High-performance liquid chromatography application for serum cortisol quantification as a substitute for radioimmunoassay

BACKGROUND: The quantification of cortisol in different organic fluids has not only been applied to different human nosological conditions as a diagnostic aid but it has also been used in clinical research. In clinical application, cortisol is routinely measured by radioimmunoassay (RIA). In the determination of free urinary cortisol this technique has been replaced by the high-performance liquid chromatography mainly in the diagnosis of Cushing syndrome. As to serum cortisol determination, there is no evidence of the application of liquid chromatography as a substitute for other analytical techniques. OBJECTIVE: The development of an analytical methodology using reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) to determine serum cortisol levels as a substitute for RIA in order to reduce radioactive waste. MATERIAL AND METHODS: Cortisol was directly quantified by RP-HPLC in previously ether-extracted serum samples. Triamcinolone acetonide was used as internal standard (IS). The chromatographic separation was developed in a BDS-Hypersil-C18® column (125 x 4 mm, 5 µm) using water-acetonitrile (72:28; v/v) as mobile phase at 1 ml/min and steroid peaks were measured at 243 nm. RESULTS: Cortisol and IS presented retention time of 3.4 and 7.1 min, respectively. The precision was less than 10% and accuracy was less than 4%. DISCUSSION: The method was effective and efficient, with good sensitivity and linearity in the concentration range of 2.5 to 60.0 µµg/dl. CONCLUSION: The present methodology substitutes RIA at clinical application.INTRODUÇÃO: A determinação de cortisol nos diferentes fluídos orgânicos tem sido aplicada como auxílio diagnóstico em distintas condições nosológicas em humanos, bem como empregada em estudos envolvendo pesquisa clínica. No intervalo de aplicação clínica, rotineiramente é determinado pela técnica de radioimunoensaio (RIE). Na determinação do cortisol urinário livre essa técnica vem sendo substituída pelo emprego da cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), principalmente no diagnóstico da síndrome de Cushing. Já para a determinação do cortisol sérico não se têm evidências do emprego da cromatografia líquida em substituição a outras técnicas analíticas. OBJETIVOS: O desenvolvimento de metodologia analítica empregando HPLC no modo fase reversa (RP-HPLC) para a determinação de cortisol sérico em substituição ao RIE visando à redução da geração de resíduos radioativos. MATERIAL E MÉTODOS: O cortisol foi quantificado diretamente empregando-se RP-HPLC em amostras de soro previamente extraídas com éter utilizando-se acetonido de triancinolona como padrão interno (PI). Utilizou-se coluna analítica BDS-Hypesil-C18® (125 x 4 mm, 5 µm), fase móvel composta de água e acetonitrila (72:28; v/v) a 1 ml/min e detecção a 243 nm. RESULTADOS: O cortisol e o PI apresentaram tempo de retenção de 3,4 e 7,1 min, respectivamente. O coeficiente de variação (CV%) obtido no estudo da precisão foi menor que 10%, e a exatidão apresentou um desvio inferior a 4%. DISCUSSÃO: O método mostrou-se eficaz e eficiente, com sensibilidade e linearidade na faixa estudada de 2,5 a 60 µµg/dl. CONCLUSÃO: O método proposto substitui o RIE no intervalo de sua aplicação clínica.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista e Medicina Departamento de MedicinaEPM/UNIFESP Departamento de Medicina Laboratório de EsteróidesUNIFESP, Escola Paulista e Medicina Depto. de MedicinaEPM/UNIFESP, Depto. de Medicina Laboratório de EsteróidesSciEL

Avaliação da prescrição: ilegibilidade de prescrições atendidas em uma farmácia / Evaluation of the prescription: illegibility of prescriptions served in a pharmacy

A morbimortalidade prevenível relacionada ao medicamento é um problema frequente encontrado nos sistemas de saúde, tendo como uma das principais causas os erros de medicação. Dentre as causas que levam aos erros destaca-se a ilegibilidade das prescrições que compromete a interpretação correta do medicamento prescrito, dosagem e via de administração. Desta forma, objetivou-se verificar a ocorrência de prescrições ilegíveis em uma farmácia sem manipulação. Foi realizado um estudo observacional que avaliou 2.869 prescrições atendidas de 20 de março a 31 de agosto de 2017 em uma farmácia sem manipulação de um Centro Social da cidade de São Paulo. A análise de prescrições incidiu sobre receituários médicos e de outros profissionais da área da saúde, atendidos neste estabelecimento e foram primeiramente quantificadas e classificadas em manuais ou digitadas. Para categorização da ilegibilidade as prescrições foram avaliadas por um acadêmico de farmácia e por um farmacêutico, sendo que quando ambos consideraram comprometida a leitura da prescrição, esta foi considerada ilegível. Das 2.869 prescrições avaliadas, 52,4% eram manuais e 1,2 % apresentaram problema relacionado à legibilidade. Estas prescrições ilegíveis apresentaram até cinco medicamentos, sendo que 33,3% tinham apenas um medicamento prescrito e 11,1% cinco medicamentos. O problema relacionado à falta de legibilidade é relevante em razão da possibilidade de induzir ao erro ou confusão, bem como, por impossibilitar a dispensação, podendo assim, interromper ou alterar o processo de assistência ao paciente. Sendo assim, a implantação da prescrição eletrônica e a conscientização de profissionais de saúde e pacientes torna-se fundamental na diminuição de erros de medicação e consequente contribuição na segurança do paciente

Aplicação da cromatografia líquida de alta eficiência para quantificação direta da 17

Determination of serum levels of 17±-hydroxyprogeterone (17OHP) is essential for hormonal characterization of the 21-hydroxylase deficiency form of congenital adrenal hyperplasia (CAH). This condition results in female pseudo-hermaphroditism and sexual precocity in both sexes. 17OHP was directly quantified by liquid chromatography and reverse-phase separation (RP-HPLC) in previously ether extracted serum samples. A ODS-Hypersil® column and a water-methanol (4:6; v/v) mobile phase at 1.0 mL/min were employed in the procedure. The 17OHP peak was measured at 246 nm, with a retention time of 5.6 min. The method was effective and efficient with good sensitivity and linearity (r²= 0.9993) in the concentration range of 500 to 100,000 ng/dL. Intra and inter-assay precisions were 4.4 and 8.1%, respectively. This method can be employed in the laboratory routine for 17OHP in the diagnostic evaluation of CAH; RIA must only be employed to quantify values below the 500 ng/dL.A determinação dos níveis séricos de 17±-hidroxiprogesterona (17OHP) é essencial no diagnóstico laboratorial da hiperplasia adrenal congênita (CAH) por deficiência de 21-hidroxilase. Essa condição é responsável por pseudo-hermafroditismo em meninas e precocidade sexual em ambos os sexos. A 17OHP foi quantificada diretamente empregando-se cromatografia líquida de alta eficiência no modo fase reversa (RP-HPLC) em amostras de soro previamente extraídas com éter. Utilizou-se coluna ODS-Hypersil® e fase móvel composta de água-metanol (4:6 v/v) com vazão de 1,0 mL/min. A determinação deu-se em 246 nm. A 17OHP apresentou tempo de retenção de 5,6 min. O método mostrou-se eficaz e eficiente com sensibilidade e linearidade (r² = 0,9993) na faixa de concentração estudada de 500 a 100.000 ng/dL. As precisões intra e interensaios foram respectivamente 4,4 e 8,1%. O método pode ser empregado na rotina laboratorial da avaliação desse esteróide para diagnóstico de CAH, sendo necessário o emprego do radioimunoensaio(RIA) apenas para quantificar amostras com valores abaixo de 500 ng/dL

Termo de consentimento livre e esclarecido: análise do nível de conhecimento dos profissionais médicos do Maranhão

Design of the Study: Analytical cross-sectional observational study. Introduction: The Informed Consent (IC) is expressed by respect for human dignity requires that all research occurs after informed consent of the subjects, individuals or groups, by themselves and/or their legal representatives express their agreement to participate in the research. However, despite its extreme importance, it is observed that its use is not common in ordinary practice of medicine in our country, because the knowledge about this instrument is still incomplete of many doctors, that consists of a fundamental right of the patient and a ethical requirement for medicine. Objective: Investigate the level of knowledge about the Informed Consent by medical professionals active in Maranhão. Methodology: This is a cross-sectional analytical study with physicians in activity in the period from December 2012 to October 2013. A questionnaire consists of 18 questions about The Informed Consent was sent to 368 doctors who had registered email at the Regional Council of Medicine. Results: 170 (46,2%) questionnaires were answered. The level of knowledge about the IC was rated as average to 83,5% of physicians. Most of participants were specialists (85,7%) and 96,4% correctly recognized that the IC is a right of the patient. When asked about the main function of Informed Consent, 65,9% chose the wrong statement. It was noticed that all interviewees did not know how to proceed when delivering the IC to the patient. Conclusions: The doctors evaluated had a deficient knowledge of the IC, even being rated as average, had flaws in its use and in some main aspects of this term, as its main function and the ability to consentModelo de Estudo: Estudo observacional, analítico e transversal. Introdução: O Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE) se expressa pelo respeito à dignidade humana exigindo que toda pesquisa ocorra após consentimento livre e esclarecido dos sujeitos, indivíduos ou grupos que, por si e/ ou por seus representantes legais, manifestem sua anuência à participação da pesquisa. No entanto, apesar de sua extrema relevância, observa-se que seu uso não é habitual na prática diária da medicina em nosso país, apesar de consistir num direito fundamental do paciente e uma exigência ética para a medicina. Objetivo: Investigar o nível de conhecimento sobre o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido dos profissionais médicos ativos no Maranhão. Metodologia: Trata-se de um estudo transversal, analítico, realizado com os médicos em atividade, no período de dezembro de 2012 a outubro de 2013. Foi enviado questionário composto por 18 questões sobre o TCLE para 368 médicos que possuíam emails cadastrados no Conselho Regional de Medicina. Resultados: Foram respondidos 170 questioná- rios (46,2%). O nível de conhecimento sobre o TCLE foi classificado como médio para 83,5% dos avaliados. A maioria dos participantes era especialista (85,7%) e 96,4% reconheceram corretamente que o TCLE é um direito do participante. Quando questionados sobre a principal função do TCLE, 65,9% responderam inadequadamente. Verificou-se também que todos os entrevistados não sabiam como proceder no momento de entregar o TCLE ao paciente. Conclusões: Os médicos avaliados possuíam um conhecimento inadequado sobre o TCLE, que mesmo sendo classificado como médio, apresentou falhas quanto à sua utilização e alguns aspectos fundamentais deste termo, tais como sua principal função e aptidão para consenti

Predicting the Proteins of Angomonas deanei, Strigomonas culicis and Their Respective Endosymbionts Reveals New Aspects of the Trypanosomatidae Family

Endosymbiont-bearing trypanosomatids have been considered excellent models for the study of cell evolution because the host protozoan co-evolves with an intracellular bacterium in a mutualistic relationship. Such protozoa inhabit a single invertebrate host during their entire life cycle and exhibit special characteristics that group them in a particular phylogenetic cluster of the Trypanosomatidae family, thus classified as monoxenics. in an effort to better understand such symbiotic association, we used DNA pyrosequencing and a reference-guided assembly to generate reads that predicted 16,960 and 12,162 open reading frames (ORFs) in two symbiont-bearing trypanosomatids, Angomonas deanei (previously named as Crithidia deanei) and Strigomonas culicis (first known as Blastocrithidia culicis), respectively. Identification of each ORF was based primarily on TriTrypDB using tblastn, and each ORF was confirmed by employing getorf from EMBOSS and Newbler 2.6 when necessary. the monoxenic organisms revealed conserved housekeeping functions when compared to other trypanosomatids, especially compared with Leishmania major. However, major differences were found in ORFs corresponding to the cytoskeleton, the kinetoplast, and the paraflagellar structure. the monoxenic organisms also contain a large number of genes for cytosolic calpain-like and surface gp63 metalloproteases and a reduced number of compartmentalized cysteine proteases in comparison to other TriTryp organisms, reflecting adaptations to the presence of the symbiont. the assembled bacterial endosymbiont sequences exhibit a high A+T content with a total of 787 and 769 ORFs for the Angomonas deanei and Strigomonas culicis endosymbionts, respectively, and indicate that these organisms hold a common ancestor related to the Alcaligenaceae family. Importantly, both symbionts contain enzymes that complement essential host cell biosynthetic pathways, such as those for amino acid, lipid and purine/pyrimidine metabolism. These findings increase our understanding of the intricate symbiotic relationship between the bacterium and the trypanosomatid host and provide clues to better understand eukaryotic cell evolution.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)ERC AdG SISYPHEUniv Fed Rio de Janeiro, Inst Biofis Carlos Chagas Filho, Lab Ultraestrutura Celular Hertha Meyer, BR-21941 Rio de Janeiro, BrazilUniv Fed Rio de Janeiro, Inst Biofis Carlos Chagas Filho, Lab Metab Macromol Firmino Torres de Castro, BR-21941 Rio de Janeiro, BrazilLab Bioinformat, Lab Nacl Computacao Cient, Rio de Janeiro, BrazilINRIA Grenoble Rhone Alpes, BAMBOO Team, Villeurbanne, FranceUniv Lyon 1, CNRS, UMR5558, Lab Biometrie & Biol Evolut, F-69622 Villeurbanne, FranceUniv Estadual Campinas, Inst Biol, Dept Genet Evolucao & Bioagentes, São Paulo, BrazilUniv São Paulo, Fac Ciencias Farmaceut Ribeirao Preto, Dept Ciencias Farmaceut, São Paulo, BrazilLab Nacl Ciencia & Tecnol Bioetano, São Paulo, BrazilUniv Fed Minas Gerais, Inst Ciencias Biol, Dept Bioquim & Imunol, Belo Horizonte, MG, BrazilUniv Fed Goias, Inst Ciencias Biol, Mol Biol Lab, Goiania, Go, BrazilFundacao Oswaldo Cruz, Inst Carlos Chagas, Lab Biol Mol Tripanossomatideos, Curitiba, Parana, BrazilFundacao Oswaldo Cruz, Inst Carlos Chagas, Lab Genom Func, Curitiba, Parana, BrazilUniv Estadual Campinas, Ctr Pluridisciplinar Pesquisas Quim Biol & Agr, São Paulo, BrazilUniv Fed Minas Gerais, Inst Ciencias Biol, Dept Parasitol, Belo Horizonte, MG, BrazilUniv Fed Santa Catarina, Dept Microbiol Imunol & Parasitol, Ctr Ciencias Biol, Lab Protozool & Bioinformat, Florianopolis, SC, BrazilUniv Fed Vicosa, Dept Bioquim & Biol Mol, Ctr Ciencias Biol & Saude, Vicosa, MG, BrazilInst Butantan, Lab Especial Ciclo Celular, São Paulo, BrazilUniv São Paulo, Dept Biol, Fac Filosofia Ciencias & Letras Ribeirao Preto, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Escola Paulista Med, Dept Microbiol Imunol & Parasitol, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Escola Paulista Med, Dept Microbiol Imunol & Parasitol, São Paulo, BrazilWeb of Scienc

POÉTICAS DO ISOLAMENTO

Esta obra é composta por textos de um grupo de professores, que no ano de 2020, reinventaram-se em suas ações pedagógicas, buscando por meio da extensão dar continuidade ao ensino com a comunidade acadêmica e externa. O momento de distanciamento, em função da pandemia do Coronavírus, nos levou a busca de meios que possibilitassem o desenvolvimento das ações pedagógicas a distância. Então, iniciamos o processo de ampliar o nosso repertório digital para aplicá-lo no desenvolvimento das aprendizagens propostas por meio de minicursos, seminários, palestras e performances artísticas

JUDICIALIZAÇÃO DA SAÚDE: OS DESAFIOS DA ASSISTÊNCIA FARMACÊUTICA DO SISTEMA ÚNICO DE SAÚDE

This article discusses the challenges of pharmaceutical assistance in the Unified Health System from the perspective of the Judicialization of Health. In this sense, the basic conceptualization for understanding the theme is presented, as well as the perspectives and challenges, together with an analysis of lawsuits related to medications, with the purpose of substantiating in a more solid manner the discussion about the proposed theme.Este artículo discute los desafíos de la atención farmacéutica en el Sistema Único de Salud desde la perspectiva de la Judicialización de la Salud. En este sentido, el concepto básico es para la comprensión del tema, así como las perspectivas y desafíos, junto con un análisis de las demandas relacionadas con los medicamentos, con el objetivo de fundamentar de una manera más sólida la discusión sobre el tema propuesto.Este artigo discute os desafios da assistência farmacêutica no Sistema Único de saúde sob a perspectiva da Judicialização da Saúde. Neste sentido, tem-se a conceituação basilar para a compreensão do tema, bem como as perspectivas e desafios, aliados a uma análise de demandas judiciais referentes aos medicamentos, com objetivo de consubstanciar de maneira mais sólida a discussão acerca da temática proposta.Este artigo discute os desafios da assistência farmacêutica no Sistema Único de saúde sob a perspectiva da Judicialização da Saúde. Neste sentido, tem-se a conceituação basilar para a compreensão do tema, bem como as perspectivas e desafios, aliados a uma análise de demandas judiciais referentes aos medicamentos, com objetivo de consubstanciar de maneira mais sólida a discussão acerca da temática proposta

Pervasive gaps in Amazonian ecological research

Biodiversity loss is one of the main challenges of our time,1,2 and attempts to address it require a clear un derstanding of how ecological communities respond to environmental change across time and space.3,4 While the increasing availability of global databases on ecological communities has advanced our knowledge of biodiversity sensitivity to environmental changes,5–7 vast areas of the tropics remain understudied.8–11 In the American tropics, Amazonia stands out as the world’s most diverse rainforest and the primary source of Neotropical biodiversity,12 but it remains among the least known forests in America and is often underrepre sented in biodiversity databases.13–15 To worsen this situation, human-induced modifications16,17 may elim inate pieces of the Amazon’s biodiversity puzzle before we can use them to understand how ecological com munities are responding. To increase generalization and applicability of biodiversity knowledge,18,19 it is thus crucial to reduce biases in ecological research, particularly in regions projected to face the most pronounced environmental changes. We integrate ecological community metadata of 7,694 sampling sites for multiple or ganism groups in a machine learning model framework to map the research probability across the Brazilian Amazonia, while identifying the region’s vulnerability to environmental change. 15%–18% of the most ne glected areas in ecological research are expected to experience severe climate or land use changes by 2050. This means that unless we take immediate action, we will not be able to establish their current status, much less monitor how it is changing and what is being lostinfo:eu-repo/semantics/publishedVersio