In vitro determination of extracellular proteins from xylella fastidiosa

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)The phytopathogen Xylella fastidiosa causes economic losses in important agricultural crops. Xylem vessel occlusion caused by biofilm formation is the major mechanism underlying the pathogenicity of distinct strains of X. fastidiosa. Here, we provide a detailed in vitro characterization of the extracellular proteins of X. fastidiosa. Based on the results, we performed a comparison with a strain J1a12, which cannot induce citrus variegated chlorosis symptoms when inoculated into citrus plants. We then extend this approach to analyze the extracellular proteins of X. fastidiosa in media supplemented with calcium. We verified increases in extracellular proteins concomitant with the days of growth and, consequently, biofilm development (330 days). Outer membrane vesicles carrying toxins were identified beginning at 10 days of growth in the 9a5c strain. In addition, a decrease in extracellular proteins in media supplemented with calcium was observed in both strains. Using mass spectrometry, 71 different proteins were identified during 30 days of X. fastidiosa biofilm development, including proteases, quorum-sensing proteins, biofilm formation proteins, hypothetical proteins, phage-related proteins, chaperones, toxins, antitoxins, and extracellular vesicle membrane components.The phytopathogen Xylella fastidiosa causes economic losses in important agricultural crops. Xylem vessel occlusion caused by biofilm formation is the major mechanism underlying the pathogenicity of distinct strains of X. fastidiosa. Here, we provide a de7Fundacao de Amparo a Pesquisa do Estado de Sao Paulo (FAPESP) [2001/07533-7, 2012/51580-4]Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nivel Superior (CAPES, Computational Biology Program)CAPESFAPESP [2011/50268-4]CAPES (Computational Biology Program)Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnologico (CNPq)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq

Efectos de la sobredosificación con láser de arseniuro de galio sobre el cuádriceps de ratas

RESUMENObjetivo. Obtener información de los efectos de la irradiación con laser con el objeto de determinar dosis en la que se observen efectos deletéreos sobre el tejido muscular. Materiales y métodos. Se estudiaron 20 ratas macho Sprague Dawley y fueron divididas aleatoriamente en cuatro grupos de 5 individuos. En todos los grupos se realizó la irradiación con laser, empleando un equipo de diodo de Arseniuro de Galio. Se aplicó en forma puntual 1 vez al día durante 10 días consecutivos. El tiempo de exposición y las dosis diarias siguieron el siguiente arreglo: grupo A, 15 minutos y 24.3 julios, grupo B, 30 minutos y 48.6 Julios, grupo C, 45 minutos y 72.9 Julios, grupo D, 60 minutos y 97.2 Julios. Se tomaron muestras del cuadriceps para microscopía óptica y microscopía electrónica. Resultados. La microscopia óptica no mostró alteraciones en ninguno de los grupos estudiados. Al microscopio electrónico se observaron alteraciones ultraestructurales solamente en el grupo D. Conclusiones. El rango entre la dosis terapeútica y la que produce alteraciones ultraestructurales en el tejido muscular es tan amplio que hace del laser un eficiente elemento seguro para la terapia física

Estrategia pedagógica en el proceso de enseñanza y aprendizaje para acercar a los estudiantes a la realidad productiva en la cual desarrollarán su profesión: programa de iniciación profesional

La vinculación de la Universidad con la comunidad, procura a partir de la respuesta que brinda a las demandas y necesidades que se presenten en el ámbito social, articular conocimientos académicos, científicos y tecnológicos, con las diferentes realidades que emergen del medio. La Facultad de Ciencias Agropecuarias de la U.N.C, a través de la asignatura Mejoramiento Animal, implementa en el Campo Escuela un sistema productivo con bovinos de la raza Angus, la cual focaliza su función como unidad de transferencia tecnológica y espacio de formación de recursos humanos, tanto a nivel de grado, con los alumnos de la carrera, como a nivel regional mediante la capacitación de los actores sociales regionales. La implementación del Programa de Iniciación Profesional como técnica participativa de educación adaptada a las temáticas relacionadas y objetivos propuestos y a partir de la generación de debates y reflexiones con productores, tiende a la búsqueda y generación de respuestas conjuntas. Dichos espacios de capacitación permitieron aportar fundamentos teóricos y entrenamiento en manejo productivo y técnicas ganaderas para favorecer los procesos formativos integrales y críticos que afiancen el desarrollo y sustentabilidad productiva regional. Es así que dicho programa relaciono a los estudiantes de esta Facultad a través del contacto directo con la práctica y la realidad productiva promoviendo y fortaleciendo la experiencia socio-productiva en la región del Noroeste de La Provincia de Córdoba.Eje temático 2: Problemáticas y alternativas de mejora de la enseñanza (continuación) e - Los enfoques y modalidades de integración curricularFacultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Estrategia pedagógica en el proceso de enseñanza y aprendizaje para acercar a los estudiantes a la realidad productiva en la cual desarrollarán su profesión: programa de iniciación profesional

La vinculación de la Universidad con la comunidad, procura a partir de la respuesta que brinda a las demandas y necesidades que se presenten en el ámbito social, articular conocimientos académicos, científicos y tecnológicos, con las diferentes realidades que emergen del medio. La Facultad de Ciencias Agropecuarias de la U.N.C, a través de la asignatura Mejoramiento Animal, implementa en el Campo Escuela un sistema productivo con bovinos de la raza Angus, la cual focaliza su función como unidad de transferencia tecnológica y espacio de formación de recursos humanos, tanto a nivel de grado, con los alumnos de la carrera, como a nivel regional mediante la capacitación de los actores sociales regionales. La implementación del Programa de Iniciación Profesional como técnica participativa de educación adaptada a las temáticas relacionadas y objetivos propuestos y a partir de la generación de debates y reflexiones con productores, tiende a la búsqueda y generación de respuestas conjuntas. Dichos espacios de capacitación permitieron aportar fundamentos teóricos y entrenamiento en manejo productivo y técnicas ganaderas para favorecer los procesos formativos integrales y críticos que afiancen el desarrollo y sustentabilidad productiva regional. Es así que dicho programa relaciono a los estudiantes de esta Facultad a través del contacto directo con la práctica y la realidad productiva promoviendo y fortaleciendo la experiencia socio-productiva en la región del Noroeste de La Provincia de Córdoba.Eje temático 2: Problemáticas y alternativas de mejora de la enseñanza (continuación) e - Los enfoques y modalidades de integración curricularFacultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Estrategia pedagógica en el proceso de enseñanza y aprendizaje para acercar a los estudiantes a la realidad productiva en la cual desarrollarán su profesión: programa de iniciación profesional

La vinculación de la Universidad con la comunidad, procura a partir de la respuesta que brinda a las demandas y necesidades que se presenten en el ámbito social, articular conocimientos académicos, científicos y tecnológicos, con las diferentes realidades que emergen del medio. La Facultad de Ciencias Agropecuarias de la U.N.C, a través de la asignatura Mejoramiento Animal, implementa en el Campo Escuela un sistema productivo con bovinos de la raza Angus, la cual focaliza su función como unidad de transferencia tecnológica y espacio de formación de recursos humanos, tanto a nivel de grado, con los alumnos de la carrera, como a nivel regional mediante la capacitación de los actores sociales regionales. La implementación del Programa de Iniciación Profesional como técnica participativa de educación adaptada a las temáticas relacionadas y objetivos propuestos y a partir de la generación de debates y reflexiones con productores, tiende a la búsqueda y generación de respuestas conjuntas. Dichos espacios de capacitación permitieron aportar fundamentos teóricos y entrenamiento en manejo productivo y técnicas ganaderas para favorecer los procesos formativos integrales y críticos que afiancen el desarrollo y sustentabilidad productiva regional. Es así que dicho programa relaciono a los estudiantes de esta Facultad a través del contacto directo con la práctica y la realidad productiva promoviendo y fortaleciendo la experiencia socio-productiva en la región del Noroeste de La Provincia de Córdoba.Eje temático 2: Problemáticas y alternativas de mejora de la enseñanza (continuación) e - Los enfoques y modalidades de integración curricularFacultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Margens cirúrgicas no dermatofibrossarcoma protuberans: relato de caso e revisão da literatura

Introduction: Dermatofibrosarcoma protuberans (DFSP) is a rare dermal fibrohistiocytic tumor that affects the skin, accounting for 1% of soft tissue sarcomas and representing less than0.1% of all malignancies. The main characteristic of this type of tumor is a high rate of local recurrence after surgical excision. Deciding the proper surgical margin for complete resection is a challenge. Case report: 24 year-old, shows a reddish vegetative asymptomatic tumor on the left shoulder. She has a positive family history of DFSP in the lower limb. The definitive histopathological report confirmed Dermatofibrossarcoma protuberans. Discussion: The histological feature of the tumor is the presence of tentacle type projections of neoplastic cells in the periphery extending through the subcutaneous tissue to the muscular fascia. Of course, the most important factor for local control is the achievement of free surgical margins. Excision through Mohs micrographic surgery is a great option in regions where wide excision is not desirable, as in the face. The standard margin in most pf the literature is 3 cm resected to the muscular fascia, and it can be reduced to 2 cm in places where the extensive excision impairs the conformation of the site, as in the face.Introdução: O dermatofibrossarcoma protuberante (DFSP) é um tumor fibrohistiocítico de origem dérmica raro, que acomete a pele, representando 1% dos sarcomas de partes moles e menos de 0,1% de todas malignidades. A principal característica deste tipo de tumor é a sua elevada taxa de recidiva local após excisão cirúrgica. Decidir a margem cirúrgica adequada para a ressecção completa é um desafio. Relato de caso: 24 anos, apresenta lesão tumoral vegetante avermelhada no ombro esquerdo, assintomática. Possui história familiar positiva de DFSP em membro inferior. O laudo histopatológico definitivo confirmou Dermatofibrossarcoma protuberans. Discussão: A característica histológica do tumor é a presença de projeções tipo tentáculos de células neoplásicas na periferia que se estendem através do tecido subcutâneo até a fáscia muscular. Certamente, o fator de maior importância para o controle local é a obtenção de margens cirúrgicas livres. A excisão através da cirurgia micrográfica de Mohs é uma ótima opção em regiões onde a excisão ampla não é desejável, como na face. A margem padrão estabelicida em grande parte da literatura é de 3 cm com ressecção até a fáscia muscular, podendo ser diminuida para 2 cm em locais em que a excisão ampla prejudique a conformação do local, como na fac

Vapd In Xylella Fastidiosa Is A Thermostable Protein With Ribonuclease Activity.

Xylella fastidiosa strain 9a5c is a gram-negative phytopathogen that is the causal agent of citrus variegated chlorosis (CVC), a disease that is responsible for economic losses in Brazilian agriculture. The most well-known mechanism of pathogenicity for this bacterial pathogen is xylem vessel occlusion, which results from bacterial movement and the formation of biofilms. The molecular mechanisms underlying the virulence caused by biofilm formation are unknown. Here, we provide evidence showing that virulence-associated protein D in X. fastidiosa (Xf-VapD) is a thermostable protein with ribonuclease activity. Moreover, protein expression analyses in two X. fastidiosa strains, including virulent (Xf9a5c) and nonpathogenic (XfJ1a12) strains, showed that Xf-VapD was expressed during all phases of development in both strains and that increased expression was observed in Xf9a5c during biofilm growth. This study is an important step toward characterizing and improving our understanding of the biological significance of Xf-VapD and its potential functions in the CVC pathosystem.10e014576

GenSeed-HMM: A tool for progressive assembly using profile HMMs as seeds and its application in Alpavirinae viral discovery from metagenomic data

This work reports the development of GenSeed-HMM, a program that implements seed-driven progressive assembly, an approach to reconstruct specific sequences from unassembled data, starting from short nucleotide or protein seed sequences or profile Hidden Markov Models (HMM). The program can use any one of a number of sequence assemblers. Assembly is performed in multiple steps and relatively few reads are used in each cycle, consequently the program demands low computational resources. As a proof-of-concept and to demonstrate the power of HMM-driven progressive assemblies, GenSeed-HMM was applied to metagenomic datasets in the search for diverse ssDNA bacteriophages from the recently described Alpavirinae subfamily. Profile HMMs were built using Alpavirinae-specific regions from multiple sequence alignments using either the viral protein 1 (VP1) (major capsid protein) or VP4 (genome replication initiation protein). These profile HMMs were used by GenSeed-HMM (running Newbler assembler) as seeds to reconstruct viral genomes from sequencing datasets of human fecal samples. All contigs obtained were annotated and taxonomically classified using similarity searches and phylogenetic analyses. The most specific profile HMM seed enabled the reconstruction of 45 partial or complete Alpavirinae genomic sequences. A comparison with conventional (global) assembly of the same original dataset, using Newbler in a standalone execution, revealed that GenSeed-HMM outperformed global genomic assembly in several metrics employed. This approach is capable of detecting organisms that have not been used in the construction of the profile HMM, which opens up the possibility of diagnosing novel viruses, without previous specific information, constituting a de novo diagnosis. Additional applications include, but are not limited to, the specific assembly of extrachromosomal elements such as plastid and mitochondrial genomes from metagenomic data. Profile HMM seeds can also be used to reconstruct specific protein coding genes for gene diversity studies, and to determine all possible gene variants present in a metagenomic sample. Such surveys could be useful to detect the emergence of drug-resistance variants in sensitive environments such as hospitals and animal production facilities, where antibiotics are regularly used. Finally, GenSeed-HMM can be used as an adjunct for gap closure on assembly finishing projects, by using multiple contig ends as anchored seeds

Contrasting CO2 and water vapour fluxes in dry forest and pasture sites of central Argentina

The dry forests of South America are a key player of the global carbon cycle and the regional water cycle, but they are being intensively deforested. We used eddy covariance measurements to compare the temporal patterns of CO2 and water vapour fluxes and their relationships with environmental variables in dry forest and pastures sites of central Argentina. Ecosystem fluxes showed clear contrasts in magnitude, timing and response to environmental controls between ecosystems. The dry forest displayed higher daily gross primary productivity (GPP, 10.6 vs. 7.8 g CO2 m−2 d−1) and ecosystem respiration (Reco, 9.1 vs. 7.0 g CO2 m−2 d−1) and lower net ecosystem exchange (NEE, −1.5 vs. −0.7 g CO2 m−2 d−1) than the pasture. These differences were explained by a lower tolerance of the pasture to cool temperatures and drought. The lowest NEE rates were observed between 26°C and 34°C in the pasture, but below this range, NEE increased sharply, switching to a carbon source with temperatures <20°C. By contrast, the dry forest remained as a strong carbon sink down to 18°C. The pasture also showed a stronger drop of GPP with drought compared with the dry forest, becoming a carbon source with soil wetness <25% of soil available water. Rainfall was strongly coupled with GPP in both ecosystems, but the dry forest responded to longer rainfall integration periods. This study helps to understand how ecosystems can respond to climate change, improve global scale modelling and increase the productivity and resilience of rangelands.Fil: Nosetto, Marcelo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Matemática Aplicada de San Luis "Prof. Ezio Marchi". Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Ciencias Físico, Matemáticas y Naturales. Instituto de Matemática Aplicada de San Luis "Prof. Ezio Marchi"; ArgentinaFil: Luna Toledo, Emanuel Santiago. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina. Universidad Nacional de Chilecito; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Magliano, Patricio Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Matemática Aplicada de San Luis "Prof. Ezio Marchi". Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Ciencias Físico, Matemáticas y Naturales. Instituto de Matemática Aplicada de San Luis "Prof. Ezio Marchi"; ArgentinaFil: Figuerola, Patricia Irene. Universidad Nacional de Chilecito; ArgentinaFil: Blanco, Lisandro Javier. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Jobbagy Gampel, Esteban Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Matemática Aplicada de San Luis "Prof. Ezio Marchi". Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Ciencias Físico, Matemáticas y Naturales. Instituto de Matemática Aplicada de San Luis "Prof. Ezio Marchi"; Argentin