Acute methamphetamine exposure induces long-lasting depressive-like behaviour in mice

Trabalho final de mestrado integrado em Medicina área científica de Farmacologia, apresentado á Faculdade de Medicina da Universidade de CoimbraO consumo de metanfetamina (META) conduz a deficits cognitivos e alterações de humor, incluindo sintomas depressivos. A administração de uma única dose elevada de META em roedores reproduz a disfunção monoaminérgica observada em dependentes de META.. Contudo, ainda não se sabe se um regime neurotóxico de META é capaz de induzir um comportamento depressivo em murganhos. Neste trabalho, propomo-nos avaliar o comportamento depressivo em murganhos após uma única dose elevada de META. Murganhos adultos C57BL/6 (3-4 meses de idade) foram injetados com META (30 mg/kg, i.p.) e o seu comportamento depressivo foi avaliado até aos 49 dias após a administração pelo teste da suspensão pela cauda (TST). As alterações comportamentais relacionadas com o estriado, incluindo a função motora e a memória de procedimento, foram também avaliadas pelos testes do poste vertical (PT) e do labirinto aquático de Morris (MWM, versão da plataforma visível), respetivamente. As alterações na homeostasia das monoaminas no córtex frontal e no estriado, assim como os níveis de proteína glial fibrilar ácida (GFAP), foram avaliados através de HPLC-ED e western-blotting. Todos os valores foram expressos pela média ± SEM e a análise estatística foi realizada com recurso ao teste t-student ou à ANOVA seguida de um teste de comparação múltipla de Newman-Keuls. Esta dose única e elevada de META provocou uma hipertermia aguda com pico à 1h após a sua injeção. A META aumentou significativamente o tempo de imobilidade no TST aos 3, 8 e 49 dias após o tratamento com este psicoestimulante. Por outro lado, não foram observadas alterações na função motora no PT, 3 e 8 dias após a injecção com META. Além disso, a META não prejudicou a aprendizagem nem a memória de procedimento durante os quatro dias de teste na versão da plataforma visível do MWM (1-4 dias após adminstração com META). A velocidade de natação também não foi alterada nos murganhos injectados com META, reforçando a ausência de deficits motores. Relativamente aos parâmetros neuroquímicos, foi observada uma depleção acentuada de dopamina (30%) e de tirosina hidroxilase (40%) no córtex frontal e no estriado dos murganhos injetados com META, aos 3 e 49 dias após a sua administração. A META também induziu uma depleção de 5-HT no cortex frontal aos 3 dias após a injecção, que persistiu até aos 49 dias. Adicionalmente, a intensa astrogliose observada aos 3 dias vem confirmar que estamos na presença de um modelo neurotóxico. Os nossos resultados evidenciam, pela primeira vez, que uma administração aguda de META induz um comportamento depressivo a longo prazo em murganhos acompanhado por persistentes alterações monoaminérgicas. Este modelo experimental de comportamento depressivo a longo prazo é relevante para desvendar o substrato neurobiológico subjacente aos sintomas depressivos observados nos dependentes de META.Methamphetamine (METH) abuse leads to cognitive and mood abnormalities including depressive symptoms. A single high dose of METH administration to rodents models the monoaminergic dysfunction seen in METH addicts. However, whether this neurotoxic METH regimen induces a depressive-like behaviour remains unknown. Herein, we aimed to assess the depressive-like behaviour in mice following a single-high dose of METH. Adult C57BL/6 mice (3-4 month-old) were injected with METH (30 mg/kg, i.p.) and their depressive-like responses were evaluated up to 49 days post-injection in the tail-suspension test (TST). Striatal-related behavioural alterations including motor function and procedural memory were also assessed by pole-test (PT) and Morris water maze (MWM, cued version), respectively. Frontal cortical and striatal changes in monoamine homeostasis as well as glial fibrillary acidic protein (GFAP) levels were evaluated by HPLC-ED and western-blotting. All values were expressed as means ± SEM and statistical analysis were performed by Student’s t test or by ANOVA followed by Newman–Keuls multiple comparison test. This 2 single high METH dose caused an acute hyperthermia peaking at 1 h. METH increased significantly the immobility time in the TST at 3, 8 and 49 days post-treatment. In contrast, METH did not disrupt the motor function as evaluated in the PT at 3 and 8 days post-treatment. Additionally, METH did not impair the procedural learning and memory over the four testing days in the cued version of the MWM (1-4 days post-treatment). Moreover, swimming speed was not changed in METH treated mice, reinforcing the absence of motor impairments. Concerning the neurochemistry parameters, a marked depletion of dopamine (30%) and tyrosine hydroxylase (40%) were observed in frontal cortex and striatum of METH-injected mice at 3 and 49 days post-treatment. At 3 days post-treatment, METH also induced a depletion of 5-HT in frontal cortex that persisted up to 49 days. Moreover, a robust astrogliosis observed in the striatum at 3 days lends additional credence to this neurotoxic model. Our results provide new evidence that an acute administration of METH induces a long-lasting depressive-like behaviour underlined by a long-term monoaminergic disruption in mice. This experimental model of long-term depression-like behaviour is of relevance to unravel the neurobiological substrate underlying depressive symptoms seen in METH addicts

Erosão laser 3D - tecnologia de micromaquinação

Caracteriza-se e descreve-se a tecnologia de erosão por laser, evidenciando algumas das suas potencialidades e possíveis áreas de aplicação. Faz-se referência à máquina DML 40 SI do INETI, utilizada na experimentação, com indicação das características do laser nela instalado. Segue-se a apresentação de um conjunto de resultados experimentais em que se analisa a influência da espessura das camadas, da frequência e da velocidade de varrimento do laser, na qualidade da superfície. Concluiu-se que os melhores resultados são obtidos para uma espessura de camada de 2 m, frequência de 30 KHz e velocidade de 300 mm/s, se bem que a taxa de remoção de material nestas condições seja baixa

Precarious and less well paid? Wage differences between permanent and fixed-term contracts across the EU

We analyse wage differences between permanent and fixed-term contracts across the EU using data from the European Structure of Earnings Survey. We find that, after controlling for individual and job characteristics, workers on permanent contracts earn on average about 15% more than workers on fixed-term contracts with similar observable characteristics. The permanent contract wage premium is higher for men, workers at middle age and with middle education, and performing non-elementary occupations. We also find that permanent workers enjoy a higher wage premium for education and age. We explore cross-country differences in the wage premium for permanent workers and correlate them with indicators of labour market institutions. In particular, results indicate that the wage premium is higher the stricter is employment protection for permanent contracts and the higher the share of temporary employment, which supports the view that workers with fixed-term contracts suffer from a negative wage gap due to lower bargaining power

Responsabilidade e governação na moderna gestão hospitalar

Doutoramento em Ciências da SaúdeEsta dissertação, elaborada com vista à obtenção do grau de doutor pela Universidade de Aveiro, compõe-se de onze capítulos. O primeiro inclui, além de uma introdução, a justificação, os objectivos e a estrutura da dissertação. Seguem-se quatro capítulos relativos às empresas privadas onde são abordados, sucessivamente, as teorias da governação, a governação e gestão nas empresas, a regulação e a avaliação da performance, a avaliação da governação e da gestão de topo. O capítulo VI é dedicado à produção e avaliação na Administração Pública seguindo-se dois capítulos, um abordando a especificidade dos hospitais e da sua avaliação o outro caracterizando o hospital público português e a sua avaliação. No capítulo IX faz-se a síntese do que pode ser designado enquadramento teórico. No estudo empírico, capítulo X, definimos o problema, “Inexistência de modelo de avaliação dos conselhos de administração (CA) dos hospitais entidade pública empresarial”, descrevemos a metodologia seguida e os resultados obtidos, que se traduzem num modelo de avaliação dos CA. O modelo é constituído por três áreas – Resultados do hospital, Cumprimento da estratégia, Forma como o CA actuou e liderou – decompostas em critérios e indicadores, adequadamente ponderados, que permitem a valoração concreta de um qualquer CA de hospital EPE. Este modelo recolheu um consenso elevado dos principais peritos nacionais no tema que participaram nas técnicas de consenso usadas para a sua construção: um painel Delphi e três Técnicas de Grupo Nominal. Finalmente no capítulo XI extraímos as conclusões e referimos questões para investigação futura.This doctoral dissertation has eleven chapters. The first one includes an introduction and the justification, objectives and structure of the dissertation. The private firm is the subject of the four chapters that follow, where we analyze: the theories of governance; the governance and the management of the business firm, its regulation and performance evaluation; the evaluation of the governance and top management. The public production and management is the focus of chapter VI. In the following two chapters, we analyze the hospital: its unique nature and specificity of evaluation in chapter VII; the characteristics of the Portuguese public hospital and its evaluation in chapter VIII. The chapter IX provides a global synthesis of the first eight chapters that may be considered the theoretical part. In the empiric study, chapter X, the problem is defined: “Absence of a model for evaluation of the management boards of the Portuguese public hospitals”; the methodology is described and the results obtained are presented, including the proposed model of performance evaluation. That model is composed of three areas: hospital results; fulfilment of the strategy; leadership of the management board. Each area has criteria and indicators, properly weighed, which permit the evaluation of any management board of Portuguese public hospital EPE. This model has obtained a high consensus of the main Portuguese experts in the field that participated in the consensus techniques utilized for the construction of the model: one Delphi Technique and three Nominal Group Techniques. In chapter XI conclusions are extracted and questions for future investigation are presented

Integração de informação do centro de cartografia da EDIA no sistema ERDAS Apollo: relatório de estágio

A necessidade de organização e de acesso aos dados e informação que se produz é importante para tornar qualquer processo e tarefa mais eficiente e célere. Com esse intuito o Centro de Cartografia da Empresa de Desenvolvimento e Infra-estruturas do Alqueva, S.A. (EDIA) considerou pertinente criar um repositório de dados produzidos. O acesso aos dados pode ser feito através de um geoportal ou por aplicações desktop através de serviços web (WMS e WFS). O presente relatório apresenta, de forma detalhada, a descrição das tarefas executadas durante o estágio realizado no Centro de Cartografia da EDIA S.A, com a finalidade de reunir e organizar a informação a disponibilizar através de uma infraestrutura de dados espaciais aos utilizadores do Centro de Cartografia supracitado.The need to organize and access to data and information is important to improve efficiency of any process and make every task faster. With that propose the Cartography Center of Alqueva infrastructure Company (EDIA) consider pertinent to create a data repository. The data access can be done through by a geoportal or even using desktop applications through web services (WMS and WFS). This report shows the tasks that were done during the internership in the Cartography Center with the intention to gather and organize the information to show in a spatial data system to all Cartography Center users

Estudo sanitário de um apiário da região centro Portugal : identificação, monotorização e controlo dos principais agentes etiológicos

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaO conhecimento do estado sanitário das colmeias e dos apiários é uma ferramenta chave para o apicultor obter uma redução na mortalidade anual e consequentemente um aumento do sucesso da exploração apícola. Os objetivos deste trabalho basearam-se na realização de 3 estudos sanitários num apiário da região centro de Portugal, durante a época de maior mortalidade (início do outono, inverno e início da primavera) de forma a obter informação sobre o real estado sanitário das colmeias, pesquisando os principais agentes etiológicos no território nacional: a) Varroa destructor; b) Nosema spp.; c) Ascosfera apis; d) Senotainia tricuspis e e) Paenibacilus larvae. No decurso deste estudo fez-se a aplicação de 4 acaricidas homologados contra a varroose (Apivar®, Thymovar®, Apilife-Var® e Apiguard®) de forma a comparar a sua eficácia. Para tal, foram utilizadas 20 colmeias, criadas na primavera que antecedeu o início do estudo, sujeitas ao mesmo maneio e provenientes da mesma colónia-mãe de forma a reduzir possíveis fatores causadores de erros. Após o segundo estudo sanitário foram criados 5 grupos para efetuar a aplicação e comparação dos métodos e controlo sendo que nos grupos 1 a 4 foram aplicados de acaricidas e o grupo 5 usado como grupo controlo. No outono, observou-se que todas as colmeias estavam afetadas por S. tricuspis (média 12,12%) e que 60% continham V. destrutor, com taxas de infestação médias inferiores a 1. No inverno, o único parasita encontrado foi V. destructor, com 100% das colmeias afetadas e com taxas médias de infestação de 3,75% nas abelhas adultas e 8,6% nos favos de criação. No início da primavera, 15% das colmeias apresentavam Nosema spp. e 90% das colmeias V. destructor, sendo que os grupos (1 a 4) sujeitos à aplicação de métodos de controlo apresentaram uma infestação média por colmeia de 2,45% nas abelhas e de 3,22% nos favos. A avaliação da eficácia dos métodos de controlo contra a varroose mostrou que o Apilife-Var® foi o fármaco mais eficaz seguido do Apivar®, Thymovar® e do Apiguard®.ABSTRACT - The knowledge of the health status of hives and apiaries is a really important tool for the beekeeper in order to obtain a reduction in annual mortality and consequently an increase in the success of beekeeping. The objective of this work consisted in the realization of 3 health studies in an apiary in the central region of Portugal during the season of higher mortality (early Autumn, Winter, and early Spring) in order to obtain information on the real health status of the hives by researching the main etiological agents in the national territory: a) Varroa destructor; b) Nosema spp.; c) Ascosfera apis; d) Senotainia tricuspis and e) Paenibacilus larvae. During the course of this study, 4 approved acaricides against varroose (Apivar®, Thymovar®, Apilife-Var® and Apiguard®) were applied to compare their effectiveness. For this purpose, 20 hives were used, all of them created in the spring before the beginning of the study, subjected to the same management and descending from the same mother colony, in order to reduce possible factors that would cause evaluation errors. After the second health study, 5 groups were created to carry out the application and comparison of the control methods. From group 1 to 4 were applied acaricides and group 5 was used as a control group. In autumn, it was observed that all hives were affected by S. tricuspis (average 12.12%) and that 60% contained V. destructor, with average infestation rates below 1%. In winter, the only parasite found was V. destructor, with 100% of hives affected and with an average infestation rates of 3.75% in adult bees and 8.6% in breeding combs. In early spring, 15% of hives had Nosema spp. and 90% of hives had V. destructor, being that groups (1 to 4) in which were applied varroa control methods having a mean hive infestation of 2.45% in adult bees and 3.22% in breeding combs. The evaluation of the effectiveness of control methods against varroosis showed that Apilife-Var® was the most effective drug followed by Apivar®, Thymovar® and Apiguard®.N/

Relatório de estágio

O Mestrado de Enfermagem, com especialização em Enfermagem Comunitária, visa a aquisição e desenvolvimento de competências para o exercício autónomo, autorrefletido e com poder de ajuizamento crítico sobre os cuidados prestados e a sua qualidade ao nível dos cinco níveis de prevenção do cliente comunidade. O presente relatório, realizado no âmbito da unidade curricular de Estágio, visa descrever de forma sucinta, clara e reflexiva o percurso da construção de competências específicas para a intervenção especializada em Enfermagem Comunitária. Ele propõe-se a sintetizar as etapas de crescimento pessoal e profissional que permitem uma melhoria da qualidade dos cuidados prestados, um maior desenvolvimento profissional e a melhoria da satisfação dos grupos e comunidades em que intervim. Nele se demonstram as competências desenvolvidas e que entroncam nos objetivos académicos definidos por este Mestrado, bem como no perfil de competências preconizado pela Ordem dos Enfermeiros para o desempenho autónomo de cuidados especializados de Enfermagem a grupos e comunidades. Desde a realização do Diagnóstico de Saúde, realizado no módulo I, que permitiu conhecer a realidade dos cuidadores familiares de idosos dependentes, identificando as principais necessidades em saúde, tantas vezes negligenciadas em detrimento da atenção dispensada ao idoso dependente, em particular em relação ao impacto negativo decorrente da tarefa de Cuidar (ao nível da sobrecarga e funcionalidade familiar). Após a identificação dos problemas, surgiu a necessidade de intervir ativamente e numa lógica multidisciplinar e de proximidade, envolvendo outros profissionais e indo ao encontro das necessidades detetadas nos cuidadores, inclusive no seu domicílio. Assim desenvolvi o projeto de intervenção comunitária: “Cuidar do Cuidador”, que teve como objetivo geral reduzir o impacto do cuidado informal nos cuidadores familiares, por intermédio da intervenção em prol da adesão e desempenho adequado do papel de prestador de cuidados, prevenindo a exaustão do cuidador e, empoderando-o, promovendo as competências para o cuidado informal. Contribuiu-se assim para um exercício mais equilibrado e sustentado do papel de prestador de cuidados. Para isso recorri a diversas estratégias e atividades, de onde se destacam as sessões de empoderamento e educação para a saúde, o grupo de ajuda e a intervenção domiciliária, para além da mobilização de diversas parcerias estratégicas, sem as quais o sucesso, repercutido em ganhos em saúde, não seria possível. Tornou-se exequível avaliar o impacto deste projeto por intermédio de um conjunto de indicadores de desempenho, que demonstraram a sua eficácia e significativa importância na melhoria da qualidade de vida dos cuidadores familiares, demonstrando clara e inequivocamente ganhos em saúde pela intervenção especializada do enfermeiro ao nível comunitário, particularmente ao nível da aquisição de conhecimentos, redução da sobrecarga do cuidador e promoção da adesão ao papel de prestador de cuidados.The Master in Nursing, with a specialization in Community Nursing, seeks to provide de acquisition and development of skills for autonomous, self-reflected and decision-based nursing performance, on the five levels of prevention, on a group/community level. This report aims to describe succinctly and clearly the route towards building skills for the specialized intervention in Community Nursing. Thus, it proposes to summarize the stages of personal and professional growth that can considerably enhance the quality of care, increase professional development and improves the satisfaction of the groups and communities in which I intervened. It demonstrates the skills developed and which converge in the recommended by Ordem dos Enfermeiros to perform specialized nursing actions in groups and communities. From the completion of Diagnostic Health, which helped identify the reality of family caregivers of frail older adults, identifying the main real, potential and latent health needs of this group, so often neglected by nurses at the expense the attention given to dependent elderly, particularly what concerns to the negative impact arising from the task of caring (the level of burden, functionality, and family dynamics). Following the identification of health problems, the need to intervene actively and in a multidisciplinary and proximity way, was a reality. Thus was born the Community Intervention Project: "Caring for the Caregiver," which aims to generally reduce the impact on family caregivers, through the intervention in favor of adherence and adequate performance of the role of provider of care, preventing the burnout of the caregiver and empowering it, promoting the acquisition and development of skills for care giving, contributing that way to a more balanced and sustained exercise the role of carer. This project was based on a multidisciplinary and outreach approach, involving other health professionals and intervening even on the caregivers home, promoting adherence and proper performance of the role of carer. To achieve this the project ran various activities, which highlight the empowerment and health education group sessions and psychological support group, in addition to the mobilization of several strategic partnerships without which the success reflected in measurable gains in health, would not be possible. It became possible to evaluate the impact of this project through a set of performance indicators that have proved the effective and meaningful role of a specialized nurse at Community level in improving the quality of life of family caregivers through the reduction of the negative impact associated with the task of caring, demonstrating clearly and unequivocally health gains by their intervention

Certificação Energética do Teclabs

Tese de mestrado integrado, Engenharia da Energia e do Ambiente, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2020Currently, there is a great concern among representatives from all countries of the world about the objectives to be defined in order to mitigate the emission of greenhouse gases and their impact on our planet. In the European Union, the buildings sector represents more than 41% of the final energy consumed and in Portugal it represents almost 30%. The energy certification of buildings introduced in Europe through the Energy Performance of Buildings Directive (EPBD) was an important measure that recognized the active role that the building sector has in the emissions of each country. This master's thesis consists of the energy certification of a service building, applying the Energy Performance Regulation of Commercial and Service Buildings (RECS) in effect in Portugal. The evaluation of the building's energy performance was carried out by dynamic multi-zone simulation using the EnergyPlus® simulation software. The Energy Efficiency Class attributed to the building was B, as it presented an RIEE of 0.55. Potential improvement measures were evaluated, through their cost of implementation in comparison with the benefit they would bring to the energy bill. The replacement of lighting equipment allows an annual saving always higher than € 657 with a maximum return period of less than 2 years and 8 months. The installation of a 10kWp photovoltaic system allows an annual saving of more than 2200 € with a maximum payback period of 5 years and 7 months. Even when applied separately, each measure allows the improvement of the building's Class to Category A, which allows the building to obtain a reduction of the Municipal Property Tax (IMI) of up to 25%. This dissertation recommends the implementation of both measures in order to obtain greater annual savings after the return period of both investments.Atualmente existe uma grande preocupação entre os representantes de todos os países do mundo sobre quais os objetivos a definir para mitigar a emissão de gases de efeito estufa e o seu impacte no nosso planeta. Na União Europeia o sector dos edifícios representa mais de 41% da energia final consumida e em Portugal representa quase 30%. A certificação energética dos edifícios introduzida na Europa através da Energy Performance of Buildings Directive (EPBD) foi uma importante medida que reconheceu o papel ativo que o sector dos edifícios tem nas emissões de cada país. Esta dissertação de mestrado consiste na certificação energética de um edifício de serviços, aplicando o Regulamento de Desempenho Energético dos Edifícios de Comércio e Serviços (RECS) em vigor em Portugal. A avaliação do desempenho energético do edifício foi realizada por simulação dinâmica multizona recorrendo ao software de simulação EnergyPlus®. A Classe de Eficiência Energética atribuída ao edifício foi B, pois este apresentou um RIEE de 0.55. Foram avaliadas potenciais medidas de melhoria, através do seu custo de implementação em comparação com o benefício que trariam à fatura energética. A substituição de equipamentos de iluminação permite uma poupança anual nunca inferior a 654€ possuindo um período de retorno máximo inferior a 2 anos e 8 meses. A instalação de um sistema fotovoltaico de 10kWp permite uma poupança anual superior a 2200€ possuindo um período de retorno máximo de 5 anos e 7 meses. Isoladamente, cada medida permite o melhoramento da Classe do edifício para a categoria A, o que coloca o edifício apto a obter uma redução do Imposto Municipal sobre Imóveis (IMI) de até 25%. A presente dissertação recomenda a implementação de ambas as medidas visando obter uma poupança anual maior após o período de retorno de ambos os investimentos

How early life experience shapes mate preference in female mice

Tese de mestrado. Biologia (Biologia Evolutiva e do Desenvolvimento). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2013Mate choice is an evolutionary process with a profound impact in species morphology, behavioural displays and overall success. We are interested in understanding the proximate mechanisms underlying the assortative mate choice exhibited by Mus musculus musculus females when given a choice between a male of their own subspecies and a male from the closely related subspecies, Mus musculus domesticus. Previous results from our laboratory suggest that this assortative preference is modulated by early life experience. Because mice rely primarily on olfactory cues for communication, our hypothesis is that M. m. musculus females are using an olfactory imprinting process in early life to establish their mating preferences. To understand which cues are important for this learning, we manipulated different elements of the mice’s social context within the first weeks of life, such as the presence of the father. We also used classical conditioning with artificial odours to alter the olfactory experience of M. m. musculus females during post-natal development. We found the father’s presence during M. m. musculus female’s upbringing to be irrelevant in the establishment of the female’s assortative preferences. Moreover, the early olfactory experience also seems to have no influence in the establishment of these preferences.Darwin baseou a sua teoria da evolução em duas formas de selecção. A primeira, selecção natural, refere-se à sobrevivência das espécies melhor adaptadas (Darwin, 1859). A segunda refere-se à luta para encontrar parceiros sexuais, sendo conhecida como selecção sexual (Darwin, 1871). Esta pode ser intrasexual, onde indivíduos de um sexo (normalmente os machos) lutam para ter acesso a parceiros sexuais, ou intersexual, onde as preferências de acasalamento das fêmeas, combinadas com competição entre os machos para atrair as fêmeas, determinam o sucesso de cada indivíduo. Zonas híbridas são locais ideias para estudar selecção sexual e o seu papel na manutenção da identidade das espécies. Acasalamento selectivo, um tipo particular de selecção sexual onde os indivíduos preferem acasalar com parceiros que são fenotipicamente semelhantes, é um tipo comum de barreira pré-zigótica em zonas híbridas (Majerus, 1986; Shurtliff, 2011). Em mamíferos, uma das primeiras zonas híbridas a estudada foi a do murganho (Mus musculus), ocupada por duas subespécies, Mus musculus musculus e Mus musculus domesticus. Estas duas subespécies têm origem numa população ancestral do continente Indiano (Boursot, 1993) que divergiu em alopatria acompanhando a migração do homem, o desenvolvimento agrícola e a abertura de novos nichos ecológicos (Auffray, 1990). A subespécie musculus colonizou a Europa Oriental e o Norte Asiático, enquanto a subespécie domesticus ocupou a baía do Mediterrâneo e a Europa Ocidental, o que levou a um contacto secundário e à formação de uma zona híbrida que vai desde a Dinamarca até à Bulgária (Boursot, 1993). Pensa-se que várias barreiras pré e pós-zigóticas contribuem para o baixo fluxo genético entre estas duas subespécies, uma delas sendo a forte selecção contra híbridos, evidenciada pela esterilidade (Forejt, 1996), aumento da carga parasítica (Moulia, 1991, 1993) e reduzida introgressão nos genes localizados nos cromossomas sexuais, dos híbridos. Para além da selecção contra os híbridos, as fêmeas da subespécie musculus exibem uma forte preferência sexual por machos da sua própria subespécie (Baudoin, 1998). Tal como em vários roedores, existem evidências de que as fêmeas musculus utilizam informação da urina e saliva dos machos para discriminar entre diferentes subespécies (Laukaitis, 1997; Ganem, 2001) e assim escolher um parceiro sexual. Esta preferência sexual parece ter evoluído no seio da zona híbrida e não durante a divergência em alopatria das duas subespécies, uma vez que a preferência sexual das fêmeas musculus é significativamente mais forte na zona de contacto entre as duas subespécies, do que em populações alopátricas (Smadja & Ganem, 2005). No nosso laboratório, estamos interessados em perceber os mecanismos subjacentes às preferências sexuais das fêmeas musculus, especificamente, como é que a informação de múltiplos machos é processada para além da periferia, e também como é que experiência prévia e o estado interno das fêmeas influencia a sua decisão. Para responder a estas questões, nós estabelecemos um paradigma comportamental que simula a escolha natural das fêmeas na natureza entre os machos musculus e domesticus (Lima, 2013). Com este paradigma mostrámos que somos capazes de reproduzir, em condições controladas de laboratório, a preferência clássica exibida pelas fêmeas musculus por machos da sua própria subespécie. Esta preferência é evidenciada tanto em situações de contacto total, em que é permitido às fêmeas escolher com que machos preferem acasalar, como em situações de contacto limitado, onde apenas contacto entre os focinhos do macho e da fêmea é permitido. Outro conjunto de experiências no nosso laboratório mostrou que as preferências sexuais das fêmeas musculus são altamente dependentes do ambiente em que estas fêmeas são criadas, uma vez que fêmeas criadas numa família da subespécie domesticus perdem a sua preferência natural por machos musculus (Lima, não publicado). O sistema olfactivo, a principal forma de comunicação em roedores, sobretudo em recém-nascidos, é provavelmente muito importante neste processo. Com base nestes resultados desenvolvemos uma hipótese de que as fêmeas estariam a aprender através dos cheiros presentes no ambiente pós-natal quais os machos com que deve acasalar em idade adulta. Para isso, manipulámos vários elementos do contexto social das fêmeas durante as suas primeiras semanas de vida, como por exemplo a presença do pai. Empregámos também técnicas de condicionamento olfativo, utilizando odores artificias para alterar a experiência olfactiva das fêmeas musculus durante as suas primeiras semanas de vida. Vários elementos do ambiente pós-natal podem fornecer informação às fêmeas sobre com que machos acasalar em idade adulta. Resultados deste projecto mostram que a presença do pai no ambiente pós-natal não é necessária para que as fêmeas aprendam com que machos devem acasalar. Tanto fêmeas criadas com ou sem pai mostram uma forte preferência por machos da subespécie musculus. Estes resultados podem ser explicados se o pai não tiver qualquer papel na aprendizagem das preferências sexuais das fêmeas. Por outro lado, sendo esta preferência um elemento crucial para a manutenção do isolamento entre as duas subespécies, é possível que a aprendizagem seja de tal forma robusta que mesmo que as fêmeas utilizem informação proveniente do pai, consigam na sua ausência utilizar outras fontes de informação, como a mãe ou os irmãos. Para investigar os efeitos da experiência olfactiva das fêmeas musculus na aprendizagem das suas preferências sexuais, utilizámos odores artificiais e condicionamento clássico para manipular a experiência pós-natal das fêmeas. Começámos por utilizar citronela, um odor a limão, para alterar o cheiro do ninho durante o desenvolvimento das fêmeas. A nossa previsão era que as fêmeas expostas a citronela mostrassem uma preferência por este odor em idade adulta. No entanto, não encontrámos diferenças significativas no comportamento das fêmeas condicionadas e não-condicionadas com citronela. Na realidade, os primeiros conjuntos de experiências sugeriram que este odor poderia ser aversivo para as fêmeas, algo que viemos mais tarde a confirmar. Uma vez que as experiências com citronela não nos permitiram testar a nossa hipótese acerca da importância das experiência olfactivas no desenvolvimento das preferências sexuais de fêmeas musculus, decidimos alterar a sua experiência olfactiva alterando o cheiro, não do ninho, mas da mãe. Para isso utilizámos outro par de odores, alho e baunilha, que foram pintados dia sim, dia não nos mamilos e área genital das mães. Começámos por testar o comportamento de fêmeas musculus, não condicionadas, em relação a estes dois odores, sem qualquer macho. Descobrimos que as fêmeas musculus têm uma aversão ao odor de alho e exibem uma resposta de neutralidade, ou ligeira atracção, para a baunilha. Em fêmeas criadas por mães que cheiravam a baunilha, não encontrámos um efeito significativo da nossa manipulação, uma vez que tanto fêmeas criadas com mães não manipuladas como fêmeas criadas com mães pintadas com baunilha, não mostram uma maior atracção por machos perfumados com baunilha. Estes resultados mostram que o nosso protocolo de condicionamento foi ineficaz em alterar as preferências sexuais das fêmeas. Em conclusão, este estudo trouxe mais informação sobre o papel de experiência prévia na escolha de um parceiro sexual. Testámos diferentes protocolos de condicionamento olfactivo e avaliámos a importância do pai no desenvolvimento das preferências sexuais de fêmeas musculus. Os resultados aqui apresentados levantam também importantes questões que será importante responder no futuro. Isto permitir-nos-á aprender mais acerca dos mecanismos neuronais por detrás das preferências das fêmeas musculus