Efeitos das etapas de tratamento e processamento do tecido na PCR para detecção de Mycobacterium tuberculosis em amostras fixadas em formalina e incluídas em parafina

Development and standardization of reliable methods for detection of Mycobacterium tuberculosis in clinical samples is an important goal in laboratories throughout the world. In this work, lung and spleen fragments from a patient who died with the diagnosis of miliary tuberculosis were used to evaluate the influence of the type of fixative as well as the fixation and paraffin inclusion protocols on PCR performance in paraffin embedded specimens. Tissue fragments were fixed for four h to 48 h, using either 10% non-buffered or 10% buffered formalin, and embedded in pure paraffin or paraffin mixed with bee wax. Specimens were submitted to PCR for amplification of the human beta-actin gene and separately for amplification of the insertion sequence IS6110, specific from the M. tuberculosis complex. Amplification of the beta-actin gene was positive in all samples. No amplicons were generated by PCR-IS6110 when lung tissue fragments were fixed using 10% non-buffered formalin and were embedded in paraffin containing bee wax. In conclusion, combined inhibitory factors interfere in the detection of M. tuberculosis in stored material. It is important to control these inhibitory factors in order to implement molecular diagnosis in pathology laboratories.O desenvolvimento e a padronização de métodos confiáveis para a detecção de Mycobacterium tuberculosis em amostras clínicas é um objetivo importante nos laboratórios de todo o mundo. Neste trabalho, fragmentos de pulmão e baço de paciente que morreu com o diagnóstico de tuberculose miliar foram usados para avaliar a influência do tipo de fixador e dos protocolos de fixação e inclusão em parafina na performance da PCR. Fragmentos de tecido foram fixados por quatro h a 48 h, usando formalina não tamponada a 10% ou formalina tamponada a 10% e incluídos em parafina pura ou misturada a cera de abelha. As amostras foram submetidas a PCR para amplificação do gene da beta-actina humana e, separadamente, para amplificação da sequência de inserção IS6110, específica do complexo M. tuberculosis. O resultado da amplificação do gene da beta-actina foi positivo em todas as amostras. Não foram gerados amplicons na PCR-IS6110 em amostras de tecido pulmonar fixadas usando formalina não tamponada a 10% e incluídas em parafina com cera de abelha. Em conclusão, fatores inibitórios combinados interferiram na detecção de M. tuberculosis em material de arquivo. É importante controlar estes fatores inibitórios para poder implementar o diagnóstico molecular em laboratórios de patologia

Relação do fluxo de íons (H+) em raízes com as atividades alelopáticas e mutagênicas do extrato etanólico e da nanodispersão de Mikania glomerata Spreng.

RESUMO A Mikania glomerata Spreng é uma espécie muito estudada sobre o aspecto etnofarmacológico e produção de compostos secundários, como as cumarinas. Esses compostos vêm sendo associados ao uso de nanopartículas as quais são utilizadas para associar compostos ativos vegetais, pouco solúveis, aumentando mais a biodisponibilidade desses. Assim, o presente trabalho tem como objetivo avaliar a capacidade iônica do extrato e nanodispersão do teor de cumarina (0,001; 0,002; 0,004; 0,008 e 0,016 mg/mL) de Mikania, relacionando essa capacidade com uma potencial atividade alelopática e mutagênica em raízes de Lactuca sativa e Allium cepa. O fluxo de H+ foi determinado na zona de alongamento das raízes, usando sistema vibratório de íons seletivos. A atividade alelopática foi avaliada por meio de ensaio de germinação. Após sua protrusão, as raízes foram fotografadas e analisadas em software ImageJ. Para avaliar a atividade mutagênica, as sementes foram germinadas em placas de Petri em triplicata e receberam 5mL de extrato de Mikania nas mesmas concentrações utilizadas para a nanodispersão, além dos grupos: cumarina pura 0,002 mg/mL (CuP); controle positivo metilmetanosulfonado a 4x10-4M (MMS) - como controle positivo - e o controle negativo (água destilada). Após a protrusão das raízes, foram confeccionadas lâminas para análise do índice mitótico e possíveis anomalias cromossômicas. Os dados obtidos foram submetidos à ANOVA e teste de médias (p<0,05). O fluxo de H+ , na curva dose-resposta, apontou a concentração de 0,002 mg/mL, sendo a melhor concentração para comparação aos demais tratamentos. Foi possível, também, observar que todos os tratamentos promoveram inibição do fluxo de H+ , quando comparados ao controle negativo. De forma similar, foi encontrado no fluxo de teores de cumarina em nanodispersão, em que foi possível evidenciar uma oscilação, de acordo com as concentrações analisadas. Esse resultado pode estar relacionado à inibição da germinação de sementes, diferenciação celular anormal e redução do crescimento das plantas. Nas análises de atividade alelopática, foi observado que a Lactuca sativa apresentou uma maior queda na porcentagem de germinação e aumento mais expressivo do índice de alelopatia, quando comparada ao Allium cepa, na concentração de 0,004mg/mL de teor de cumarina no extrato. No entanto, para o ensaio com nanodispersão, foi evidenciado que, em ambos os organismos testes, houve uma queda significativa da germinação e/ou inibição da germinação, quando comparada ao controle, proporcionando maior atividade alelopática. Quanto à atividade mutagênica, em tratamento contínuo, a CuP promoveu um maior efeito clastogênico, indicando que a cumarina isolada promove mais danos à célula vegetal do que quando associada a outros compostos presentes no extrato de guaco. No tratamento descontínuo do extrato, foi possível verificar que, tanto para 24h, 48h, quanto para o tratamento da Recuperação, houve uma queda do índice mitótico. No tratamento de 24h, a concentração de 0,001mg/mL apresentou efeito clastogênico, quando comparada ao controle negativo. Palavras-chave: Prótons Mutagenicidade Alelopatia Allium cepa

Identification of common bean resistant sources to angular leaf spot disease in a brazilian germplasm collection.

The aim of this study was to identify sources of resistance in the germplasm collection providing information of potential sources of resistance to introduce in breeding programs

On singular Lagrangians affine in velocities

The properties of Lagrangians affine in velocities are analyzed in a geometric way. These systems are necessarily singular and exhibit, in general, gauge invariance. The analysis of constraint functions and gauge symmetry leads us to a complete classification of such Lagrangians.Comment: AMSTeX, 22 page

Entre a cordilheira e o mar: exploração e evangelização jesuítica no Chile

This article analyzes a series of incursions carried out by Jesuit missionaries in areas that are presently part of the Chilean territory. Several writings that resulted from these incursions provide information on the practices of evangelism and territorial exploration implemented by the Jesuits. Key words: Chile, Jesuits, missions, Indians, texts.Este artigo analisa um conjunto de incursões realizadas por missionários da Companhia de Jesus em áreas que hoje compreendem o território chileno, e das quais resultaram diversos escritos que permitem uma aproximação com as práticas de evangelização e exploração territorial levadas a cabo pelos inacianos. Palavras-chave: Chile, jesuítas, missões, índios, textos

Entre a cordilheira e o mar: exploração e evangelização jesuítica no Chile

This article analyzes a series of incursions carried out by Jesuit missionaries in areas that are presently part of the Chilean territory. Several writings that resulted from these incursions provide information on the practices of evangelism and territorial exploration implemented by the Jesuits. Key words: Chile, Jesuits, missions, Indians, texts.Este artigo analisa um conjunto de incursões realizadas por missionários da Companhia de Jesus em áreas que hoje compreendem o território chileno, e das quais resultaram diversos escritos que permitem uma aproximação com as práticas de evangelização e exploração territorial levadas a cabo pelos inacianos. Palavras-chave: Chile, jesuítas, missões, índios, textos

A utilização de óleo de palma como componente do biodiesel na Amazônia.

bitstream/item/27700/1/com.tec.103.pd

Sustainability indicators in cooperative management of recyclable materials

Following the promulgation of the National Solid Waste Policy in 2010, legal provisions, government programs and sectoral agreements have been implemented, but without the expected efficiency in relation to recycling. It should be noted that Cooperatives of Recyclable Material Pickers (CRMP) should play a leading role in this regard, but they do not have adequate management to be economically, socially and environmentally sustainable, depending on assistance to maintain the activity. Aiming to elucidate this issue, in this paper was made an institutional diagnosis of the category of waste pickers using the Gramacho region in the city of Duque de Caxias (Rio de Janeiro) as a case study. It was carried out an evaluation of the historical context of the neighbourhood, and it was drawn up a semi-structured questionnaire in 12 of the 18 cooperatives in the region. The data were interpreted through a SWOT matrix and the Venn diagram. A matrix was proposed and elaborated with 15 sustainability indicators specific to the CRMC reality in order to evaluate and monitor the management of cooperatives. After collecting the primary data, it was possible to validate the matrix of indicators with indexes of cultural, economic, political and ecological sustainability of the cooperatives. It was found that the matrix of indicators facilitated the understanding of the data and the comparison between the indicators. This tool can help decision-making, creation of action plans and identification of demands by the cooperative waste pickers themselves, without the presence of an analyst or technician

Symplectic Quantization of Open Strings and Noncommutativity in Branes

We show how to translate boundary conditions into constraints in the symplectic quantization method by an appropriate choice of generalized variables. This way the symplectic quantization of an open string attached to a brane in the presence of an antisymmetric background field reproduces the non commutativity of the brane coordinates.Comment: We included a comparison with previous results obtained from Dirac quantization, emphasizing the fact that in the symplectic case the boundary conditions, that lead to the non commutativity, show up from the direct application of the standard method. Version to appear in Phys. Rev.