Development of SYK NanoBRET cellular target engagement assays for gain–of–function variants

Spleen tyrosine kinase (SYK) is a non-receptor tyrosine kinase that is activated by phosphorylation events downstream of FcR, B-cell and T-cell receptors, integrins, and C-type lectin receptors. When the tandem Src homology 2 (SH2) domains of SYK bind to phosphorylated immunoreceptor tyrosine-based activation motifs (pITAMs) contained within these immunoreceptors, or when SYK is phosphorylated in interdomain regions A and B, SYK is activated. SYK gain-of-function (GoF) variants were previously identified in six patients that had higher levels of phosphorylated SYK and phosphorylated downstream proteins JNK and ERK. Furthermore, the increased SYK activation resulted in the clinical manifestation of immune dysregulation, organ inflammation, and a predisposition for lymphoma. The knowledge that the SYK GoF variants have enhanced activity was leveraged to develop a SYK NanoBRET cellular target engagement assay in intact live cells with constructs for the SYK GoF variants. Herein, we developed a potent SYK-targeted NanoBRET tracer using a SYK donated chemical probe, MRL-SYKi, that enabled a NanoBRET cellular target engagement assay for SYK GoF variants, SYK(S550Y), SYK(S550F), and SYK(P342T). We determined that ATP-competitive SYK inhibitors bind potently to these SYK variants in intact live cells. Additionally, we demonstrated that MRL-SYKi can effectively reduce the catalytic activity of SYK variants, and the phosphorylation levels of SYK(S550Y) in an epithelial cell line (SW480) stably expressing SYK(S550Y)

Le Forum, Vol. 43 #4

https://digitalcommons.library.umaine.edu/francoamericain_forum/1102/thumbnail.jp

The Association of Systemic Microvascular Changes with Lung Function and Lung Density: A Cross-Sectional Study

10.1371/journal.pone.0050224PLoS ONE712

Diagnostic accuracy of post-mortem CT with targeted coronary angiography versus autopsy for coroner-requested post-mortem investigations: a prospective, masked, comparison study.

England and Wales have one of the highest frequencies of autopsy in the world. Implementation of post-mortem CT (PMCT), enhanced with targeted coronary angiography (PMCTA), in adults to avoid invasive autopsy would have cultural, religious, and potential economic benefits. We aimed to assess the diagnostic accuracy of PMCTA as a first-line technique in post-mortem investigations.This article is freely available via Open Access. Click on the Additional Link above to access the full-text via the publisher's site

Quantitative description of SARS-CoV-2 RT-PCR, a cohort of 76 COVID-19 older hospitalized adults

PMCID: PMC8250917No abstract availabl

Nom propre et écritures de soi

L'autobiographie, sous ses divers avatars, a connu une expansion sans précédent, au point de devenir le registre dominant de la littérature d'aujourd'hui. Ses frontières génériques sont plus incertaines que jamais et la distance du sujet à lui-même implique un questionnement qui touche inévitablement le nom. Par ailleurs, à côté de la linguistique du nom propre, très productive ces dernières années, les travaux sur l'écriture de soi se sont multipliés dans le sillage d'une nouvelle phénoménologie de l'identité. Le nom propre s'est ainsi retrouvé au cœur de la réflexion sur les limites de la fiction et de la non-fiction. Voici qu'il apparaît, à l'égal du sujet ou de la vérité qu'il aurait fonction d'attester, comme une catégorie instable, sujette au doute et aux manipulations. L'être et l'identité sont désormais devenus friables. Le moment est donc venu de mettre à l'épreuve le modèle canonique proposé par l'école formaliste et sa confiance dans l'autorité du nom propre

Italians in the Americas — European Jews

Ce numéro s’intéresse à l’immigration des Italiens dans les Amériques (du Nord et du Sud) et aux questions de l’identité, du transnationalisme et de la transculturation. Il ne s’agit pas ici d’un panorama descriptif, mais d’une problématique précise : la renégociation de l’identité, c’est-à-dire la formation d’une nouvelle identité parmi les Italiens en raison de leur immigration. En comparant situations et expériences d’immigrations dans différents pays (Argentine, Mexique, Pérou, Équateur, Brésil et États-Unis), ces articles cherchent donc à mieux comprendre les enjeux du phénomène de transculturation ainsi que le long et complexe processus de construction des identités italo-américaines. Ce numéro thématique a été entièrement rédigé en anglais dans le but de toucher un public plus large et international (américain notamment)