Initial detailed routing algorithms

In this work, we present a study of the problem of routing in the context of the VLSI physical synthesis flow. We study the fundamental routing algorithms such as maze routing, A*, and Steiner tree-based algorithms, as well as some global routing algorithms, namely FastRoute 4.0 and BoxRouter 2.0. We dissect some of the major state of the art initial detailed routing tools, such as RegularRoute, TritonRoute, SmartDR and Dr.CU 2.0. We also propose an initial detailed routing flow, and present an implementation of the proposed routing flow, with a track assignment technique that models the problem as an instance of the maximum independent weighted set (MWIS) and utilizes integer linear programming (ILP) as a solver. The implementation of the proposed initial detailed routing flow also includes an implementation of multiple-source and multiple-target A* for terminal andnet connection with adjustable rules and weights. Finally, we also present a study of the results obtained by the implementation of the proposed initial detailed routing flow and a comparison with the ISPD 2019 contest winners, considering the ISPD 2019 and benchmark suite and evaluation tools.Neste trabalho, apresentamos um estudo do problema de roteamento no contexto do fluxo de síntese física de circuitos integrados VLSI. Nós estudamos algoritmos de roteamento fundamentais como roteamento de labirinto, A* e baseados em árvores de Steiner, além de alguns algoritmos de roteamento global como FastRoute 4.0 e BoxRouter 2.0. Nós dissecamos alguns dos principais trabalhos de roteamento detalhado inicial do estado da arte, como RegularRoute, TritonRoute, SmartDR e Dr.CU 2.0. Também propomos um fluxo de roteamento detalhado inicial, e apresentamos uma implementação do fluxo de roteametno proposto, com uma técnica de assinalamento de trilhas que modela o problema como uma instância do problema do conjunto independente de peso máximo e usa programação linear inteira como um resolvedor. A implementação do fluxo de rotemaento detalhado inicial proposto também inclui uma implementação de um A* com múltiplas fontes e múltiplos destinos para conexão de terminais e redes, com regras e pesos ajustáveis. Por fim, nós apresentamos um estudo dos resultados obtidos pela implementação do fluxo de roteamento detalhado inicial proposto e comparamos com os vencedores do ISPD 2019 contest considerando a suíte de teste e ferramentas de avaliação do ISPD 2019

Pattern classification for layout hotspots

The final objective of an integrated circuit design is to produce a layout, that is, a geometrical representation of the circuit where the geometrical shapes correspond to patters that will be formed by layers of metal, oxide, and semiconductors. These patterns are essentially descriptions that will be used to print the circuit through chemical, thermal and photographic processes. To ensure the layout can be used to print the circuit with no defects, it is necessary to run design rules check. This verification searches for patterns that violate design rules, which makes it impossible to guarantee defect-free printing. However, some layout patterns may present printability problems even when design rules are respected. To solve this problem, physical verification flows are applied to the layout with the objective of detecting and treating such patterns. The sheer number of these layout printability hotspots and the fact that they are sometimes similar to each other suggests that the physical verification flow can be sped up by clustering together similar patterns. In this work, we address the problem of complex shape partitioning, incorporating an algorithm with complexity O(n5=2) into the layout hotspot clustering flow, which allows for clustering of hotspots in benchmarks with complex polygons. Furthermore, a study of the viability of a machine learning flow for incremental clustering is conducted, covering the choice of features and analysis of candidate models.O objetivo final do fluxo de projeto de um circuito é produzir um leiaute, uma representação geométrica do circuito, onde as formas geométricas correspondem aos padrões que serão formados por camadas de metal, óxido e semicondutores. Esses padrões são essencialmente descrições que serão usadas para imprimir o circuito através de processos químicos, térmicos e fotográficos. Para garantir que o leiaute possa ser usado para impressão de um circuito integrado sem defeitos, é necessário executar verificações de regras de projeto. Essa verificação encontra padrões que violam regras que inviabilizariam a garantia de impressão sem defeitos. Porém, alguns padrões do leiaute podem apresentar problemas na impressão mesmo quando a checagem das regras de projeto não encontra erros. Para solucionar esse problema, fluxos de verificação física são aplicados no leiaute com o objetivo de detectar e tratar tais padrões. A grande quantidade de regiões com problemas de impressão e a similaridade entre elas sugere que o fluxo de verificação física pode ser acelerado ao se agrupar padrões similares. Neste trabalho, o problema de particionamento de polígonos complexos é abordado, e um algoritmo de particionamento de complexidade O(n5=2) é incorporado ao fluxo de classificação e agrupamento de regiões de interesse, permitindo que casos de teste com polígonos complexos tenham suas regiões de interesse agrupadas. Além disso, um estudo sobre a viabilidade de um fluxo de aprendizado de máquina é conduzido, cobrindo a escolha de atributos e a análise de diferentes modelos candidatos

Individual and coordinated decision for the CAMBADA team

Mestrado em Engenharia de Computadores e TelemáticaA coordenação em sistemas multi-robô é um aspecto crucial no futebol robótico. A maneira como cada equipa coordena cada um dos seus robôs em acções cooperativas define a base da sua estratégia. Este trabalho tem como foco o desenvolvimento da coordenação e estratégia da equipa CAMBADA. CAMBADA é a equipa de futebol robótico da modalidade RoboCup Middle Size League da Universidade de Aveiro. Foi desenvolvida pelo grupo ATRI, pertencente µa unidade de investigação IEETA. O presente trabalho baseia-se em trabalho desenvolvido anteriormente, tentando melhorar o desempenho da equipa. Cada robô da equipa CAMBADA é um agente independente e autónomo capaz de coordenar as suas acções com os colegas de equipa através da comunicação e da partilha de informação. O comportamento de cada robô deverá ser integrado na estratégia global da equipa, resultando assim em acções cooperativas de todos os robôs. Isto é conseguido através do uso de papeis(roles) e comportamentos(behaviours) que definem a atitude de cada robô e as acções que daí resultam. Novos papeis foram desenvolvidos para complementar a estratégia de equipa, e alguns dos papeis existentes foram melhorados. Também foram efectuadas melhorias em alguns dos comportamentos existentes. É efectu- ada a descrição de cada um destes papeis e comportamentos, assim como as alterações efectuadas. O trabalho desenvolvido foi testado nas competições do Robótica 2008 (o desenvolvimento não estava ainda concluído) e por fim nas competições do RoboCup'2008. A participação da equipa no RoboCup'2008 é analisada e discutida. A equipa consagrou-se campeã mundial, vencendo a competição da Middle Size League do RoboCup'2008 em Suzhou, China. ABSTRACT: Multi-robot coordination is one crucial aspect in robotic soccer. The way each team coordinates its individual robots into cooperative global actions define the foundation of its strategy. CAMBADA is the RoboCup Middle Size League robotic soccer team of the University of Aveiro. It was created by the ATRI group, part of the IEETA research unit. This work is focused on coordination and strategy development for the CAMBADA team. It is built upon previous work and tries to improve the team performance further. In CAMBADA each robot is an independent agent, it coordinates its actions with its teammates through communication and information exchange. The resulting behaviour of the individual robot should be integrated into the global team strategy, thus resulting in cooperative actions by all the robots. This is done by the use of roles and behaviours that define each robot attitude in the field and resulting individual actions. In this work, new roles were created to add to the team strategy and some of the previous existing roles were improved. Some of the existing behaviours were also improved to better fit the desired goals. Each role and behaviour is described as well as the changes made. The resulting work was put to test in the portuguese Robotica 2008 competition (while still in progress) and finally in the RoboCup'2008 world competitions. The performance of the team in the latter is analysed and discussed. The team achieved the 1st place in the RoboCup'2008 MSL world competitions

Posse responsável de animais de estimação com ênfase em pets não convencionais

Orientador: Prof. Dr. Rogério Ribas LangeTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa : Curitiba, 26/02/2024Inclui referênciasÁrea de concentração: Ciências VeterináriasResumo: A coexistência entre humanos e animais é um fenômeno ancestral, moldado por eventos e influências socioculturais ao longo dos séculos. A domesticação de plantas e animais desempenhou um papel vital, transformando a Terra em aspectos socioambientais, na produção de alimentos e no vínculo afetivo entre humanos e natureza. A domesticação animal ocorreu por meio de vias comensais, predatórias e direcionadas, resultando junto às mudanças genéticas a Síndrome da Domesticação. A domesticação é um processo complexo, variando entre espécies e estágios, e perpetua-se até os dias de hoje, evidenciada em domesticações secundárias, e até na domesticação de novas raças e espécies. No contexto dos animais de estimação, a sua posse impacta social e ambientalmente, exigindo cuidados básicos para garantir qualidade de vida dos animais, desde a reprodução até a manutenção nas residências. Por outro lado, a relação com animais de estimação beneficia a saúde física, psicológica e social do ser humano, além do movimento econômico no mercado pet. Contudo, há malefícios, desde questões de bem-estar animal, impactos individuais até problemas de saúde pública, danos ambientais e disseminação de doenças. A presente tese buscou entender a relação contemporânea entre humanos e animais de estimação. Utilizando dois questionários online e Snowball sampling, a pesquisa focou na interação com diversas espécies e na posse responsável para estabelecer relações sustentáveis entre humanos e animais. Abordar a posse responsável envolve reafirmar um comportamento ético e moral, independentemente da espécie. Para tornar esse conceito concreto, a tese propõe os Três Pilares da Posse Responsável: comprometimento, investimento e responsabilidade socioambiental. No primeiro momento, a pesquisa com 2.854 respondentes revela uma alta prevalência de animais de estimação, principalmente cães e gatos, mas também um interesse crescente em aves, répteis e outros entre os jovens. Na posse responsável, os respondentes destacam o comprometimento físico e psicológico, enquanto a responsabilidade socioambiental recebe menos atenção. O ambiente, nutrição e afeto são considerados cruciais, enquanto a dimensão financeira é mencionada por menos da metade dos participantes. A sociedade busca informações principalmente com profissionais e online. Na segunda fase, quase 90% dos 1.706 participantes conhecem alguém que possui um animal silvestre de estimação, sendo mais da metade ilegalmente. A busca por animais silvestres ilegais é motivada principalmente pelo preço e pelo desejo de resgatar. A disparidade de valores entre tráfico e legalidade é um fator decisivo, com a maioria considerando um aumento de 10 a 20 vezes no preço como ponto de corte para optar por um animal ilegal. Diante do tráfico de animais silvestres e da demanda por espécies, a abordagem multidisciplinar é crucial. A educação, liderada por profissionais e a internet, desempenha papel vital na disseminação de conhecimento. Por fim a tese propõe um escore de posse responsável, composto por 100 pontos e 20 critérios, que surge como uma ferramenta clara e objetiva para sensibilizar os responsáveis por animais, auxiliando na escolha alinhada ao estilo de vida, promovendo relações saudáveis entre humanos e animais.Abstract: The coexistence between humans and animals is an ancestral phenomenon, shaped by sociocultural events and influences over the centuries. The domestication of plants and animals played a vital role, transforming the Earth in socio-environmental aspects, in food production and in the emotional bond between humans and nature. Animal domestication occurred through commensal, predatory and directed pathways, resulting in the Domestication Syndrome along with genetic changes. Domestication is a complex process, varying between species and stages, and continues to this day, evidenced in secondary domestications, and even in the domestication of new breeds and species. In the context of pets, their ownership has a social and environmental impact, requiring basic care to ensure the animals' quality of life, from reproduction to maintenance in homes. On the other hand, the relationship with pets benefits the physical, psychological and social health of human beings, in addition to the economic movement in the pet market. However, there are harms, from animal welfare issues, individual impacts to public health problems, environmental damage and the spread of diseases. This thesis sought to understand the contemporary relationship between humans and pets. Using two online questionnaires and Snowball sampling, the research focused on interaction with diverse species and responsible ownership to establish sustainable relationships between humans and animals. Addressing responsible ownership involves reaffirming ethical and moral behavior, regardless of species. To make this concept concrete, the thesis proposes the Three Pillars of Responsible Ownership: commitment, investment and socio-environmental responsibility. Initially, a survey with 2,854 respondents reveals a high prevalence of pets, mainly dogs and cats, but also a growing interest in birds, reptiles and others among young people. In responsible ownership, respondents highlight physical and psychological commitment, while socio-environmental responsibility receives less attention. The environment, nutrition and affection are considered crucial, while the financial dimension is mentioned by less than half of the participants. Society seeks information mainly from professionals and online. In a second questionnaire, almost 90% of the 1,706 participants know someone who owns an exotic animal as a pet, more than half of them illegally. The search for illegal wildlife is primarily motivated by price and the desire to rescue. The disparity in values between trafficking and legality is a decisive factor, with most considering a 10 to 20 times increase in price as the cutoff point for opting for an illegal animal. Faced with wildlife trafficking and the demand for species, a multidisciplinary approach is crucial. Education, led by professionals and the internet, plays a vital role in disseminating knowledge. Finally, the thesis proposes a responsible ownership score, consisting of 100 points and 20 criteria, which appears as a clear and objective tool to raise awareness among those responsible for animals, helping to make choices aligned with their lifestyle, promoting healthy relationships between humans and animals

Tópicos de atualização em anestesia de roedores e lagomorfos

Orientador: Prof. Dr. Rogério Ribas LangeCoorientador: Prof. Dr. Juan Carlos Moreno DuqueDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa : Curitiba, 02/03/2020Inclui referênciasResumo: Pequenos mamíferos estão mais frequentes como animais de estimação pelo mundo. Coelhos, chinchillas, porquinhos-da-índia, ferrets, hamsters, degus, petauros e outras espécies apresentam diferentes demandas para cuidado, portanto há sempre uma opção para cada residência. Nesse cenário, os proprietários demandam qualidade do atendimento veterinário. Cirurgias e emergências serão mais frequentes na rotina clínica e as técnicas devem ser desenvolvidas, otimizando o sucesso e bemestar dos pacientes. A anestesia de pequenos mamíferos pode ser desafiante, há peculiaridades anatômicas e fisiológicas, tamanho reduzido, alto metabolismo e a canulação e intubação endotracheal pode ser difícil. Visando uma anestesia efetiva com relaxamento muscular, analgesia e perda de consciência, protocolos balanceados devem ser buscados. O bloqueio do plano transverso (TAP block) provou ser uma técnica praticável em chinchilas, e provavelmente outras espécies de roedores e em coelhos. Apesar de a descrição anatômica da parede abdominal de chinchilas não ser completamente descrita, o TAP block foi realizado com sucesso empírico em dois animais. Bloqueios locorregionais são uma excelente opção para analgesia com efeitos sistêmicos reduzidos, o que é desejado em pequenos pacientes, especialmente herbívoros. O principal desafio de realizar o TAP block em chinchila é o tamanho do paciente o que requer material de tamanho adequado e treinamento prévio do profissional. O TAP block provê analgesia apenas da parede abdominal e deve ser utilizado como parte de um protocolo anestésico balanceado para cirurgias abdominais, otimizando analgesia trans e pos operatória. A intubação endotraqueal de coelhos é considerada complicada, especialmente às cegas. A técnica é descrita demandando várias tentativas, tempo longo e resultando em falhas e lesões de glote. A intubação com visualização indireta da glote por meio de endoscópio é considerada ótima para o processo, entretanto um equipamento de endoscopia pode ser grande e caro, nem sempre sendo acessíveis, ao contrário do dispositivo de smartphone descrito nesse trabalho. Ambas técnicas, às cegas e assistida por endoscópio, provaram ser confiáveis para intubação de coelhos, entretanto as vantagens do endoscópio não foram totalmente confirmadas, inclusive a anestesiologista foi mais eficiente na técnica às cegas. Sugerindo que o domínio da técnica, independente de qual, é essencial para otimizar o sucesso da intubação de coelhos. Palavras-chave: Analgesia. Emergência. Exóticos. Silvestres.Abstract: Small mammals are being increasingly more frequent as pets worldwide. Rabbits, chinchillas, guinea-pigs, ferrets, hamsters, degus, sugar-gliders, and other species have different behaviors and demands for care, therefore there is always an adequate species for each residency. In this scenario, owners of these pets are demanding optimal veterinary care. Surgical and emergency cases will be more frequent in the veterinary routine and techniques must be improved to enhance success rate and welfare of these animals. Small mammals' anesthesia can be challenging, they have specific anatomic and physiological features, reduced size, high metabolism rates and catheterization and tracheal intubation can be challenging or even unsuccessful. Aiming an effective anesthesia with muscle relaxation, analgesia and loss of consciousness, balanced protocols must be pursued. The transverse plane block proved to be a feasible technique to be applied in chinchillas, and probably other rodent species and rabbits. Although the abdominal wall anatomy of chinchillas still not fully described, the technique was performed in two animals with empiric success. Regional blocks are excellent options for analgesia with minimal systemic effects, what is desired in many small patients, especially the herbivores. The main challenge for performing the TAP block in chinchillas is the size of the patient, requiring adequate size material and previous training of the professional. The TAP block only provides analgesia to the abdominal wall, and must be used as part of a balanced anesthetic protocol especially for abdominal surgeries, improving both trans as postoperative analgesia. Rabbit endotraqueal intubation is considered tricky, especially by the blind technique. It is reported to require many attempts, a considered amount of time and resulting in occasional failures and glottic lesions. Intubation with indirect visualization of the glottis through an endoscope is considered optimal to improve the process, however endoscopic systems may be large and expensive, being not always available, instead of the smartphone-based device reported in this study. Both blind and endoscope-assisted techniques were proved to be reliable for rabbit intubation, however expected differences were not confirmed. Reduced time and occurrence of complications expected for the endoscopic group were not confirmed in this study, however the anaesthesiologist performed better with the blind technique. Suggesting that mastering is essential for improved success of rabbit intubation independent of the technique. Keywords: Analgesia. Emergency. Exotics

Ação antrópica e meio ambiente : sustentabilidade discutida a partir da ONU

Desde início da década de setenta, a Organização das Nações Unidas mostra de forma recorrente sua preocupação com os danos ao meio ambiente devido à ação antrópica, a exemplo da mudança climática global. Em sua argumentação aparecem diferentes atores como os governos, as empresas e os indivíduos de forma a terem responsabilidade para a diminuição desses danos e pela busca de um desenvolvimento sustentável. Na primeira parte desse trabalho, apresentamos alguns de seus documentos como o Relatório Brundtland ou a Agenda 21, os quais há sugestões de formas de atingimento de desse tipo de desenvolvimento através de, por exemplo, avanço tecnológico, acordos entre nações e regulação do mercado interno. De forma a subsidiar teoricamente essa organização, num segundo momento apresentamos alguns autores como Robert Solow, William Baumol e Joseph Stiglitz os quais concordam com mecanismos como tributação a fim da diminuição de externalidades negativas geradas pelos processos produtivos, ou que avanços na tecnologia poderiam mitigar de forma importante a escassez de recursos não renováveis Na terceira parte desse trabalho, em sentido oposto, são apresentados teóricos como Karl Marx, John Bellamy Foster e Guillermo Foladori os quais afirmam que mecanismos impostos por governos ou a tecnologia não seriam suficientes para deter um modo de produção o qual primordialmente busca o lucro sem considerar os limites da natureza. Através de pesquisa exploratória com caráter de levantamento bibliográfico procuraremos contribuir ao debate sobre a viabilidade do desenvolvimento sustentável proposto pela ONU. Utilizaremos o método dialético o qual busca interpretar de forma mais abrangente a realidade, considerando-o como mais adequado para entendimento dos acontecimentos sociais. Como hipótese principal, dadas características inerentes ao modo de produção atual, seria inviável o atingimento desse tipo de desenvolvimento. Secundariamente mostramos tendências intrínsecas ao capitalismo o qual teria então uma natureza destruidora.Since the early seventies, the United Nations repeatedly shows its concern about environment damages due to anthropic action, such as global climate change. In their argumentation appear different actors as the governments, companies and individuals with regard to take responsibility for the reduction of such damages and the pursuit of sustainable development. In the first part of this paper, we present some of its documents as the Brundtland Report or Agenda 21, which have suggestions of paths to achieve this type of development through, for example, technological advances, nations agreements and internal market regulation. In the direction of theoretically subsidize that organization, in a second moment we present some authors as Robert Solow, William Baumol and Joseph Stiglitz which agree with mechanisms related to taxation in pursuance of to reduce the negative externalities generated by the productive processes, or that technological advances could significantly mitigate the scarcity of non-renewable resources In the third part of this work, in the opposite direction, theorists are presented as Karl Marx, John Bellamy Foster and Guillermo Foladori who affirm that mechanisms imposed by governments or technology would not be enough to restrain a mode of production which primarily quest for profit without any regard to the limits of the nature. Through an exploratory research with a bibliographic survey feature, we will try to contribute to the debate about the viability of sustainable development proposed by the United Nations. We will use the dialectical method which pursues interpretation in an ample way, considering it as more adequate for the understanding of social events. As the main hypothesis, given inherent characteristics of the current mode of production, it would be nonviable to achieve this kind of development. Secondarily, we show capitalism intrinsic tendencies which would have a destructive nature

Produtividade no ciclo de vida e diferenças de gênero na pesquisa acadêmica: evidências de uma universidade pública brasileira

Personal attributes and behavioral factors are key factors in determining researchers’ scientific productivity. Investigating what determines the academic productivity among university researchers is the purpose of this study, which uses a sample of microdata from professors at a State university in Brazil (Federal University of Juiz de Fora) for the period 1999-2013. The main results show that age and academic productivity have an inverted-U-shaped relationship, revealing that experience enhances academic production. Regarding gender differences, we found that women generally have lower average productivity than men. However, at the end of their careers, women are subject to greater leverage effects in productivity and therefore achieve productive parity with men, especially during their production peaks.Atributos pessoais e fatores comportamentais são fatores-chave na determinação da produtividade científica dos pesquisadores. Investigar o que determina a produtividade acadêmica entre pesquisadores universitários é o objetivo deste estudo, que utiliza uma amostra de microdados de professores de uma universidade estadual brasileira (Universidade Federal de Juiz de Fora) para o período 1999-2013. Os principais resultados mostram que a idade e a produtividade acadêmica apresentam uma relação em forma de U invertido, revelando que a experiência potencializa a produção acadêmica. Em relação às diferenças de gênero, descobrimos que as mulheres geralmente têm produtividade média menor do que os homens. No entanto, ao final da carreira, as mulheres estão sujeitas a maiores efeitos de alavancagem na produtividade e, portanto, alcançam paridade produtiva com os homens, principalmente nos picos de produção

Biochemical characterisation of the interaction of the myosin light chain phosphatase with the regulatory subunits of protein kinase A in cells of the circulatory system

Regulation of actomyosin-driven contraction is important for numerous cardiovascular cell functions, including smooth muscle tone, endothelial cell permeability and platelet shape change and spreading. These processes are primarily regulated by the phosphorylation and dephosphorylation of the myosin light chain, catalysed by myosin light chain kinase (MLCK) and myosin light chain phosphatase (MLCP), respectively. MLCP is composed of a 38-kDa protein phosphatase catalytic subunit (PP1c) and a 130-kDa myosin phosphatase targeting subunit 1 (MYPT1). MYPT1 serves as a scaffold that positions PP1c in proximity to its substrates. The activity, protein-protein interactions and localisation of MLCP are fine-tuned by the phosphorylation status of MYPT1, which is targeted by multiple protein kinases. Notably, phosphorylation by protein kinase A (PKA) can counteract the inhibition of MLCP elicited by ROCK phosphorylation.Several isoforms of MYPT1 have been identified, resulting from cassette-type alternative splicing of exons E13, E14, E22, and E24 of the PPP1R12A gene. An analysis of public databases reveals a greater transcriptional complexity of this gene than previously appreciated. Many studies on PPP1R12A expression and transcription variants have focused on a limited number of organs and tissues, often composed of mixed cell types. There is a scarcity of studies on specific cell lines or individual cell types. To address this gap, a comprehensive examination of the transcriptional landscape of the PPP1R12A gene, emphasising protein-coding transcripts was conducted. This in silico analysis of public EST and mRNA databases revealed that PPP1R12A comprises 32 exons, 29 of which are used in 11 protein-coding transcripts. Using publicly available RNAseq data and reverse transcription PCR, the relative abundance of each transcript in human umbilical vein endothelial cells (HUVEC), human saphenous vein smooth muscle cells (HSVSMC), and platelets were determined. HUVECs and HSVSMCs were found to predominantly express the full-length variant (58.3% and 64.3%, respectively), with the E13-skipping variant being the second most common (33.7% and 23.1%, respectively). Variants including E24 account for 5.4% of transcripts in platelets but are rare in HUVECs and HSVSMCs. These insights set the stage for future studies on the specific roles of MYPT1 isoforms in physiology and pathology.MYPT1 is part of a complex signalling node involving PP1c, kinases, and other enzymes, and previous studies have unravelled a direct interaction between MYPT1 and the regulatory subunits of PKA. The hypothesis in this study was that MYPT1 and PKA subunits interact directly in vascular cells, potentially functioning as an A-kinase anchoring protein (AKAP) to target PKA to the MLCP signalling node. Using immunoprecipitation, affinity pulldown, and in situ proximity ligation assays in human platelets and endothelial cells, it was demonstrated that MYPT1 directly interacts with all four PKA regulatory subunit variants. Peptide array overlays identified K595, E676, and the PKA/ROCK kinase substrate motif R693/R694/S695/T696 as critical for this interaction. Substitution of S695, T696, or both with aspartic acid or the corresponding phosphorylated residues abolished binding. A model is proposed where MYPT1 functions as a non-canonical AKAP, anchoring PKA near non-phosphorylated S695/T696 to prevent PKA catalytic subunits and potentially ROCK from phosphorylating MYPT1. Collectively, these findings provide valuable insights into the anchoring role of MYPT1 and lay the groundwork for future research into the specific roles of MYPT1 isoforms in cardiovascular function

Ejemplos de Guiones para radionovela

Texto explicativo e com exemplos de scripts de uma radionovel