Producción de blastocistos diploides, heteroparentales a partir de pre-embriones tripronucleareshumanos procedentes de FIV e ICSI

En Biomedicina, particularmente en el campo de reproducción humana asistida, la mejora de las técnicas implícitas, así como la puesta a punto de otras, requiere de la realización de estudios y ensayos previos con pre-embriones, preferiblemente de la misma especie, con potencial de desarrollo y que sean genéticamente normales. La disponibilidad y uso de estos pre-embriones no debe provocar conflictos éticos ni legales, no siendo, los pre-embriones humanos generados con una finalidad reproductiva la opción más inmediata. En la búsqueda de modelos pre-embrionarios humanos válidos, homólogos a aquéllos reproductivamente viables, presentamos el presente trabajo de tesis, cuyo objetivo principal es obtener blastocistos diploides heteroparentales a partir de pre-embriones humanos tripronucleares, procedentes de fecundación in vitro convencional (FIV), y microinyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) que, por resultar de una fecundación anómala, son no viables y por tanto, descartados de los procedimientos de reproducción asistida. La obtención de blastocistos diploides heteroparentales a partir de pre-embriones humanos tripronucleares procedentes de FIV se realizará mediante la eliminación microquirúrgica del pronúcleo supernumerario y los procedentes de ICSI mediante el proceso de autocorrección embrionaria tras el cultivo y estudio morfocinético de éstos. Tras hacer un estudio exhaustivo de la ploidía y composición parental en los pre-embriones tripronucleares procedentes de cada una de las técnicas de fecundación in vitro (FIV e ICSI) observamos que, pese a que la capacidad para desarrollarse in vitro hasta el estadio de blastocisto es similar en ambos grupos, su composición cromosómica (ploidía) es dependiente del procedimiento de fecundación que les dio origen. Así, los pre-embriones tripronucleares procedentes de FIV presentan una capacidad muy limitada para autocorregirse, debido a su origen diándrico, ya que estos pre-embriones tripronucleares, además del pronúcleo extra, presentan un centriolo adicional que da lugar a segregaciones cromosómicas caóticas en sucesivas divisiones de segmentación. En este grupo de cigotos tripronucleares, fue necesario poner a punto, desarrollar y validar la técnica de epronucleación selectiva, mediante la cual, el pronúcleo paterno y el centriolo extra fueron eliminados, logrando obtener blastocistos diploides y heteroparentales. Por otro lado, los pre-embriones tripronucleares procedentes de ICSI, mostraron la capacidad de autocorregirse hacia la diploidía y heteroparentalidad a lo largo del desarrollo in vitro. En este grupo de pre-embriones tripronucleares realizamos un estudio morfocinético exhaustivo de su desarrollo in vitro desde el estadio de cigoto hasta el estadio de blastocisto en tiempo real, observando que, los parámetros morfocinéticos de aquellos pre-embriones tripronucleares que se autocorregían hacia la diploidía fueron similares a aquéllos propios de los pre-embriones diploides control y diferentes de los pre-embriones tripronucleares persistentemente triploides. Con estos datos pudimos establecer un modelo matemático predictivo de la diploidía, dependiente de la variable t5, es decir del tiempo de división a 5 células. De este trabajo de investigación concluimos que, es posible obtener blastocistos diploides heteroparentales a partir de pre-embriones tripronucleares no viables, procedentes de FIV e ICSI, previa micromanipulación y cultivo (respectivamente), quedando validados como modelos biológicos para investigación en Biomedicina y quedando tal vez, para un futuro, como una posible opción reproductiva para casos muy particulares de infertilidad.Biomedicine, particularly in the field of human assisted reproduction, the improvement of implied techniques, as well as the development of other, requires studies and preliminary tests using pre-embryos, preferably of the same species, provided with development potential and genetically normal. The availability and use of these pre-embryos may not cause ethical or legal disputes, not being, human pre-embryos generated with a reproductive purpose the immediate option. In the search for homologous to those valid reproductively viable human pre-embryo models, we presented this thesis. The main objective is to obtain heteroparental diploid blastocysts from human tripronucleated pre-embryos, from conventional in vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) which, result from abnormal fertilization, are not viable and therefore discarded from assisted reproduction procedures. Obtaining diploid and heteroparental tripronucleated blastocysts from human pre-embryos from IVF will be through the microsurgical removal of supernumerary pronucleus and those from ICSI embryo through the process of self-correction after culture and morphokinetic study of them. After an exhaustive study of ploidy and parental composition in tripronucleated pre-embryos from each of the techniques of in vitro fertilization (IVF and ICSI), it was observed that, although the ability for growing in vitro to the blastocyst stage is similar in both groups, ploidy is dependent on the fertilization procedure that gave rise them. Thus, tripronucleated pre-embryos from IVF have a very limited ability to be self-corrected, due to its diandric origin, as these tripronucleated pre-embryos present an additional centriole in addition to the extra pronucleus, resulting in chaotic chromosomal segregation along the successive cleavage divisions. In this group of tripronucleated zygotes it was necessary to develop and validate the technique of selective epronucleation, whereby, the paternal pronucleous and extra centrioles were eliminated, obtaining diploid and heteroparental blastocysts. Furthermore, tripronucleated pre-embryos coming from ICSI, showed the ability to be self-corrected to diploidy and heteroparentality along the in vitro development. In this group of tripronucleated pre-embryos we performed a morphokinetic comprehensive study of in vitro development from the zygote to the blastocyst stage in real time, noting that the morphokinetic in those tripronucleated pre-embryos that were self-corrected to diploidy were similar to those typical of the diploid control pre-embryos and different from triploid tripronucleated pre-embryos. With this data we could establish a predictive mathematical model of diploidy dependent of the variable t5, ie time division to 5 cells. From this research we conclude that it is possible to obtain diploid and heteroparental blastocysts from tripronucleated not viable pre-embryos from IVF and ICSI, after micromanipulation and culture (respectively), being them validated as biological models for biomedical research and being such instead, for a future as a possible reproductive choice for very special cases of infertility

Presence of Vibrio mediterranei associated to major mortality in stabled individuals of Pinna nobilis L.

A major epizootic event attributed to Haplosporidium pinnae leading to 100% mortality of Pinna nobilis L. populations along Mediterranean coastlines started in the fall of 2016. As a result, a project to rescue 221 adult individuals of the endangered pen shell, Pinna nobilis was conducted in November 2017 in the two areas of the Spanish coast where the species was still abundant and apparently free from infection by H. pinnae: Port Lligat in the Costa Brava, and the Alfacs Bay in the Ebro Delta. For biosecurity reasons, the 106 individuals from the Ebro Delta were stabled at the IRTA facilities located next to Alfacs Bay, whereas the 115 individuals from Port Lligat were stabled in different institutions throughout the Spanish territory. Initial biopsies showed that individuals from the Ebro Delta were free of the parasite, whereas most individuals from Port Lligat were already parasitized and died in the following months. Individuals at IRTA were hold in five tanks and fed ca. 4% of their dry weight with a mix of three species of phytoplankton and fine riverine sediments (13% OM). Seawater was filtered through 10, 5 and 1 μm to ensure the absence of the parasite and disinfected with UV light. No individuals died during the 4 initial months of captivity, but two died in April–May at temperatures from 17 to 19 °C. A peak of mortalities occurred during the summer months and early fall (53%) with maximums coinciding with temperatures above 25 °C. Individuals were again analyzed by PCR and histology for the presence of H. pinnae, Mycobacteria sp., and other locally important pathogens of commercial bivalves (Vibrio splendidus, V. aestuarianus and Herpesvirus OsHV-1 microVar), and therefore considered as potential pathogens of pen shells. However, with the exception of 3 individuals that were positive for Mycobacteria sp., results were all negative for the studied pathogens. Microbiological culture and isolation of bacteria from three moribund individuals, sacrificed for study purposes, showed V. mediterranei as the dominant species, and further PCR analyses confirmed the presence of the bacterium in ten deceased individuals. Overall, our results suggest the V. mediterranei is an opportunistic pathogen of stabled individuals possibly subjected to stress from captivity, and that antibiotic treatment (Florfenicol) combined with vitamins and mineral supplementation and reduction of water temperature (15 to 18 °C), can be used to mitigate (not to eradicate) the disease. Further research is needed to determine diets and stabling conditions that minimize captivity stress and prevent the emergence of the disease.info:eu-repo/semantics/acceptedVersio

Centrifugación industrial

En este artículo se presentan las ecuaciones matemáticas para trabajar en el dimensionado de diferentes tipos de centrífugasCastelló Gómez, ML.; Pérez Esteve, E.; Barrera Puigdollers, MC.; Betoret Valls, N.; Andrés Grau, AM. (2021). Centrifugación industrial. http://hdl.handle.net/10251/167683DE

Transcriptomic and genetic studies identify NFAT5 as a candidate gene for cocaine dependence

Cocaine reward and reinforcing effects are mediated mainly by dopaminergic neurotransmission. In this study, we aimed at evaluating gene expression changes induced by acute cocaine exposure on SH-SY5Y-differentiated cells, which have been widely used as a dopaminergic neuronal model. Expression changes and a concomitant increase in neuronal activity were observed after a 5 μ cocaine exposure, whereas no changes in gene expression or in neuronal activity took place at 1 μ cocaine. Changes in gene expression were identified in a total of 756 genes, mainly related to regulation of transcription and gene expression, cell cycle, adhesion and cell projection, as well as mitogen-activeated protein kinase (MAPK), CREB, neurotrophin and neuregulin signaling pathways. Some genes displaying altered expression were subsequently targeted with predicted functional single-nucleotide polymorphisms (SNPs) in a case-control association study in a sample of 806 cocaine-dependent patients and 817 controls. This study highlighted associations between cocaine dependence and five SNPs predicted to alter microRNA binding at the 3'-untranslated region of the NFAT5 gene. The association of SNP rs1437134 with cocaine dependence survived the Bonferroni correction for multiple testing. A functional effect was confirmed for this variant by a luciferase reporter assay, with lower expression observed for the rs1437134G allele, which was more pronounced in the presence of hsa-miR-509. However, brain volumes in regions of relevance to addiction, as assessed with magnetic resonance imaging, did not correlate with NFAT5 variation. These results suggest that the NFAT5 gene, which is upregulated a few hours after cocaine exposure, may be involved in the genetic predisposition to cocaine dependence

Immune response generated with the administration of autologous dendritic cells pulsed with an allogenic tumoral cell lines lysate in patients with newly diagnosed DIPG

Background and objective. Diffuse intrinsic pontine glioma (DIPG) is a lethal brainstem tumor in children. Dendritic cells (DCs) have T-cell stimulatory capacity and, therefore, potential antitumor activity for disease control. DCs vaccines have been shown to reactivate tumor-specific T cells in both clinical and pre-clinical settings. We designed a phase Ib immunotherapy (IT) clinical trial with the use of autologous dendritic cells (ADCs) pulsed with an allogeneic tumors cell-lines lysate (ATCL) in patients with newly diagnosed DIPG after irradiation (RT). Methods. Nine patients with newly diagnosed DIPG met enrollment criteria. Autologous dendritic cell vaccines (ADCV) were prepared from monocytes obtained by leukapheresis. Five ADCV doses were administered intradermally during induction phase. In the absence of tumor progression, patients received 3 boosts of tumor lysate every three months during the maintenance phase. Results. Vaccine fabrication was feasible in all patients included in the study. Non-specific KLH (9/9 patients) and specific (8/9 patients) antitumor response was identified by immunologic studies in peripheral blood mononuclear cells (PBMC). Immunological responses were also confirmed in the T lymphocytes isolated from the cerebrospinal fluid (CSF) of 2 patients. Vaccine administration resulted safe in all patients treated with this schema. Conclusions. These preliminary results demonstrate that ADCV preparation is feasible, safe and generate a DIPG-specific immune response detected in PBMC and CSF. This strategy shows a promising backbone for future schemas of combination immunotherapy

Famílies botàniques de plantes medicinals

Facultat de Farmàcia, Universitat de Barcelona. Ensenyament: Grau de Farmàcia, Assignatura: Botànica Farmacèutica, Curs: 2013-2014, Coordinadors: Joan Simon, Cèsar Blanché i Maria Bosch.Els materials que aquí es presenten són els recull de 175 treballs d’una família botànica d’interès medicinal realitzats de manera individual. Els treballs han estat realitzat per la totalitat dels estudiants dels grups M-2 i M-3 de l’assignatura Botànica Farmacèutica durant els mesos d’abril i maig del curs 2013-14. Tots els treballs s’han dut a terme a través de la plataforma de GoogleDocs i han estat tutoritzats pel professor de l’assignatura i revisats i finalment co-avaluats entre els propis estudiants. L’objectiu principal de l’activitat ha estat fomentar l’aprenentatge autònom i col·laboratiu en Botànica farmacèutica

Argentine Network of Permanent Native Forest Plots to promote scientific collaborations on longterm studies

Las parcelas forestales permanentes son áreas de muestreo donde se registran la identidad, abundancia y tamaño de los árboles de forma periódica, para estudiar cómo cambian los bosques en relación al clima, disturbios naturales, usos y manejos. Hasta el momento, los patrones de cambio observados con parcelas permanentes en Argentina tuvieron en general alcance local o regional. Para potenciar los vínculos entre los diferentes grupos de trabajo que promuevan colaboraciones a escalas, tanto intra como inter-regionales, creamos la Red Argentina de Parcelas Permanentes de Bosques Nativos (RAPP), la cual abarca las regiones forestales de los Bosques Andino-Patagónicos, Chaco Seco, Chaco Húmedo, Monte de Sierras y Bolsones, Monte de Llanuras y Mesetas, Selva Paranaense y Yungas. En este artículo se sintetizó y caracterizó la información de 317 parcelas permanentes (328.9 ha) incluidas en la RAPP, describiendo su distribución geográfica, objetivos, principales aspectos metodológicos, y características de los bosques donde están establecidas (e.g., disturbios, tenencia de la tierra, estructura, riqueza de especies). Asimismo, se discutió la complementariedad entre la RAPP y los Inventarios Nacionales de Bosques Nativos. Las parcelas están distribuidas en un amplio rango latitudinal (22.02-65.29° S) y altitudinal (19 a 2304 m snm), aunque están concentradas principalmente en el Subtrópico (Chaco Seco, Chaco Húmedo, Selva Paranaense y Yungas) y en los Bosques Andino-Patagónicos. En todas las parcelas se realiza periódicamente la identificación taxonómica de los árboles y se miden diferentes variables dasométricas, que son la base para responder preguntas ecológicas a una mayor escala mediante colaboraciones. Esperamos continuar incorporando grupos de trabajo en la RAPP e incentivar el establecimiento de nuevas parcelas permanentes en regiones actualmente poco representadas como el Monte, Espinal y Delta e Islas del Paraná. La meta es que la RAPP permita avanzar en el estudio a largo plazo de todos los bosques nativos de Argentina, alcanzando una mayor cobertura nacional y más interacciones entre los grupos de trabajo.Permanent forest plots are sampling areas where tree identity, abundance and size are recorded periodically, in order to study how forests change with climate, natural disturbances, uses and management. So far, patterns of change observed with permanent plots in Argentina have been local or regional. To promote scientific collaborations between different research groups within and among regions of Argentina, we created the Network of Permanent Plots of Native Argentinian Forests (RAPP), which includes the regions of Bosques Andino-Patagónicos, Chaco Seco, Chaco Húmedo, Monte de Sierras y Bolsones, Monte de Llanuras y Mesetas, Selva Paranaense and Yungas. Here we synthesize and characterize the information of 317 permanent plots (328.9 ha) included in the RAPP, describing their geographic distribution, objectives, main methodological aspects, and characteristics of the forests where they are established (e.g, disturbance, land tenure, structure, species richness), and after that, discuss the complementarity between the RAPP and the national inventories of native forests. Permanent plots are established over a wide range of latitude (22.02-54.89° S) and elevation (19 a 2304 m a. s. l.), but they are mainly concentrated in Subtropics (Chaco Seco, Chaco Húmedo, Selva Paranaense, and Yungas) and in Bosques Andino-Patagónicos. In all plots, trees are taxonomically identified and different dasometric variables are remeasured, which are the basis for potential collaborations to answer ecological questions at a larger scale. We hope to continue incorporating working groups in the RAPP and encouraging the establishment of plots, mainly in regions with a low number of permanent plots such as Monte, Espinal, and Delta e Islas del Paraná. The goal is that the RAPP advances in the long-term study of all native forests in Argentina, achieving a greater national cover and more interactions among research teams.Fil: Ceballos, Sergio Javier. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Ecología Regional. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Ecología Regional; ArgentinaFil: Blundo, Cecilia Mabel. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Ecología Regional. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Ecología Regional; ArgentinaFil: Malizia, Agustina. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Ecología Regional. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Ecología Regional; ArgentinaFil: Osinaga Acosta, Oriana. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Ecología Regional. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Ecología Regional; ArgentinaFil: Carilla, Julieta. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Ecología Regional. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Ecología Regional; ArgentinaFil: Grau, Hector Ricardo. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Ecología Regional. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Ecología Regional; ArgentinaFil: Campanello, Paula Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de la Patagonia "San Juan Bosco"; ArgentinaFil: Cuchietti, Anibal. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Ministerio de Ambiente y Desarrollo Sostenible de la Nación. Dirección Nacional de Bosques. Segundo Inventario Nacional de Bosques Nativos; ArgentinaFil: Gasparri, Nestor Ignacio. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Ecología Regional. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Ecología Regional; ArgentinaFil: Gatti, Maria Genoveva. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Biología Subtropical. Universidad Nacional de Misiones. Instituto de Biología Subtropical; ArgentinaFil: Loto, Dante Ernesto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Facultad de Ciencias Forestales. Instituto de Silvicultura y Manejo de Bosques; ArgentinaFil: Martínez Pastur, Guillermo José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Austral de Investigaciones Científicas; ArgentinaFil: Saucedo Miranda, Jimena. Ministerio de Ambiente y Desarrollo Sostenible de la Nación. Dirección Nacional de Bosques. Segundo Inventario Nacional de Bosques Nativos; ArgentinaFil: Amoroso, Mariano Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Negro. Sede Andina. Instituto de Investigaciones en Recursos Naturales, Agroecología y Desarrollo Rural; ArgentinaFil: Andino, Natalia del Pilar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Juan; Argentina. Universidad Nacional de San Juan. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto y Museo de Ciencias Naturales; ArgentinaFil: Arpigiani, Daniela Fabiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Negro. Sede Andina. Instituto de Investigaciones en Recursos Naturales, Agroecología y Desarrollo Rural; ArgentinaFil: Aschero, Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Provincia de Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Universidad Nacional de Cuyo. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales; ArgentinaFil: Barberis, Ignacio Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Investigaciones en Ciencias Agrarias de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Investigaciones en Ciencias Agrarias de Rosario; ArgentinaFil: Bedrij, Natalia Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Biología Subtropical. Universidad Nacional de Misiones. Instituto de Biología Subtropical; ArgentinaFil: Nicora Chequín, Renata. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Chillo, María Verónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Eibl, Beatriz Irene. Universidad Nacional de Misiones; ArgentinaFil: Eliano, Pablo. Asociación Forestal Industrial de Jujuy; ArgentinaFil: Fernandez, Romina Daiana. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Ecología Regional. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Ecología Regional; ArgentinaFil: Garibaldi, Lucas Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Norte. Instituto de Investigaciones en Recursos Naturales, Agroecología y Desarrollo Rural. - Universidad Nacional de Rio Negro. Instituto de Investigaciones en Recursos Naturales, Agroecología y Desarrollo Rural; ArgentinaFil: Giannoni, Stella Maris. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Juan. Centro de Investigaciones de la Geosfera y Biosfera. Universidad Nacional de San Juan. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Centro de Investigaciones de la Geosfera y Biosfera; ArgentinaFil: Goldenberg, Matías Guillermo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Norte. Instituto de Investigaciones en Recursos Naturales, Agroecología y Desarrollo Rural. - Universidad Nacional de Rio Negro. Instituto de Investigaciones en Recursos Naturales, Agroecología y Desarrollo Rural; ArgentinaFil: Gonzalez Peñalba, Marcelo. Administración de Parques Nacionales; ArgentinaFil: Jiménez, Yohana Gisell. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Ecología Regional. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Ecología Regional; ArgentinaFil: Kees, Sebastián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Klekailo, Graciela Noemí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Rosario; ArgentinaFil: Lara, Martín. Ministerio de Ambiente y Desarrollo Sostenible. Administracion de Parques Nacionales. Parque Nacional Lanin; ArgentinaFil: Mac Donagh, Patricio Miguel. Universidad Nacional de Misiones; ArgentinaFil: Malizia, Lucio Ricardo. Universidad Nacional de Jujuy; ArgentinaFil: Mazzini, Flavia Noelia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Jujuy; ArgentinaFil: Medina, Walter Adrian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Rosario; ArgentinaFil: Oddi, Facundo José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Norte. Instituto de Investigaciones en Recursos Naturales, Agroecología y Desarrollo Rural. - Universidad Nacional de Rio Negro. Instituto de Investigaciones en Recursos Naturales, Agroecología y Desarrollo Rural; ArgentinaFil: Paredes, Dardo. Gobierno de la Provincia de Tierra del Fuego. Ministerio de Agricultura Ganaderia y Pesca.; ArgentinaFil: Peri, Pablo Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Persini, Carlos. Refugio y Estación Biológica Aponapó; ArgentinaFil: Prado, Darién E.. Universidad Nacional de Rosario; ArgentinaFil: Salas, Roberto Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Srur, Ana Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Provincia de Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Universidad Nacional de Cuyo. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales; ArgentinaFil: Villagra, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Biología Subtropical. Universidad Nacional de Misiones. Instituto de Biología Subtropical; ArgentinaFil: Zelaya, Patricia Viviana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Instituto de Estudios para el Desarrollo Social. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Facultad de Humanidades Ciencias Sociales y de la Salud. Instituto de Estudios para el Desarrollo Social; ArgentinaFil: Villagra, Pablo Eugenio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Provincia de Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Universidad Nacional de Cuyo. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales; Argentin

Cromatografía líquida desnaturalizante de alta resolución (DHPLC) para la detección y el seguimiento de bacterias viables no cultivables (BVNC)

La tecnología de cromatografía líquida de alta resolución (DHPLC) se utiliza en diagnóstico e investigación de tumores y enfermedades genéticas (Frueh et al., 2003; Xiao et al., 2001). Recientemente se ha comenzado a trabajar con ella en identificación y seguimiento de poblaciones microbianas. Los protocolos de trabajo en el equipo se han adaptado para discriminar diferencias en distintos genes bacterianos. Los fragmentos de genes de interés amplificados por PCR se pasan a través de la columna del equipo que contiene partículas de poliestireno / polidivinilbenceno. La separación de los productos de PCR se basa en la elución mediante acetato de triethylammonium (TEAA) de moléculas de ADN parcialmente desnaturalizadas por la temperatura. Las muestras de ADN bacteriano con variaciones de la secuencia muestran diferencias en los tiempos de retención. Hay algunos factores clave para el éxito en la detección de variantes genéticas bacterianas en DHPLC: diseño de cebador de PCR, protocolo de PCR, gradiente de separación y la temperatura (Barlaan et al., 2006)

Cromatografía líquida desnaturalizante de alta resolución (DHPLC) para la detección y el seguimiento de bacterias viables no cultivables (BVNC)

La tecnología de cromatografía líquida de alta resolución (DHPLC) se utiliza en diagnóstico e investigación de tumores y enfermedades genéticas (Frueh et al., 2003; Xiao et al., 2001). Recientemente se ha comenzado a trabajar con ella en identificación y seguimiento de poblaciones microbianas. Los protocolos de trabajo en el equipo se han adaptado para discriminar diferencias en distintos genes bacterianos. Los fragmentos de genes de interés amplificados por PCR se pasan a través de la columna del equipo que contiene partículas de poliestireno / polidivinilbenceno. La separación de los productos de PCR se basa en la elución mediante acetato de triethylammonium (TEAA) de moléculas de ADN parcialmente desnaturalizadas por la temperatura. Las muestras de ADN bacteriano con variaciones de la secuencia muestran diferencias en los tiempos de retención. Hay algunos factores clave para el éxito en la detección de variantes genéticas bacterianas en DHPLC: diseño de cebador de PCR, protocolo de PCR, gradiente de separación y la temperatura (Barlaan et al., 2006)

Vivir la calle

Capítulo de carácter antropológico dedicado a vivir la calle, enmarcado en un trabajo de investigación de recuperación de la memoria histórica del barrio valenciano del Cabanyal-Canyamela