TGF-β1 induces activation of HSC-T6 cells and epithelial-mesenchymal transition in rats

目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）在大鼠肝星状细胞系（HSC-T6）活化及上皮间质转换（EMT）中的作用。方法体外培养HSC-T6，用MTT法筛选TGF-β1对HSC-T6作用的最佳浓度；用10μg／L TGF-β1处理HSC-T624h，相差倒置显微镜下观察细胞形态改变，免疫荧光染色法检测细胞骨架结构F-actin蛋白的表达，RT-qPCR法检测肌动蛋白α-SMA及代表上皮间质转换的神经黏附素（N-cadherin）、波形蛋白（vimentin）和上皮黏附素（E-cadherin）基因表达；用不同浓度（0、5和10μg/L）的TGF-β1处理HSC-T624h，Western blot检测α-SMA、N-cadherin、vimentin和E-cadherin蛋白表达。结果10μg/L TGF-β1干预HSC-T624h有最好的细胞存活率；TGF-β1刺激HSC-T6后，细胞拉伸，伪足增多呈星形，细胞间连接疏松，呈显著活化状态；F-actin聚集形成应力纤维丝，沿细胞长轴分布；实验组α-SMA mRNA及vimentin mRNA的表达量明显高于对照组（P〈0．05），而E-cadherin mRNA的表达量明显降低（P〈0．05）；在不同浓度的TGF-β1呈剂量依赖性致α-SMA及N-cadherin和vimentin的蛋白表达量增多，而E-cadherin的蛋白表达量减少。结论TGF-β1可诱导HSC-T6活化及上皮间质转换。Objective To observe the effect of TGF-β1 on activation and epithelial mesenchymal transition （EMT） in rat hepatic stellate cell-T6. Methods Adopt the MTT method to screen the optimum concentration of TGF-β1 in vitro HSC-T6 cultured. After the HSC-T6 stimulation by TGF-β1 of 10 μg/L for 24 hours, the morphology of the cells was observed under inverted phase contrast microscope, the expression of F-actin which on behalf of cotoskeletal structure was detected by immunofluorescence staining; the expression of α-SMA and N-cadherin, vimentin, E-eadherin was measured by RT-qPCR ; The changes of α-SMA, N-cadherin, vimentin and E-eadherin were assessed by Western blot after different concentrations （0,5 and 10 μg/L） of TGF-β1 interventing HSC-T6 for 24 h. Results The optimal cell survival rate was recorded when 10 μg/L TGF-β1 dealt with cells for 24 h. After HSC-T6 were treated with TGF-β1 ,cells stretched, pseudopodia increased and turn into stellate, ceils connections were looser, so that represented a significantly activated state. F-actin filaments gathered to form stress and distributed along the long axis of the cells ; The expression of α-SMA mRNA and vimentin mRNA in experimental group was significantly higher while E-cadherin mRNA was obviously lower than the control group （P〈 0. 05）. TGF-β1 made the protein expression of α-SMA and N-cadherin, vimentin in dose-dependent increased while E-cadherin was decreased.Conclusions TGF-β1 may induce activation and epithelial-mesenchymal transition of HSC-T6.福建省科技计划（2015Y01010224）;福州市科技计划（2014-S-137-1

砌体防倒塌钢桁架加固方法研究

上世纪后30年,我国建造了大量砌体结构,而现用中小学校舍占有其中相当的比例。对于砌体结构的改造与加固在现时代仍具有十分重要的意义。本文提出了一种利用钢桁架对砌体结构进行防倒塌加固的方法,包括计算假定以及设计理论,并且给出了该加固方法的设计流程。分析表明,防倒塌钢桁架加固方法,在提高结构系统的安全储备方面可以发挥重要作用,是一种经济可行的对砌体结构加固的新方法

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羊水栓塞（amniotic fluid embolism,AFE）,亦称为妊娠过敏样综合征,是指在分娩过程中羊水物质进入母体血循环引起的栓塞、休克、DIC等一系列严重症状的综合征,是产科少见而极其凶险的并发症,严重威胁母婴安全,也是孕产妇死亡的重要原因之一。目前,关于羊水栓塞的案例并不少见,但本例并未构成真正意义的“栓塞”,仅少量羊水入血即引起较为严重的过敏和DIC而导致产妇死亡,此类病例较为少见

Measurement Method of Logical Gate in Bulk Spin Quantum Computer

提出一种核磁共振量子计算机两量子位逻辑门测量的方案。该方案通过设置适当的标记量子位可显著缩减测量所需输入态数目,给出量子门和具体输入状态集合的实验脉冲序列。包含较少J偶合演化的脉冲序列设计可有效减少操作时间,削弱环境对量子系统的退相干影响。A scheme of measuring two-qubit logical gate is proposed based on nuclear magnetic resonance,which includes the specific input states and complete pulse sequences.In comparison with the approach not using ancillary qubit,this method remarkably reduces the number of the inputs at the cost of flag qubit resource.The pulse sequence with fewer J-coupling evolution can effectively shorten the experiment time and weaken the quantum system decoherence effect by environment.福建省自然科学基金(2008J0219;2009J05152

戊型肝炎病毒颗粒性蛋白疫苗H-2~d限制性Th表位的筛选

戊型肝炎病毒衣壳蛋白重组抗原HEV 239能形成类病毒颗粒,具备演变成多价疫苗的载体的潜力,此文旨在筛选、鉴定其内包含的H-2d限制性Th表位。以50μg HEV 239蛋白与完全弗式佐剂混合后皮下免疫BALB/c鼠,以覆盖HEV 239蛋白全长的15氨基酸肽库体外刺激其脾细胞,用IFN--γELISPOT方法检测其细胞免疫应答,并通过磁珠剔除脾细胞中CD4+T细胞或CD8+T细胞以分析筛选得到的T细胞表位的特性。结果显示:HEV 239中包含优势的T细胞表位P34(HEV PORF2 AA533~AA547,HSKTF FVLPL RGKLS)及数个较弱的T细胞表位,P34对HEV 239免疫的BALB/c鼠脾细胞的刺激效果与HEV 239蛋白相当,剔除实验表明该表位为CD4+T细胞表位,即Th表位

戊肝病毒Th表位肽免疫可增强其载体蛋白的体液免疫应答

戊型肝炎病毒衣壳蛋白内包含一个强H-2d限制性Th表位P34。以该表位肽免疫BALB/c鼠,其脾细胞能够在体外识别重组戊型肝炎病毒衣壳蛋白,剔除实验表明应答细胞几乎完全是CD4+T细胞,证明P34表位肽能有效诱导产生特异性Th细胞。以P34肽初免小鼠,再以包含该表位的重组戊型肝炎病毒抗原(E2)免疫,结果表明,10μg、20μgE2免疫组在免疫后第1周即有部分小鼠产生抗体,到第3周所有小鼠均能够产生抗体;而对照肽P18初免的小鼠,以20μgE2加强免疫亦无法诱导小鼠产生抗体。这表明,Th表位肽P34初免诱导产生的Th细胞能够有效促进小鼠对携带该表位的载体蛋白的体液免疫应答

SARS冠状病毒核衣壳(N)蛋白不同区域的原核表达

利用大肠杆菌表达系统对SARS冠状病毒的核衣壳(N)蛋白全长及N末端或/和C末端缺失突变体进行了表达,共表达了39个重组蛋白,表达量在15%～30%之间。分别利用电洗脱或金属鳌合介质纯化重组蛋白,用蛋白印迹实验检测纯化蛋白对SARS病人恢复期血清的反应性,结果发现全长N蛋白活性最好,其余的末端缺失蛋白均无法达到同一活性水平。由此说明N蛋白的完整性对于其优势表位的充分暴露是必要的

传染性非典型肺炎病毒核蛋白的表达与活性检测

用PCR方法,人工合成传染性非典型肺炎病毒(SARS-CoV)核蛋白(N)全编码基因,并构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达。结果重组N蛋白表达产量占菌体总蛋白的40％以上,主要以可溶形式存在。用SARS患者急性期血清进行蛋白印迹检测,表明可溶形式和包含体形式均有明显活性。包含体形式的重组蛋白经纯化后纯度可达90％以上,活性与纯化前相当,可作为SARS抗体诊断试剂盒的抗原原料

具有可调装置的斜齿插齿机主传动机构设计与分析

针对国产传统数控插齿机使用螺旋导轨加工斜齿轮存在的制造成本高,更换麻烦费时等问题,基于斜齿轮加工原理提出了实现附加转动和展成运动同步的机械结构,在现有数控插齿机上增加了一套可调装置,可使其不需更换螺旋导轨就可加工不同螺旋角的斜齿轮,并探讨了实现附加转动的具体方法。分析结果表明,该机构可满足不同螺旋角斜齿轮的插齿加工,能减少插齿加工辅助时间,使机床的效率和柔性得到提高

H.264在分层网络视频监控系统中的应用研究

随着数字图像压缩技术的发展,数字监控系统的应用已经成熟,基于数字图像压缩技术的视频监控系统得到了广泛应用。而数字监控系统也随着图像压缩技术的发展在更新换代,H.264是一种新近成熟的、高效的视频压缩标准,它有着比以往压缩标准压缩效率更高,更能适应网络的特点。在深入分析了H.264视频压缩技术的基础上,设计和实现了一套实用的分层网络视频监控系统