric co-occurrence network was created to understand the link between the topics, using the VOSViewer software for the purpose. From the results obtained from the literature review, it was possible to conclude that effectively the new version of the EFQM Model and the Shingo Model guide organisations towards achieving sustainable economic, social, and environmental results. Also, a Conceptual Model for Excellence in Business Towards Sustainability is proposed, based on the relationship between the models in the study, their relationships with sustainability, and supporting core concepts that enable to promote the Environmental Policy for sustainable development with Stakeholder Engagement. In order to assess the Propensity of Portuguese organisations to implement whether the Shingo or the EFQM Models, analysing which one fits the most the reality of Portugal, a conceptual model was proposed. To test the hypotheses operationalised in the model, a survey was planned and therefore sent to the 37730 Portuguese organisations. The data was collected for 6 weeks, from 15 June 2023 to 24 July 2023, in which it was possible to obtain 789 answers, a number above the minimum level required with a confidence level of 95%. From the initial sample, a total of 731 responses were considered valid and consequently, the data extracted from them was treated and analysed, in order to draw the respective conclusions concerning the previously mentioned objectives, using a Structural Equation Modelling (SEM) approach. Results from the hypothesis testing indicate that Portuguese organisations have the Propensity to implement the Shingo Model. Furthermore, these organisations that show great Propensity for the Shingo Model revealed to be positively related to six important pillars of organisational maturity: strategic alignment, stakeholders’ management, culture, internal processes, and use of technology. Also, it was concluded that the Propensity to implement the Shingo Model is positively related to environmental, operational, and social performance, thus indicating the right path of Portuguese organisations towards excellence and the implementation of the Shingo Model.Os mercados têm-se tornado cada vez mais competitivos. Para fazer face aos desafios diários das organizações e à permanente e rápida transformação, as organizações procuram atingir um patamar de excelência que não só aumente os seus níveis de qualidade e desempenho, como também proporcione resultados sustentáveis. Atualmente, existem inúmeros modelos de excelência, entre os quais o Modelo EFQM e o Modelo Shingo. O modelo EFQM foi criado na Europa e é amplamente utilizado neste continente, nomeadamente em Portugal, em detrimento do modelo Shingo. Por sua vez, esta dissertação tem como objetivo analisar os critérios e pressupostos sobre os quais os modelos foram construídos, concluindo sobre o que potencialmente melhor se adequa ao contexto português. Outro foco desta dissertação é investigar como os modelos são incorporados e promovem os três pilares da sustentabilidade nas organizações. Para responder a estas questões de investigação, foi efetuada uma revisão da literatura sobre os temas em questão. Foram assim analisados 143 artigos, principalmente da plataforma Web of Science, no período de 27 de novembro de 2022 a 30 de dezembro de 2022, seguindo a Metodologia PRISMA. Foi ainda criada uma rede de coocorrência bibliométrica para compreender a ligação entre os temas, utilizando para o efeito o software VOSViewer. A partir dos resultados obtidos da revisão da literatura foi possível concluir que, efetivamente, a nova versão do Modelo EFQM e do Modelo Shingo orientam as organizações para a obtenção de resultados económicos, sociais e ambientais sustentáveis. É ainda proposto um Modelo Conceptual de Excelência Empresarial para a Sustentabilidade, baseado na relação entre os modelos em estudo, nas suas relações com a sustentabilidade e nos conceitos centrais de suporte que permitem promover a Política Ambiental para o desenvolvimento sustentável com o Envolvimento das Partes Interessadas. Com o objetivo de avaliar a propensão das organizações portuguesas para implementarem o Modelo Shingo ou o Modelo EFQM, analisando qual deles se adequa melhor à realidade portuguesa, foi proposto um modelo conceptual. Para testar as hipóteses operacionalizadas no modelo, foi planeado e enviado um inquérito a 37730 organizações portuguesas. Os dados foram recolhidos durante 6 semanas, de 15 de junho de 2023 a 24 de julho de 2023, em que foi possível obter 789 respostas, um número acima do nível mínimo exigido, com um nível de confiança de 95%. Da amostra inicial, um total de 731 respostas foram consideradas válidas e, consequentemente, os dados extraídos das mesmas foram tratados e analisados, de forma a extrair as respetivas conclusões relativamente aos objetivos anteriormente mencionados, utilizando uma abordagem por Modelação de Equações Estruturais (MEE). Os resultados do teste de hipóteses indicam que as organizações portuguesas têm maior Propensão para implementar o Modelo Shingo. Para além disso, estas organizações que apresentam maior Propensão para o Modelo Shingo revelam estar positivamente relacionadas com seis importantes pilares da maturidade organizacional: alinhamento estratégico, gestão de stakeholders, cultura, processos internos e utilização de tecnologia. Concluiu-se ainda que que a Propensão para a implementação do Modelo Shingo está positivamente relacionada com o desempenho ambiental, operacional e social, indicando assim o caminho favorável das organizações portuguesas em direção à excelência e à implementação do Modelo Shingo

Risk factors for Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS): the effect of high-intensity sport

Trabalho de projeto de mestrado em Bioestatística, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2020A Esclerose Lateral Amiotrofica (ELA) é uma doença neurodegenerativa rara que envolve principalmente os neurónios motores (diretamente associados a movimentos voluntários). Atualmente, não existe cura para a ELA, aproximadamente 50% dos pacientes com ELA morrem dentro de 30 meses após o início dos sintomas, geralmente devido a insuficiência respiratória e suas complicações, enquanto cerca de 10% dos pacientes podem sobreviver por mais de uma década (National Institute of Neurological Disorders and Stroke NIH, n.d.). A maioria dos casos de ELA é esporádica, sem histórico familiar da doença. No entanto, 5 a 10% dos casos tem uma componente genética associada - uma mutação do gene C9ORF72, responsável pela codificação da proteína C9ORF72, mais comumente associada a ELA. Outra mutação sobre a qual há referências de ligação com a ELA ocorre no gene SOD1, que em conjunto com a mutação do gene C9ORF72, explica os 87% da ELA familiar. (Renton et al., 2011). A idade e o género, são fatores de risco já bem estabelecidos. Para além destes, outros fatores como o tabagismo ou a prática de atividade física intensa, são apontados como potencias fatores de risco para a doença, embora os resultados de trabalhos anteriores sejam contraditórios (Ingre, Ross, Phiel, Kamel & F, 2015). Ainda assim, estudos recentes indicam que as modalidades de contacto nos níveis mais altos de intensidade, que combinam atividade física intensa e aumento do risco de trauma repetitivo na cabeça e na coluna cervical (Blecher et al., 2019), são um fator de risco para o aparecimento de doenças neurodegenerativas. Esta tese, baseou-se num estudo caso-controlo da ELA, e teve como principais objetivos avaliar a relação entre a prática das modalidades de contacto - boxe, rugby, hóquei e futebol e a ocorrência de ELA, bem como a existência de potenciais fatores que interfiram nessa relação, como sexo, idade e hábitos tabágicos. Optou-se por selecionar apenas as modalidades que envolviam trauma repetitivo ao nível da cabeça e coluna cervical, partindo do pressuposto, apresentado por (Blecher et al., 2019). A análise estratificada em estudos de caso-controlo e modelos de regressão logística, foram as metodologias escolhidas para atingir este objetivo. Os resultados obtidos pelas duas metodologias foram comparados. O segundo objetivo, foi avaliar a relação entre a idade de diagnóstico precoce e a prática de futebol de alta intensidade. Para testar a existência de diferenças na idade do diagnóstico, considerando os diferentes níveis de intensidade com que o futebol era praticado, foi aplicada a análise de variância a um fator. Foram também definidos objetivos secundários: i) avaliar a relação entre a idade do diagnóstico e a idade dos primeiros sintomas e o tipo de início da doença, através do modelo linear clássico. ii) avaliar a relação entre os diferentes valores de ALS Fuctional Rate of Decay (ALSFSR.R) e um conjunto de variáveis como sexo, idade dos primeiros sintomas e outras através da mesma metodologia. iii) avaliar a existência de diferenças entre os diferentes níveis de progressão por meio de regressão logística multinominal. Quando uma ou mais suposições não foram atendidas, recorreu-se à aplicação da transformação logarítmica. Para todas as análises estatísticas realizadas, com exceção da análise estratificada, foi utilizado o software R com a interface RStudio Versao 1.1.463 -cc 2009-2018 RStudio, Inc. A análise estratificada foi realizada com o software baseado na Web Open-Epi. Foi considerado o nível de significância α = 5%. O conjunto de dados utilizado compreende 2247 participantes, 1326 pacientes e 921 controlos de várias nacionalidades Europeias que responderam a um questionário padronizado, criado em 2015 como parte do projeto OnWebDuals. O projeto OnWebDuals pretende recolher dados de pacientes com ELA de diferentes locais europeus, para construir uma ontologia de domínio da ELA e implementá-la num grande banco de dados web-europeu. Fazem parte desta base de dados variáveis sociodemográficas como por exemplo género e idade, variáveis clínicas como tipo de início da doença, a idade dos primeiros sintomas e ainda uma classe de variáveis exclusivamente relacionadas com o desporto, tendo em conta um dos objetivos principais desta tese. Encontrou-se evidência para o nível de significância α = 5% para que género e idade (categorizada) atuem como modificadores de efeito na relação entre a prática de modalidades de contacto e a ELA. Contudo, após maior reflexão, e levantada a possibilidade destes resultados estarem relacionados com o número reduzido de mulheres a praticar modalidades de contacto, o que é natural, considerando que nesta base de dados a idade média das mulheres é de 63.5 anos. Nesta geração, o número de mulheres que praticavam atividade física, era muito reduzido. Desta forma, foi construído um modelo onde se considerou exclusivamente a população masculina. Quando considerado apenas o efeito da prática de modalidades de contacto, esta surge como fator de risco para a doença, a chance de vir a desenvolver a doença e 1.765 vezes superior nos praticantes, relativamente aos não praticantes. Houve também interesse em avaliar o efeito de outras variáveis considerados fatores de risco, ou potenciais fatores de risco, para a doença - idade e hábitos de fumo representados pela carga tabágica (TE). Foram testados diferentes modelos, chegando ao modelo final. O modelo final, constituído exclusivamente pela população masculina tem como variáveis - prática de modalidades de contacto (Contact), idade, carga tabágica (TE) e interação entre a prática de modalidades de contacto e a carga tabágica (Contact × TE). Considerando o objetivo principal - avaliar a relação entre a prática de modalidades de contacto e a ELA, pode dizer-se que a chance de vir a desenvolver a doença é 1.3 (IC a 95%:0.867;2.124) vezes maior nos praticantes relativamente aos não praticantes nos participantes com carga tabágica nula (TE=0). Quanto à interação entre a prática de modalidades de contacto e a carga tabágica, os resultados mostraram-se estatisticamente significativos, verifica-se um aumento de aproximadamente 3% na chance de vir a desenvolver a doença nos praticantes de modalidade de contacto, quando comparados com os não praticantes para duas cargas homogéneas que diferem em 1 maço/ano. Relativamente ao segundo objetivo, para além de se avaliar a relação entre a prática de futebol de alta intensidade e idade de diagnóstico precoce, considerando todos os participantes dos 4 países Europeus (Alemanha, Polónia, Portugal e Turquia), procedeu-se à mesma avaliação, mas aplicada exclusivamente aos participantes portugueses, que nos interessava especialmente. Quando considerada apenas a população portuguesa pode dizer-se que a idade de diagnóstico difere significativamente entre praticantes de futebol de alta intensidade e não praticantes. Contudo, quando considerada toda a população esta diferença não se verifica. Relativamente aos objetivos secundários, por cada ano mais na idade de ocorrência dos primeiros sintomas, verificou-se uma diminuição de aproximadamente 0.7% no atraso do diagnóstico. Comparando pacientes com início bulbar relativamente a pacientes com início num dos membros, pode dizer-se que o atraso no diagnostico é aproximadamente 30% menor para os pacientes com início bulbar relativamente aos com início nos membros. Considerando os diferentes grupos de progressão, verificou-se que grupos de progressão mais lentos correspondem a um aumento no atraso de diagnóstico. Apesar de ainda não existirem muitos estudos nesta área, este é um dos maiores considerando o tamanho da amostra. Os resultados obtidos e agora apresentados, estão de acordo com alguns trabalhos publicados anteriormente. Dado o tamanho da nossa amostra, estes resultados, são atuais e importantes para validar outros trabalhos semelhantes que têm vindo a ser desenvolvidos. No futuro, será importante, a realização de um estudo semelhante, para confirmar o efeito de modalidades de alta intensidade associadas a um trauma repetitivo a nível da cabeça e coluna cervical como um fator de risco para a ELA. A sua aplicação a uma nova geração de homens e mulheres, em que as diferenças relativas a prática de atividade física não sejam tão acentuadas, permitirá obter resultados mais ajustados à realidade atual. Citando a emblemática afirmação de (Box, 1979), ”todos os modelos estão errados, mas alguns são úteis”. Os resultados agora apresentados, não podem ser assumidos como lei universal mas reforçam a necessidade de mais investigação nesta área, contribuindo para um melhor conhecimento da doença. A confirmação destes resultados deverá proporcionar uma maior consciencialização das federações desportivas e dos atletas para este problema e promover a discussão de estratégias que de alguma forma tentem minimizar os efeitos da prática destas atividades na saúde dos atletas.Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS) is a rare neurodegenerative disease that primarily involves motor neurons (directly associated with voluntary movements). Currently there is no cure for ALS, approximately 50% of ALS patients die within 30 months of symptom onset, usually due to respiratory failure and its complications, while about 10% of patients may survive more than a decade (National Institute of Neurological Disorders and Stroke NIH, n.d.). Vigorous, high-intensity physical activity has been identified as a risk factor for ALS; the practice of modalities prone to repetitive injuries of the cervical spine and head are pointed as possible risk factors for ALS when associated with vigorous practice (Blecher et al., 2019). This report has two main objectives: i) evaluate the relationship between the practice of contact modalities - boxing, hockey, football and rugby and ALS and the existence of variables that can interfere in this relation: age, gender and smoking habits. ii) evaluate the relationship between early diagnosis and football practice with different levels of intensity. In complement, variables associated with late diagnosis and different levels of disease progression were also evaluated. The study included 2247 individuals - 1326 patients and 921 controls. To answer the first objective, binary logistic regression models were used, the response variable was the presence or absence of ALS. The explanatory variables considered were the practice of contact modalities, the study main variable and age, gender and smoking (as packs/year). Stratified analysis in case control studies was also applied, with the same objective. The results obtained by both methodologies were compared. For other purposes, classical linear model and its extensions were used. The significance level α = 5% was considered. The results suggested the existence of evidence indicating gender and age as effect modifiers in the relationship between ALS and contact sports. The small number of female practicing contact modalities and their high average age, may have conditioned the results, so special attention was paid to it and only the male population was considered. A relationship between the practice of contact modality and ALS, was found. For the second objective, considering only the Portuguese population, statistically significant differences were found in the age of diagnosis between high intensity practitioners and practitioners with low intensity level or non-practitioners. However, this difference was not verified, when considering the whole population. Limbs onset and age of early diagnosis are associated with an increase in diagnostic delay. Considering the different progression groups, the slower progression correspond to an increase in the delay of the diagnosis. Although this is still a poorly studied area, as there is a growing concern around the effects of physical activity on this disease, the results presented now, are important and in accordance with similar previous works, and supports and validate them. Contact × TE interaction, was statistically significant. As far as known, this interaction was not yet identified and there are no previous published results showing it. Future similar studies are needed to include a new generation of men and women where differences regarding the practice of physical activity are not so pronounced

Growth after pediatric kidney transplantation

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2021Introdução: O atraso estaturo-ponderal é umas das principais complicações da doença renal crónica em idade pediátrica. Contudo, mesmo após o transplante renal, cerca de 50% das crianças não atingem a estatura esperada na idade adulta. Os objetivos deste estudo foram avaliar o crescimento após transplante e identificar fatores que o possam influenciar. Métodos: Foi realizado um estudo observacional retrospetivo. Foram analisados os processos clínicos de todos os doentes submetidos a transplante renal nos últimos 25 anos (n=149) e foram realizadas chamadas telefónicas para obtenção de dados em falta. Os z-scores de estatura e índice de massa corporal (IMC) foram examinados à altura do transplante, 3 meses, 6 meses, 1 ano e 5 anos após o transplante renal e a estatura final na idade adulta, através das curvas e tabelas de crescimento da OMS. Ademais, dados relativos à duração da doença previamente ao transplante, técnica de substituição da função renal, administração de hormona de crescimento, suporte nutricional, estatura alvo, função renal e dose cumulativa de corticosteroides foram obtidos. Resultados: A análise dos z-scores revelou uma recuperação da estatura estatisticamente significativa aos 6 meses (p=0,006), 1 ano (p<0,001), 5 anos após transplante (p<0,001) e na idade adulta (p=0,012). Houve também uma recuperação significativa do IMC em todos os momentos avaliados (p<0,001). A taxa de filtração glomerular correlacionou-se de forma positiva e significativa com a estatura (p=0,006) e o IMC (p=0,006). O tratamento com hormona do crescimento não teve impacto na estatura à data do transplante (p=0,182). A utilização de gastrostomia não teve impacto significativo na estatura (p=0,167) nem no IMC (p=0,086) à data do transplante. A duração da doença renal até ao transplante não demonstrou influenciar a estatura (r=- 0,087, p=0,464) e o IMC (r=-0,144, p=0,225) na idade adulta. Ademais, a dose cumulativa de corticosteroides a que são sujeitos não demonstrou impacto na estatura (r=-0,080, p=0,538) e IMC (r=-0,155, p=0,229) na idade adulta. A evidenciar, temos o facto de que, em média, a estatura destas crianças na idade adulta foi 8,82 cm mais baixa do que a estatura-alvo.Conclusão: Apesar dos resultados encorajadores do nosso trabalho relativamente à recuperação da estatura após o transplante renal, os resultados permanecem longe do que seria desejável. Desta forma, estratégias devem ser estudadas e aplicadas, nomeadamente, a utilização sistemática de gastrostomia. Ademais, deve ser feito um controlo regrado do IMC de modo a evitar um excessivo ganho ponderal, que se associa a um aumento do risco cardiovascular.Background: Growth failure is one of the major complications of pediatric chronic kidney disease (CKD). However, even after KT, up to 50% of patients fail to attain expected final height by the time they transition to adult services. The aims of this project were to assess longitudinal growth after KT and to identify factors that influence it. Methods: A retrospective observational study was performed. We reviewed the clinical records of all patients who underwent KT in the last 25 years in a single center (n=149) and performed phone interviews in order to obtain further data. Height-for-age and sex and BMI-for-age and sex were examined at transplant, 3 months, 6 months, 1 year and 5 years post-transplant and at final adult height, using WHO growth standards. Data regarding duration of disease prior to transplant, type of dialysis, administration of pretransplant recombinant human growth hormone (rhGH), nutritional support, target height, glomerular filtration rate (GFR) and cumulative corticosteroid dose were obtained as well. Results: Height z-scores showed catch-up growth at 6 months (p=.006), 1 year (p<.001), 5 years after transplantation (p<.001) and on transition to adult care (p=.012). Regarding BMI z-scores, a significant increase was also detected at all time-point assessments (p<.001). GFR was significantly associated with height z-score (p=.006) and BMI z-score (p=.006). In our cohort, treatment with rhGH had no impact on height zscore at transplant (p=.182). Use of gastrostomy feeding tube had no statistically significant impact on height z-score (p=.167) and BMI z-score (p=.086) at transplantation, although only 6% (n=6) of our patients used gastrostomy feeding tube. Disease duration until transplantation had, also, no influence on height z-score (r=-.087, p=.464) or BMI z-score (r=-.144, p=.225) at adult care transition. Furthermore, cumulative corticosteroid dose had no influence on height z-score (r=-.080, p=.538) or BMI z-score (r=-.155, p=.229) at transition to adult care. Importantly, in our cohort height in adulthood was 8.82 cm lower, on average, than the target height.Conclusion: Although the encouraging results regarding catch-up growth after KT presented in this cohort, results remain far from optimum. Therefore, strategies must be thought, including systematic use of gastrostomy tube feeding. Furthermore, closely monitoring of BMI is important in order to avoid excessive weight gain as it is associated with a greater cardiovascular risk

O impacto do conflito trabalho-família no engagement, desempenho e intenção de turnover dos colaboradores

A incompatibilidade entre a esfera do trabalho e da família é uma realidade que assola muitos trabalhadores na atualidade. A difícil articulação destes dois domínios conduz à vivência do fenómeno designado por Conflito Trabalho-Família (CTF). O presente estudo tem como objetivo avaliar o impacto que o CTF poderá ter no engagement e no desempenho dos colaboradores, bem como, na sua intenção de turnover. Pretende-se também testar o efeito mediador do engagement na relação entre o CTF e o desempenho, e entre o CTF e a intenção de turnover. Foram inquiridos 105 colaboradores de várias organizações. Os resultados revelaram que os colaboradores que sentem maior CTF apresentam menores níveis de engagement e maior intenção de sair da organização. O CTF não revelou relação com o desempenho. O engagement assume o papel mediador (mediação parcial) na relação entre o CTF e a intenção de turnover. A relevância deste estudo prende-se com as implicações que poderá trazer para as empresas no âmbito da implementação de estratégias de conciliação trabalho-família de forma a reduzir o referido conflito.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

How authentic leadership promotes individual creativity: The mediating role of affective commitment

This study sought to provide a more comprehensive understanding of how authentic leadership can affect employees’ individual creativity through affective commitment’s mediating role. The sample included 177 leader-follower dyads from 26 private, small and medium-sized enterprises. Followers reported their levels of affective commitment and perceptions of authentic leadership, and leaders assessed each follower’s level of creativity. The results show that authentic leadership has a positive impact on affective commitment and creativity. Moreover, affective commitment fully mediates the relationship between perceived authentic leadership and individual creativity. Organizations can thus increase employees’ affective commitment and creativity by encouraging their managers to adopt more authentic leadership styles. Additional studies with larger samples are needed to determine more clearly not only authentic leadership’s influence on individual creativity but also other psychosocial and personal variables’ effects on that relationship.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Osteogenic differentiation of human umbilical cord-derived stromal cells on human amniotic membrane

Tese de mestrado. Biologia (Biologia Evolutiva e do Desenvolvimento). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2011Mesenchymal stromal cells (MSC) from the umbilical cord (UC) are a promising tool for regenerative medicine due to their easy acquisition, high expansion potential and the ability to differentiate into multiple lineages. In particular, the capacity for osteogenic differentiation makes them of great interest for clinical application in bone repair. In this work, 51 MSC lines were isolated from different parts of 26 UC and successfully expanded in fetal bovine serum (FBS)-containing medium. These cells complied with the criteria for MSC classification as they were adherent to plastic, capable of multilineage differentiation, and expressed CD73, CD90, CD44 and CD105 while lacking hematopoietc and endothelial markers. Differentiation of the different MSC lines along the osteogenic lineage was variable depending mostly on the tissue source and isolation method. Moreover, osteogenic differentiation could be modulated by selecting for cells with high expression levels of CD105 (Endoglin) or by the co-culture of MSCs with different osteogenic potential. With the aim of establishing xeno-free clinically compatible culture conditions, StemPro MSCs serum free medium (SP-MSC SFM), human platelet lysate (in medium or in plasma), human plasma and AB serum (hABS) were tested. We have observed that only hABS supplemented medium could efficiently sustain MSC expansion, morphology, immunophenotype and multi-lineage differentiation similarly to FBS-containing medium. Finally, preliminary data indicates that frozen immunologically inert amniotic membrane is a suitable substrate for osteogenic differentiation of MSCs and, therefore, a promising scaffold for producing an osseous matrix for application in regenerative medicine.A medicina regenerativa é uma área em grande expansão que tenta ultrapassar a escassez e curto tempo de vida dos órgãos e tecidos doados para transplantação e os problemas decorrentes da histocompatibilidade (Chai e Leong 2007). Para tal, células estaminais são expandidas e diferenciadas in vitro num sistema de suporte criado artificialmente. As células estaminais têm o potencial de se auto-renovarem por divisão mitótica mantendo a capacidade de se diferenciarem em vários tipos celulares e deste modo de repovoarem um tecido in vivo. As células mesenquimais do estroma (MSCs, “mesenchymal stromal cells”) representam uma população de células estaminais adultas multipotentes de grande interesse de estudo na área da regeneração de tecidos (Kode et al., 2009). Estas células foram inicialmente identificadas como uma população rara de células estaminais não hematopoiéticas presente na medula óssea (Friedenstein et al., 1966; Friedenstein et al., 1987; Kode et al., 2009; Owen e Friedenstein, 1988). Contudo, tem vindo a ser descrito o isolamento destas células de variados tecidos, entre eles o cordão umbilical humano (UC, “umbilical cord”) (Lu et al., 2006; Nekanti et al., 2010; Shetty et al., 2010). O UC é constituído por duas artérias, uma veia, e uma matriz circundante de tecido conectivo designada por geleia de Wharton (WJ “Wharton’s jelly”), composta por células com morfologia fibroblástica e alguns mastócitos numa substância amorfa rica em proteoglicanos, principalmente ácido hialurónico (Can e Karahuseyinoglu, 2007). MSCs foram já isoladas a partir de todos estes constituintes do UC e constituem uma ferramenta promissora em medicina regenerativa, devido à sua fácil aquisição, elevado potencial de expansão e capacidade de se diferenciar em várias linhagens, nomeadamente osteogénica, adipogénica e condrogénica. Em particular, a sua capacidade de diferenciação osteogénica é de grande interesse para a aplicação clínica destas células em reparação óssea. Neste trabalho MSCs foram isoladas de diferentes partes de 26 UCs tendo 51 linhas celulares sido obtidas. Em particular, foram isoladas células da geleia de Wharton periférica (pWJ) e total (tWJ), apenas dos vasos (V-UC), e de todo o cordão (W-UC). Para isto aperfeiçoámos um método composto por uma fragmentação mecânica da WJ, V-UC e W-UC em pequenos pedaços seguida de uma digestão enzimática de 3 a 4 horas com colagenase e hialuronidase, deste modo obtendo um bom equilíbrio entre a dissociação do tecido e a viabilidade celular. Para a obtenção de tWJ-UC e V-UC foi necessário efectuar uma digestão enzimática inicial da parte interna do cordão para permitir a remoção dos vasos. As células isoladas foram então expandidas num meio de cultura composto pelo meio basal Dulbecco's Modified Eagle's Medium F12 (DMEM-F12), glutamina e soro fetal bovino (FBS). Estas células preencheram os critérios de classificação para MSCs estabelecidos pela Sociedade Internacional para a Terapia Celular (ISCT), uma vez que: eram aderentes ao plástico; auto-renovaram-se em cultura ao longo de várias passagens; expressam os marcadores de superfície específicos CD73, CD90, CD44 e CD105, e não marcadores hematopoiéticos nem vasculares como CD45 e CD34; e foram capazes de se diferenciar nas linhagens osteogénica, adipogénica e condrogénica. Com o objectivo de obter condições de cultura compatíveis com uma aplicação clinica, ou seja sem produtos animais tais como o FBS, foram testados como candidatos o meio de cultura comercial StemPro (SP-MSC SFM), lisado de plaquetas humanas (ressuspendidas em meio- hPL ou em plasma-hPLP), plasma humano (hP) e soro AB humano (hABS). Um meio de cultura apropriado para esta aplicação, deverá ser capaz de sustentar a expansão de MSCs mantendo a sua morfologia, fenótipo e o potencial de diferenciação em diferentes linhagens. Neste estudo, o meio de cultura com hPLP, hPL ou hP apenas permitiu a sobrevivência das MSCs por 3 passagens, ainda que usando placas de cultura revestidas com fibronectina humana e adicionado 250μM de ácido ascórbico (asc), condições que deveriam facilitar a expansão de MSCs (Choi KM et al., 2008; Potdar e d’Sousa, 2010), como foi possível verificar no meio com FBS. No meio de cultura SP-MSC SFM e no meio suplementado com hSAB foi possível expandir as células durante pelo menos 8 passagens. Contudo, em SP-MSC SFM as células sofreram algumas alterações morfológicas e uma diminuição da expressão de CD105 ao longo do tempo em cultura. Por seu lado, MSCs expandidas em hSAB (um pool de soro humano AB alogénico) exibiram o comportamento desejado uma vez que nem a sua morfologia nem o imunofenótipo foi alterado quando comparado com células em meio com FBS. De grande importância foi também a observação que, enquanto em MSCs expandidas em SP-MSC SFM houve uma redução na capacidade de diferenciação osteogénica das células, em meio com hSAB esta capacidade foi mantida. Bons resultados no uso de hSAB como suplemento do meio de cultura de MSCs tinham já sido documentados em outros estudos (Yamaguchi et al., 2002; Kocaoermer, Kern e Kluter et al., 2007). Para a análise do potencial osteogénico das MSCs foram testados diversos meios basais de cultura (com diferentes concentrações de glucose e aminoácidos) e combinações dos osteoindutores ácido ascórbico, dexametasona e β-glicerofosfato. No entanto, observámos que melhores resultados foram obtidos com o meio de cultura comercial MesenCult osteogenic stimulatory kit. A diferenciação osteogénica das células foi avaliada através da análise da expressão génica, imunofenotipagem por citometria de fluxo, marcação para a actividade da fosfatase alcalina (AP), característica da fase de deposição de matriz orgânica (aproximadamente aos 14 dias de diferenciação), e numa fase mais tardia (de mineralização) pela deposição de cálcio detectada com vermelho de Alizarina ou marcação von Kossa. Assim, foi possível observar que durante a osteogénese há uma diminuição inicial da expressão de CD105, CD73 e de CD90 (tanto RNA como proteína), seguida do aparecimento de fosfatase alcalina e osteocalcina, e finalmente um aumento gradual da deposição de cálcio a partir dos 21 dias de diferenciação. Neste estudo foi observada uma grande variabilidade na capacidade de diferenciação das diferentes linhas de MSCs obtidas. Esta variabilidade parece estar de alguma forma relacionada com o tecido e método de isolamento utilizado. No entanto, outros factores como a densidade celular no início da cultura, o nível de expressão de CD105 e a interacção entre células parecem também ter uma importante influência na aptidão osteogénica das MSCs. Em diversos aspectos deste estudo o antigénio CD105, pareceu ter um papel relevante, uma vez que a diminuição da sua expressão em SP-MSC-SFM parece inibir a osteogenése, e as células seleccionadas para elevados níveis desta proteína provocam o aumento de diferenciação das MSCs. O CD105, ou Endoglina, é uma glicoproteina membranar de tipo I que faz parte do complexo do receptor TGF-β (Barbara et al., 1999; Blanco et al., 2005). Assim, a regulação dos níveis de expressão de CD105 pode estar relacionada com a modelação da sinalização em resposta ao TGF-β e esta pode determinar aspectos cruciais da diferenciação osteogénica. Este aspecto deverá ser alvo de estudos futuros. Outro aspecto importante da diferenciação é a matriz ou substrato onde sobre a qual se encontram as células (Salasznyk et al., 2004; Cool e Nurcombe, 2005; Chastain et al.,2006). Neste estudo propusemos a utilização de membrana amniótica (AM “Amniotic membrane”) como um substrato adequado para promover a diferenciação osteogénica de MSCs, o que ajudaria a ultrapassar a necessidade de dissociação das células e disrupção de uma matriz óssea para transplantação num paciente. Os nossos dados preliminares indicam que a AM congelada imunologicamente inerte é um substrato adequado para diferenciação osteogénica de MSCs, apesar de dificuldades em prevenir o enrolamento e enrugamento da membrana durante a diferenciação e de esta diferenciação ser menos eficiente que a de células cultivadas em plástico. Um outro aspecto interessante foi a detecção de um nível basal de AP em MSCs sobre AM em meio de expansão. Isto sugere que a AM tem propriedades intrínsecas que lhe permitem induzir osteogénese, como sejam factores de crescimento presentes na AM (Koizumi et al., 2000; Valladares et al., 2010). Apesar de estudos adicionais serem necessários de modo a melhorar as condições de cultura das MSCs na AM, este parece ser um substrato promissor para a produção de uma matriz óssea para aplicação em medicina regenerativa