Structural Characterization of Serine Protease Complexes with Novel Inhibitors

Human Neutrophil Elastase (HNE) is a serine protease responsible for cleavage of peptide bonds conferring elasticity to the connecting tissues. For this reason, this enzyme is mainly found in the lungs, arteries and ligaments [1-2]. In case of over-expression, HNE enables the appearance of some diseases, such as Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD), Rheumatoid Arthritis, Psoriasis and Arteriosclerosis [3-4]. Currently, diseases affecting the respiratory tract are one of the major causes of death in the world, so HNE is a potential drug target of considerable interest [4]. Porcine Pancreatic Elastase (PPE) is commonly used as a model for HNE, sharing 37% of amino acid sequence identity [5]. According to previous studies, the catalytic serine performs a nucleophilic attack on a carbonyl group present in the inhibitors [6]. The focus of this work was the three-dimensional structure determination of elastases (PPE and HNE) in complex with inhibitors by X-ray crystallography to characterize their interactions at atomic level. The rational is to correlate structure and function and contribute to the design of more potent and specific inhibitors. These newly synthetic compounds were provided by the group of Prof. Rui Moreira, Instituto de Investigação do Medicamento, Faculdade de Farmácia, Universidade de Lisboa. X-ray diffraction data of PPE crystals were collected at a synchrotron source and three 3D-structures of PPE in complex with inhibitors were determined at resolutions around 1.4 Ǻ. Analysis of the electron density maps revealed that the nucleophilic attack occurred at the sulfonyl group of the inhibitors, contrary to what was initially expected (which would be in the carbonyl group). In silico energy minimization studies of the docked ligand structure into the active site of HNE, show no relevant structural modifications of the protein structure upon ligand binding. Finally, crystals of HNE have already been obtained and experiments are ongoing to grow complexes of HNE with various inhibitors. References: [1] A. Thomson and S. B. Kapadia, “The specificity of the S1 and S2 subsites of elastase,” Eur. J. Biochem., vol. 102, pp. 111–116, 1979. [2] Z. Werb, M. J. Banda, J. H. McKerrow, and R. A. Sandhaus, “Elastases and elastin degradation.,” J. Invest. Dermatol., vol. 79 Suppl 1, p. 154s–159s, Jul. 1982. [3] E. F. P. Ruivo, L. M. Gonåalves, L. A. R. Carvalho, R. C. Guedes, S. Hofbauer, J. A. Brito, M. Archer, R. Moreira, and S. D. Lucas, “Clickable 4-Oxo- b -lactam-Based Selective Probing for Human Neutrophil Elastase Related Proteomes,” pp. 1–7, 2016. [4] L. R. P. Areias, E. F. P. Ruivo, M. T. Duarte, R. Moreira, S. D. Lucas, and R. C. Guedes, “RSC Advances PAPER A uni fi ed approach toward the rational design of selective low nanomolar human neutrophil elastase,” pp. 51717–51721, 2015. [5] “Uniprot.” [Online]. Available: http://www.uniprot.org/. [Accessed: 16-Aug-2017]. [6] W. Huang, Y. Yamamoto, Y. Li, D. Dou, K. R. Alliston, R. P. Hanzlik, T. D. Williams, and W. C. Groutas, “X-ray Snapshot of the Mechanism of Inactivation of Human Neutrophil Elastase by 1,2,5-Thiadiazolidin-3-one 1,1-Dioxide Derivatives.,” Society, pp. 2003–2008, 2008.Elastase Neutrófila Humana (HNE) é uma protease de serina responsável pela clivagem das ligações peptídicas que conferem elasticidade aos tecidos de conexão. Por esta razão, esta enzima é encontrada principalmente nos pulmões, artérias e ligamentos [1-2]. Em casos de sobre-expressão, esta permite o aparecimento de algumas doenças, como Doença Pulmonar Obstrutiva Crónica (DPOC), Artrite Reumatóide, Psoríase e Arteriosclerose [3-4]. Atualmente, as doenças que afetam o trato respiratório são uma das principais causas de morte no mundo, sendo então a HNE um potencial alvo terapêutico de considerável interesse [4]. A Elastase Pancreática Suína (PPE) é normalmente usada como modelo para HNE, compartilhando 37% de identidade de sequência primária [5]. De acordo com estudos anteriores, a serina catalítica realiza um ataque nucleofílico ao grupo carbonilo presente nos inibidores [6]. O foco deste trabalho foi a determinação por cristalografia de raios-X da estrutura tridimensional de elastases (HNE e PPE) complexadas com inibidores, de modo a caracterizar as respetivas interações a nível atómico. O racional é correlacionar a estrutura com a função e contribuir para o desenho de inibidores mais fortes e mais específicos. Estes novos compostos sintéticos foram fornecidos pelo grupo do Prof. Rui Moreira, Instituto de Investigação do Medicamento, Faculdade de Farmácia, Universidade de Lisboa. Os dados de difração de raios-X dos cristais de PPE foram recolhidos numa fonte de sincrotrão e três estruturas 3D de três complexos da PPE com inibidores foram determinadas com resoluções em torno dos 1,4 Å. A análise dos mapas de densidade eletrónica revelaram que o ataque nucleofílico ocorreu no grupo sulfonilo dos inibidores ao contrário do que era inicialmente esperado (que seria no grupo carbonilo). A minimização de energia in silico da estrutura do ligando acoplado no centro ativo da HNE não mostra modificações relevantes na estrutura da proteína após a ligação do ligando. Finalmente, já foram obtidos cristais de HNE, estando já em curso experiencias para o crescimento de cristais de complexos de HNE com vários inibidores. Referências: [1] A. Thomson and S. B. Kapadia, “The specificity of the S1 and S2 subsites of elastase,” Eur. J. Biochem., vol. 102, pp. 111–116, 1979. [2] Z. Werb, M. J. Banda, J. H. McKerrow, and R. A. Sandhaus, “Elastases and elastin degradation.,” J. Invest. Dermatol., vol. 79 Suppl 1, p. 154s–159s, Jul. 1982. [3] E. F. P. Ruivo, L. M. Gonåalves, L. A. R. Carvalho, R. C. Guedes, S. Hofbauer, J. A. Brito, M. Archer, R. Moreira, and S. D. Lucas, “Clickable 4-Oxo- b -lactam-Based Selective Probing for Human Neutrophil Elastase Related Proteomes,” pp. 1–7, 2016. [4] L. R. P. Areias, E. F. P. Ruivo, M. T. Duarte, R. Moreira, S. D. Lucas, and R. C. Guedes, “RSC Advances PAPER A uni fi ed approach toward the rational design of selective low nanomolar human neutrophil elastase,” pp. 51717–51721, 2015. [5] “Uniprot.” [Online]. Available: http://www.uniprot.org/. [Accessed: 16-Aug-2017]. [6] W. Huang, Y. Yamamoto, Y. Li, D. Dou, K. R. Alliston, R. P. Hanzlik, T. D. Williams, and W. C. Groutas, “X-ray Snapshot of the Mechanism of Inactivation of Human Neutrophil Elastase by 1,2,5-Thiadiazolidin-3-one 1,1-Dioxide Derivatives.,” Society, pp. 2003–2008, 2008

APFELSTRUDEL, 80 CAMADAS DA MAIS FINA MASSA FOLHEADA DE MÚLTIPLOS EUS: UMA HOMENAGEM A CLAUDIO WILLER

O presente ensaio é uma homenagem ao poeta, ensaísta e tradutor paulistano Claudio Willer que, em dezembro de 2020, completou 80 anos. Por meio de um diálogo entre seus textos em prosa, alguns poemas e sua fortuna crítica, far-se-á um exame de sua trajetória, iniciada em meados da década de 1960. De matriz surrealista, sua atuação se dá, sobretudo, numa atitude que entrelaça sua produção com um modo de vida que, por sua vez, se desdobra nessa produção. O poeta absorve, em sua prática, uma concepção da literatura livre do cerceamento da razão e aberto à contemplação do caráter enigmático e mágico do universo. Nessa perspectiva, traduziu obras de autores importantes para os fundamentos do Surrealismo e da literatura beat. Partindo das considerações de Leila Perrone-Moisés, é possível compreender as múltiplas atuações de Willer, seu jogo profuso de Eus, poeta, tradutor e crítico teórico, com os mais diversos interlocutores, como componentes de um escopo necessário à vitalidade dos pressupostos surrealistas na atividade artística e literária do país. O entrecruzamento de suas ações sinaliza também a própria tessitura da intertextualidade de sua poesia, seu recurso mais radical. Afinal, antiaristotélico pelo avesso, a palavra poética é, para Willer, agente mágico que produz realidade.This essay is a tribute to the São Paulo’s poet, essayist and translator Claudio Willer who, in December 2020, completed 80 years. Through a dialogue among his prose texts, some poems and critical fortune, an examination of his trajectory, which began in the mid-1960s, will be carried out. In a surrealistic matrix, his procedure takes place, above all, in an attitude that intertwines his production with a way of life that, in turn, unfolds in this production. In his practice, the poet absorbs a conception of literature free from the restriction of reason and open to contemplation of the enigmatic and magical character of the universe. In this perspective, he translated works by important foundation authors of Surrealism and Beat literature. Based on the considerations of Leila Perrone-Moisés, it is possible to understand the multiple actions of Willer – his profuse game of selves, poet, translator and theoretical critic, with the most diverse interlocutors – as components of a scope necessary for the vitality of the surrealistic assumptions in the brazilian artistic and literary activity. The intersection of his actions also signals the intertextuality very tessiture of his poetry – his most radical resource. After all, an anti aristotelian inside out, the poetic word is, for Willer, a magical agent that produces reality

Questão sociocientífica: uma estratégia para o desenvolvimento da argumentação em aulas de química

This work aims to analyze how a socio-scientific question can enable the development of argumentation in Chemistry classes. For this, a socio-scientific question on “food supplementation” was applied to students of the 3rd year of high school in a public school in Pernambuco, Brazil. The research is qualitative and the methodological procedures adopted were: Elaboration and Development of the Socio-scientific Question and Data Analysis. The results show that the use of the socio-scientific question Food Supplementation establishes a favorable context for the emergence of argumentation processes in the classroom. In students' discursive actions, social and scientific arguments were identified. The confrontation of ideas brought about by the socio-scientific question evidenced from the emergence of argumentative situations enables the development of school chemical knowledge, also contributing to a more critical and reflective training of students.Este trabajo tiene como objetivo analizar cómo el proceso de resolución de un problema socio-científico facilita el desarrollo de la argumentación en las clases de Química. Para esto, se aplicó una pregunta sociocientífica sobre la “suplementación alimentícia”, a los estudiantes del tercer año de secundaria en una escuela pública de Pernambuco, Brasil. La investigación es de naturaleza cualitativa y los procedimientos metodológicos adoptados fueron: Elaboración y Desarrollo de la Pregunta Sociocientífica y Análisis de Datos. Los resultados muestran que el uso de la pregunta sociocientífica propicia un contexto favorable para el surgimiento de procesos de argumentación en el aula. En las acciones discursivas de los estudiantes, se identificaron argumentos sociales y científicos. La confrontación de ideas provocada por la cuestión sociocientífica, evidenciada por las situaciones argumentativas que se dieron, permite el desarrollo del conocimiento químico escolar, contribuyendo también a una formación más crítica y reflexiva de los estudiantes.Objetivamos analisar como o processo de resolução de uma questão sociocientífica pode possibilitar o desenvolvimento da argumentação e de sua natureza em aulas de Química. Para isso, foi aplicada uma questão sociocientífica sobre “suplementação alimentar” para alunos do 3º ano do ensino médio de uma escola pública de Pernambuco, Brasil. A pesquisa é de natureza qualitativa e os procedimentos metodológicos adotados foram: Elaboração e Desenvolvimento da Questão Sociocientífica e Análise dos Dados. Os resultados apontam que o uso da questão sociocientífica Suplementação Alimentar estabelece um contexto favorável para a emergência de processos de argumentação em sala de aula. Nas ações discursivas dos alunos foi identificada a argumentação de natureza social e científica. O confronto de ideias propiciado pela questão sociocientífica, evidenciado a partir da emergência de situações argumentativas, possibilita o desenvolvimento do conhecimento químico escolar, contribuindo também para uma formação mais crítica e reflexiva dos alunos

CRISE PETROLÍFERA E O DESCASO FERROVIÁRIO: DA DEPENDÊNCIA AO COLAPSO

O presente artigo trata da problemática da crise petrolífera e da omissão brasileira no que diz respeito as malhas ferroviárias do país como uma alternativa para a agilizar e baratear os custos de transporte. Utilizou-se de metodologia bibliográfica e exploratória, objetivando explanar a Greve dos Caminhoneiros e suas consequências tanto dentro da sociedade quanto no ordenamento jurídico que a rege, no qual se analisou leis concernentes como a Lei de Greve, CLT e Lei Antitruste. Dessa forma, foi possível abordar as malhas ferroviárias como uma opção para diminuir as importações de derivados do petróleo e assim diminuir os custos com o qual o governo arca, dando ênfase ao descaso com o qual essa opção bastante beneficente é tratada e destacando os diversos benefícios do investimento em ferrovias. Vale ressaltar que a referida pesquisa pautou-se nos mais variados pesquisadores, revistas e demais meios necessário

Envelhecer no olhar da pessoa idosa: uma análise a partir do software IRAMUTEQ / Aging in the elderly person’s: an analysis from the IRAMUTEQ software

O entendimento do processo de envelhecer precisa ser estudado a partir da própria pessoa idosa que o vivencia. Desse modo, o objetivo deste estudo foi compreender o fenômeno do envelhecer a partir da percepção e das experiências da pessoa idosa. Trata-se de uma pesquisa qualitativa e exploratória, para a qual foi utilizado o método do estudo de caso. A amostra da pesquisa foi constituída por 40 idosos participantes de grupo de terceira idade em Viçosa, Minas Gerais, Brasil. Utilizou-se a entrevista como método de pesquisa, sendo que essas foram analisadas pelo software IRAMUTEQ. Os resultados evidenciaram que as palavras mais citadas pelos idosos para explicar o significado da velhice foram “não; ficar; bom; Deus; gente; viver”. Essas palavras permitiram significar o envelhecimento dentro de aspectos positivos e negativos. Ao final, foi possível concluir que o processo de envelhecer não é único, mas relativo e subjetivo; e dependente do percurso e curso de vida dos sujeitos para viver essa etapa da vida

Envelhecer no olhar da pessoa idosa: uma análise a partir do software IRAMUTEQ / Aging in the elderly person’s: an analysis from the IRAMUTEQ software

O entendimento do processo de envelhecer precisa ser estudado a partir da própria pessoa idosa que o vivencia. Desse modo, o objetivo deste estudo foi compreender o fenômeno do envelhecer a partir da percepção e das experiências da pessoa idosa. Trata-se de uma pesquisa qualitativa e exploratória, para a qual foi utilizado o método do estudo de caso. A amostra da pesquisa foi constituída por 40 idosos participantes de grupo de terceira idade em Viçosa, Minas Gerais, Brasil. Utilizou-se a entrevista como método de pesquisa, sendo que essas foram analisadas pelo software IRAMUTEQ. Os resultados evidenciaram que as palavras mais citadas pelos idosos para explicar o significado da velhice foram “não; ficar; bom; Deus; gente; viver”. Essas palavras permitiram significar o envelhecimento dentro de aspectos positivos e negativos. Ao final, foi possível concluir que o processo de envelhecer não é único, mas relativo e subjetivo; e dependente do percurso e curso de vida dos sujeitos para viver essa etapa da vida

El impacto económico de la huelga de los camioneros: un análisis jurídico, fáctico y económico de los acontecimientos

O presente trabalho visou levantar, através de revisão de literatura, os principais pontos econômicos desencadeados pelo fenômeno das manifestações dos caminhoneiros nas rodovias federais e estaduais do Brasil. Ao aparato geral, objetiva-se pela fragmentação das informações políticas e econômicas acerca da crise diesel. Logo, visou-se sintetizar os dados das perdas mais relevantes que expressem com maior clareza a resultante do movimento social mais expressivo no primeiro semestre de 2017 através de uma pesquisa de natureza descritiva. Diante disso, objetiva-se compreender o impacto gerado pela paralisação na economia do Brasil, assim como, tem-se a possibilidade de criar um parâmetro às dimensões socioeconômicas desencadeada por fenômenos dessa natureza, com perdas que podem variar entre R$75 bilhões a R$ 100 bilhões.The present work aimed to raise, through a literature review, the main economic points triggered by the phenomenon of truck drivers' manifestations on federal and state highways in Brazil. To the general apparatus, it is objectified by the fragmentation of the political and economic information about the diesel crisis. Therefore, it was intended to synthesize the data of the most relevant losses that express with greater clarity the result of the most expressive social movement in the first half of 2017 through a research of a descriptive nature. The objective is to understand the impact generated by the economic downturn in Brazil, as well as the possibility of creating a parameter to socioeconomic dimensions triggered by phenomena of this nature, with losses ranging from R $75 billion to R$ 100 billion.El presente trabajo pretendía levantar, a través de revisión de literatura, los principales puntos económicos desencadenados por el fenómeno de las manifestaciones de los camioneros en las carreteras federales y estatales de Brasil. Al aparato general, se objetiva por la fragmentación de las informaciones políticas y económicas acerca de la crisis diesel. Por lo tanto, se pretendió sintetizar los datos de las pérdidas más relevantes que expresen con mayor claridad la resultante del movimiento social más expresivo en el primer semestre de 2017 a través de una investigación de naturaleza descriptiva. En este sentido, se pretende comprender el impacto generado por la paralización en la economía de Brasil, así como, se tiene la posibilidad de crear un parámetro a las dimensiones socioeconómicas desencadenadas por fenómenos de esa naturaleza, con pérdidas que pueden variar entre R $75 mil millones a R$ 100 mil millones

Episiotomia: o (des) conhecimento da puérpera / Episiotomy: the (un) knowledge of the puerperal woman

Introdução: A episiotomia é caracterizada como uma incisão cirúrgica realizada na região do períneo durante o final do segundo estágio do trabalho de parto com o intuito de ampliar o canal vaginal facilitando a saída do feto e prevenindo possíveis lacerações perineais graves. Objetivo: Descrever o conhecimento das puérperas sobre a prática da episiotomia. Metodologia: Trata-se de uma pesquisa do tipo exploratória descritiva com abordagem qualitativa. A pesquisa foi realizada em um Hospital Geral Filantrópico na cidade de Maceió, com 20 puérperas que foram submetidas à episiotomia. A coleta de dados foi realizada através de um questionário semiestruturado, durante o período de abril á maio de 2018. Resultados e discussões: A partir dos depoimentos evidenciou-se nesse estudo o desconhecimento das puérperas, sobre a prática da episiotomia. A falta de informação, orientação e consentimento prévio dessas mulheres para a realização da episiotomia foram aspectos relevantes encontrados nos discursos das entrevistadas, demonstrando o poder profissional na violação dos direitos sexuais e reprodutivos. Conclusão: É fato que ainda existe uma lacuna de conhecimento desta prática entre as gestantes, o que reforça a necessidade de orienta-las durante o pré-natal, e no momento do parto, no intuito de resgatar a autonomia da mulher e proporcionar uma assistência humanizada durante a fase de gestar e parir

Boas práticas de enfermagem na utilização de dreno de tórax: revisão integrativa

The aim was to identify in the scientific literature the best nursing practices related to the use of a chest tube in an adult Intensive Care Unit. This is an integrative review with consultation of the Latin American Caribbean Literature on Health Sciences, Nursing Database, Online Medical Literature Search and Analysis System, Scientific Electronic Library Online, PubMed, CINAHL and EBSCO. Studies published between January 2014 and December 2018 in English, Portuguese and Spanish and available in full of full texts are included. Those with pediatric patients and duplicities were excluded. 133 studies were identified that gave rise to five articles analyzed. Of the selected articles, 80% corresponded to international studies; 40% published in 2016 and 60% with quantitative analysis. The categories of good practices with chest tube, complications related to chest tube, and use of a care protocol related to chest tube emerged. Therefore, the use of care protocols in the use of chest tubes and evidence-based practices contribute to the improvement and quality of nursing care for these patients.Objetivou-se identificar na literatura científica as melhores práticas de enfermagem relacionadas a utilização de dreno torácico em Unidade de Terapia Intensiva adulta. Trata-se de uma revisão integrativa com consulta à Literatura Latino-Americana do Caribe em Ciências da Saúde, Base de Dados de Enfermagem, Sistema Online de Busca e Análise de Literatura Médica, Scientific Electronic Library Online, PubMed, CINAHL e EBSCO. Incluídos estudos publicados entre janeiro de 2014 a dezembro de 2018 nos idiomas inglês, português e espanhol e disponíveis na íntegra com textos completos. Excluídos aqueles com pacientes pediátricos e duplicidades. Foram identificados 133 estudos que deram origem a cinco artigos analisados. Dos artigos selecionados 80% corresponderam a estudos internacionais; 40% publicados em 2016 e 60% com análise quantitativa. Emergiram as categorias de boas práticas com dreno torácico, complicações relacionadas ao dreno torácico e uso de protocolo de cuidados relacionados ao dreno torácico. Portanto, a utilização de protocolos de assistência na utilização de drenos torácicos e práticas baseadas em evidências contribuem para a melhoria e qualidade da assistência de enfermagem a esses pacientes