A etnoarqueologia brasileira contemporanea : cultura material e implicações sociais

Jornadas de Jóvenes en Investigación Arqueológica, JIA (3as : 5-7 de mayo 2010 : Universitat Autònoma de Barcelona). Sesión 4. Cultura material y transdisciplinariedad en la investigación arqueológica de Latinoamérica .O objectivo do presente trabalho é investigar as opções teórico-metodológicas de algumas teses de Mestrado e Doutoramento em Etnoarqueologia, realizadas no Brasil a partir da década de 80 do século XX de forma a propor um quadro de caracterização desse campo científico no cenário brasileiro contemporâneo que leve em conta sua relação com a sociedade civil bem como as implicações socio-políticas dessas pesquisas.The aim of the present work is to ivestigate theoretical and methodological options of some masters and doctoral theses in Ethnoarchaeology held in Brazil from the 80s of the twentieth century in order to propose a characterization framework of this scientific field in the Brazilian contemporary scenario considering their relationship with civil society as well as the socio-political implications of such research.L'objectiu d'aquest treball és investigar les opinions teòriques i metodològiques d'alguns Màsters i Tesis Doctorals en Etnoarqueologia, realitzats al Brazil a partir de la dècada dels 80 del segle XX, per tal de proposar un quadre de caracterització del camp científic a l'escenari brasiler contemporani, que tingui en compte la seva relació amb la societat civil així com les implicacions sociopolítiques de tals recerques.

Estudo de um evento de afloramento e ralaxamento na região costeira de Aveiro

Mestrado em Meteorologia e Oceanografia FísicaEste trabalho, realizado no âmbito do Mestrado em Meteorologia e Oceanografia Física da Universidade de Aveiro, surge ligado à campanha realizada pelo IPIMAR (NeoMav), a bordo dos Navios de Investigação Noruega e Tellina em Julho de 2007. Nele se faz uma análise dos dados recolhidos pelo CTDF a bordo dos dois navios, caracterizando os campos de temperatura, salinidade, densidade e concentração de clorofila-a na área mais costeira, ao largo de Aveiro, para o período de 2 a 7 de Julho de 2007. A informação recolhida por estes navios foi complementada com: i) uma configuração numérica de circulação, realizada com o modelo ROMS-AGRIF, com uma resolução aproximada de 900m, forçado em condições realistas; ii) dados obtidos por satélite para temperatura de superfície (da série NOAA, sensor AVHRR) e concentração de clorofila-a (sensor MODIS, satélite Terra). São estudadas as respostas da plataforma média e plataforma interior aos forçamentos atmosféricos que consistiram na alternância entre um regime de ventos de Norte, seguido de relaxamento e nova intensificação do vento de Norte, no Verão, na zona em estudo. As características mais marcantes são: a ascensão de água fria, durante o afloramento; o aparecimento de uma contracorrente para Norte na plataforma interior, junto à costa, durante o relaxamento; o aparecimento de uma frente que separa as águas afloradas mais frias das águas oceânicas mais quentes; a assinatura das descargas do rio Douro na salinidade, com uma pluma de água menos salgada a deslocar-se para Sul, associada ao jacto e para o largo, associada ao transporte de Ekman induzido pelo vento. Os resultados obtidos através do modelo demonstraram ser bastante consistentes com as observações e com as Imagens de Satélite, pelo que este modelo numérico reproduz realisticamente os resultados. ABSTRACT: The present work, as a dissertation of the Master’s Degree Programme in Meteorology and Physical Oceanography at the University of Aveiro, is associated with a survey (NeoMav), conducted by the IPIMAR, with two Investigation boats, Noruega and Tellina, in July of 2007. An analysis of the data provided by the CTDF is made in order to characterize temperature, salinity, density and chlorophyll-a concentration, in the region near the cost of Aveiro, in the western Iberian region. The information of the both cruises was complemented with: a fine resolution model ROMS-AGRIF, with 900 m of resolution approximately, forced in realistic conditions; ii) data from satellite imagery of surface temperature (series NOAA, sensor AVHRR) and chlorophyll-a concentration (sensor MODIS, Satellite Terra). The responses of middle and inner shelves are studied due to the forcing of the atmospheric conditions, during the alternation between Southward winds and relaxation, in the summer, in the region of the study. The most striking features are: the upwelled water during the upwelling; the appearance of a Northward counter current during the relaxation; the appearance of a front, which separates cold upwelled waters from warmer oceanic water; the signature of less salinity lens from Douro river, with a plume going Southward, associated to the flow, and offshore, associated to the Ekman transport induced by the wind. There is plenty of agreement between the results from the numeric model, the observations and the satellite imagery

The role of Hedgehog signaling during zebrafish larvae fin fold regeneration

Several studies have demonstrated that although the structure of the adult and larval zebrafish caudal fin is different, there are similarities at the cellular and molecular level that turn larval zebrafish fin fold a useful model to study the basic principles of regeneration. In this process, while the essential role for Hedgehog (Hh) signaling is well established in the adult zebrafish caudal fin system, its involvement in juvenile tissue regeneration is still unknown. The aim of this Master thesis was therefore to evaluate the contribution of the Hh signaling pathway to the larval zebrafish fin fold regeneration process. Accordingly, we analyzed the expression of several Hh signaling components through in situ hybridization. Here, we showed that several of these genes are effectively expressed in the larval regenerating fin tissue, suggesting a role for Hh signaling also during larval regeneration. However, divergence in the regulation of few Hh signaling components appears to exist between the adult and larval zebrafish fin regeneration processes. Nevertheless, similarly to adult caudal fin regeneration, when Hh signaling was blocked, by using cyclopamine, the larval fin fold regenerative outgrowth is severely impaired. Since larval zebrafish fin fold is ciliated, and primary cilia are closely related to Hh signaling regulation in vertebrate systems, we further addressed the role of primary cilia during larval fin fold regeneration process. To this end, we used the zebrafish iguana mutant, in which primary cilia are not formed, to study the modulation of Hh signaling expression during larval fin fold regeneration in the absence of primary cilia. Here, we found that several genes were expressed with a delay, coincident with the delay in the mutant fin fold regeneration observed in previous work. We show that Hh signaling in the fin fold is crucial to promote cell proliferation. When Hh signaling is blocked using cyclopamine there is a strong blockage of cell proliferation and regeneration is also blocked. Surprisingly, in iguana mutants where Hh signaling is impaired but not totally blocked, cell proliferation is not detected but regeneration still occurs. This raises the question about the requirement of cell proliferation in larvae fin fold regeneration. By blocking the cell cycle using aphidicolin we demonstrate that cell proliferation is not necessary for zebrafish larvae fin fold regeneration

Mothers´ diet influence on food acceptance during weaning : a systematic review

First year of life infants start defining their food preferences and eating behaviors, which will track into adulthood influencing dietary habits later in life. Eating behaviors evolve and change from an exclusive milk diet through a complementary feeding until familiar diet. Weaning starts between 4 and 6 months and it’s the period when caregivers start introducing solid foods. There are several and complex factors influencing initial responses to the introduction of new foods. As some flavors may pass through amniotic liquid and breast milk it was hypothesized that mothers’ diet could affect food acceptance during weaning, through flavor learning. Mothers may also influence some children through modelling. And so, mothers’ eating habits may influence food acceptance during weaning. However, there are still few studies focusing in role of mothers’ diet as a predictor of food acceptance during weaning and so further researches are needed to better understand the role of mothers’ diet.As preferências, assim como os comportamentos, alimentares das crianças começam a ser definidos desde o primeiro ano de vida. E estes, por sua vez, irão influenciar os hábitos alimentares no futuro e, consequentemente, a sua saúde. Durante este primeiro ano de vida, naturalmente, os comportamentos alimentares evoluem drasticamente, uma vez que a criança passa de uma alimentação à base exclusiva de leite durante os primeiros 4 a 6 meses, passando pela fase da diversificação alimentar, em que são introduzidos novos alimentos até pass aar estar integrada na alimentação da família. São vários os factores, intrínsecos e extrínsecos que podem influenciar a aceitação de novos alimentos durante a diversificação alimentar. No que diz respeito à mãe, esta poderá influenciar a aceitação dos novos alimentos através da exposição a sabores desde o útero ou através da modelação. Embora pareça haver de facto um papel importante da alimentação da mãe, são ainda necessários mais estudos que procurem perceber de que forma é que esta influencia a aceitação de novos alimentos na diversificação alimentar

Portable lab-on-chip platform for bovine mastitis diagnosis in raw milk

Tese de mestrado integrado em Engenharia Biomédica e Biofísica , apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2015As medidas de prevenção e controlo da mastite bovina consistem em boas práticas de gestão aliadas à administração de antibióticos. Os conceitos actuais para uma utilização prudente de antibióticos e preocupações a nível de saúde pública têm vindo a reforçar a necessidade de um diagnóstico adequado e atempado. Geralmente, a mastite é detectada com base em sinais clínicos evidentes de condições anormais do leite e / ou do úbere das vacas ou por testes que indicam uma reacção inflamatória. O teste Califórnia Mastite, consiste na contagem de células somáticas e kits relativamente baratos de bio marcadores estão disponíveis para o efeito, mas estes apenas fornecem informações sobre a presença / ausência de inflamação. Nos últimos anos, a tecnologia de Lab-on-Chip teve grandes desenvolvimentos, apresentando inúmeras vantagens relativamente aos métodos tradicionais de detecção de biomoléculas: maior sensibilidade, uma resposta mais rápida, recurso a pequenas quantidades de reagentes, redução do tamanho dos dispositivos, fácil utilização e custos acessíveis. Com o crescente interesse da medicina, indústria farmacêutica, biotecnologia e controlo ambiental, a tendência será deslocar os laboratórios para mais próximo dos clientes, através desta tecnologia também designada Point-of-Care (POC). Paralelamente, a integração da tecnologia biológica em aplicações de engenharia alimentar tem tido particular interesse na última década. A identificação precoce dos agentes patogénicos causadores da mastite bovina tem uma grande importância para a implementação de medidas de controlo adequadas, reduzindo o risco de infecções crónicas e permitindo orientar a terapêutica antimicrobiana a ser prescrita. A rápida identificação dos agentes patogénicos, como Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. e, entre estes, a discriminação entre os principais agentes contagiosos Staphylococcus aureus e Streptococcus agalactiae, irá contribuir para um decréscimo dos danos económicos e de saúde pública consequentes da mastite bovina. Apesar dos sistemas de citometria convencional fornecerem resultados rápidos e fiáveis, estes continuam a ser volumosos, o que dificulta a sua portabilidade, além de apresentarem custos relativamente elevados e serem de utilização complexa. Por seu lado, os sensores magnetoresistivos são micro fabricados, podem ser integrados em canais microfluídicos e conseguem detectar células marcadas magneticamente. Os sensores magnetoresistivos utilizados neste trabalho são designados por Spin-Valve, sendo constituídos por uma camada de metal não magnético entre duas camadas de metais magnéticos. Uma das camadas magnéticas apresenta uma magnetização fixa, devido a uma camada antiferromagnética adjacente que lhe fixa a magnetização, enquanto a magnetização da outra camada se encontra livre para rodar. Esta dissertação pretende desenvolver uma plataforma portátil que integra um magnete permanente como fonte de magnetização, vinte e oito sensores magnetoresistivos e microfluídica, tornando possível a detecção e quantificação, de forma dinâmica e em tempo real, de partículas magnéticas e células marcadas magneticamente, utilizando vários sensores. Para tal, utilizou-se como ponto de partida um protótipo já existente no INESC-MN, que embora funcional, apresentava limitações na integração do biochip com a fonte de magnetização das nanopartículas, neste caso um magnete permanente. Como as Spin-Valves são apenas sensíveis a uma direcção no plano, se bem alinhadas na zona de homogeneidade dos campos perpendiculares criados pelo magnete, este não afecta a sensibilidade dos sensores. No entanto, uma pequena inclinação do magnete pode criar componentes de campo magnético no plano do sensor e, por conseguinte, afectar a sua sensibilidade. O magnete utilizado neste trabalho tem dimensões 20x20x3mm3 e um campo magnético residual de 1.2-1.3T. O sistema de microfluídica é composto por quatro canais lineares e individuais com 50 μm de altura, 100 μm de largura e 1 cm de comprimento, alinhados com cada conjunto de sensores. O chip e os microcanais são montados face-a-face e selados através de um processo químico, sendo depois montados e soldados num circuito impresso. Neste caso particular, o biossensor é desenhado para ser capaz de detectar e quantificar pequenas variações de campo magnético causadas pela presença de marcadores superparamagnéticos que são funcionalizados com anticorpos para proteínas de parede celular específicas que estão presentes na superfície das células de interesse. As partículas superparamagnéticas são muito utilizadas neste tipo de aplicações pelo facto de, na ausência de campo magnético externo, apresentarem magnetização nula – estão num estado superparamagnético. Quando um campo magnético externo é aplicado, provoca a magnetização destas partículas conduzindo-as a um estado paramagnético. Uma partícula magnetizada verticalmente, ao fluir no microcanal, gera um campo variável sobre o sensor. Como resultado, um pico bipolar é a assinatura da passagem de uma partícula perpendicularmente magnetizada sobre o sensor. De forma a conseguir obter uma plataforma com as características identificadas acima, foram combinados vários componentes numa única plataforma, através de um processo faseado que incluiu: i) A microfabricação de sensores magnetoresistivos, através de técnicas de fotolitografia, etching e lift-off; ii) A fabricação de um sistema de microfluidica em PDMS; iii) A integração do chip com os microcanais de PDMS através de um processo de ligação químico; iv) desenvolver um estudo sobre os efeitos de campos magnéticos externos sobre os sensores magnetoresistivos devido à presença de magnetes permanentes; v) O desenvolvimento de um módulo com um sensor de efeito de hall, que integrado numa plataforma de scanning permitisse quantificar os campos perpendiculares e longitudinais de magnetes; vi) a optimização do design do biochip de acordo com os dados obtidos; vii) O desenvolvimento de uma plataforma de suporte para a combinação do biochip com o magnete permanente; viii) A medição do momento magnético de um conjunto de partículas magnéticas com diferentes dimensões; ix) A validação experimental da eficiência do magnete permanente na magnetização de nanopartículas magnéticas, através de ensaios experimentais de detecção de nanopartículas de diferentes dimensões. x) O desenvolvimento de um programa de análise e contagem de eventos magnéticos utilizando o software Matlab®; xi) A avaliação experimental da detecção de células marcadas com partículas magnéticas. As medições experimentais foram realizadas utilizando uma plataforma electrónica desenvolvida pelo INESC-ID, há dois anos por um aluno de doutoramento, mostraram que a plataforma já optimizada permite a detecção de nanopartículas magnéticas e células marcadas magneticamente utilizando vários sensores magnetoresistivos, o que não era possível no protótipo anterior. Cinco tipos de partículas magnéticas, com dimensões entre os 2800 nm e os 50 nm, foram testadas nos vários canais. Foram observados picos correspondentes à passagem de partículas magnéticas em todas as amostras, excepto para as partículas com dimensões de 80 nm e 50 nm. Face a estes resultados conclui-se que, provavelmente: - Partículas de menores dimensões não apresentam tendência para formar aglomerados e, partículas individualizadas não têm momento magnético suficiente para serem detectadas; - Ou que a magnetização das partículas pelo magnete permanente é demasiado pequena para induzir um momento magnético significativo nas mesmas. Contudo, como neste caso é importante diminuir a probabilidade de ocorrência de falsos positivos, é relevante que partículas magnéticas que não estejam ligadas às moléculas de interesse não sejam detectadas pelo sensor. Deste modo, determinou-se que, para este sensor, as partículas de 80 nm ou 50 nm são as mais indicadas. Para validação da detecção de células foram realizadas experiências usando amostras de leite com Staphyloccocus spp. cedidas por uma colega do INESC-MN que está a desenvolver o seu trabalho de doutoramento em plataformas portáteis para análises ao leite. Estes testes com amostras biológicas foram realizados no INESC-MN, utilizando culturas de bactérias e protocolos de funcionalização e marcação magnética previamente desenvolvidos no Centro de Investigação Interdisciplinar em Sanidade Animal (CIISA). As células foram marcadas magneticamente com partículas de 50 nm funcionalizadas com o anticorpo monoclonal anti-Staphyloccocus spp. e introduzidas no biochip para os testes de aquisição. Nesta fase foram utilizadas amostras de 500 μL contendo 10000 ufc e 8 x 108 partículas magnéticas funcionalizadas. Foram detectados picos, o que indica a capacidade desta plataforma para a detecção magnética de células marcadas. Para além disso, com o programa de contagem foi possível quantificar o número de eventos magnéticos ocorridos, tendo sido detectados 6063, para um número de colónias de 10000. Os resultados obtidos são bastante promissores, no entanto são necessários ainda estudos futuros para que este citómetro possa quantificar com maior precisão. Nomeadamente, um dos objectivos seria a medição realizada por vários sensores em simultâneo, de forma a obterem-se resultados mais confiáveis e precisos. Para tal, optimizações ao nível da aquisição do sinal, mais propriamente ao nível da plataforma electrónica de aquisição serão necessárias para que seja possível a medição com sensores em paralelo.Over the past decade, the drawbacks of conventional flow cytometers have encouraged efforts in microfabrication technologies and advanced microfluidics systems. Biosensor technology has been in exponentially development as it presents huge advantages when in comparison to traditional detection methods of biomolecules, such as high sensitivity, rapid response and small amount of reagents. Unlike external fluorescent/optical detectors, magnetoresistive (MR) sensors are micro-fabricated, can be integrated within microfluidic channels and can detect magnetically labelled biomolecules. Bovine mastitis is an economic burden for dairy farmers and control measures to prevent mastitis are crucial for dairy company sustainability. The present work describes a platform for dynamic mastitis diagnosis through detection of magnetically labelled cells with a magnetoresistive based cell cytometer, where a permanent magnet is used as magnetic source. A study about the effects of the magnetic fields over the MR sensors was developed in order to be possible to design and engineer a platform integrating the permanent magnet with the chip in such a way that the magnetic fields did not affect the MR sensors behaviour. Overall, assays were performed involving magnetic nanoparticles (MNP) and cells labelled with MNP. These assays were performed with a platform mentioned above, containing a permanent magnet assembled with the chip which was integrated with an electronic platform from INESC-ID, allowing signal acquisition from magnetized nanoparticles. In a very preliminary stage, magnetic particles between 2800 nm and 50 nm were tested flowing through a 100 μm wide, 50 μm high microchannel, with speeds around 50 μL/min being detected. Bipolar and unipolar signals with average amplitude of 15 μV – ~250 μV were observed corresponding to magnetic events. A home-made program to count magnetic events was developed in Matlab®. In particular it is presented an example for the validation of the platform as a magnetic counter that identifies and quantifies Staphylococcus spp. cells magnetically labelled with 50nm particles in a milk sample. In assays using 500 μL of milk sample, cells were detected with signal amplitude of 30 μV – ~200 μV

Decellularized fetal skeletal muscle as an in vitro system to study a congenital muscular dystrophy

Laminin-α2-congenital muscular dystrophy (LAMA2-CMD) is caused by mutations in the LAMA2 gene, which encodes for the α2 chain of laminin-211, a glycoprotein present in extra-cellular matrix (ECM). Studies in our laboratory using a mouse model of the disease (dyW mice) have shown defects in fetal myogenesis. To better understand the impact of both extracellular environment and the cellular niche dur-ing the onset of LAMA2-CMD, wildtype C2C12 myoblast (C2C12-WT) and Lama2-null my-oblasts (C2C12-KO) were cultured in flasks and in decellularized fetal skeletal muscle obtained from embryonic day 18.5 healthy and dyW-/- fetuses. Our findings suggest that the absence of laminin-α2 results in alterations in the expression levels of genes that encode for other ECM proteins. Additionally, our results also show that proliferation and differentiation are also affected. Indeed, although C2C12-KO cells cultured in decellularized matrices showed a higher expression level of myogenin, a differentiation marker, and a higher tendency to formed aligned cells in matrices, only C2C12-WT cells were able to fuse and form multinucleated myotubes. The use of this novel 3D method allowed to reach a better understanding of the precise effects of laminin-α2 deficiency, which will be a requisite for the development of new therapies in the future.A distrofia muscular congénita laminina-α2 (LAMA2-CMD) é causada por mutações no gene LAMA2, que codifica a cadeia α2 da laminina, uma glicoproteína presente na matriz extracelu-lar (ECM). Estudos no nosso laboratório usando o ratinho modelo (dyW) para a doença LAMA2-CMD demonstraram defeitos na miogénese fetal. Para entender melhor o impacto tanto do ambiente extracelular como das células no desen-cadear da LAMA2-CMD, mioblastos C2C12 selvagens (C2C12-WT) e mioblastos nulos para Lama2 (C2C12-KO) foram cultivados em frascos e em músculo esquelético fetal descelulari-zado proveniente de fetos selvagens e fetos dyW-/- colhidos no estádio de 18.5 dias de desen-volvimento. Os nossos resultados demonstram que a ausência de laminina-α2 resulta em alterações nos níveis de expressão de genes que codificam outras proteínas da ECM. Além disso, os processos de proliferação e diferenciação são também afetados. De facto, apesar das C2C12-KO cultiva-das em matrizes descelularizadas exibirem um nível de expressão mais elevado de miogenina, um marcador da diferenciação, e uma maior tendência para alongar e alinhar, apenas as células C2C12-WT são capazes de fundir e formar miotubos multinucleados. A utilização deste modelo 3D permitiu entender melhor os efeitos causados pela ausência de laminina-α2, o que poderá contribuir para o futuro desenvolvimento de novas terapias

Poupa Mais : Pingo Doce’s loyalty card : what should be done next?

Pingo Doce represents the second major player in the Portuguese food retail sector and, in 2013, in order to respond to consumers’ needs and to reinforce the client relationship launched its loyalty card – “Poupa Mais”. The existence of loyalty cards is a reality among the major Portuguese retailers, used as a method to encourage the continued patronage of clients, reward loyalty, retain customers and influence their shopping behaviour. These retail reward programs have shown to be a very appreciated “tool” by Portuguese shoppers with the majority of Portuguese households holding at least one loyalty card from a Portuguese retailer. One year after “Poupa Mais” implementation, in March 2014, it was the time to think about what should be done in order to enlarge and extend the customer base that could be interested in using the card. In order to accomplish it was decided that the loyalty card should be enriched, allowing customers to take advantage of more benefits by using it. Lara Pinheiro's team concluded that one of two paths should be followed – create more partnerships with companies from other industries or direct discounts in accordance with different consumer segments.O Pingo Doce representa o segundo maior retalhista no sector de retalho alimentar Português e, em 2013, com o objetivo de dar resposta às necessidades dos consumidores e para reforçar a relação com o cliente, lançou o seu cartão de lealdade - "Poupa Mais". A existência de cartões de lealdade é uma realidade entre os principais retalhistas Portugueses, sendo utilizados como um método para estimular o contínuo compromisso dos clientes, recompensar a fidelidade, reter os clientes e influenciar o seu comportamento de compra. Estes métodos de recompensa utilizados pelos retalhistas têm demonstrado ser uma "ferramenta" muito apreciada pelos consumidores Portugueses, sendo que a maioria dos lares Portugueses tem pelo menos um cartão de lealdade de um retalhista Português Um ano após a implementação do “Poupa Mais”, em Março de 2014, considerou-se ser o momento para pensar no que poderia ser feito de forma a ampliar a base de clientes interessada em utilizar o cartão. Foi decidido que se deveria enriquecer o cartão de lealdade, permitindo que os clientes tirem partido de mais benefícios ao utilizá-lo. A equipa de Lara Pinheiro concluiu que deveria ser seguido um de dois caminhos - criar mais parcerias com empresas de outros sectores ou direcionar os descontos de acordo com diferentes segmentos de consumidores