The Effects of the Structural Components of 4-H Residential Summer Programs on the Achievement of the Essential Elements of Positive Youth Development and the Acquisition of Targeted Life Skills

Youth-serving organizations, such as 4-H, place a large emphasis on positive youth development and experiential learning in order to assist youth in acquiring specific life skills. The literature suggests that residential summer camps are one of the best ways to provide positive youth development, experiential learning, and targeted life skills. This study was a mixed methods design which utilized four residential summer programs throughout the state of Mississippi in order to compare the differences between the residential 4-H summer programs that took place on a university campus to those that took place within the naturalistic environment. The results of this study indicate that on-campus residential summer programs achieved the essential elements of positive youth development more so than those that took place within the naturalistic environment. The on-campus program participants also acquired targeted life skills more so than those that participated in programs that took place within the naturalistic environment

Security strategies in genomic files

There are new mechanisms to sequence and process the genomic code, discovering thus diagnostic tools and treatments. The file for a sequenced genome can reach hundreds of gigabytes. Thus, for further studies, we need new means to compress the information and a standardized representation to simplify the development of new tools. The ISO standardization group MPEG has used its expertise in compressing multimedia content to compress genomic information and develop its ´MPEG-G standard’. Given the sensitivity of the data, security is a major identified requirement. This thesis proposes novel technologies that assure the security of both the sequenced data and its metadata. We define a container-based file format to group data, metadata, and security information at the syntactical level. It includes new features like grouping multiple results in a same file to simplify the transport of whole studies. We use the granularity of the encoder’s output to enhance security. The information is represented in units, each dedicated to a specific region of the genome, which allows to provide encryption and signature features on a region base. We analyze the trade-off between security and an even more fine-grained approach and prove that apparently secure settings can be insecure: if the file creator may encrypt only specific elements of a unit, cross-checking unencrypted information permits to infer encrypted content. Most of the proposals for MPEG-G coming from other research groups and companies focused on data compression and representation. However, the need was recognized to find a solution for metadata encoding. Our proposal was included in the standard: an XML-based solution, separated in a core specification and extensions. It permits to adapt the metadata schema to the different genomic repositories' frameworks, without importing requirements from one framework to another. To simplify the handling of the resulting metadata, we define profiles, i.e. lists of extensions that must be present in a given framework. We use XML signature and XML encryption for metadata security. The MPEG requirements also concern access rules. Our privacy solutions limit the range of persons with access and we propose access rules represented with XACML to convey under which circumstances a user is granted access to a specific action among the ones specified in MPEG-G's API, e.g. filtering data by attributes. We also specify algorithms to combine multiple rules by defining default behaviors and exceptions. The standard’s security mechanisms protect the information only during transport and access. Once the data is obtained, the user could publish it. In order to identify leakers, we propose an algorithm that generates unique, virtually undetectable variations. Our solution is novel as the marking can be undone (and the utility of the data preserved) if the corresponding secret key is revealed. We also show how to combine multiple secret keys to avoid collusion. The API retained for MPEG-G considers search criteria not present in the indexing tables, which highlights shortcomings. Based on the proposed MPEG-G API we have developed a solution. It is based on a collaboration framework where the different users' needs and the patient's privacy settings result in a purpose-built file format that optimizes query times and provides privacy and authenticity on the patient-defined genomic regions. The encrypted output units are created and indexed to optimize query times and avoid rarely used indexing fields. Our approach resolves the shortcomings of MPEG-G's indexing strategy. We have submitted our technologies to the MPEG standardization committee. Many have been included in the final standard, via merging with other proposals (e.g. file format), discussion (e.g. security mechanisms), or direct acceptance (e.g. privacy rules).Hi han nous mètodes per la seqüenciació i el processament del codi genòmic, permetent descobrir eines de diagnòstic i tractaments en l’àmbit mèdic. El resultat de la seqüenciació d’un genoma es representa en un fitxer, que pot ocupar centenars de gigabytes. Degut a això, hi ha una necessitat d’una representació estandarditzada on la informació és comprimida. Dins de la ISO, el grup MPEG ha fet servir la seva experiència en compressió de dades multimèdia per comprimir dades genòmiques i desenvolupar l'estàndard MPEG-G, sent la seguretat un dels requeriments principals. L'objectiu de la tesi és garantir aquesta seguretat (encriptant, firmant i definint regles d¿ accés) tan per les dades seqüenciades com per les seves metadades. El primer pas és definir com transportar les dades, metadades i paràmetres de seguretat. Especifiquem un format de fitxer basat en contenidors per tal d'agrupar aquets elements a nivell sintàctic. La nostra solució proposa noves funcionalitats com agrupar múltiples resultats en un mateix fitxer. Pel que fa la seguretat de dades, la nostra proposta utilitza les propietats de la sortida del codificador. Aquesta sortida és estructurada en unitats, cadascuna dedicada a una regió concreta del genoma, permetent una encriptació i firma de dades específica a la unitat. Analitzem el compromís entre seguretat i un enfocament de gra més fi demostrant que configuracions aparentment vàlides poden no ser-ho: si es permet encriptar sols certes sub-unitats d'informació, creuant els continguts no encriptats, podem inferir el contingut encriptat. Quant a metadades, proposem una solució basada en XML separada en una especificació bàsica i en extensions. Podem adaptar l'esquema de metadades als diferents marcs de repositoris genòmics, sense imposar requeriments d’un marc a un altre. Per simplificar l'ús, plantegem la definició de perfils, és a dir, una llista de les extensions que han de ser present per un marc concret. Fem servir firmes XML i encriptació XML per implementar la seguretat de les metadades. Les nostres solucions per la privacitat limiten qui té accés a les dades, però no en limita l’ús. Proposem regles d’accés representades amb XACML per indicar en quines circumstàncies un usuari té dret d'executar una de les accions especificades a l'API de MPEG-G (per exemple, filtrar les dades per atributs). Presentem algoritmes per combinar regles, per tal de poder definir casos per defecte i excepcions. Els mecanismes de seguretat de MPEG-G protegeixen la informació durant el transport i l'accés. Una vegada l’usuari ha accedit a les dades, les podria publicar. Per tal d'identificar qui és l'origen del filtratge de dades, proposem un algoritme que genera modificacions úniques i virtualment no detectables. La nostra solució és pionera, ja que els canvis es poden desfer si el secret corresponent és publicat. Per tant, la utilitat de les dades és mantinguda. Demostrem que combinant varis secrets, podem evitar col·lusions. L'API seleccionada per MPEG-G, considera criteris de cerca que no són presents en les taules d’indexació. Basant-nos en aquesta API, hem desenvolupat una solució. És basada en un marc de col·laboració, on la combinació de les necessitats dels diferents usuaris i els requeriments de privacitat del pacient, es combinen en una representació ad-hoc que optimitza temps d’accessos tot i garantint la privacitat i autenticitat de les dades. La majoria de les nostres propostes s’han inclòs a la versió final de l'estàndard, fusionant-les amb altres proposes (com amb el format del fitxer), demostrant la seva superioritat (com amb els mecanismes de seguretat), i fins i tot sent acceptades directament (com amb les regles de privacitat).Postprint (published version

Security strategies in genomic files

There are new mechanisms to sequence and process the genomic code, discovering thus diagnostic tools and treatments. The file for a sequenced genome can reach hundreds of gigabytes. Thus, for further studies, we need new means to compress the information and a standardized representation to simplify the development of new tools. The ISO standardization group MPEG has used its expertise in compressing multimedia content to compress genomic information and develop its ´MPEG-G standard’. Given the sensitivity of the data, security is a major identified requirement. This thesis proposes novel technologies that assure the security of both the sequenced data and its metadata. We define a container-based file format to group data, metadata, and security information at the syntactical level. It includes new features like grouping multiple results in a same file to simplify the transport of whole studies. We use the granularity of the encoder’s output to enhance security. The information is represented in units, each dedicated to a specific region of the genome, which allows to provide encryption and signature features on a region base. We analyze the trade-off between security and an even more fine-grained approach and prove that apparently secure settings can be insecure: if the file creator may encrypt only specific elements of a unit, cross-checking unencrypted information permits to infer encrypted content. Most of the proposals for MPEG-G coming from other research groups and companies focused on data compression and representation. However, the need was recognized to find a solution for metadata encoding. Our proposal was included in the standard: an XML-based solution, separated in a core specification and extensions. It permits to adapt the metadata schema to the different genomic repositories' frameworks, without importing requirements from one framework to another. To simplify the handling of the resulting metadata, we define profiles, i.e. lists of extensions that must be present in a given framework. We use XML signature and XML encryption for metadata security. The MPEG requirements also concern access rules. Our privacy solutions limit the range of persons with access and we propose access rules represented with XACML to convey under which circumstances a user is granted access to a specific action among the ones specified in MPEG-G's API, e.g. filtering data by attributes. We also specify algorithms to combine multiple rules by defining default behaviors and exceptions. The standard’s security mechanisms protect the information only during transport and access. Once the data is obtained, the user could publish it. In order to identify leakers, we propose an algorithm that generates unique, virtually undetectable variations. Our solution is novel as the marking can be undone (and the utility of the data preserved) if the corresponding secret key is revealed. We also show how to combine multiple secret keys to avoid collusion. The API retained for MPEG-G considers search criteria not present in the indexing tables, which highlights shortcomings. Based on the proposed MPEG-G API we have developed a solution. It is based on a collaboration framework where the different users' needs and the patient's privacy settings result in a purpose-built file format that optimizes query times and provides privacy and authenticity on the patient-defined genomic regions. The encrypted output units are created and indexed to optimize query times and avoid rarely used indexing fields. Our approach resolves the shortcomings of MPEG-G's indexing strategy. We have submitted our technologies to the MPEG standardization committee. Many have been included in the final standard, via merging with other proposals (e.g. file format), discussion (e.g. security mechanisms), or direct acceptance (e.g. privacy rules).Hi han nous mètodes per la seqüenciació i el processament del codi genòmic, permetent descobrir eines de diagnòstic i tractaments en l’àmbit mèdic. El resultat de la seqüenciació d’un genoma es representa en un fitxer, que pot ocupar centenars de gigabytes. Degut a això, hi ha una necessitat d’una representació estandarditzada on la informació és comprimida. Dins de la ISO, el grup MPEG ha fet servir la seva experiència en compressió de dades multimèdia per comprimir dades genòmiques i desenvolupar l'estàndard MPEG-G, sent la seguretat un dels requeriments principals. L'objectiu de la tesi és garantir aquesta seguretat (encriptant, firmant i definint regles d¿ accés) tan per les dades seqüenciades com per les seves metadades. El primer pas és definir com transportar les dades, metadades i paràmetres de seguretat. Especifiquem un format de fitxer basat en contenidors per tal d'agrupar aquets elements a nivell sintàctic. La nostra solució proposa noves funcionalitats com agrupar múltiples resultats en un mateix fitxer. Pel que fa la seguretat de dades, la nostra proposta utilitza les propietats de la sortida del codificador. Aquesta sortida és estructurada en unitats, cadascuna dedicada a una regió concreta del genoma, permetent una encriptació i firma de dades específica a la unitat. Analitzem el compromís entre seguretat i un enfocament de gra més fi demostrant que configuracions aparentment vàlides poden no ser-ho: si es permet encriptar sols certes sub-unitats d'informació, creuant els continguts no encriptats, podem inferir el contingut encriptat. Quant a metadades, proposem una solució basada en XML separada en una especificació bàsica i en extensions. Podem adaptar l'esquema de metadades als diferents marcs de repositoris genòmics, sense imposar requeriments d’un marc a un altre. Per simplificar l'ús, plantegem la definició de perfils, és a dir, una llista de les extensions que han de ser present per un marc concret. Fem servir firmes XML i encriptació XML per implementar la seguretat de les metadades. Les nostres solucions per la privacitat limiten qui té accés a les dades, però no en limita l’ús. Proposem regles d’accés representades amb XACML per indicar en quines circumstàncies un usuari té dret d'executar una de les accions especificades a l'API de MPEG-G (per exemple, filtrar les dades per atributs). Presentem algoritmes per combinar regles, per tal de poder definir casos per defecte i excepcions. Els mecanismes de seguretat de MPEG-G protegeixen la informació durant el transport i l'accés. Una vegada l’usuari ha accedit a les dades, les podria publicar. Per tal d'identificar qui és l'origen del filtratge de dades, proposem un algoritme que genera modificacions úniques i virtualment no detectables. La nostra solució és pionera, ja que els canvis es poden desfer si el secret corresponent és publicat. Per tant, la utilitat de les dades és mantinguda. Demostrem que combinant varis secrets, podem evitar col·lusions. L'API seleccionada per MPEG-G, considera criteris de cerca que no són presents en les taules d’indexació. Basant-nos en aquesta API, hem desenvolupat una solució. És basada en un marc de col·laboració, on la combinació de les necessitats dels diferents usuaris i els requeriments de privacitat del pacient, es combinen en una representació ad-hoc que optimitza temps d’accessos tot i garantint la privacitat i autenticitat de les dades. La majoria de les nostres propostes s’han inclòs a la versió final de l'estàndard, fusionant-les amb altres proposes (com amb el format del fitxer), demostrant la seva superioritat (com amb els mecanismes de seguretat), i fins i tot sent acceptades directament (com amb les regles de privacitat)

Critical analysis and comparison of data protection techniques for genomics data sets

This work reviews the current literature on protecting genomic information. The goal is to provide insight on how to define a secure file format for such data. We compare the published ideas to the requirements defined by MPEG. We also propose new ideas to secure such data

Security strategies in genomic files

There are new mechanisms to sequence and process the genomic code, discovering thus diagnostic tools and treatments. The file for a sequenced genome can reach hundreds of gigabytes. Thus, for further studies, we need new means to compress the information and a standardized representation to simplify the development of new tools. The ISO standardization group MPEG has used its expertise in compressing multimedia content to compress genomic information and develop its ´MPEG-G standard’. Given the sensitivity of the data, security is a major identified requirement. This thesis proposes novel technologies that assure the security of both the sequenced data and its metadata. We define a container-based file format to group data, metadata, and security information at the syntactical level. It includes new features like grouping multiple results in a same file to simplify the transport of whole studies. We use the granularity of the encoder’s output to enhance security. The information is represented in units, each dedicated to a specific region of the genome, which allows to provide encryption and signature features on a region base. We analyze the trade-off between security and an even more fine-grained approach and prove that apparently secure settings can be insecure: if the file creator may encrypt only specific elements of a unit, cross-checking unencrypted information permits to infer encrypted content. Most of the proposals for MPEG-G coming from other research groups and companies focused on data compression and representation. However, the need was recognized to find a solution for metadata encoding. Our proposal was included in the standard: an XML-based solution, separated in a core specification and extensions. It permits to adapt the metadata schema to the different genomic repositories' frameworks, without importing requirements from one framework to another. To simplify the handling of the resulting metadata, we define profiles, i.e. lists of extensions that must be present in a given framework. We use XML signature and XML encryption for metadata security. The MPEG requirements also concern access rules. Our privacy solutions limit the range of persons with access and we propose access rules represented with XACML to convey under which circumstances a user is granted access to a specific action among the ones specified in MPEG-G's API, e.g. filtering data by attributes. We also specify algorithms to combine multiple rules by defining default behaviors and exceptions. The standard’s security mechanisms protect the information only during transport and access. Once the data is obtained, the user could publish it. In order to identify leakers, we propose an algorithm that generates unique, virtually undetectable variations. Our solution is novel as the marking can be undone (and the utility of the data preserved) if the corresponding secret key is revealed. We also show how to combine multiple secret keys to avoid collusion. The API retained for MPEG-G considers search criteria not present in the indexing tables, which highlights shortcomings. Based on the proposed MPEG-G API we have developed a solution. It is based on a collaboration framework where the different users' needs and the patient's privacy settings result in a purpose-built file format that optimizes query times and provides privacy and authenticity on the patient-defined genomic regions. The encrypted output units are created and indexed to optimize query times and avoid rarely used indexing fields. Our approach resolves the shortcomings of MPEG-G's indexing strategy. We have submitted our technologies to the MPEG standardization committee. Many have been included in the final standard, via merging with other proposals (e.g. file format), discussion (e.g. security mechanisms), or direct acceptance (e.g. privacy rules).Hi han nous mètodes per la seqüenciació i el processament del codi genòmic, permetent descobrir eines de diagnòstic i tractaments en l’àmbit mèdic. El resultat de la seqüenciació d’un genoma es representa en un fitxer, que pot ocupar centenars de gigabytes. Degut a això, hi ha una necessitat d’una representació estandarditzada on la informació és comprimida. Dins de la ISO, el grup MPEG ha fet servir la seva experiència en compressió de dades multimèdia per comprimir dades genòmiques i desenvolupar l'estàndard MPEG-G, sent la seguretat un dels requeriments principals. L'objectiu de la tesi és garantir aquesta seguretat (encriptant, firmant i definint regles d¿ accés) tan per les dades seqüenciades com per les seves metadades. El primer pas és definir com transportar les dades, metadades i paràmetres de seguretat. Especifiquem un format de fitxer basat en contenidors per tal d'agrupar aquets elements a nivell sintàctic. La nostra solució proposa noves funcionalitats com agrupar múltiples resultats en un mateix fitxer. Pel que fa la seguretat de dades, la nostra proposta utilitza les propietats de la sortida del codificador. Aquesta sortida és estructurada en unitats, cadascuna dedicada a una regió concreta del genoma, permetent una encriptació i firma de dades específica a la unitat. Analitzem el compromís entre seguretat i un enfocament de gra més fi demostrant que configuracions aparentment vàlides poden no ser-ho: si es permet encriptar sols certes sub-unitats d'informació, creuant els continguts no encriptats, podem inferir el contingut encriptat. Quant a metadades, proposem una solució basada en XML separada en una especificació bàsica i en extensions. Podem adaptar l'esquema de metadades als diferents marcs de repositoris genòmics, sense imposar requeriments d’un marc a un altre. Per simplificar l'ús, plantegem la definició de perfils, és a dir, una llista de les extensions que han de ser present per un marc concret. Fem servir firmes XML i encriptació XML per implementar la seguretat de les metadades. Les nostres solucions per la privacitat limiten qui té accés a les dades, però no en limita l’ús. Proposem regles d’accés representades amb XACML per indicar en quines circumstàncies un usuari té dret d'executar una de les accions especificades a l'API de MPEG-G (per exemple, filtrar les dades per atributs). Presentem algoritmes per combinar regles, per tal de poder definir casos per defecte i excepcions. Els mecanismes de seguretat de MPEG-G protegeixen la informació durant el transport i l'accés. Una vegada l’usuari ha accedit a les dades, les podria publicar. Per tal d'identificar qui és l'origen del filtratge de dades, proposem un algoritme que genera modificacions úniques i virtualment no detectables. La nostra solució és pionera, ja que els canvis es poden desfer si el secret corresponent és publicat. Per tant, la utilitat de les dades és mantinguda. Demostrem que combinant varis secrets, podem evitar col·lusions. L'API seleccionada per MPEG-G, considera criteris de cerca que no són presents en les taules d’indexació. Basant-nos en aquesta API, hem desenvolupat una solució. És basada en un marc de col·laboració, on la combinació de les necessitats dels diferents usuaris i els requeriments de privacitat del pacient, es combinen en una representació ad-hoc que optimitza temps d’accessos tot i garantint la privacitat i autenticitat de les dades. La majoria de les nostres propostes s’han inclòs a la versió final de l'estàndard, fusionant-les amb altres proposes (com amb el format del fitxer), demostrant la seva superioritat (com amb els mecanismes de seguretat), i fins i tot sent acceptades directament (com amb les regles de privacitat)

Use of the KlADH3 promoter for the quantitative production of the murine PDE5A isoforms in the yeast Kluyveromyces lactis

Background: Phosphodiesterases (PDE) are a superfamily of enzymes that hydrolyse cyclic nucleotides (cAMP/ cGMP), signal molecules in transduction pathways regulating crucial aspects of cell life. PDEs regulate the intensity and duration of the cyclic nucleotides signal modulating the downstream biological efect. Due to this critical role associated with the extensive distribution and multiplicity of isozymes, the 11 mammalian families (PDE1 to PDE11) constitute key therapeutic targets. PDE5, one of these cGMP-specifc hydrolysing families, is the molecular target of several well known drugs used to treat erectile dysfunction and pulmonary hypertension. Kluyveromyces lactis, one of the few yeasts capable of utilizing lactose, is an attractive host alternative to Saccharomyces cerevisiae for heterologous protein production. Here we established K. lactis as a powerful host for the quantitative production of the murine PDE5 isoforms. Results: Using the promoter of the highly expressed KlADH3 gene, multicopy plasmids were engineered to produce the native and recombinant Mus musculus PDE5 in K. lactis. Yeast cells produced large amounts of the purifed A1, A2 and A3 isoforms displaying Km, Vmax and Sildenafl inhibition values similar to those of the native murine enzymes. PDE5 whose yield was nearly 1 mg/g wet weight biomass for all three isozymes (30 mg/L culture), is well tolerated by K. lactis cells without major growth defciencies and interferences with the endogenous cAMP/cGMP signal transduction pathways. Conclusions: To our knowledge, this is the frst time that the entire PDE5 isozymes family containing both regulatory and catalytic domains has been produced at high levels in a heterologous eukaryotic organism. K. lactis has been shown to be a very promising host platform for large scale production of mammalian PDEs for biochemical and structural studies and for the development of new specifc PDE inhibitors for therapeutic applications in many pathologies

Phosphorylation-mediated regulation of alternative splicing in cancer

Alternative splicing (AS) is one of the key processes involved in the regulation of gene expression in eukaryotic cells. AS catalyzes the removal of intronic sequences and the joining of selected exons, thus ensuring the correct processing of the primary transcript into the mature mRNA. The combinatorial nature of AS allows a great expansion of the genome coding potential, as multiple splice-variants encoding for different proteins may arise from a single gene. Splicing is mediated by a large macromolecular complex, the spliceosome, whose activity needs a fine regulation exerted by cis-acting RNA sequence elements and trans-acting RNA binding proteins (RBP). The activity of both core spliceosomal components and accessory splicing factors is modulated by their reversible phosphorylation. The kinases and phosphatases involved in these posttranslational modifications significantly contribute to AS regulation and to its integration in the complex regulative network that controls gene expression in eukaryotic cells. Herein, we will review the major canonical and noncanonical splicing factor kinases and phosphatases, focusing on those whose activity has been implicated in the aberrant splicing events that characterize neoplastic transformation