Characterization of wheat DP, a heterodimerization partner of the plant E2F transcription factor which stimulates E2F–DNA binding

AbstractRecent studies suggest that the G1/S transition in plants depends on the activity of E2F transcription factors. In animal cells, E2Fs interact with DP proteins, whose identification in plants has been elusive, so far. Here we show that although an E2F-containing DNA-binding activity can be detected in plant cell extracts, purified E2F protein binds poorly to DNA. In a yeast two-hybrid screening, using wheat E2F as a bait, we have isolated a cDNA clone encoding a wheat DP (TmDP) protein. TmDP is expressed ubiquitously and exhibits a domain organization similar to animal DPs. Contrary to the specificity observed for the plant RBR/E2F interaction, human and plant E2F and DP proteins can interact in a heterologous manner. Purified TmDP protein stimulates E2F–DNA complex formation

Relationship of Oligomerization to DNA Binding of Wheat Dwarf Virus RepA and Rep Proteins

AbstractMembers of the genus Mastrevirus (family Geminiviridae) produce a complementary-sense (c-sense) transcription unit with the potential to encode two proteins, RepA and Rep. In the present work, we have studied the DNA–protein complexes formed by the Wheat dwarf virus (WDV) RepA protein within the WDV large intergenic region. WDV RepA forms large nucleoprotein complexes near the TATA boxes of the viral complementary-sense and virion-sense (v-sense) promoters (the RepA C- and V-complexes, respectively), a location similar to those of WDV Rep–DNA complexes but with distinct DNase I footprints. We have also studied the relationship of oligomerization of WDV RepA and Rep proteins to DNA–protein complex formation. Using chemical cross-linking, we have determined that both WDV proteins can form oligomers in solution. Interestingly, the pH is critical for the monomer–oligomer equilibrium and small changes produce a displacement in such a way that at pH ≤ 7.0, the predominant species is an octamer while at pH ≥ 7.4 it is a monomer. Complex formation is also strongly affected by pH and occurs more efficiently at pH 7.0–7.4. We found that preformed oligomers interact very poorly with DNA. Thus, our data are consistent with a stepwise model for protein–DNA complex assembly in which monomers interact with DNA and then with other monomers to assemble an oligomeric structure on the DNA. These results may be relevant for studies on the DNA binding, replication, and transcription properties of geminivirus proteins

Evaluación de efectos antitumorales de un oligonucleótido (ODN) tipo señuelo dirigido a STAT3 en un modelo de línea celular de cáncer de pulmón

Resumen: Actualmente el cáncer continúa siendo una enfermedad con altas tasas de incidencia y mortalidad a nivel mundial. El desarrollo de nuevas moléculas para tratar los diferentes tipos de cáncer se encuentra enfocado en la terapia molecular dirigida. Sin embargo, pocas estrategias de este tipo han alcanzado la etapa de estudios clínicos debido a sus efectos inespecíficos, inestabilidad o baja permeabilidad celular. Los oligonucleótidos (ODNs) tipo señuelo son una alternativa para la terapia molecular dirigida. Estos han mostrado gran efectividad en diversos modelos de líneas celulares, junto con una mejor selectividad y mayor especificidad en sus efectos. Se seleccionó al factor de transcripción STAT3 como un blanco molecular potencial ya que su sobrexpresión en el tejido tumoral claramente se ha asociado con el desarrollo y progresión del cáncer de pulmón y a fenómenos de resistencia a medicamentos usados en clínica. El objetivo de este trabajo fue validar el potencial antitumoral de ODNs dirigidos contra STAT3 en líneas celulares de cáncer de pulmón teniendo en cuenta la selectividad y especificidad de los efectos. La expresión y activación de STAT3 fue medida por inmunofluorescencia para asegurar la presencia del blanco molecular en el modelo escogido. Posteriormente se cuantificó la captación celular de los ODNs por medio de citometría de flujo. Los efectos citotóxicos de los ODNs fueron determinados medio del ensayo metabólico de resazurina teniendo en cuenta diferentes concentraciones y tiempos de tratamientos. Finalmente se evaluó el posible mecanismo de muerte celular asociado a los tratamientos por medio de ensayos de actividad de caspasas y fragmentación nuclear por microscopía de fluorescencia. Los resultados mostraron que hubo una mayor expresión y activación del factor de transcripción STAT3 en las líneas tumorales respecto a una línea control de fibroblastos pulmonares. Además se encontró que los ODNs empleados fueron transfectados eficientemente en las células localizándose principalmente en el citoplasma. Mediante los ensayos de citotoxicidad se evidenció que los ODNs parental y modificado lograron la disminución de la supervivencia celular de forma dosis y tiempo dependiente alcanzando concentraciones letales 50 (CL50) en el rango nanomolar. Dichos efectos fueron exclusivos para las líneas tumorales y no para la línea celular normal demostrando la selectividad de los ODNs. Por otra parte se encontró que los ODNs bajo las condiciones de tratamiento indujeron un proceso de muerte por apoptosis y generaron cambios en la expresión de mRNA de tres genes blanco de STAT3. Estos resultados permitieron validar la tecnología de ODNs tipo señuelo como un modelo potencial de terapia dirigida con efectos selectivos sobre líneas celulares de cáncer de pulmón.Abstract. Currently, the cancer is still a disease with high mortality and incidence rates. The development of new molecules to treat the different cancer types is focused on targeted therapy. However, very few strategies have reached the stage of clinical trials due to their non-specific effects, instability or low cell uptake. Decoys oligonucleotides (ODNs) are an alternative for molecular targeted therapy and have shown high effectiveness in many cell lines with selectivity and specificity in their effects. We choose the STAT3 transcription factor as a potential molecular target since its overexpression in tumor tissue has been associated with development and progression of lung cancer and drug resistance in clinical practice. The aim of this research was to validate the antitumor potential of ODNs targeting STAT3 in lung cancer cell lines taking into consideration selective and specific effects. Protein expression and activation of STAT3 was measured by immunofluorescence to ensure the presence of the molecular target in the chosen model. Subsequently the cellular uptake of ODNs was quantified by flow cytometry. The cytotoxic effects of ODNs were determined using the resazurin metabolic assay, taking into account different concentrations and treatment times. Finally, the probable mechanism of cell death associated with the treatments was evaluated by caspase activity assays and nuclear fragmentation by fluorescence microscopy. The results showed a greater expression and activation of STAT3 in the tumor lines compared to a control line of pulmonary fibroblasts. In addition, it was found that the ODNs employed were efficiently transfected into cells and located mainly in the cytoplasm. Cytotoxicity assays revealed that the parental and modified ODNs achieved a decrease in cell survival in a dose and time dependent manner reaching lethal concentrations 50 (CL50) in the nanomolar range. These effects were exclusive for tumor cell lines and not for a normal cell line showing the selectivity of the ODNs. On the other hand, it was found that the ODNs under the conditions of treatment induced a death process by apoptosis and generated changes in the mRNA expression of three STAT3 target genes. These results validated the decoy ODNs as a potential model of targeted therapy with selective effects on lung cancer cell lines.Maestrí

Presentación

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Fortalecimiento de la habilidad de escucha en el aprendizaje del inglés para estudiantes de tercer semestre del programa de Licenciatura en Lenguas Extranjeras con énfasis en Inglés (LiLEI) en edades entre 20 y 30 años de la Universidad Nacional Abierta y a Distancia (UNAD)

https://drive.google.com/file/d/1oqpqb88C--EKoNX_3BOF23-66cPjwteR/view?usp=sharingLa enseñanza del inglés ha sido un reto para muchas instituciones de nuestro país así como la búsqueda de nuevas estrategias para el aprendizaje de las diferentes habilidades. Gran parte de los estudiantes del programa de Licenciatura en Lenguas Extranjeras con énfasis en Inglés (LiLEI) de tercer semestre de la Universidad Nacional Abierta y a Distancia (UNAD) han demostrado un bajo nivel en la habilidad del listening, siendo necesario la incorporación de estrategias didácticas que permitan su fortalecimiento durante el aprendizaje del inglés como segunda lengua. Esta investigación pedagógica pretende mostrar cómo a través del uso de las Tecnologías de la Información y las Comunicaciones (TIC) y de la música por medio de canciones, se puede fortalecer la habilidad de escucha en el aprendizaje del inglés. Se estableció una metodología denominada “las tres PPP” (presentación, práctica y producción), la cual se consideró pertinente según los momentos planificados al interior de la secuencia didáctica (SD) y se desarrolló en dos actividades. Como instrumentos de recolección de datos se empleó el diario de campo y soportes documentales, tales como: videos, gráficas estadísticas y registros fotográficos de avances en la App Lyrics Training. Se logra dar respuesta a la pregunta de investigación, dado que, se evidencio el fortalecimiento de la habilidad de escucha en estudiantes que adelantan un proceso de aprendizaje del inglés como segunda lengua.Teaching English has been a challenge for many institutions in our country as well as the search for new strategies for learning different skills. A large part of the students of the Bachelor of Foreign Languages program with an emphasis in English (LiLEI) of the third semester of the National Open and Distance University (UNAD) have shown a low level of listening skills, being necessary the incorporation of didactic strategies that allow their strengthening during the learning of English as a second language. This pedagogical research aims to show how through the use of Information and Communication Technologies (ICT) and music through songs, listening skills can be strengthened in learning English. A methodology called “the three PPPs” (presentation, practice, and production) was established, which was considered pertinent according to the moments planned within the didactic sequence (SD) and was developed in two activities. As data collection instruments, the field diary, and documentary supports were used, such as videos, statistical graphics, and photographic records of the progress in the Lyrics Training App. It is possible to answer the research question since the strengthening of listening skills was evidenced in students who advance a process of learning English as a second language

SOLUCIÓN DE DOS ESCENARIOS PRESENTES EN ENTORNOS CORPORATIVOS BAJO EL USO DE TECNOLOGÍAS CISCO CCNA

En el proceso de desarrollo y conocimiento del escenario 1 para el diplomado de profundización CCNA para el programa de ingeniería de sistemas de la UNAD, desarrolle diferentes trabajos correspondientes a CISCO, llegando de esta manera a realizar esta práctica mostrando mis conocimientos adquiridos y dar a conocer los pasos a seguir para esta configuración de dispositivos, realizando correctamente los requisitos solicitados y dar la forma de transmitir y salvaguardar la información que se garantice tener un nivel operativo sin fallos, para la integración de los datos y la rapidez que se trasmite de una manera constante en cualquier red con sus respectivas normas y parámetros correspondientes.In the process of development and knowledge of scenario 1 for the CCNA deepening diploma for the systems engineering program of the UNAD, I developed different works corresponding to CISCO, in this way to carry out this practice showing my acquired knowledge and making known the steps to follow for this configuration of devices, correctly carrying out the requested requirements and giving the way to transmit and safeguard the information that is guaranteed to have an operation without failures, for the integration of the data and the speed that it is transmitted in a constant way in any network with their respective standards and corresponding parameters

Mosquito-Borne Diseases, Pesticides Used for Mosquito Control, and Development of Resistance to Insecticides

Mosquitoes are one of the most dangerous insects in the world for humanity. Over one million people worldwide die from mosquito-borne diseases every year. Mosquito vectored diseases include protozoan diseases, i.e., malaria, filarial diseases such as dog heartworm, and viral diseases such as dengue, encephalitis, and yellow fever. In addition, mosquitoes transmit several diseases and parasites that dogs and horses are very susceptible too. These include dog heartworm, West Nile virus (WNV), and eastern equine encephalitis (EEE). Since its discovery, chemical insecticides have represented the most widely method used to control mosquito-borne vectors. However, the effects of chemical insecticides on mosquito vector populations are usually transitory because vectors can rapidly develop resistance against them. Each insecticide triggers the selection of one or more mechanisms of resistance. These mechanisms include changes in the target site of action and metabolic detoxification among others

Diseño de un modelo de mejora del proceso operativo de la empresa IMGAS LTDA.

El presente trabajo de investigación tendrá como punto de referencia diseñar un modelo de mejora del proceso operativo de la empresa IMGAS LTDA, por medio de un sistema gestión de calidad de los procesos, de planificación estratégica, y cultura organización ya que enfoca su importancia en la posibilidad de identificar deficiencias que puedan ser corregidas mediante mejoras en el desarrollo del proceso de revisión periódica de la empresa IMGAS LTDA, por ser este el de mayor demanda, presenta un mayor número de ordenes vencidas, incumplidas o no certificadas en interventoría, lo cual genera directamente pérdidas monetarias y de recursos para la organización. Es importante mencionar que, aunque se tomó como referencia para la propuesta de mejora el proceso mencionado anteriormente, el proyecto logra orientar acciones correctivas y propositivas en el marco general del sistema de gestión de calidad de los demás procesos que actualmente posee la compañía. Por tal razón, surge la iniciativa de proponer un modelo de mejora en el proceso operativo de la organización, el cual funcionaría como metodología correctiva a las deficiencias que han venido presentándose alrededor de su operatividad. De esta manera, se plantea en su desarrollo, un plan de calidad representado en un diagrama de flujo que logra organizar y estandarizar las actividades, lo que permite un mayor seguimiento y control en la ejecución de trabajos realizados. Así mismo, se realiza la metodología AMEF para identificar las deficiencias y proponer las acciones correctivas necesarias en cada caso, con el fin de brindar un apoyo en la mejora continua de la operatividad de la empresa

Revisión sistemática: Calidad de vida de los pacientes con cáncer avanzado en manejo paliativo

El trabajo de investigacion titulado “Calidad de vida de los pacientes con cáncer avanzado en manejo paliativo”. El cáncer avanzado en nuestro medio es un problema de salud que afecta la calidad de vida de los pacientes, y su tiempo medio de supervivencia. El objetivo de la presente revisión sistemática, fue determinar la calidad de vida de los pacientes con cáncer avanzado en manejo paliativo, durante el periodo 2015- 2020. La base de datos consultada fue Pubmed Se encontraron 100 artículos, luego de la aplicación de la estrategia Prisma, se seleccionaron 22 artículos. Los instrumentos empleados para el análisis crítico fueron Progress plus y Prisma. La teoría de la calidad de vida aplicada a los pacientes con cáncer fue desarrollada por Wilson (1995). La calidad de vida de los pacientes con cáncer se ve deteriorada debido a los tratamientos, intervenciones y del mismo proceso de salud enfermedad; de los resultados, se reporta regular calidad de vida en 8 estudios (66.7%), 3 estudios buena calidad de vida (25%), seguido de mala calidad 1 estudio (8.3%). Actualmente el instrumento empleado para evaluar calidad de vida es la escala EORTC. De los estudios evaluados, se concluye que los cuidados paliativos, mejoran la calidad de vida los pacientes con cáncer avanzado; pero deben tener una intervención beneficiosa, debe iniciarse en forma temprana y debe ser integral; pero el acceso se dificulta debido a otros factores como el acceso de personas provenientes del área rural o de recursos económicos limitados, especialmente en zonas con bajas coberturas de los seguros de salud. La calidad de vida del paciente con cáncer avanzado, que accede a un sistema de salud es regular; pero es mucho mejor si tiene la intervención temprana de los cuidados paliativos; se debe aplicar escalas para predecir sobrevida a corto plazo, la calidad de vida es mejor al final de la existencia, si aplicamos medidas paliativas en domicili