The influence of Toll-like receptor 4 activation in human CD4 T cell function

Tese de mestrado, Ciências Biofarmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2019O sistema imunitário dos mamíferos evoluiu de forma a proteger o hospedeiro e eliminar organismos patogénicos enquanto simultaneamente evita uma resposta imune excessiva perante bactérias e organismos comensais. A disrupção do extraordinário equilíbrio dos mecanismos desta resposta resulta frequentemente em inflamação crónica ou doenças autoimunes. Uma melhor compreensão dos mecanismos que regulam a tolerância do sistema imune é então crucial para desenvolver terapias que permitam o controlo de reação exacerbadas em situações de doença autoimune. Os recetores do tipo Toll (TLRs) detetam padrões moleculares característicos de patógenos e contribuem para a rápida iniciação de uma complexa resposta imunitária. Apesar de terem sido intensivamente estudados pela sua expressão em células do sistema inato, estudos recentes mostram que os linfócitos T também expressam estes TLRs e que a sua expressão pode afetar diretamente as funções da célula. Os linfócitos T são um componente chave do sistema imune adaptativo e respondem à presença de patógenos libertando citoquinas que ditam o desfecho da resposta inflamatória. Em particular, resultados anteriores do nosso grupo demonstraram que as células T CD4 humanas expressam TLR4, o recetor que reconhece lipopolissacarídeos (LPS) provenientes de bactérias. No presente trabalho demonstramos que a ativação do TLR4 tem um impacto direto em células T CD4 humanas, sem a interferência de células do sistema inato. A estimulação crónica destas células com condições não-polarizantes do recetor das células T (TCR), juntamente com LPS, levou a um aumento da ativação, sobrevivência e da proliferação das mesmas. Adicionalmente, a mesma estimulação consegue ajudar a redirecionar as células T auxiliares para que estas expressem menores níveis de interferão gama, e maiores níveis das interleucinas 10 e 17. Além disto, também foram isoladas células T CD4 de amostras de fígado humano que expressavam simultaneamente marcadores de residência no tecido e TLR4. Esta observação preliminar pode indicar que as nossas observações anteriores se alarguem ainda a células que residem no tecido. Os nossos resultados apoiam a ideia de que uma ativação consistente do TLR4 em células T CD4, em resposta a bactérias comensais, levam à redirecção das células produtoras de IL-17 para um fenótipo mais tolerante. Esperamos assim que este projeto abra portas a novos estudos que se foquem no papel da ativação direta do TLR em linfócitos T e na sua contribuição para a tolerância no sistema imune.The mammalian immune system has evolved to provide protection from environmental threats, eliminating pathogenic organisms and toxins whilst avoiding an excessive response in the presence of commensal organisms and bacteria. The disruption of this perfectly balanced mechanism of immune responsiveness often results in chronic inflammation and autoimmune disease. A better comprehension of the mechanisms that regulate immune tolerance is thus crucial to develop therapies that allow us to control exacerbated reactions in autoimmune illness. Toll-like receptors (TLRs) detect conserved microbial patterns and largely contribute to the rapid initiation of the highly complex protective mechanism that is the immune response. Despite having been intensively studied for their expression and role in innate immune cells, recent evidence shows that T lymphocytes also express these receptors and that their expression may directly affect cell function. T lymphocytes are a key component of the adaptive arm of the immune system and respond to pathogen encounters by releasing cytokines that dictate the outcome of the inflammatory response. Particularly, previous data from our group has demonstrated that human CD4+ T cells express TLR4, the molecular sensor of bacterial liposaccharide (LPS). In the present work, we provide evidence that the activation of TLR4 has a direct impact in human CD4+ T cells, without interference from innate immune cells. The chronic stimulation of these cells with non-polarizing TCR stimulation and LPS leads to enhanced activation, survival and proliferation. Furthermore, the same stimulation re-directed helper T cells into expressing lower levels of the pro-inflammatory cytokine interferon-gamma, but it increased the production of interleukin (IL) 17 and the immunoregulatory IL-10. Additionally, we isolated CD4+ T cells from human liver samples that simultaneously expressed markers of tissue residency and TLR4, which may broaden these findings to tissue resident T cells. Our results support the view that a consistent activation of TLR4 in CD4+ T cells in response to commensal bacteria leads to re-direction of IL-17-producing cells to a more tolerogenic phenotype. These findings thus pave the way for new studies that focus on the role of direct TLR signaling in T cells and their contribution to immunotolerance.The studies developed in this thesis were performed at CEDOC-NMS/UNL – Centro de Estudos de Doenças Crónicas, NOVA Medical Schoo

Estudo de caracterização de adultos idosos dependentes de substâncias

Mestrado em Psicologia - Psicologia Clínica e da SaúdeO principal objetivo da presente dissertação é caracterizar os utentes ativos do CRIA, com 50 anos ou mais, sociodemográficamente; relativamente aos consumos e do ponto de vista clínico, comparando-os consoante o programa de tratamento de manutenção opióide em que se inserem. O crescente envelhecimento da população traz novos desafios, como o envelhecimento da população com perturbações pelo uso de substâncias (EMCDA, 2010). Este grupo tem estado a aumentar e espera-se que continue até pelo menos 2020 (Han, Gfroerer, Colliver, & Penne, 2009). Apesar disso, o desconhecimento do fenómeno é grande e são necessários mais estudos, especialmente devido às vulnerabilidades específicas desta faixa etária. Dos 102 utentes ativos, desta faixa etária, 71 reúnem as condições necessárias para participar no estudo e 42 realizaram a avaliação psicológica. A bateria de avaliação consistiu nos seguintes instrumentos: BSI, MOCA, IAFAI, GDS e WHOQOL-Bref e a análise de dados foi realizada através do SPSS – Versão 20. Foram encontradas diferenças significativas entre os dois programas de tratamento no MOCA, no WHOQOL-Bref (domínio 2 e 4) e no IAFAI (IE). Em todos esses casos o programa de manutenção com metadona obteve piores resultados clínicos que o programa de manutenção com buprenorfina. A amostra global diferiu significativamente da população normal no WHOQOL-Bref (domínio geral), obtendo piores resultados de qualidade de vida; e em alguns domínios do BSI, obtendo melhores resultados de sintomatologia psicológica. Apesar das diferenças encontradas, a amostra encontra-se melhor do que seria de esperar face ao contexto de vida em que se insere.The main goal of this dissertation is to characterize the active patients of the CRIA, with 50 or more years, social and demographically; in respect to their consumption and clinically, comparing them according to the program of opioid maintenance treatment received by them. The growing aging of the general population brings new challenges such as the increase of the age population with substance use disorders (EMCDA, 2010). This group has been increasing and is expected to continue until at least 2020 (Han, Gfroerer, Colliver, & Penne, 2009). Nevertheless, the ignorance of this phenomenon is huge and more studies are largely necessary, especially due to the specific vulnerabilities of this age group. Of the 102 active patients in this age group, 71 meet the necessary conditions for participating in the study and 42 underwent psychological evaluation. The assessment battery consisted of the following instruments: BSI, MOCA, IAFAI, GDS and WHOQOL-Bref and data analysis was performed using SPSS - Version 20. Significant differences between the two treatment programs were found at MOCA, WHOQOL-Bref (domain 2 and 4) and IAFAI (IE). In all these cases the methadone maintenance program got worse clinical outcomes than the buprenorphine maintenance program. The global sample differed significantly from the normal population in the WHOQOL-Bref (general domain), showing worst results of quality of life; and in some domains of the BSI, obtaining better results of psychological symptomatology. Despite those differences the sample is better than expected due the life context in which they are embedded

Investigating factors that affect willingness to pay an analysis on freemium social media apps

While social media has grown in popularity and usage in recent years, little is known about users' willingness to pay for the premium version of them. In this study, we investigate how consumers' perceived value is associated with their intention to use freemium services and to purchase premium content. We employ data gathered through an online survey (N=200) among the users of freemium social media networks, like LinkedIn, YouTube, Reddit and Flickr and tested 15 different hypotheses, using PLS-SEM. Firstly, we find support for the security hypothesis proposed in this study, indicating that if users value the security component of the freemium social media, they will have a higher intention to use the service overall. Secondly, the higher quality of the freemium service leads to higher usage intentions, which further leads to higher purchase intentions. Thirdly, the price value of freemium services shows to have a negative association with the intention to purchase premium content. Fourthly, social platform community is found to positively affect premium purchases. Lastly, we find support for the usage frequency hypothesis proposed in this study, indicating that if a user establishes a habit of using a social media, he will eventually decide to buy the premium version. The current study's findings contribute to the uniqueness of the freemium business model, implying that increasing perceived value of the freemium service, improving security, or increasing usage frequency can all contribute to and subtract from future profitability via increased retention on the one hand and reduced monetization on the other.Embora as redes sociais tenham crescido em popularidade e utilização nos últimos anos, pouco se sabe sobre a vontade dos utilizadores de pagar pela versão premium das mesmas. Neste estudo, investigamos como o valor percebido pelos consumidores está associado à sua intenção de utilizar os serviços freemium e de adquirir conteúdos premium. Investigamos os dados recolhidos através de um inquérito online (N=200) e testamos 15 hipóteses diferentes, utilizando PLS-SEM. Em primeiro lugar, encontrámos suporte para a hipótese de Segurança proposta neste estudo, indicando que os utilizadores que valorizam a componente de segurança nas redes sociais freemium terão uma maior intenção de utilizar o serviço. Em segundo lugar, a maior qualidade da rede social leva a maiores intenções de utilização, o que leva a maiores intenções de compra. Em terceiro lugar, o valor do preço dos serviços freemium mostra ter uma associação negativa com a intenção de compra de conteúdos premium. Em quarto lugar, observámos que a comunidade social afeta positivamente as compra da versão premium. Finalmente, encontrámos apoio para a hipótese de frequência de utilização proposta neste estudo, indicando que se um utilizador estabelecer o hábito de utilizar uma rede social freemium, acabará por decidir comprar a versão premium. As conclusões do presente estudo realçam a singularidade do modelo de negócio freemium, implicando que o aumento do valor percebido do serviço, a melhoria da segurança, ou o aumento da frequência de utilização podem contribuir ou subtrair da rentabilidade futura através do aumento da retenção ou da redução da monetização

Attention and concentration in normal and deaf gamers

In this research the performance of individuals with normal hearing and impaired hearing while playing a computer game was evaluated. The aim was to study and understand if impaired hearing gamers are at disadvantage when playing games without being able to hear the music. Three levels (attention, concentration and blinking) were measured to compare and understand how sound can influence players’ attention and concentration performance. The data was recorded using Mindwave equipment during the game Outlast considering two scenarios: game with sound and game without sound. The results show that hearing impaired individuals have the same standard of attention and level of concentration as individuals with normal hearing when there is sound in the game. In the case of the blinking level, this is quite different between the scenarios and the analyzed groups. For this particular study the results suggest that sound is not an important level in the attention and concentration performance of impaired hearing players. Although much work still needs to be done, there is evidence of a relation between the attention and the concentration levels between normal hearing and impaired hearing individuals in the presence and absence of sound.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

SSA of biomedical signals: A linear invariant systems approach

Singular spectrum analysis (SSA) is considered from a linear invariant systems perspective. In this terminology, the extracted components are considered as outputs of a linear invariant system which corresponds to finite impulse response (FIR) filters. The number of filters is determined by the embedding dimension.We propose to explicitly define the frequency response of each filter responsible for the selection of informative components. We also introduce a subspace distance measure for clustering subspace models. We illustrate the methodology by analyzing lectroencephalograms (EEG).FCT - PhD scholarship (SFRH/BD/28404/2006)FCT - PhD scholarship (SFRH/BD/48775/2008

Anomalias congénitas com interesse médico-legal

Cada vez mais se recorre à Medicina Dentária Forense para identificação de cadáveres, isto porque esta área se tem mostrado prática e eficaz na determinação da sua identidade, principalmente em casos em que o corpo esteja em avançado estágio de decomposição. Os dentes são tecidos duros que aguentam elevadas temperaturas e resistem a uma infinidade de ações do tempo, sendo por isso de um potencial imenso. É sabido que cada um de nós possui arcadas dentárias diferentes, isto é, não há duas pessoas com uma dentição igual, nem mesmo em gémeos homozigóticos. Isto acontece porque há variadíssimas formas de combinações possíveis entre as anomalias congénitas, tratamentos, desgastes decorrentes de hábitos da vida, entre outros, que provocam alterações nas peças dentárias tornando-as únicas. As anomalias congénitas dentárias são de máxima importância para este processo, principalmente as de número e as de forma, pois são as mais fáceis de identificar. Atualmente a Medicina Dentária tem um papel fundamental nas Ciências Forenses, pois há uma variabilidade de caraterísticas dentárias que ajudam a tornar possível a identificação humana, mesmo em condições extremas. Para estudar este tema, foi realizada uma revisão bibliográfica, com recurso a bases de dados informáticas como a PubMed, b-on, SciELO e ScienceDirect. Conclui-se que é de uma relevante importância a existência de profissionais de Medicina Dentária no Instituto Nacional de Medicina Legal, nos seus gabinetes, pois demonstrou-se crucial o conhecimento e o detalhe da cavidade oral, nomeadamente das peças dentárias para este fim. O principal objetivo desta dissertação é perceber a importância das anomalias dentárias congénitas na identificação humana.Nowadays, more and more the Forensic Dental Medicine plays a big role in cadaver identification. This area has being showing effective and practical in identity determination, even when the corpse is already in an advanced decomposing state. Teeth are a very tough tissue that can stand very high temperatures and resist to hard weather conditions. Thus, it is a reliable mean in dead bodys identification. Every single one of us has their own dental arch, and so it is a unique feature that not even homozygote twins share. The reason for this is because there are almost infinite possible combinations related to congenital anomalies. The congenital anomalies are at utmost importance for this process, mainly regarding number and shape, since they are the easiest to identify. Nowadays, Dental Medicine plays a huge role in the Forensic Sciences, since there is a variability of dental characteristics that make the human identification possible, even in extreme conditions. For the purposes of this study, a bibliographical revision was made, using data bases such as PubMed, b-on, SciELO and ScienceDirect. As a conclusion, it is to notice the relevance of having Dental Medicine Professionals in the Legal Medicine Institutes, as it was demonstrated de importance of the oral cavity knowledge, mainly in dental pieces to the human identification. The main reason of this dissertation is to understand the importance of the congenital dental anomalies in cadaver identification

Surdez após meningite em idade pediátrica

Trabalho final de mestrado integrado em Medicina área científica de Otorrinolaringologia, apresentado á Faculdade de Medicina da universidade de CoimbraA meningite é uma das principais causas de surdez neurossensorial adquirida na infância e esta, por sua vez, é a principal sequela a longo prazo nos sobreviventes. Foi nosso propósito, com este estudo, avaliar a repercussão auditiva da meningite bacteriana em crianças. Assim, foram feitas avaliações otológica, neurológica e auditiva (impedancimetria, otoemissões acústicas, potenciais evocados auditivos e audiometria tonal, consoante a idade) de crianças com o diagnóstico de meningite bacteriana, admitidas no Departamento Pediátrico do Centro Hospitalar de Coimbra, entre 2000 e 2008. Foi identificada de surdez neurossensorial em 26% dos casos (em 13% bilateral). A Neisseria meningitidis foi o agente etiológico de meningite em 40% destes casos; em 20% não houve identificação de gérmen. Os outros agentes etiológicos identificados foram Streptococcus pneumoniae, Streptococcus do grupo B, Escherichia coli e Haemophilus influenzae, cada um deles identificado em 10% dos casos. As crianças com surdez apresentavam uma elevada incidência de sequelas neurológicas (40%). Em conclusão, a avaliação auditiva precoce após meningite é de extrema importância de forma a identificar lesões comprometedoras da função auditiva que possam interferir com a aquisição da linguagem. Um diagnóstico tardio pode comprometer o prognóstico e as opções terapêuticasBacterial meningitis is an important and prevalent aetiology of acquired sensorineural hearing loss in paediatric population, and deafness is the main long term consequence in the survivors. Our main goal was to study audiological consequences in children victim of meningitis. This way, otologic, neurologic and auditory complete assessment of children admitted in Paediatric Department of Centro Hospitalar de Coimbra, with the diagnosis of meningitis, between 2000 e 2008, was conducted. Clinical otological and neurological examination, impedancimetry, otoacoustic emissions, auditory brainstem evoked potentials and tonal audiometry were performed, depending on age. The incidence of sensorineural hearing loss was twenty-six percent (13% bilateral). Neisseria meningitidis was the etiological agent responsible for 40% of these cases, and in 20% the agent was not identified. The other aetiological agents identified were Streptococcus pneumoniae, Streptococcus B, Escherichia coli and Haemophilus influenzae, each one responsible for 10% of the cases. Children with hearing impairment had a high incidence of neurological sequelae (40%). In conclusion, early auditory assessment after meningitis is of great importance in order to identify any ear damage that could determine restricted access to sound and lack of progress in development of auditory skills and speech. Later diagnosis could compromise outcomes and treatment options

Forecasting Retail Client Flow with LSTMs on Inconsistent Time Series

An important variable in retail future planning is forecasting client flow in stores. This research aims at introducing two Long Short-Term Memory network architectures for time series forecasting of client flow in retail stores. These models are allied with three main data preprocessing approaches: a data imputation method that standardizes store schedules; a harmonic regression method that captures and removes the seasonal and trend components of the time series and a sliding window sampling method to construct the network’s training phase. Results were not extensively optimized but the framework leaves an open door for further improvements