Establishment of a suppression therapy for beta-thalassemia due to a nonsense mutation

Tese de mestrado em Bioquímica, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2017A célula necessita de manter os níveis de proteína regulados, uma vez que estas possuem funções que determinam a sobrevivência e adaptação da célula em resposta a diferentes estímulos. De forma a regular estes níveis a célula altera os padrões de expressão génica, controlando vários processos celulares, nomeadamente, a transcrição e a tradução. Uma desregulação nestes processos pode levar a inúmeras doenças, como as doenças genéticas. A β-talassemia é um exemplo de uma doença genética, caraterizada pela redução ou ausência de β-globina, a qual leva consequentemente a anemia. A redução dos níveis de proteína pode ser causada pela presença de codões prematuros da tradução (PTCs) no seu mRNA. O mRNA que contenha estes PTCs pode ser envidado para o mecanismo de degradação mediado por mutações nonsense (NMD) caso cumpra os requisitos necessários. O NMD é um mecanismo de controlo de qualidade da célula, uma vez que tem um papel protetor contra erros genéticos. Durante o splicing são adicionados complexos exão-exão (EJCs) a 20-24 nucleótidos a montante das junções exão-exão. Durante a ronda pioneira da tradução todos os EJCs adicionados são removidos. No entanto, na presença de um PTC localizado a 50-54 nucleótidos a montante da junção exão-exão, o EJC não é removido e interage com outros complexos proteicos de forma a recrutar endonucleases e exonucleases, os quais levam à degradação do mRNA. Os mRNAs que contenham PTCs próximos do codão de iniciação são uma exceção a esta regra, assim como mRNAs que contenham PTCs a jusante da ultima junção exão-exão. Quando o mRNA que contenha o PTC não é enviado para NMD pode ocorrer a produção de pequenos péptidos, que são degradados por proteólise, ou de longas proteínas truncadas, que agregam e precipitam, levando à destruição dos percursores eritroides e ao agravamento do fenótipo do doente. Sendo assim, tanto o tipo de mutação com a sua posição no gene influenciam o fenótipo e a severidade da β-talassemia. Esta doença apresenta três fenótipos, a β-talassemia suave, a intermédia e a grave. Os pacientes que apresentam β-talassemia suave são assintomáticos, no entanto aqueles cujo fenótipo é mais grave, apresentam anemias severas com necessidade de transfusões sanguíneas recorrentes. A β-talassemia intermédia apresenta sintomas com grau de severidade entre a β-talassemia suave e β-talassemia grave. Apesar de não existir uma cura para a β-talassemia existem algumas terapias convencionais, como por exemplo, as transfusões sanguíneas que permitem restaurar temporariamente os níveis de β-globina no sangue. No entanto, estas terapias possuem efeitos secundários, nomeadamente a deposição de elevados níveis de ferro em diferentes órgãos e tecidos que prejudicam a saúde do doente. Desta forma, é importante estudar uma terapia que permita restaurar os níveis da proteína β-globina, assim como a sua função. Existem diversos artigos que relatam uma terapia de supressão onde são restaurados os níveis e a função de proteína em doenças causadas pela presença de um PTC, como na fibrose cística ou na distrofia muscular Duchenne. Esta terapia consiste na releitura de um codão que levaria à terminação prematura da tradução. Este processo permite que o mRNA seja totalmente traduzido, resultando na síntese de uma proteína completa e com pelo menos alguma da sua função restaurada. De forma a ser possível esta releitura, alguns compostos aminoglicósidos e não-aminoglicósidos permitem a ligação de um aminoacil-tRNA com duas bases compatíveis com o codão stop prematuro, anulando a ligação dos fatores de libertação da tradução ao PTC. Assim sendo, ocorre a incorporação de um novo aminoácido e a tradução continua. A terapia de supressão tem sido estudada em diversas doenças genéticas causadas pela presença de PTCs em genes, que levam à terminação prematura da tradução. Salvatori et al. demonstrou a capacidade do composto aminoglicósido G418 de induzir a releitura de um PTC no codão 39 no mRNA da β-globina humana. No entanto, a capacidade de supressão deste composto, assim como de outros agentes supressores, ainda não foi estudada na releitura de PTCs em outros locais do mRNA da β-globina humana. Assim, o objetivo principal deste projeto foi estudar que compostos aminoglicósidos e não-aminoglicósidos permitiam obter níveis eficientes de supressão de codões prematuros da tradução no mRNA da β-globina humana. Um segundo objetivo foi compreender como diferentes PTCs em diferentes posições do mRNA respondem a esta terapia de supressão. De forma a ser possível observar a proteína β-globina humana por Western blot, delineou-se uma estratégia que consistiu em clonar a open reading frame (ORF) do enhanced green fluorescent protein (EGFP), sem os codões de iniciação e terminação, no exão 3 do gene da β-globina. Apesar de inúmeras tentativas, não foi possível obter nenhum clone positivo. Dado que a estratégia anterior se mostrou difícil de alcançar, foi delineada uma segunda estratégia. Utilizaram-se construtos que continham 55 codões da β-globina humana em fusão com o gene da firefly luciferase. Estes construtos apesar de não sensíveis ao NMD por não conterem junções exão-exão, permitiram no entanto, compreender as características da terapia de supressão na releitura dos PTCs no mRNA da β-globina humana. De forma a alcançar os objetivos propostos, as células HeLa ou HEK293 foram transfectadas com os constructos referidos, sendo que o gene da β-globina não apresentava mutações (βWT-FLUC) ou possuía uma mutação nonsense no codão 15 (TGA) (β15-FLUC) ou 39 (TAG) (β39-FLUC). As células foram tratadas com G418 (aminoglicósido) ou PTC124 (não-aminoglicósido) e analisou-se a ocorrência de supressão por ensaios de bioluminescência e por Western blot. Após a análise dos resultados obtidos para as células HeLa transfectadas com constructos contendo um PTC no codão 39 no gene da β-globina humana, observou-se que o G418 levou ao aumento da atividade relativa da firefly luciferase na maioria das concentrações testadas. Os resultados obtidos para as células HEK293 aparentam indicar a presença de supressão de um PTC localizado no codão 15 ou 39 no mRNA da β-globina humana, quando estas células são tratadas com G418. No Western blot observou-se a presença de uma banda com tamanho similar à βWT-FLUC quando as células HEK293 transfetadas com construtos contendo um PTC localizado no codão 39 são tratadas com 500, 750, 1000 e 1250 μg/mL. Relativamente às células HEK293 transfetadas com constructos contendo uma mutação no codão 15 pudemos observar a presença de uma banda com tamanho similar ao βWT-FLUC para as células tratadas com G418 a 400, 500, 750, 1000 e 1250 μg/mL. Adicionalmente, foi observado um aumento da atividade relativa da firefly luciferase nestas condições. Este composto não parece influenciar a expressão do constructo βWT-FLUC em nenhuma concentração testada, em ambas as linhas celulares. Relativamente à eficiência de supressão, o composto G418 parece ser mais eficiente na releitura do PTC no codão 15 no mRNA da β-globina humana, relativamente à releitura do PTC no codão 39. Os resultados apresentados para o não-aminoglicósido PTC124 não são claros devido ao facto de as bandas presentes nos Western blots serem difusas. No entanto, é possível que o PTC124 induza a releitura do PTC no codão 15 do mRNA da β-globina humana, quando as células HEK293 são tratadas com PTC124 a 5 μM. Pareceu ser possível a releitura do PTC no codão 39 do mRNA da β-globina humana, quando as células HEK293 são tratadas com PTC124 a 5, 10 ou 15 μM. A eficiência da terapia de supressão pode ser influenciada pelo tripleto que compõe o codão prematuro da tradução ou pela sequência flanqueadora deste codão. Os resultados obtidos permitiram compreender que ambas as sequências flanqueadoras da mutação no codão 15 e no codão 39 permitem que ocorra a releitura do PTC, embora haja uma maior eficiência na releitura do PTC no codão 15 do mRNA da β-globina humana utilizando o composto G418. Apesar de estes resultados positivos indicarem um avanço para estabelecer uma terapia de supressão para a β-talassemia, existem várias vertentes desta terapia que ainda necessitam de ser exploradas. Dado que o NMD pode limitar os níveis de mRNA disponíveis para a releitura do codão, é importante testar a sua inibição (parcial) neste tipo de terapia, utilizando compostos que alteram a eficiência do NMD. Adicionalmente, é importante estudar a função da proteína sintetizada, dado que, após a reinserção de um novo aminácido, é possível que a sua função não seja completa.β-thalassemia is a genetic disorder caused by the absence or reduction of human β-globin protein levels, which leads to a reduction on hemoglobin synthesis. This reduction can be caused by a premature termination codon (PTC) in the human β-globin gene. The messenger ribonucleic acid (mRNA) containing a PTC can be recognized and degraded by the nonsense-mediated decay mechanism (NMD), if the PTC is located 50-54 nucleotides upstream of the last exon-exon junction. If the PTC is located near to the initiation codon or downstream of the last exon-exon junction, then this mRNA is not degraded by NMD. In the first case a small peptide is degraded by proteolysis and in the second case a long truncated protein is synthesized. These proteins aggregate and precipitate, leading to a severe damage of erythroid precursors. The conventional therapies for β-thalassemia temporarily restore the levels of human β-globin protein, however these therapies have secondary effects that lead to the deterioration of the patient health. Given this, a therapy that could restore the levels of human β-globin protein by inducing the readthrough of the PTC in human β-globin mRNA, would be an advantage to these patients. Suppression therapy has been studied in detail for genetic diseases caused by PTCs. Salvatori et al. demonstrated the ability of G418 to induce the readthrough of a PTC at codon 39 of human β-globin mRNA, however, the ability of suppression by this aminoglycoside at other codons of human β-globin mRNA, and the use of other suppression compounds, have not yet been investigated. Suppression therapy consists in the readthrough of a nonsense codon into a sense codon, which allows the mRNA to be totally translated, resulting in a complete protein with partial or complete function. There are some compounds, including aminoglycosides and non-aminoglycosides, that bind to the decoding center of the ribosome and allow the near-cognate aminoacyl-tRNA to bind, resuming translation. The main aims of this project were to understand if G418, an aminoglycoside, or PTC124, a non-aminoglycoside, produce efficient levels of PTC readthrough in human β-globin mRNA, and to understand how different PTCs on β-globin mRNA respond to the suppression therapy. Therefore, HeLa and HEK293 cells were transiently transfected with constructs containing the first 55 codons of human β-globin gene fused to firefly luciferase gene without any PTC (βWT-FLUC) or carrying a PTC at codon 15 (TGA) or 39 (TAG) (β15-FLUC or β39-FLUC). The results were obtained by Western blot and bioluminescence assays. The results obtained by Western blot seem to indicate that G418 induce the readthrough of PTCs at codon 15 or 39 of the human β-globin mRNA in HEK293 cells treated with concentrations higher than 400 μg/mL. Additionally, a PTC at codon 15 of human β-globin mRNA seems to respond more efficiently to the readthrough than a PTC at codon 39. The results obtained after PTC124 treatment are not conclusive, however, PTC124 might be inducing the readthrough of a PTC at codon 15 of human β-globin mRNA in HEK293 cells treated with 5 μM, and at codon 39 of human β-globin mRNA in HEK293 cells treated with 5, 10 and 15 μM. Since G418 revealed to be able to suppress a PTC at codon 15 or 39 of the human β-globin mRNA and restore the full-length human β-globin protein in constructs containing a PTC at codon 15 and 39 of human β-globin gene, it arises as a promising compound to be used in a future therapy for β-thalassemia. Before that, it is important to study the effect of NMD in suppression therapy and how its inhibition can enhance the suppressive effect

Desenvolvimento motor global de crianças do 1º ciclo do ensino básico com e sem prática da natação em contexto educativo

“O desporto, com a diversidade das suas modalidades e disciplinas, dos seus sentidos e modelos, constitui o expoente das modernas tecnologias do corpo, disponibiliza muitas e variadas maneiras de lidar com o corpo, com os seus fenómenos, com as suas aspirações e necessidades” (Bento, 2000, p. 10). É nosso objetivo neste trabalho avaliar o desenvolvimento motor global de crianças do 1º Ciclo do Ensino Básico (do 1º ano ao 4º ano de escolaridade), praticantes e não praticantes de natação, para além da participação em aulas de Expressão e Educação Físico-Motora. A amostra sujeita ao estudo foi constituída na sua totalidade por 160 crianças do 1º Ciclo do Ensino Básico, a frequentar as aulas que fazem parte das Atividades Extra Curriculares. Destas crianças, 53 pertencem ao grupo que não frequenta aulas de natação no âmbito da Expressão e Educação Físico-Motora e; 87 pertencem ao grupo que frequenta aulas de natação no âmbito da Expressão e Educação Físico-Motora. Para avaliar o desenvolvimento motor global das crianças foi utilizada a bateria de testes “Test of Gross Motor Development ” (TGMD-2), de Ulrich Dale (2000), que foi projetada para avaliar o desenvolvimento motor global em crianças dos 3 aos 10, com confiabilidade e validade atestada. É composta por 12 habilidades, distintas em 2 subtestes (subteste locomotor e subteste controlo de objetos) que medem as habilidades motoras globais que se desenvolvem cedo na vida. As evidências transmitidas pelo conjunto de resultados, revisão de literatura e estudos feitos anteriormente, demonstram existir diferenças significativas entre as crianças com e sem experiência aquática, confirmando a hipótese, de as crianças com experiência em natação terem melhor desenvolvimento motor que as crianças sem experiência em natação."Sport, with the diversity of its forms and disciplines, their meanings and models, is the exponent of the modern technologies of the body, provides many and varied ways of dealing with the body, with its phenomena, with their aspirations and needs" (Benedict, 2000, p. 10). It is our goal in this work to evaluate global motor development of children in the 1st cycle of basic education (1st year to 4th grade), practitioners and non swimmers in parallel with participation in classes and Expression Education Physical Motor. The sample subjected to the study, was composed entirely of 160 children of the 1st Cycle of Basic Education, to attend classes that are part of the Extra Curricular Activities. Of these children, 53 belong to the group who did not attend swimming lessons as part of Expression and Physical Education and Motor, 87 belong to the group that attends swimming lessons as part of Expression and Physical Education Motor. To assess global motor development of children was used to test battery "Test of Gross Motor Development" (TGMD - 2), Dale Ulrich (2000), which was designed to assess global motor development in children from 3 to 10, with reliability and validity attested. It is composed of 12 skills, in two separate subtests (locomotor subtest and object control subtest) that measure the overall motor skills that develop early in life. The evidence submitted by the set of results, literature review and earlier studies demonstrate significant differences between children with and without aquatic experience, confirming the hypothesis that children with experience in swimming have better motor development than children without experience swimming

Views on the pandemic: rereading the experience of the religious education of children and young people

The current pandemic is transforming social interactions and interpersonal communication. The hypothesis that in the sphere of mediatization, institutions and individuals are inserted in interactions different from those in which the media emerged through mediating condition, leads us to question the place of these media, and the protagonism of individuals themselves, also in the religious sphere. In fact, the means are not just a resource to be used, but they change the way of understanding and living the relationships between individuals and groups and can constitute places of religious experience. This hypothesis is the basis of a survey aimed at families, children and adolescents, and pastoral agents from several Catholic religious communities located in the territory of Lisbon - Portugal. This empirical study aims to assess the impact of the pandemic on the spiritual life of the groups studied, particularly in the way in which the educational relationship was established, interactions with digital technologies were processed in the context of religious education, and changes in the way of understanding the organization of educational strategies and the exercise of the role of the educator of the faith were found. The surveys gravitate around five axes: 1) Spirituality: relationship with God; 2) Domestic church: educational function of the family; 3) Children's religious education and digital culture; 4) The role of the educator; 5) Community: liturgy and fraternity. Being transversal to the research, in each type of respondents some are privileged more specifically. Sixteen Catholic religious communities of the Metropolitan Area of Lisbon participated in this study, including 556 families, 598 teenagers, 60 younger children, 288 catechists and 19 priests. Our findings reveal that these different groups maintained a close relationship with God during this crisis and the majority did not experience doubts of faith. They adjusted their religious practices to the domestic context, and the family played a very important role as a “domestic church”. However, these practices revolved more around prayer, and there was a decrease in attending religious celebrations such as the mass. Concerning religious education online, most children and adolescents preferred face to face interaction, but felt that it was important to them keeping in touch with their catechist and their group. Both catechists and youngsters developed the necessary digital skills to cope with the situation quickly, but the catechists struggled with lacking pedagogical skills to teach online, and keeping in touch with their religious community. These results are an important object of critical reflection in order to help to configure new dynamics in the context of religious education and religious experience

Escalonamento do serviço laboratorial do Instituto dos Vinhos do Douro e do Porto, I.P.: uma heurística de apoio à decisão

Mestrado em Engenharia e Gestão IndustrialO presente projeto insere-se num serviço laboratorial onde são executados diversos tipos de análises de vinhos com o propósito de certificar e controlar os produtos da região do Douro. O projeto em estudo retrata um caso particular dos problemas de escalonamento, Flexible Job-Shop Scheduling Problem (FJSSP), com uma complexidade acrescida devido à diversidade de análises, equipamentos e rotas que coexistem no shopfloor. A metodologia utilizada para a resolução do problema em estudo compreende o desenvolvimento, e programação, de uma heurística construtiva, baseada na Teoria das Restrições, capaz de efetuar o escalonamento das análises tendo em conta as características específicas do laboratório. Pretende-se, através deste algoritmo, adequar o escalonamento à capacidade de resposta do laboratório, minimizando o makespan e, em última instância, permitir um aumento do nível de serviço a toda a fileira vitivinícola da Região Demarcada do Douro. Através da aplicação deste algoritmo, a empresa consegue uniformizar o processo de seleção de encomendas e executar um escalonamento da produção dimensionado para a capacidade do laboratório e ajustado às características intrínsecas de cada rota de produção, permitindo um aumento do throughtput do sistema.This project is part of a laboratory service where several types of wine analysis are performed with the purpose of certifying and controlling Douro products. The problem portrays a case of scheduling problems, Flexible Job-Shop Scheduling Problem (FJSSP), with increased complexity due to the diversity of analyzes, equipment and routes that coexist in shop floor. The methodology used to solve the problem under study comprises the development and programming of a constructive heuristic based on Theory of Constraints, that is capable of scheduling production considering the specific characteristics of the laboratory. Through this algorithm, it is intended to adapt the scheduling to the labs' capacity, minimizing the makespan and, in the end analysis, to allow an increase on the service level to the entire wine industry of Região Demarcada do Douro. Through the application of this algorithm, the company can standardize the order selection process and execute a production scheduling that is scaled to the laboratory capacity and adjusted to the intrinsic characteristics of each production route, allowing an increase of the system throughput

Echoes of romanticism and fantastic literature in psychoanalysis

This paper maps the historical, aesthetic, and epistemic processes of the 18th and 19th centuries that associate romanticism, fantastic literature and psychoanalysis. We argue that fantastic is an important vector through which elements of Romanticism were incorporated into the psychoanalytic model of the psyche. Assuming that such Romantic influences were assimilated selectively and creatively, we highlight some points of contention and compromise between romanticism and the Enlightenment that were later resumed and transformed by fantastic literature and psychoanalysis: the themes of love, madness, sexuality, superstitions and myths; the relationship between reality and its representations and between thought and consciousness; and the rhetorical use of irony. Finally, the text points to the psychoanalytic approach of the uncanny (Unheimliche) as the most sensitive moment of such exchange.Mapeiam-se os processos históricos, estéticos e epistêmicos dos séculos XVIII e XIX que associam romantismo, literatura fantástica e psicanálise. Defende-se que o fantástico constitui um importante vetor por meio do qual elementos do romantismo foram incorporados ao modelo psicanalítico de aparelho psíquico. Parte-se da perspectiva de que a assimilação da influência romântica realizou-se de forma seletiva e criativa. Destacam-se alguns pontos de tensões e compromissos entre romantismo e o iluminismo, que foram retomados e transformados pelo fantástico e a psicanálise: as temáticas do amor, da loucura, da sexualidade, das superstições e dos mitos; o questionamento da relação entre o real e suas representações e entre pensamento e consciência; e a valorização do uso retórico da ironia. Aponta-se a abordagem psicanalítica do infamiliar (Unheimliche) como o momento mais sensível dessa interlocução

IMAGINATION AND CREATION IN ONTOGENETIC DEVELOPMENT: CONTRIBUTIONS FROM THE HISTORICAL-CULTURAL THEORY

Las teorizaciones sobre la génesis del proceso de organización de la actividad consciente de los seres humanos son una marca en los escritos de L. S. Vigotski (1896-1934). En el curso del desarrollo de la conciencia, la imaginación, entendida como una actividad compleja, se caracteriza como un sistema psicológico de relaciones interfuncionales que ocupa una posición central y gana contornos específicos a lo largo de la ontogénesis. En este artículo revisamos el trabajo vygotskiano con el objetivo de analizar el desarrollo y los contornos de los procesos imaginativos a lo largo de la infancia y la adolescencia (períodos ontogenéticos estudiados por el autor). Sostenemos que la condición humana, esencial y ontológicamente, está ligada a procesos imaginativos, ya que al crear estrategias intencionales de supervivencia y acción sobre la naturaleza, el individuo se vuelve capaz de operar psíquicamente a través de la producción, reproducción y creación de imágenes.Theorizations about the genesis of the process of organizing the conscious activity of human beings are a mark in the writings of L. S. Vigotski (1896-1934). In the course of the development of consciousness, imagination – understood as a complex activity – is characterized as a psychological system of interfunctional relationships that occupies a central position and gains specific contours throughout ontogenesis. In this article, we review the Vygotskian work with the aim of analyzing the development and contours of imaginative processes throughout childhood and adolescence (ontogenetic periods studied by the author). We argue that the human condition, essentially and ontologically, is linked to imaginative processes, as by creating intentional strategies for survival and action on nature, the individual becomes capable of operating psychically through the production, reproduction and creation of images.As teorizações sobre a gênese do processo de organização da atividade consciente do ser humano são uma marca nos escritos de L. S. Vigotski (1896-1934). No curso do desenvolvimento da consciência, a imaginação – entendida como atividade complexa – caracteriza-se como um sistema psicológico de relações interfuncionais que ocupa centralidade e ganha contornos específicos ao longo da ontogênese. Neste artigo revistamos a obra vigotskiana com o objetivo de analisar o desenvolvimento e os contornos dos processos imaginativos ao longo da infância e da adolescência (períodos ontogenéticos estudados pelo autor).  Defendemos que condição humana, essencialmente e ontologicamente, se vincula aos processos imaginativos, pois ao criar estratégias intencionais de sobrevivência e ação sobre a natureza o indivíduo torna-se capaz de operar psiquicamente por meio da produção, reprodução e criação de imagens

On the Dynamics of Accelerated Observers in Special Relativity Theory

This paper investigates the dynamics of the motion of accelerated observers in Special Relativity (SR) theory. The presented discussion highlights the memristive character of the force dynamics. This description contrasts with the standard phase-space representation used in Physics

EDUCAÇÃO EM SEXUALIDADE E DEFICIÊNCIA INTELECTUAL: produção da pós-graduação brasileira (2000-2020)

Na busca de compreender o fenômeno da sexualidade de pessoas com deficiência intelectual em intersecção com aspectos educacionais, este artigo analisa as pesquisas realizadas sobre essa temática no âmbito da pós-graduação brasileira entre os anos 2000 e 2018.  Foram identificados 14 trabalhos de mestrado categorizados e analisados a partir de seis eixos: 1) confecção de material didático; 2) intervenções com jovens e adolescentes; 3) percepção/formações de/com familiares e professores; 4) contextos institucionais; 5) revisão de literatura; e, 6) violência sexual e reprodutiva contra mulheres. Os materiais examinados apontam para a dificuldade de organização de espaços formativas sobre as sexualidades com pessoas com deficiência intelectual. As raras iniciativas mostram-se esvaziadas de princípios epistemológicos que potencializem a máxima expressão do desenvolvimento humano. O cerne é o currículo prescrito, fortemente impregnado pela noção de que sexualidade se vincula exclusivamente as dimensões preventivas e anatômicas/fisiológicas

Partition and macronutrients accumulation in pineapple under nitrogen doses and plant density

Studies related to the absorption and exportation capacity of macronutrients by irrigated pineapple are essential for the definition of adequate doses and fertilization management. The objective of this study was to evaluate the accumulation of biomass and macronutrients in the compartments (leaves, shoot, root, seedlings/slip, crown/top, and fruit) of ‘Vitória’ pineapple irrigated in the semiarid region after the use of nitrogen doses and population densities. The treatments, arranged in randomized blocks with three replicates, arranged in a 5x4 factorial scheme, consisted of five nitrogen doses (0, 5, 10, 15 and 20 g per plant) and four population densities (51,282, 76,923, 90,909, and 126,984 plants ha-1). The accumulation of biomass and macronutrients in the pineapple compartments was evaluated at the end of the growing cycle. The increase of N doses combined with the increase of the plant population promoted a linear increase in the accumulation of biomass and macronutrients by the pineapple plants. The leaves presented greater accumulation of macronutrients, followed by the seedlings, shoot, fruit, crown, and roots. The pineapple presented the following decreasing order of macronutrient absorption: K> N> Ca> P> Mg>S. At the dose of 20 g per plant of N and population of 126,984 plants ha-1 were exported from the area by fruits, 1,311 (12%), 150 (9%), 144 (11%), 52 (11%), 46 (12%) and 36 (12%) kg ha-1 of K, N, Ca, P, Mg, and S, respectively; and by the shoots, 2,426 (22%), 480 (29%), 147 (11%), 101 (21%), 67 (18%), and 45 (15%) kg ha-1 of K, N, Ca, P, Mg, and S, respectively.Studies related to the absorption and exportation capacity of macronutrients by irrigated pineapple are essential for the definition of adequate doses and fertilization management. The objective of this study was to evaluate the accumulation of biomass and macronutrients in the compartments (leaves, shoot, root, seedlings/slip, crown/top, and fruit) of ‘Vitória’ pineapple irrigated in the semiarid region after the use of nitrogen doses and population densities. The treatments, arranged in randomized blocks with three replicates, arranged in a 5x4 factorial scheme, consisted of five nitrogen doses (0, 5, 10, 15 and 20 g per plant) and four population densities (51,282, 76,923, 90,909, and 126,984 plants ha-1). The accumulation of biomass and macronutrients in the pineapple compartments was evaluated at the end of the growing cycle. The increase of N doses combined with the increase of the plant population promoted a linear increase in the accumulation of biomass and macronutrients by the pineapple plants. The leaves presented greater accumulation of macronutrients, followed by the seedlings, shoot, fruit, crown, and roots. The pineapple presented the following decreasing order of macronutrient absorption: K> N> Ca> P> Mg>S. At the dose of 20 g per plant of N and population of 126,984 plants ha-1 were exported from the area by fruits, 1,311 (12%), 150 (9%), 144 (11%), 52 (11%), 46 (12%) and 36 (12%) kg ha-1 of K, N, Ca, P, Mg, and S, respectively; and by the shoots, 2,426 (22%), 480 (29%), 147 (11%), 101 (21%), 67 (18%), and 45 (15%) kg ha-1 of K, N, Ca, P, Mg, and S, respectively