Efecto del lipopolisacárido en cultivos de células dendríticas humanas y su inhibición por la polimixina B.

Dendritic cells have been described as effective antigen presenting cells. Human dentritic cells are highly susceptible to lipopolysaccharide (LPS) tolerance, consisting of a differential deactivation state in which some cellular functions are impaired. LPS tolerance can be experimentally induced in vitro, in which the presence of LPS strongly affects the behavior of cultured dendritic cells. Recombinant proteins obtained from bacterial systems or protein extracts of ectoparasites containing LPS can be used as stimuli to enhance maturation processes in these cells. The present study evaluated the effect of LPS in human dendritic cell cultures, and the activity of polymyxin B as an inhibitor of the LPS effect. Dendritic cells were obtained from peripheral blood monocytes in the presence of IL-4 and GM-CSF, followed by exposure with LPS and PGE2/TNFalpha. Surface markers and cytokine levels were evaluated by flow cytometry. The dendritic cells pre-exposed to single doses of endotoxin demonstrated a reduced capacity to mature, reduced CD83 expression, inhibited secretion of IL-12, TNFalpha, IL-10 and diminished secretion of IL-6. Furthermore, polymyxin B at 10 mg/ml inhibits LPS activity at 1 mg/ml. The maximum polymyxin B concentration with no effect on cellular morphology was 50 mg/ml. Consequently, polymyxin B was determined to be an effective LPS inhibitor in dendritic cell cultures.Algunos estímulos de maduración utilizados en cultivos de células dendríticas, como las proteínas recombinantes obtenidas en sistemas bacterianos o los extractos proteicos de ectoparásitos, contienen lipopolisacáridos (LPS) y su presencia afecta el comportamiento de las células dendríticas en cultivo. En este trabajo se evaluó el efecto del LPS en un sistema de cultivo de células dendríticas humanas y la actividad de la polimixina B como inhibidor del efecto del LPS. Para esto, los monocitos obtenidos a partir de sangre periférica humana se diferenciaron a células dendríticas con IL-4 y GM-CSF y como estímulo de maduración se utilizó LPS o PGE2/FNT?. La expresión de marcadores y la secreción de citocinas se evaluaron por citometría de flujo. Los resultados mostraron que la preexposición a endotoxina disminuyó la expresión de CD83, inhibió la secreción de IL-12p70, FNT? e IL-10 y disminuyó la secreción de IL-6 en células dendríticas. Además, la utilización de 10 mg/ml de polimixina B fue efectiva en la inhibición de la actividad de 1 mg/ml de LPS y la máxima concentración de polimixina B que no afectó la morfología de las células fue de 50 mg/ml. En conclusión, la polimixina B es efectiva para inhibir la actividad del LPS en los cultivos de células dendríticas

Predictores de mortalidad en pacientes con infección por Covid 19

La pandemia causada por el SARS -CoV-2 y la enfermedad COVID-19, afecto a todos los sistemas de salud a nivel mundial los cuales se vieron superados en su capacidad de respuesta para dar atención a los pacientes que manifestaban signos y síntomas clínicos conocidos, pero con comportamiento atípico, que, de no atenderse a tiempo, condicionaban a una alta tasa de morbilidad y mortalidad. Transcurrido más de un año desde el inicio de la pandemia, el conocimiento generado del proceso de contención de la transmisibilidad y la atención de los pacientes con la enfermedad sintomática se ha mejorado considerablemente, permitiendo establecer factores de riesgo, medios diagnósticos y terapéuticos que disminuyen la presión sobre los sistemas de salud y ayudan a dar mejor manejo a los pacientes que la padecen. Objetivo: revisar en la literatura los factores de riesgo o condiciones patológicas que incidan en el desarrollo de morbilidad o mortalidad entre los pacientes con diagnóstico de COVID-19. Metodología: Se realiza una revisión narrativa de la literatura publicada desde el 01 de enero de 2020 al 31 de marzo 2021 sobre los factores de riesgo o condiciones patológicas que se asocian a mayor morbimortalidad en pacientes con infección por COVID-19. Resultados: en los pacientes masculinos, la población mayor de 65 años se observa aumento de la mortalidad, así como personas con más de dos patologías crónicas (hipertensión arterial, diabetes mellitus tipo 2, obesidad), así como un mayor número de complicaciones severas y como fin último la muerte. Conclusión: deben realizarse estudios prospectivos que determinen la asociación directa entre la infección por COVID-19 y los factores de riesgo que predisponen a aumentar la morbimortalidad

La Ética del Cuidado como Fundamento Bioético del Cuidado Intensivo Pediátrico Centrado en la Familia

La Unidad de Cuidado Intensivo Pediátrico (UCIP) centraliza tecnología y recursos humanos especializados, lo que la hace extraña y amenazante. Una vez el niño ingresa a la Unidad, es separado abruptamente de sus padres y familia. Su cuidado natural es suplantado por un entorno frío y distante. Allí la mortalidad es opción de desenlace. Este entorno puede generar en los niños y sus familias un desorden de estrés postraumático, con la consecuente perturbación de los procesos de adaptación y reconstrucción familiar durante y después de la estancia en la unidad, fenómeno llamado síndrome post cuidado intensivo pediátrico. El modelo de Cuidado Intensivo Pediátrico Centrado en la Familia (CIPCF) reconoce el papel esencial de la familia y sus valores emocionales, sociales y culturales como restauradores y garantes de la salud y bienestar de los niños, mitigando así el impacto del síndrome

Actitudes de los estudiantes y propuesta alternativa para la enseñanza-aprendizaje de las ciencias naturales en las instituciones educativas de la ciudad de Neiva – Huila

This research evaluates how students’ attitudes towards Natural Sciences are, what is the relationship between these attitudes with factors such as gender, socioeconomic status, educational level and occupations of parents, and what is the impact of learning in this area on the daily life of schoolchildren, recognizing them as one of the bases to understand the processes of teaching / learning of Sciences in the city of Neiva, Huila. In view of the above, this is a qualitative research of social critical type due to it tries to understand the fast social transformations and assumes a critical perspective of the reality of the local context to respond to certain problems caused by these transformations; a Likert scale and a semi-structured interview were used. The results are presented in four sections: 1) Characterization through the Protocol of Attitudes related to Natural Sciences (PACN) that evaluated four categories: Teaching, Image, Social and Characteristics; 2) Relation of attitudes towards each of the factors above mentioned; 3) Recommendations given by the experts to the proposal and 4) Alternative proposal for the teaching / learning of Natural Sciences for the city of Neiva. A methodology is proposed in which processes of multidisciplinarity and interdisciplinarity are incorporated and contribute to the educational innovation, since, by achieving this synergy, better results can be generated, by the action field that is covered.Esta investigación evalúa cómo son las actitudes de los estudiantes hacia las Ciencias Naturales, qué relación existe entre dichas actitudes con factores tales como género, nivel socioeconómico, nivel educativo y ocupaciones de los padres, y cuál es el impacto de los aprendizajes de esta área en el diario vivir de los escolares, reconociéndolas como una de las bases para comprender los procesos de la enseñanza/aprendizaje de las Ciencias en la ciudad de Neiva, Huila. En vista de lo anterior, es una investigación cualitativa de tipo críticosocial porque se intenta comprender las rápidas transformaciones sociales y se asume una perspectiva crítica de la realidad del contexto local para responder a determinados problemas provocados por dichas transformaciones, en la que se utilizó una escala tipo Likert y una entrevista semiestructurada. Los resultados se presentan en cuatro secciones: 1) Caracterización a través del Protocolo de Actitudes relacionadas con las Ciencias Naturales (PACN) que evaluó cuatro categorías: Enseñanza, Imagen, Social y Características; 2) Relación de las actitudes frente a cada uno de los factores mencionados anteriormente; 3) Recomendaciones dadas por los expertos a la propuesta y 4) Propuesta alternativa para la enseñanza/aprendizaje de las Ciencias Naturales para la ciudad de Neiva. Se propone una metodología en que se incorporan procesos de multidisciplinariedad e interdisciplinariedad que contribuyen a la innovación educativa, ya que, al lograr esta sinergia, se pueden generar mejores resultados, por el campo de acción que se abarca

Generación de bloques en una red blockchain

El presente trabajo de grado consiste en un hardware especifico cuya función es minar una entrada de información de acuerdo a un número específico de ceros, de igual forma ingresados en la entrada del sistema. Las respuestas del sistema son validadas por un código de software que realiza exactamente la misma función que el sistema de hardware. Para manejar ambos sistemas de minado, hay una unidad de software de pre-procesamiento donde el usuario puede ingresar las entradas a través de una interfaz gráfica, y esta información llega a ambos sistemas. Además, hay una unidad de procesamiento posterior que obtiene y compara ambas salidas, para validar que son iguales y genera un informe que contiene el tiempo que ambos sistemas tomaron para realizar el proceso de minado.The project developed consists on a hardware which specific function is to mine an information input according to some specific number of zeroes, also specified in the input of the system. The system answers are validated by a software code that performs exactly the same function, in the same way the hardware system does. In order to handle both mining systems, there is a software unit of preprocessing where user can enter the inputs through an interface, and this information will reach both mining systems. In addition, there is a post-processing unit that will get and compare both outputs, to validate they are equal and it produces a report on it, containing the time both systems took to perform the mining process.Ingeniero (a) ElectrónicoPregrad

Perfil de respuesta inmunitaria de células T asociada a la protección frente a la re-infección por T. cruzi

Introducción: La enfermedad de Chagas representa un problema de salud pública global, que en su fase crónica implica un alto coste para el sistema de salud y a nivel laboral. No existe un tratamiento antiparasitario efectivo que produzca el aclaramiento del parásito y es escaso el conocimiento sobre los mecanismos que operan en protección. Así, el estudio de la dinámica de las poblaciones de linfocitos T asociados a protección permitirá nuevas aproximaciones terapéuticas. Objetivos: Analizar los procesos de primo- y re-infección con distintas cepas de T. cruzi en un modelo murino de infección experimental al objeto de determinar los patrones inmunológicos a activar para la obtención de una eficaz inmunoterapia frente al Chagas crónico. Materiales y Métodos: Infección experimental con T. cruzi en ratones Balb/c por vía intraperitoneal (5x102 tripomastigotes (primo-infección); 5x105 y 1x105 (re-infección) cepas Y(DTU-II) y SOL(DTUV), respectivamente. Detección anticuerpos antígeno-específicos (IgG e IgG1/IgG2a) mediante ELISA. El análisis del fenotipo y funcionalidad de las células T antígeno-específicas se realizó empleando citometría de flujo multiparamétrica. Resultados: Ratones en fase crónica de la infección por T. cruzi controlan la parasitemia que induce la re-infección con dicho parásito. Este comportamiento está asociado a un claro perfil inmunológico caracterizado por una mayor proporción de células T CD4+ y CD8+ de memoria central (TCM) y efectora (TEM). Asimismo, los ratones re-infectados presentan mayor porcentaje de células T CD8+ multifuncionales que producen IFN-¿, Granzima B y TNF¿ y menor frecuencia de aquellas que expresan los receptores inhibitorios PD-1 y CD160. Las células T CD4+ de los ratones re-infectados muestran una mayor proporción de células que expresan PD-1 y CTLA-4. Conclusiones: Los ratones en fase crónica de infección por T.cruzi controla la re-infección por dicho parásito, asociada a la presencia de una alta frecuencia de células T CD8+ antígeno-específicas de memoria con capacidad multifuncional. Financiación: Programa Estatal I+D+I (MINECO) Ref. SAF2016-81003R y SAF2016- SAF2016-80996-R; Red de Investigación en Enfermedades Tropicales (RICET) Ref. RD16/0027/0005, (ISCIII), España

Comparación de la resistencia equivalente a la flexión entre las fibras de acero Wirand producidas en Italia y las producidas en Perú

En el presente trabajo se busca obtener el valor Re3, para 3 dosificaciones de concreto (210, 245 y 280 kg/cm2) por dosificación de fibra (20 y 25kg/m3) para cada tipo de fibra Wirand FF1 Y FF3.Tesi

Diseño de un panel multicolor para evaluar moléculas intracelulares y de superficie mediante citometría de flujo

Introduction: Flow cytometry allows simultaneous detection of surface and intracellular molecules on each cell.Objective: To describe a method for building up a harmonic multicolor panel with 11 flow cytometry parameters for phenotypic and functional analysis on CD8+ T lymphocytes.Materials and methods: For the multicolor panel construction, we selected the molecules and titred conjugated antibodies with fluorochromes for CD3, CD8, CCR7, CD28, CD27, CD45RA, CD95 and CD127 determination in peripheral blood mononuclear cells (PBMC). To evaluate the panel, theconjugated antibodies were gradually added one by one and fluorescence minus one (FMO) test was performed. This method was applied to assess ex vivo subpopulations of T cells and the production of intracellular IFNγ, IL-2 and TNFα using polyclonal stimulation with enterotoxin B from Staphylococcus aureus (SEB) and antigen-specific cells with crude Trypanosoma cruzi antigen. Finally, the ex vivo CD8+ T lymphocyte subpopulations frequencies were analyzed in healthy individuals.Results: The evaluation of the selected molecules and conjugates did not show interference in the fluorescence signals and detection. The frequencies of CD8+ T cells evaluated were similar to the values reported in other studies. Additionally, we observed that the frequency of CD8+ T lymphocytes producing IFNγ, IL-2 and TNFα was higher 6 hours after culture with SEB and crude T. cruzi lysate.Conclusions: The method used for the construction of a multicolor panel allows obtaining frequencies of CD8+ T lymphocyte subpopulations corresponding to those reported in the literature.doi: http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v33i4.1709Introducción. La citometría de flujo permite detectar la presencia de moléculas intracelulares y de superficie, de forma simultánea sobre cada célula.Objetivo. Describir un método para la construcción armónica de un panel multicolor con 11 parámetros para el análisis fenotípico y funcional de linfocitos T (LT) CD8+ por citometría de flujo.Materiales y métodos. Para la construcción del panel multicolor, se seleccionaron las moléculas y se titularon los conjugados con fluorocromos para la determinación de CD3, CD8, CCR7, CD28, CD27,CD45RA, CD95 y CD127, en células mononucleares de sangre periférica. Para la evaluación del panel, se hizo la construcción progresiva adicionando uno a uno los conjugados y la fluorescencia menos uno (FMO). Este método fue aplicado para células ex vivo y para evaluar la producción de IFNγ, IL-2 y TNFα frente al estímulo con la enterotoxina B de Staphylococcus aureus (SEB) y al antígeno crudo de Trypanosoma cruzi. Finalmente, se procedió al análisis de las subpoblaciones de LT CD8+ exvivo en individuos sanos.Resultados. La evaluación de las moléculas con los conjugados no mostró interferencia en las señales de fluorescencia. Las frecuencias de las subpoblaciones de LT CD8+ evaluadas fueron cercanas a los valores reportados en otros estudios. Además, se observó que la frecuencia de LT CD8+ productores de IFNγ, IL-2 y TNFα fue mayor a las seis horas de cultivo con SEB y con el antígeno crudo de T. cruzi.Conclusiones. El método aplicado para la construcción del panel multicolor permite obtener frecuencias de las subpoblaciones de LT CD8+ que corresponden a lo reportado en la literatura científica. doi: http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v33i4.1709

Differential Th1/Th2 balance in peripheral blood lymphocytes from patients suffering from flea bite-induced papular urticaria

Q4Q2Artículo original7-10Background: The Th1/Th2 balance has not been characterized in patients suffering from flea bite-induced papular urticaria (FBPU). Our aim was to improve understanding of the immunopathogenesis of CD4+ and CD8+ T-cells in humans suffering from flea bite-induced papular urticaria. Methods: Peripheral blood mononuclear cells were obtained from 18 pediatric patients and 10 age-matched healthy controls. Cellular phenotypes, intracellular production of interferon gamma (IFN) and interleukin-4 (IL-4) in T-cells stimulated with polyclonal stimuli was determined by fl ow cytometry following short-term in vitro stimulation. Results: The results revealed lower frequencies of IFN-secreting (p = 0.02) and higher frequencies of IL-4-secreting (p = 0.03) CD4+ T-cells in patient lymphocyte cultures compared to healthy control cultures in the presence of polyclonal stimuli. This is the first description of differential cytokine patterns in papular urticaria patients. Conclusion: Patients suffering from papular urticaria have an atopic status compared to healthy children