Rastreio de estratégias terapêuticas num modelo de ratinho da doença de Machado-Joseph: foco na proteostase

Tese de Doutoramento em Ciências da SaúdeMachado-Joseph Disease (MJD) belongs to the group of nine Polyglutamine (PolyQ) diseases, which are characterized by the appearance of misfolded protein species, protein aggregates, neuronal dysfunction and ultimately cell death, of which is triggered by the presence of an expanded CAG repeat in the respective disease-causing genes. Along with the pathogenic motif, all these disease-associated proteins are widely expressed but the diseases only affect specific subsets of neurons. So far there is no effective treatment available for these disorders. Because the pathogenic mechanism(s) underlying MJD are poorly understood, which might be hampering the progression of effective therapeutical targets, this work focused on the search for new therapies based on hypotheses, that additionally allow the study of molecular mechanism(s) of disease. For this, we used the CMVMJD135 mouse model, which recapitulates the human disease both at the phenotypic and neuropathologic levels. We tested the efficacy of several compounds acting on different aspects of cellular function: (i) molecular chaperone load, (Hsp90 inhibitor - 17-dimethyl aminoethylamino-17-demethoxygeldanamycin hydrochloride - 17-DMAG); (ii) autophagy (lithium chloride and a combination of lithium chloride – LiCl - and temsirolimus - CCI-779); (iii) Endoplasmic reticulum (ER) stress response, (taroursodeoxycholic acid - TUDCA), also known to have multiple actions in the cells, and (iv) the energy status in the cell (creatine). Chronic treatment of CMVMJD mice with 17-DMAG resulted in a delay in progression of the motor coordination deficits and a reduction in neuropathology. While we observed limited induction of heat-shock proteins with treatment, we found evidence that 17-DMAG could be acting through autophagy, as levels of LC3-II and beclin-1 were induced in the brain of treated animals. This resulted in decreased levels of the mutant ataxin-3 (ATXN3) and reduced intranuclear aggregation of this protein. To further test autophagy induction as potential therapeutic approach for MJD, we tested LiCl alone and a combination of LiCl with CCI-779 (m-TOR independent and dependent inducers, respectively). In spite of activating autophagy, as suggested by the increased levels of Beclin-1, Atg7, and LC3- II, and a reduction in the p62 protein levels, lithium had no overall beneficial effects in MJD model concerning motor performance. Furthermore, the combined therapy using LiCl and CCI-779 proved to be deleterious to both WT and transgenic animals, failing to rescue their neurological symptoms in the first and exerting in neurotoxic effects in the latter. TUDCA is an orally bioavailable and BBB permeable bile acid with known neuroprotective action, through its anti-amyloidogenic and chemical chaperone activities and its ability to modulate apoptotic pathways. In addition, TUDCA is FDA-approved for chronic use in humans to treat liver disorders, but has also been shown to be beneficial in several models of different neurodegenerative diseases. In the CMVMJD135 model, TUDCA delayed the onset of disease and improved the motor phenotype, including balance, motor coordination and gait parameters, and ameliorated neurological reflexes, exploratory movement deficits and muscular strength problems. Although TUDCA treatment did not reduce the ATXN3 aggregate load in the brain, it normalized the RNA levels of TNF-α, Il1β and Il10 in the brainstem and reduced the astrogliosis in the substantia nigra and brainstem. These results demonstrated the therapeutic efficacy of TUDCA supplementation for MJD, most likely mediated by its anti-inflammatory properties, making this compound an attractive for the treatment of neurodegenerative diseases, including MJD.Lastly, we tested the efficacy of creatine, another naturally-occurring compound known to balance energy status in the cell. Creatine-supplemented diet led to an overall improvement in the motor phenotype of CMVMJD135 mice, namely improved motor coordination, limb strength and gait quality, and amelioration of some neurological parameters such as tremors and abnormal reflexes. Remarkably, chronic creatine treatment delayed the onset of several symptoms and, in some cases, completely abolished their appearance, supporting creatine supplementation as a useful strategy to slow the progression of MJD. In summary in this work we validated a new MJD mouse model for use in preclinical trials as a powerful tool to study simultaneously pathogenic mechanisms associated with the disease and to develop novel therapeutic strategies. Furthermore, we found that Hsp90 inhibitors, TUDCA and creatine are relevant therapeutic candidates for MJD, some of which could be advanced to clinical trials in MJD patients.A doença de Machado Joseph (DMJ) pertence ao grupo de nove doenças poliglutaminas em que o gene causador da doença possui uma expansão anómala do codão CAG. A presença desta expansão conduz ao aparecimento de espécies proteicas com conformação incorreta, agregados proteicos, disfunção neuronal e consequentemente, morte celular. Para além da expansão, todos os genes associados a este grupo de doenças possuem expressão ubíqua apesar de só afetarem subconjuntos específicos de neurónios. Atualmente, não existe tratamento eficaz para a DMJ. Uma das razões pelas quais há um atraso no desenvolvimento de alvos terapêuticos está relacionada com o conhecimento incompleto do(s) mecanismo(s) de patogénese associados à DMJ. Assim sendo, o objetivo deste estudo centrou-se na procura de novas terapias, usando uma abordagem baseada em hipóteses, que pode também permitir o estudo dos mecanismo(s) moleculares da doença. Para tal, foi usado o modelo de ratinho CMVMJD135 que recapitula a doença humana a vários níveis, nomeadamente fenotípico e neuropatológico. Testámos a eficácia de diversos compostos com alvos terapêuticos relacionados com diferentes funções celulares: (i) níveis de chaperones moleculares (inibidor de Hsp90 – 17-dimetil aminoetillamino 17- demetoxigeldanamicina - 17-DMAG); (ii) autofagia (cloreto de lítio e combinação de cloreto de lítico –LiCL e temsirolimus - CCI-779); (iii) resposta ao stress do retículo endoplasmático (ácido tauroursodesoxicólico – TUDCA), com múltiplas acções celulares, e (iv) estado energético celular (creatina). O tratamento crónico com 17-DMAG no ratinho CMVMJD135 resultou num atraso da progressão da descoordenação motora e redução da neuropatologia. Apesar de ter sido observada uma indução limitada das chaperonas moleculares, este tratamento poderá ter atuado a nível da autofagia na medida em que houve indução dos níveis de LC3-II e beclina-1 no cérebro de animais tratados. Esta indução resultou na diminuição dos níveis de ataxina-3 (ATXN3) e uma redução da agregação intranuclear desta proteína. Para testar mais aprofundadamente a indução da autofagia como potencial terapia para a DMJ, foi testado LiCl isoladamente e em combinação com CCI-779 (atuando de forma independente e dependente da sinalização mTOR, respectivamente). Apesar da ativação da autofagia, sugerida pelos níveis aumentados de beclina-1, Atg7, LC3-II e redução dos níveis proteicos de p62, o tratamento do modelo DMJ com lítio foi de uma forma geral ineficaz ao nível do desempenho motor. Além disso, a terapia combinada de LiCl e CCI-779 revelou-se prejudicial em ambos os ratinhos WT e transgénicos, falhando na recuperação de sintomas neurológicos e sendo neurotóxico. O TUDCA é um ácido biliar com administração oral e permeável à BBB com funções neuroprotectoras conhecidas, através da sua capacidade anti-amiloidogénica, actividade de chaperona química e de modulação de vias apoptóticas. Adicionalmente, o TUDCA é um composto aprovado pela FDA para administração crónica no tratamento de doenças hepáticas, sendo também benéfico em diversos modelos de doenças neurodegenerativas. No modelo CMVMJD135, o tratamento com TUDCA atrasou o início da doença e melhorou o fenótipo motor incluindo equilíbrio, coordenação motora, e parâmetros da marcha, reduziu os reflexos neurológicos anómalos, melhorou os défices no movimento exploratório e força muscular. Apesar de o tratamento com este composto não ter reduzido os níveis de agregação da proteína ATXN3, foi eficaz na redução dos níveis de expressão de TNF-α, Il1β e Il10, tendo também reduzido a astrogliose no tronco cerebral e substantia nigra. Estes resultados demonstram a eficácia terapêutica da suplementação com TUDCA na DMJ, muito provavelmente através das suas capacidades anti-inflamatórias, o que torna este composto atrativo no tratamento de doenças neurodegenerativas, incluindo a DMJ. Por fim foi testada a creatina, outro composto natural reconhecido pela eficácia em restabelecer o equilíbrio energético na célula. A dieta suplementada com creatina conduziu a uma melhoria geral no fenótipo motor do ratinho CMVMJD135; nomeadamente, melhorou a coordenação motora, força nos membros e qualidade da marcha. Também teve impacto positivo em parâmetros neurológicos como os tremores e reflexos anormais. Surpreendentemente, o tratamento crónico com creatina atrasou o início do aparecimento de diversos sintomas e até aboliu a presença de alguns, o que reinforça a suplementação com creatina como uma estratégica eficaz no atraso na progressão de DMJ. Em conclusão, este estudo validou o novo modelo DMJ de ratinho para ensaios pré-clínicos como uma ferramenta valiosa para estudar simultaneamente mecanismos patogénicos associado à doença e para desenvolver novas estratégias terapêuticas. Além disso foi demonstrado que inibidores da Hsp90, TUDCA e creatina são candidatos terapêuticos relevantes para a DMJ, alguns dos quais com possibilidade de avançarem para ensaios clínicos em doentes.Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT) SFRH/BD/78388/201

Pharmacological therapies for Machado-Joseph disease

Machado-Joseph disease (MJD), also known as Spinocerebellar Ataxia type 3 (SCA3), is the most common autosomal dominant ataxia worldwide. MJD integrates a large group of disorders known as polyglutamine diseases (polyQ). To date, no effective treatment exists for MJD and other polyQ diseases. Nevertheless, researchers are making efforts to find treatment possibilities that modify the disease course or alleviate disease symptoms. Since neuroimaging studies in mutation carrying individuals suggest that in nervous system dysfunction begins many years before the onset of any detectable symptoms, the development of therapeutic interventions becomes of great importance, not only to slow progression of manifest disease but also to delay, or ideally prevent, its onset. Potential therapeutic targets for MJD and polyQ diseases can be divided into (i) those that are aimed at the polyQ proteins themselves, namely gene silencing, attempts to enhance mutant protein degradation or inhibition/prevention of aggregation; and (ii) those that intercept the toxic downstream effects of the polyQ proteins, such as mitochondrial dysfunction and oxidative stress, transcriptional abnormalities, UPS impairment, excitotoxicity, or activation of cell death. The existence of relevant animal models and the recent contributions towards the identification of putative molecular mechanisms underlying MJD are impacting on the development of new drugs. To date only a few preclinical trials were conducted, nevertheless some had very promising results and some candidate drugs are close to being tested in humans. Clinical trials for MJD are also very few to date and their results not very promising, mostly due to trial design constraints. Here, we provide an overview of the pharmacological therapeutic strategies for MJD studied in animal models and patients, and of their possible translation into the clinical practice.(undefined

Exploring drivers of consumer well-being in music festivals: a relationship marketing approach

In the recent decades, the music festivals industry has developed very fast as well as contributed for the growth of wealth in the tourism sector. However, the research up-to-date about festivals is at an early stage, as there are plenty concepts and themes that have not been explored yet. Therefore, this study is motivated to explore what is behind the music festivals’ phenomenon. This dissertation considers the context of music festivals in Portugal due to its increasing levels of tourism growth, and investigates the existing relationships between common concepts within the field of Relationship Marketing, such as consumer’s experience, emotions and level of satisfaction, and yet their level engagement and their sense of well-being. In order to establish a connection between all these constructs, the S-O-R framework developed by Mehrabian and Russell (1974), regarded as one of the most influential in environmental psychology, was adapted to this study to carry this investigation. The results of the study revealed that all the constructs explored in the study show a positive relationship that enables to better comprehend the music festival experience felt by visitors, but it should be noted that not all the dimensions of each construct can be considered as relevant to our theoretical model. The overall findings in the Conclusion Chapter presented some interesting information, particularly, the relationship between consumers’ engagement and well-being, because it provides innovative and revealing facts that have not been explored previously in the music festivals literature. The managerial implications concerned to this study are discussed at the end.Nas últimas décadas, a indústria dos festivais de música tem vindo a desenvolver-se rapidamente, como ainda tem contribuído para o crescimento da riqueza que é gerada através do sector do turismo. No entanto, a pesquisa que é recolhida até à data acerca de festivais encontra-se ainda numa fase inicial, uma vez que existem vários conceitos e temas que não foram ainda investigados. Desta forma, este estudo é motivado a explorar o que está por detrás do fenómeno dos festivais de música. Esta dissertação considera o contexto dos festivais de música em Portugal, devido aos altos níveis de crescimento do seu turismo, e investiga as relações entre alguns conceitos que são comuns na área do Marketing Relacional, como por exemplo, a experiência dos consumidores, as suas emoções e satisfação, e ainda os seus níveis de compromisso, e as suas sensações de bem-estar. De maneira a estabelecer uma conexão entre todos estes conceitos, o framework S-O-R desenvolvido por Mehrabian e Russell (1974), reconhecido como um dos mais influentes na área de psicologia ambiental, foi adaptado a este estudo para que fosse conduzida esta investigação. Os resultados deste estudo revelaram que todos os constructos explorados neste estudo demonstram uma relação positiva que permite compreender melhor a experiência dos festivais de música sentida pelos visitantes, mas deve também ser referido que nem todas as dimensões de cada constructo podem ser consideradas como relevantes para este modelo teórico. Os resultados gerais que se encontram no capítulo das conclusões apresentaram informação relevante, nomeadamente, a relação entre compromisso e bem-estar dos consumidores, por apresentar factos inovadores e reveladores que não foram ainda explorados na literatura dos festivais de música. As implicações que foram reconhecidas neste estudo são discutidas no final do mesmo

La narrativa para niños en España y Portugal entre los años 80 y 90 del siglo XX: una visión de conjunto

Este artículo analiza el panorama de la litera tura narrativa infantil publicada en España y Portugal en la década de los añ os 80 y 90. Con el fin de la dictadura política en estos dos países, se abre un nuevo periodo literario en el que autores de este momento histórico escriben para un tipo de público, el infantil, que muestra curiosidad e interés por nuevas temáticas que contribuirán a su progresiva formación intelectual y lectora. Los autores, títulos y editoriales presentados en este trabajo son un fiel reflejo de la nueva literatura infantil del momento que se hace eco de estas necesidades pedagógicas.This essay analyzes narrative children’s literature published in Spain and Portugal in the late 80s and 90s. With the end of political dictatorship in these countries, it occurs a new literary period in which authors of this historic moment write to a sort of public, children, who shows curiosity and interest in new topics that will help his progressive intellectual and reading formation. The authors, titles and publishers presented in this study are a reflection of the new children's literature of that time, making echo of these educational needs

A crise das dívidas soberanas da Zona Euro : análise da evolução do programa de ajustamento económico e financeiro português

Mestrado em Economia Internacional e Estudos EuropeusEste TFM tem como objetivo analisar a versão original do Programa de Ajustamento Económico e Financeiro português e as suas sucessivas revisões ao longo do tempo. O enquadramento teórico pretende assim retomar a literatura relacionada com o multiplicador orçamental de modo a conseguir compreender a parte empírica deste documento, no qual se faz uma análise dos documentos relativos ao processo de consolidação das contas públicas. Inclui-se igualmente uma análise dos desequilíbrios estruturais e conjunturais da economia portuguesa, focalizando no comportamento do produto e do mercado de trabalho.This document aims to analyse the original version of the Economic Adjustment Programme of Portugal and its subsequent revisions over time. The theoretical framework thus intends to resume the literature related to the fiscal multiplier in order to understand the empirical part of this paper, in which an analysis is made of the documents relating to the consolidation of the public accounts. It also includes an analysis of structural and cyclical economic imbalances of the Portuguese economy, focusing on the product behaviour and labour market

Insights into pathology and neurodegeneration features in a transgenic mouse model of Machado-Joseph disease

Dissertação de mestrado em Genética MolecularMachado-Joseph disease (MJD), also known as Spinocerebellar Ataxia 3 (SCA3), is the most common autosomal dominant ataxia worldwide, and is caused by a CAG repeat expansion within the coding region of the ATXN3 gene. The clinical variability of the disease phenotype as well as the age of onset depend on the length of the expanded repeat. The anticipation phenomenon is most frequently associated with repeat expansions in paternal transmission. MJD patients with a repeat expansion above 44 CAGs in the ATXN3 gene present cytoplasmic and/or intranuclear ataxin-3 aggregates and neuronal cell loss in specific areas of the brain. However, some questions remains unanswered in this disease: why only some subpopulations of neurons are affected, although ataxin- 3 is everywhere; what underlies this selective neuronal vulnerability; are these neurons dysfunctional or dying? In an attempt to address these issues, we took advantage of studying a cDNA transgenic mouse model (CMVMJD) expressing the mutant human ataxin-3 under the regulation of the CMV promoter (pCMV), previously generated in our lab. This transgenic mouse model shows an important overlap with genetic and clinical features of MJD, namely genetic instability of the expanded CAG repeat and a motor impairment phenotype. In this work, we performed an extensive pathological analysis of MJD mouse brains, that revealed a significant atrophy in the thalamus and in the dentate neurons. Increased GFAP immunostaining with reactive astrocytes was observed in the vestibular nuclei and substantia nigra of transgenic mice. Regarding cell death, we have searched for evidence of different cell death types (apoptosis and necrosis) by TUNEL assay, caspase-3 analysis and Fluoro-Jade B staining. We did not find any differences between wild-type and MJD transgenic mice, suggesting that probably the affected neurons are not dying, at least by apoptosis or necrosis, instead, they might just be dysfunctional. We also analysed of the somatic mosaicism in neuronal and non-neuronal tissues through aging revealed a significant increase in the mosaicism index of specific brain regions such as the pons, substantia nigra, cerebellar cortex, hipocampus, striatum, deep cerebellar nuclei and hypothalamus with age. However, there was no correlation between the extent of the mosaicism and the pathological involvement of a given region. The results allow us to conclude that the pCMVMJD94 mouse is a good model to study the pathogenic mechanisms of MJD, mimicking an early stage of the disease.A doença de Machado-Joseph, também conhecida por Ataxia Espinocerebelosa tipo 3 (SCA3), é a ataxia autossómica dominante mais comum em todo o mundo, causada por uma repetição de CAGs na região codificante do gene ATXN3. A variabilidade no fenótipo da doença assim como a idade de surgimento dos sintomas depende no tamanho da repetição expandida. O fenómeno de antecipação está mais frequentemente associado a transmissões paternas. Pacientes com DMJ com expansões acima de 44 CAGs revelam agregados citoplasmáticos e /ou nucleares e perda neuronal em áreas do cérebro específicas. Algumas questões chave permanecem por esclarecer. Por exemplo, nesta doença apenas algumas subpopulações de neurónios são afectadas, embora a ataxina-3 seja expressa em todas as áreas. O que está por detrás desta vulnerabilidade neuronal selectiva? Estarão estes neurónios a morrer ou estarão disfuncionais? Numa tentativa de responder a estas perguntas, utilizámos um modelo em ratinho que expressa o cDNA da ataxina-3 humana mutada, sob a regulação do promotor CMV (pCMV), previamente gerado no nosso laboratório. Neste trabalho, fizemos uma extensa análise patológica de cérebros de ratinho DMJ que revelaram uma atrofia relevante no tálamo e núcleos denteados. Também se observou um aumento da proteína GFAP, revelando um aumento da reactividade dos astrócitos, nos núcleos vestibular e substantia nigra dos ratinhos transgénicos. Também fizemos um rastreio de diferentes tipos de morte celular (apoptose e necrose) por TUNEL, análise da activação da caspase-3 (imunohistoquímica e western-blot) e coloração com Fluoro-Jade B. Não encontrámos diferenças significativas entre ratinhos do tipo selvagem e transgénicos, sugerindo que provavelmente estes neurónios não estarão a morrer, pelo menos por apoptose ou necrose, estando possivelmente disfuncionais. Para além disso, a repetição de CAG expandida, variou em mais de 50% das transmissões nos ratinhos transgénicos, com expansões típica transmitidas em meioses paternas e contracções em maternas. A análise do mosaicismo somático em tecidos neuronais e periféricos, durante o envelhecimento, revelou um aumento no índex de mosaicismo em regiões específicas do cérebro e mostrou ser dependente da idade. Este ratinho transgénico apresenta características genéticas e clínicas importantes que se sobrepõem às da DMJ, nomeadamente instabilidade intergeracional da expansão de CAGs, características patológicas da doença (astrogliose e neurónios atrofiados, nas regiões relevantes) e um fenótipo de descoordenação motora. Estes resultados permitiram-nos concluir que o ratinho pCMVMJD94 é um bom modelo para estudar os mecanismos patogénicos da DMJ, mimetizando estadios precoces da doença

Influência da Força e do Controlo Motor na Relação Entre a Atividade Elétrica Cerebral e Muscular

Atualmente, o cérebro e a comunicação neuronal são dos temas mais investigados pela comunidade científica. Nesse âmbito, diversos estudos atribuem um papel importante ao fenómeno de sincronia de fase na relação entre atividade elétrica cerebral e muscular, durante a realização de uma tarefa motora. A presente dissertação enquadra-se numa investigação neste contexto, havendo resultados que apontam para uma prevalência de sincronia, entre sinais de Eletroencefalograma (EEG) e Eletromiograma (EMG), em períodos de maior controlo do movimento. Assim, o principal objetivo desta dissertação incide na validação da teoria de que existe uma relação entre a sincronia e o controlo motor. Foi utilizado um dispositivo experimental lúdico, desenvolvido anteriormente, que possibilita um controlo fino da força, durante períodos de tempo alargados. A aquisição de dados decorreu num laboratório especializado, localizado no Departamento de Engenharia Eletrotécnica da Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa. O protocolo de aquisição consistiu na recolha de EEG e EMG superficial ao longo do antebraço direito, simultaneamente, enquanto cada um dos 11 sujeitos da amostra (4 do sexo masculino e 7 do sexo feminino) executava tarefas de controlo motor através da utilização do jogo, durante 2 minutos. O jogo – Keep Control – tem como objetivo movimentar um cursor, controlado pela força exercida no atuador, através de gates, dispostas em posições verticais aleatórias. A boa qualidade e concordância dos resultados obtidos após processamento dos sinais com os algoritmos Separação de Fontes por Descorrelação Temporal (do inglês, Time-Delay Separation) (TDSEP) e Análise com Referência de Fase (do inglês, Referenced Phase Analysis) (RPA), em MATLAB, fundamenta a teoria apresentada. Existem dois tipos de fontes de interesse: motoras e pré-frontais (contralaterais, ipsilaterais e bilaterais), verificando-se a prevalência das motoras. Adicionalmente, fontes monopolares localizadas no lobo parietal também aparentam algum interesse. O aumento do número de sujeitos da amostra possibilitou a obtenção de resultados mais robustos e consistentes.Currently, the brain and neuronal communication are one of the most studying topics by scientific community. In this context, several studies attribute an important role to the process of phase synchronization in the relationship between the electrical activity of the brain and the muscles, during the execution of a motor task. The following thesis is part of a research in the context, with results that point to a prevalence of synchrony between Eletroencephalogram (EEG) and Eletromyogram (EMG) signals, in periods of greater control of the movement. Thus, the main objective of this thesis focuses on the validation of the theory that there is a relationship between a synchrony and the control motor. The use of an experimental ludic device, previously developed, allowed precise control of the force, during extended periods of time. The data acquisition took place in a specialized laboratory, located in Departamento de Engenharia Eletrotécnica da Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa. The acquisition protocol consisted of the simultaneous collection of EEG and superficial EMG along the right forearm, while each of the 11 subjects (4 males and 7 females) performed motor control tasks through the use of the game, for 2 minutes. The game – Keep Control – aims to move a cursor, controlled by the force exerted on the actuator, through gates, arranged in random vertical positions. The good quality and coherence of the results obtained after processing the signals with the algorithms Time-Delay Separation (TDSEP) and Reference Phase Analysis (RPA), in MATLAB, bases the presented theory. There are two types of interesting sources: motor and pre-frontal (contralateral, ipsilateral and bilateral), and motor prevalence is verified. In addition, monopolar sources located in the parietal lobe also appear to have some interest. The increase in the number of subjects in the sample made it possible to obtain more robust and consistent results

Proteostasis networks in aging: novel insights from text-mining approaches

Aging is a topic of paramount importance in an increasingly elderly society and has been the focus of extensive research. Protein homeostasis (proteostasis) decline is a hallmark in aging and several age-related diseases, but which specific proteins and mechanisms are involved in proteostasis (de)regulation during the aging process remain largely unknown. Here, we used different text-mining tools complemented with protein–protein interaction data to address this complex topic. Analysis of the integrated protein interaction networks identified novel proteins and pathways associated to proteostasis mechanisms and aging or age-related disorders, indicating that this approach is useful to identify previously unknown links and for retrieving information of potential novel biomarkers or therapeutic targets.info:eu-repo/semantics/acceptedVersio

La narrativa para niños en España y Portugal entre los años 80 y 90 del siglo XX: una visión de conjunto

Este artículo analiza el panorama de la literatura narrativa infantil publicada en España y Portugal en la década de los años 80 y 90. Con el fin de la dictadura política en estos dos países, se abre un nuevo periodo literario en el que autores de este momento histórico escriben para un tipo de público, el infantil, que muestra curiosidad e interés por nuevas temáticas que contribuirán a su progresiva formación intelectual y lectora. Los autores, títulos y editoriales presentados en este trabajo son un fiel reflejo de la nueva literatura infantil del momento que se hace eco de estas necesidades pedagógicas.This essay analyzes narrative children’s literature published in Spain and Portugal in the late 80s and 90s. With the end of political dictatorship in these countries, it occurs a new literary period in which authors of this historic moment write to a sort of public, children, who shows curiosity and interest in new topics that will help his progressive intellectual and reading formation. The authors, titles and publishers presented in this study are a reflection of the new children's literature of that time, making echo of these educational needs.Cet article analyse le panorama de la littérature infantile pour les enfants, publiée en Espagne et en Portugal durant la décade des années 80 et 90. Á la fin de la dictadure politique dans ces deux pays, a lieu une nouvelle période littéraire pendant laquelle des auteurs de ce moment historique écrivent pour une sorte de public, infantile, qui démontre avoir cusiosité e intérêt pour des nouvelles tématiques qui contribuiront a leur progressive formation intelectuelle et lectrice. Les auteurs, les titres et les éditions présentés dans ce travail devienent un fidéle reflet de la nouvelle littérature pour les enfants du moment que se fait écho de ces besoins pédogogiques

Merging microarray studies to identify a common gene expression signature to several structural heart diseases

Background: Heart disease is the leading cause of death worldwide. Knowing a gene expression signature in heart disease can lead to the development of more efficient diagnosis and treatments that may prevent premature deaths. A large amount of microarray data is available in public repositories and can be used to identify differentially expressed genes. However, most of the microarray datasets are composed of a reduced number of samples and to obtain more reliable results, several datasets have to be merged, which is a challenging task. The identification of differentially expressed genes is commonly done using statistical methods. Nonetheless, these methods are based on the definition of an arbitrary threshold to select the differentially expressed genes and there is no consensus on the values that should be used. Results: Nine publicly available microarray datasets from studies of different heart diseases were merged to form a dataset composed of 689 samples and 8354 features. Subsequently, the adjusted p-value and fold change were determined and by combining a set of adjusted p-values cutoffs with a list of different fold change thresholds, 12 sets of differentially expressed genes were obtained. To select the set of differentially expressed genes that has the best accuracy in classifying samples from patients with heart diseases and samples from patients with no heart condition, the random forest algorithm was used. A set of 62 differentially expressed genes having a classification accuracy of approximately 95% was identified. Conclusions: We identified a gene expression signature common to different cardiac diseases and supported our findings by showing their involvement in the pathophysiology of the heart. The approach used in this study is suitable for the identification of gene expression signatures, and can be extended to different diseases.info:eu-repo/semantics/publishedVersio