Estrógeno exógeno no início do ciclo estral de vacas leiteiras na indução do estro e na dinâmica ovariana

O objetivo do presente trabalho foi verifi car o efeito do estrógeno exógeno, em fase precoce do ciclo estral, de vacas leiteiras, na indução do comportamento (sinais) de estro e na dinâmica ovariana. Foram utilizadas 16 vacas mestiças holandês-zebu ciclando regularmente, sem apresentar qualquer alteração clínica ou reprodutiva. As vacas foram incluídas ao acaso nos respectivos tratamentos. Tratamento 1: oito vacas receberam 2,5mL de cipionato de estradiol no 1º dia do ciclo estral, (considerando dia 0 o dia do estro). Tratamento 2 (controle): oito vacas sem tratamento. A manifestação de estro foi monitorada visualmente. Os exames ultrassonográfi cos foram realizados diariamente pela manhã, iniciando no dia do estro. As coletas de sangue para as dosagens de progesterona tiveram início no dia do estro (dia 0) e foram realizadas a cada três dias até o próximo estro. Os animais que receberam estrógeno no 1o dia após o estro natural manifestaram os sinais característicos de estro (psíquicos, útero túrgido e muco abundante) um dia após o tratamento. Esta redução do intervalo de estro para apenas dois dias pode favorecer a eliminação de bactérias do útero (quando presentes), aumentando, consequentemente, a eficiência reprodutiva. Excetuando o dia da emergência da 1a onda folicular, todas as outras variáveis estudadas (número e comprimento de ondas, características dos folículos dominantes e subordinados, assim como os parâmetros relacionados ao corpo lúteo e produção de progesterona) não foram afetadas pela aplicação de estrógeno um dia após o estro. A aplicação de cipionato de estradiol em vacas mestiças, um dia após o estro natural promove o aparecimento de sinais deestro (psíquicos, útero túrgido e muco abundante) dois dias após o estro natural, sem afetar as características do ciclo estral subsequente

USO DA rbST NO DIA DO ESTRO EM RECEPTORAS DE EMBRIÃO BOVINO CRIOPRESERVADO

Estudou-se o efeito da administração de duas doses de rbST (250 e 500 mg) no dia do estro em receptoras de embrião bovino criopreservado na taxa de gestação e na concentração sérica de progesterona. No experimento I, 44 receptoras foram distribuídas em dois tratamentos: T1(n = 22, controle) e T2(n = 22), recebendo a administração subcutânea de 250 mg de rbST. No experimento II, 71 receptoras foram distribuídas em: T1(n = 31, controle) e T2(n = 40), recebendo 500 mg de rbST. Os diagnósticos de gestação foram realizados 30 dias após o estro. As taxas de gestação não diferiram entre tratamentos em ambos os experimentos (40,9%(T1) vs 50,0%(T2) e 48,4%(T1) vs 52,5%(T2) para os experimentos I e II, respectivamente). As concentrações séricas de progesterona (ng/mL de plasma), obtidas nas amostras de sangue coletadas no dia da inovulação, não diferiram entre tratamentos, sendo 5,92 ± 0,62(T1) vs 5,77 ± 0,48(T2) e 4,94 ± 0,54(T1) vs 4,77 ± 0,51(T2) para os experimentos I e II, respectivamente. Esses resultados indicam que a administração de 250 ou 500 mg de rbST, no dia do estro, não proporciona incremento tanto na taxa de gestação como na concentração sérica de progesterona de receptoras de embrião bovino criopreservado. PALAVRAS-CHAVE: bovino; receptora de embrião; taxa de gestação

Reducing the environmental impact of surgery on a global scale: systematic review and co-prioritization with healthcare workers in 132 countries

Abstract Background Healthcare cannot achieve net-zero carbon without addressing operating theatres. The aim of this study was to prioritize feasible interventions to reduce the environmental impact of operating theatres. Methods This study adopted a four-phase Delphi consensus co-prioritization methodology. In phase 1, a systematic review of published interventions and global consultation of perioperative healthcare professionals were used to longlist interventions. In phase 2, iterative thematic analysis consolidated comparable interventions into a shortlist. In phase 3, the shortlist was co-prioritized based on patient and clinician views on acceptability, feasibility, and safety. In phase 4, ranked lists of interventions were presented by their relevance to high-income countries and low–middle-income countries. Results In phase 1, 43 interventions were identified, which had low uptake in practice according to 3042 professionals globally. In phase 2, a shortlist of 15 intervention domains was generated. In phase 3, interventions were deemed acceptable for more than 90 per cent of patients except for reducing general anaesthesia (84 per cent) and re-sterilization of ‘single-use’ consumables (86 per cent). In phase 4, the top three shortlisted interventions for high-income countries were: introducing recycling; reducing use of anaesthetic gases; and appropriate clinical waste processing. In phase 4, the top three shortlisted interventions for low–middle-income countries were: introducing reusable surgical devices; reducing use of consumables; and reducing the use of general anaesthesia. Conclusion This is a step toward environmentally sustainable operating environments with actionable interventions applicable to both high– and low–middle–income countries

Vitrification of bovine immature oocytes

Objetivou-se avaliar o efeito de soluções vitrificantes e da vitrificação em ovócitos imaturos bovino. Os ovócitos foram obtidos a partir de ovários coletados de fêmeas bovinas logo após o abate, selecionados morfologicamente e distribuídos de acordo com os tratamentos. O procedimento experimental foi dividido em duas fases. Na primeira fase foi testada a toxicidade de soluções de vitrificação. Na segunda fase, foi testado o efeito da vitrificação. Na primeira fase, os ovócitos foram submetidos à maturação in vitro após manutenção em diferentes soluções de vitrificação (61 tratamentos). Foram testadas soluções de equilíbrio (SE) de 3, 8, 16, 20, 32 e 40% de Etilenoglicol (EG) em tempos (TE) de 1, 2, 4, 5, 6, 8 e 10 minutos e posteriormente mantidos por 1 minuto em solução de vitrificação (SV) contendo 40% de EG e 1,0 mol.L-1 de sacarose. O mesmo procedimento foi realizado, porém, utilizando solução de vitrificação contendo 25% de EG, 25% de DMSO e 1,0 mol.L-1 de sacarose. Após estes procedimentos, os ovócitos foram reidratados e submetidos ao cultivo in vitro por 24 horas. Observou-se maturação nuclear em grande parte dos tratamentos com exceção das combinações de SE com 32 e 40% de EG nos diferentes TE. Da mesma forma, os ovócitos expostos à SV de 25% de EG + 25% de DMSO + 1 mol.L-1 de sacarose não possibilitaram a maturação. Os melhores resultados foram as soluções de SE contendo 3%, 16%, expostas por cinco minutos e 20% de EG, expostas por 10 minutos (76,7, 57,1 e 66,7% de ovócitos em metáfase II, respectivamente). Todos estes tratamentos foram expostos ao final do equilíbrio à SV, contendo 40% de EG + 1,0 mol.L-1 de sacarose. Na segunda etapa, ovócitos foram submetidos aos procedimentos conforme descrito na primeira fase. Foram testadas SE com 3% de EG (por 1, 5, 6, 8, e 10 minutos), 8% de EG (por 1, 5 e 10 minutos), 16 e 20% de EG (por 5 e 8 minutos). Posteriormente, os ovócitos foram mantidos por 1 minuto em SV contendo 40% de EG e 1,0 mol.L-1 de sacarose. Posteriormente, os ovócitos foram envasados em palhetas de 0,25 mL, vitrificados (imersos em nitrogênio líquido) e posteriormente desvitrificados, rehidratados e submetidos à maturação in vitro por 24 horas. Observou-se que as combinações SE com 3% de EG, com TE de 1, 5, 6, 8 e 10 minutos proporcionaram taxas de metáfase II de 10,4; 19,3; 10,0; 7,6 e 14,3% respectivamente. As combinações SE com 8% de EG, com TE de 1, 5 e 10, e SE com 16% de EG, com TE de 5 minutos e SE de 20% de EG, com TE de 8 minutos proporcionaram taxas de metáfase II de 12,9; 6,9; 2,4; 23,1 e 2,0% respectivamente, sendo que todas diferem (P<0,05) ao grupo testemunha (73,7%). Foram processados ovócitos para a avaliação da ultraestrutura e expressão gênica. A ultraestrutura indicou que ovócitos de todos os tratamentos testados (exceto o grupo testemunha) apresentavam organelas degeneradas. Adicionalmente, não foi observada a distribuição citoplasmática típica de mitocôndrias de um ovócito maduro. Já na expressão gênica observou-se que ovócitos expostos a solução de equilíbrio de 16% de EG em tempo de cinco minutos apresentam maior quantidade de transcritos relacionados com o estresse oxidativo (HSP 70.1). No entanto, os transcritos da transcrição materno-zigótica (MATER e ZAR1) foram sub-regulados (P<0,05). Conclui-se que os procedimentos de desidratação testados para vitrificação de ovócitos, com exceção das combinações de SE com 32 e 40% de EG nos diferentes TE, podem não comprometer a taxa de maturação nuclear após maturação in vitro . Entretanto, comprometem a integridade ultraestrutural, a maturação citoplamática e a expressão gênica.The aim was to investigate the effects of vitrification solutions and vitrification of bovine immature oocytes. The oocytes were obtained from ovaries collected from bovine females immediately after slaughter, morphologically selected and distributed according to the treatments. The experimental procedure was divided into two phases, in the first phase was tested the toxicity of vitrification solutions and in the second phase was tested the effect of vitrification. In Experiment 1, the oocytes were matured in vitro after maintenance in differents vitrification solutions (61 treatments). Solutions of equilibrium (SE) of 3, 8, 16, 20, 32 and 40% ethylene glycol (EG) were tested to equilibration time (ET) of 1, 2, 4, 5, 6, 8 and 10 minutes and then maintained by 1 minute in the vitrification solution (VS) containing 40% EG and 1.0 mol L-1 sucrose. The same procedure was performed in other tratament, but using the vitrification solution containing 25% EG, 25% DMSO and 1.0 mol L-1 sucrose. After these procedures, the oocytes were rehydrated and subjected to cultivation in vitro for 24 hours. Nuclear maturation was observed in most treatments except in SE combinations with 32 and 40% EG at different ET. Likewise, the oocytes exposed to SV 25% EG + 25% DMSO + 1 mol L-1 sucrose did not allow maturation. The best results were obtained with SE solutions containing 3% and 16% exposed f or five minutes and 20% EG exposed for 10 minutes (76.7, 57.1 and 66.7% of oocytes in metaphase II, respectively). All treatments groups were exposed to the end of the equilibrium to the SV, containing 40% EG + 1.0 mol L -1 sucrose. In Experiment 2, oocytes were submitted to the procedures described in the Experiment 1. Were tested SE containing 3% EG (for 1, 5, 6, 8, and 10 minutes), 8% EG (for 1, 5 and 10 minutes), 16 and 20% EG (for 5 and 8 minutes). Subsequently, the oocytes were maintained for 1 minute at SV containing 40% EG and 1.0 mol L-1 sucrose. Subsequently, the oocytes were packed into 0.25 mL straws, vitrified (immersed in liquid nitrogen) and subsequently desvitrificated, rehydrated and submitted to maturation in vitro for 24 hours. It was observed that the SE combination with 3% of EG, in ET of 1, 5, 6, 8 and 10 minutes provided the metaphase II rates of 10.4, 19.3, 10.0, 7.6 and 14 3% respectively. The combinations SE with 8% EG with ET 1, 5 and 10 minutes and SE with 16% EG, 5 minutes with ET and SE of 20% EG with ET 8 minutes provided rates of metaphase II 12.9, 6.9, 2.4, 23.1 and 2.0% respectively, all of which differ (P <0.05) than the control group (73.7%). Oocytes were processed for the evaluation of the ultrastructure and gene expression. The ultrastructure of oocytes indicated that all treatments (except control group) had degenerated organelles. Additionally, it not observed cytoplasmic distribution of mitochondria typical of a mature oocyte. In the gene expression was observed that oocytes exposed to the equilibrium solution of 16% EG in five minutes have a higher amount of transcripts related to oxidative stress (HSP 70.1). However, the transcripts of the maternalzygotic transcription (MATER and ZAR1) were under-regulated (P <0.05). We conclude that the procedures of dehydration tested for cryopreservation of oocytes, except for combinations of SE with 32% EG and 40 in different TE, cannot compromise the rate of nuclear maturation after maturation "in vitro". However, ultrastructural compromise the integrity, citoplasmatic maturation and gene expression.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superio

Different exposition times and transportation media on "in vitro" maturation rate of bovine oocytes

O objetivo do presente trabalho foi avaliar e comparar a influência dos diferentes tempos de exposição e meios no transporte de ovócitos imaturos bovinos sobre a taxa de maturação in vitro. Foram utilizados 799 ovócitos imaturos, distribuídos em dez tratamentos, sendo um controle. Foram testados três meios de transporte: Talp-Hepes, segundo BAVISTER et al. (1983); Talp-Hepes modificado, acrescido de 10 µg/mL de FSH e 0,0454 mM de Piruvato de Sódio e TCM modificado sem NaHCO3, acrescido de 5,665 mM de Hepes, 0,999 mM de NaCl, 0,0412 mM de Lactato de Cálcio, 0,0454 mM de Piruvato de Sódio, 10.000 UI de Penicilina G sódica, 0,005g% de Estreptomicina, 0,4g% de BSA e 10 µg/mL de FSH. Em cada um dos meios utilizados, os ovócitos foram mantidos em placa aquecida a 38°C por um período de duas, quatro e oito horas. Após o término do tempo de exposição, os ovócitos foram submetidos a cultivo in vitro em meio TCM 199 acrescido de 10% de SVE e 10 µg/mL de FSH, em estufa de CO2, por 24 horas, para posterior avaliação da taxa de maturação nuclear. No tratamento controle, após a decantação e seleção dos ovócitos, eles foram imediatamente submetidos ao procedimento de cultivo in vitro. Observou-se que nos tratamentos com Talp-Hepes em tempos de duas, quatro e oito horas foram obtidas taxas de maturação nuclear de 84,7; 81,2 e 81,3%, respectivamente. No meio Talp-Hepes modificado foram registradas taxas de 72,2; 82,0 e 82,2%, e no meio TCM modificado, taxas de 80,0; 78,6 e 80,0%, respectivamente, para os tempos duas, quatro e oito horas. No tratamento controle, observou-se 80,1% de metáfase II. Conclui-se que os meios utilizados para o transporte dos ovócitos imaturos e o tempo decorrido da coleta até incubação para a maturação in vitro não influenciaram (P>0,05) a taxa de maturação nuclear. Deste modo, estes meios se mostram uma possível alternativa para o transporte dos ovócitos bovinos destinados à produção in vitro de embriões.The objective of this work was to assess and compare the influence of different expositon time and transportation media on in vitro maturation of immature bovine ocytes. We used 799 immature oocytes, distributed in ten treatments, one of them, the control. Three transportation media were tested: Talp-Hepes, according to BAVISTER et al. (1983); modified Talp-Hepes, with 10 µg/mL of FSH and 0,0454 mM of Sodium Piruvate and modified TCM without NaHCO3, with 5,665 mM of Hepes, 0,999 mM of NaCl, 0,0412 mM of Calcium Lactate, 0,0454 mM of Sodium Piruvate, 10.000 UI of Sodic Penicillin G, 0,005g% of Streptomycin, 0,4g% of BSA and 10 µg/mL of FSH. In each of the used media, the oocyte were kept on a plate and heated at 38oC for two, four and eight hours. After this time, the oocytes were submitted to in vitro cultivation in TCM 199 media with 10% of SVE and 10 µg/mL of FSH, in CO2 oven, for 24 hours, for later nuclear maturation rate evaluation. In the control, after the oocyte decanting and selection, they were immediately submitted to in vitro cultivation procedure. We observed that in the Talp-Hepes treatment with two, four and eight hours, the nuclear maturation rates were 84,7; 81,2 and 81,3%, respectively. In the modified Talp-Hepes media the rates were 72,2; 82,0 and 82,2%, and the modified TCM media the rates were 80,0; 78,6 and 80,0%, respectively to two, four and eight hours. In the control we observed 80,1% in metaphase II stage. Concluding, the transportation media and the time between the collection and the incubation for in vitro maturation didn t influence (P>0,05) the nuclear maturation rate. So, these media can be a possible alternative to the bovine oocytes transportation for in vitro embryo production.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superio

Infecção natural em estruturas ovarianas pelo Herpesvírus bovino 1: detecção molecular e sorológica

In this study, the polymerase chain reaction (PCR) was used to evaluate the presence of viral DNA in ovarian tissue, in the cumulus-oocyte complex (COC), follicular liquid, and blood of animals naturally infected with bovine herpesvirus-1 (BoHV-1). The serum profile of the sampled animals was also evaluated. Samples of serum, blood, ovarian tissue, follicular liquid, and COC were collected from 147 slaughterhouse animals that were not vaccinated against BoHV-1. Contaminated or insufficient samples were disregarded. Serological tests allowed the identification of serum-positive animals with neutralizing antibodies against BoHV-1. Analysis of samples by PCR revealed the presence of viral DNA in 0.9% (1/115) of the COC samples, in 4.3% (5/117) of the ovarian tissue samples, and in 2.8% (3/108) of the blood samples. Viral DNA was not detected in any of the follicular liquid samples. In serological samples, a positivity of 83.6% (117/140) was observed for BoHV-1. All PCR-positive animals, regardless of the samples analyzed, showed positivity in the serum neutralization test for the detection of BoHV-1-specific antibodies. According to these results, a high prevalence of antibodies against BoHV-1 was detected in naturally infected animals from different herds, and the molecular tests revealed the presence of viral DNA in bovine ovarian tissue, providing evidence that this might be a site of BoHV-1 infection in naturally infected animals.Neste trabalho foi avaliada a presença do DNA viral, por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), no tecido ovariano, nos oócitos, líquido folicular e sangue de vacas naturalmente infectadas. Também foi avaliado o perfil sorológico dos animais amostrados. Foram coletadas amostras de soro, sangue, tecido ovariano, líquido folicular e complexo cumulus-oócitos de 147 animais abatidos em frigorífico não vacinados contra o herpesvirus bovino 1 (BoHV-1). Amostras tóxicas ou insuficientes foram descartadas. Os testes sorológicos foram realizados permitindo a identificação dos animais soropositivos para anticorpos neutralizantes contra o BoHV-1. Foram realizadas as PCRs onde foi observada a presença do DNA viral em 0,9% (1/115) dos oócitos, em 4,3% (5/117) do tecido ovariano e em 2,8% (3/108) do sangue. Em nenhuma das amostras de líquido folicular foi detectado o DNA viral. Nas amostras sorológicas observou-se 83,6% (117/140) de positividade para o BoHV-1. Dentre os animais positivos na PCR, independente das amostras, todos apresentavam positividade no teste de soroneutralização para detecção de anticorpos para BoHV-1. Conclui-se que em animais de diferentes rebanhos analisados foi detectada alta prevalência de anticorpos contra o BoHV-1 e que nos testes moleculares houve a presença do DNA viral em amostras de tecidos ovarianos de bovinos, evidenciando que estas estruturas poderiam ser sítios de infecção pelo vírus em animais naturalmente infectados

Antibodies against Bovine herpesvirus 1 in dairy herds in the state of Espirito Santo, Brasil

Bovine herpesvirus 1 (BoHV-1) causes major losses in worldwide livestock, affecting the respiratory and reproductive tracts of bovine. In the past decades, the number of cases in Brazil has been gradually increasing. Therefore, it is important to assess the distribution of infection in different regions of the country. In the state of Espírito Santo (ES) the BoHV 1 infection rate in dairy cattle herds is unknown. Thus, the aim of this study was to detect neutralizing antibodies against BoHV-1 in serum samples from 1,161 non-vaccinated cows from 59 dairy cattle herds in 23 municipalities of the Metropolitan, North, Northwest and South macro-regions. The identification of seropositive cows was evaluated by the virus neutralization test. The results showed that of all serum samples evaluated 775 (66.75%) had neutralizing antibodies against BoHV-1. Moreover, all herds were found positive; however, the percentage of positive cows varied among regions; 49.06%, 62.15%, 67.21% and 80.04% for the Metropolitan, South, North and Northwest macro-regions, respectively. In this study, the results clearly indicate the dissemination of the viral agent in dairy cattle in the ES state, requiring the monitoring and control of diseases related to BoHV-1 infection