Identification of novel NEK9 substrates and functions through the use of genetically engineered mice. Novel roles in the control of the centrosome cycle

[eng] Mitosis is a process that ensure the correct distribution of the chromosomes between the two newly generated cells, is tightly regulated by two main processes, protein degradation controlled by the APC and protein phosphorylation by different mitotic kinases. CDK1 is the master regulator of mitosis but in the last decades proteins from the Aurora or Polo or the NIMA family have been shown to play key roles in mitosis. The objective of this thesis is to identify new roles during the cell cycle and more specifically the late phases of mitosis of Nek9, a NIMA-related kinase. We aim to characterize new substrates and functions of the kinase by using different cell lines and genetically modified mice and interfering with Nek9 expression. The centrosome acts as the major microtubule-organizing center (MTOC) of the cell to maintain cytoskeleton in interphase and to organize the bipolar spindle in mitosis, and its duplication cycle is coupled with the cell cycle. When the cell enters mitosis, the duplicated centrosomes separate to the spindle poles and assemble the bipolar mitotic spindle for accurate chromosome separation and to maintain genomic stability. However, centrosome aberrations occur frequently and often lead to abnormal mitotic spindle formation, which can result in abnormal chromosome segregation and as a consequence tumorigenesis, microcephaly or ciliopathies. Nek9 is inactive during interphase and activated at centrosomes and spindle poles during mitosis by a two-step mechanism mediated by Plk1 and CDK1. Once active, Nek9 is able to bind Nek6 and Nek7 and directly phosphorylate these kinases inducing in turn their activation. Our group has shown that Nek6/7 phosphorylates the kinesin Eg5 at Ser1033 in the C-terminal domain, modulating the accumulation of Eg5 at or around centrosomes and their separation during prophase. Nek9 also phosphorylates the adapter NEDD1/GCP-WD, independently of Nek6/7, contributing to its recruitment to the centrosome and in consequence, to the recruitment of the microtubule nucleating complex formed by y-tubulin to the same organelle. Thus, Nek9, Nek7 and Nek6 regulate different aspects of the centrosome machinery during the entry in mitosis and have a role in spindle organization and correct mitotic progression. Here we show that animals with a single Nek9 KO allele are healthy and fertile but intercrosses between them have not resulted in any homozygous null animals among born offspring indicating that the deletion of Nek9 is embryonic lethal. Also embryos obtained from these intercrosses had a higher frequency of mitotic abnormalities that result in death during the first days of development. As Nek9 is important for the proper development of mitosis we checked whether the expression in heterozygosity of Nek9 results in tumors affecting the viability of the animals. Some differences in tumor-free lifespan between heterozygous and wild type animals have been observed, with the appearance of tumors and aneuploidy. In addition, elimination of Nek9 expression lead to the apparition of abnormal mitosis, aneuploidy and multiple centrosomes both in genetically engineered MEFs and human cells, resulting in accumulation of centrobin, a protein mostly associated with the daughter centrioles, in the amplified centrioles. In the present thesis we describe possible new functions and substrates of Nek9 in the centrosome cycle, closely linked to the cell division cycle, after interfering with its expression using different strategies.[spa] La mitosis es un proceso que asegura la distribución correcta de los cromosomas entre dos células recién generadas, está regulada por dos procesos principales, la degradación y la fosforilación de proteínas por diferentes quinasas mitóticas. CDK1 es el principal regulador de la mitosis, pero en las últimas décadas se ha demostrado que las proteínas de la familia Aurora o Polo o NIMA desempeñan un papel clave en la mitosis. El objetivo de esta tesis es identificar nuevas funciones de Nek9, una quinasa de la familia NIMA, durante el ciclo celular y más específicamente durante las fases tardías de la mitosis. Nuestro objetivo es caracterizar nuevos sustratos y funciones de la quinasa mediante el uso de diferentes líneas celulares y ratones genéticamente modificados que nos permiten interferir con la expresión de Nek9. El centrosoma actúa como el principal centro organizador de microtúbulos de la célula para mantener el citoesqueleto en interfase y para organizar el huso bipolar en la mitosis, su ciclo de duplicación va en sintonía con el ciclo celular. Cuando la célula entra en mitosis, los centrosomas duplicados se separan ensamblando el huso mitótico para segregar los cromosomas y para mantener la estabilidad genómica. Sin embargo, diferentes aberraciones ocurren con frecuencia en el centrosoma y a menudo conducen a la formación anormal del huso mitótico, que puede dar como resultado una segregación cromosómica anormal y, como consecuencia, tumorogénesis, microcefalia o ciliopatias. Nek9 está inactiva en interfase y se activa en los centrosomas durante la mitosis mediante un mecanismo de dos pasos mediado por Plk1 y CDK1. Una vez activo, Nek9 se puede unir a Nek6 y Nek7 y fosforilarlas induciendo a su vez su activación. Nuestro grupo ha demostrado que Nek6/7 fosforilan la quinesina Eg5, modulando la acumulación de Eg5 en los centrosomas y su separación durante la profase. Nek9 también fosforila el adaptador NEDD1 / GCP-WD, independientemente de Nek6/7, lo que contribuye a su reclutamiento en el centrosoma y, en consecuencia, al reclutamiento del complejo de nucleación de microtúbulos formado por y-tubulina. Aquí mostramos que los animales con un único alelo Nek9 KO están sanos y son fértiles. Sin embargo, los cruces entre ellos no dan lugar a ningún animal KO homocigoto, lo que indica que la eliminación de Nek9 es letal durante el desarrollo embrionario. Además, los embriones procedentes de estos cruces tienen una mayor frecuencia de defectos mitóticos que provocan la muerte durante los primeros días de desarrollo. Como Nek9 es importante para el correcto desarrollo de la mitosis, queríamos ver si la expresión en heterocigosis daba como resultado tumores que afectan la viabilidad de los animales. Se han observado algunas diferencias en la esperanza de vida libre de tumores entre los heterocigotos con cierta incidencia de cáncer y aneuploidía. Por otro lado, la eliminación de la expresión de Nek9 en células conduce a la aparición de mitosis anormales, aneuploidía y múltiples centrosomas, tanto en fibroblastos embrionarios de ratón genéticamente modificados como en células humanas teniendo como consecuencia la acumulación de centrobina, una proteína presente en los procentriolos. En la presente tesis describimos posibles nuevas funciones y sustratos de Nek9 en el ciclo del centrosoma, íntimamente ligado al ciclo de división celular, tras interferir con su expresión de diferentes formas

Las TIC en el ámbito educativo. Comparativa entre entorno rural y urbano

En el presente Trabajo de Investigación de Fin de Grado, se muestran los resultados obtenidos de la recopilación de información en relación a las Tecnologías de la Información y la Comunicación (TIC) en base a la comparativa de dos instituciones de educación. La investigación se ha centrado en dos centros de distinta índole, localizados en un entorno urbano y un entorno rural de la provincia de Soria. Para ello, hemos utilizado una serie de instrumentos de recogida de datos, a través de los cuales, he obtenido diversos resultados acerca de las semejanzas y diferencias entre ambos ámbitos y puntos fuertes y débiles de los centros en relación a las TIC. Para analizar de manera objetiva los resultados obtenidos en ambos centros, llevaremos a cabo una aproximación al concepto TIC y su importancia a nivel social y económico, la normativa en la que se sustenta y, los entornos rurales y su inclusión en el aula.Grado en Educación Infanti

Análisis del proceso de implementación de la Norma Técnica Sectorial de Turismo Sostenible para establecimientos de alojamiento y hospedaje. (NTS-TS 002 2014) en el municipio de Girardot Cundinamarca.

El turismo es una actividad económica que genera cada vez más impacto en Girardot, el municipio reúne una serie de características que lo hacen ser una ciudad turística reconocida a nivel nacional, es así como gran parte de los ingresos que recibe el municipio se debe a este sector, de esta forma genera servicios para soportar movimientos de ocio, negocios, placer, motivos profesionales, entre otras. Además, se caracteriza por cumplir con una relevancia a nivel socioeconómico actualmente, debido a que uno de sus objetivos es mantener un equilibrio para la generación de oportunidades en las comunidades donde se realice esta actividad, permitiendo generar ingresos a la misma. La Organización Mundial del Turismo definió que “El turismo es un fenómeno social, cultural y económico relacionado con el movimiento de personas a lugares fuera de su lugar habitual de residencia” (OMT, 2008, p. 1) Por lo tanto, es fundamental analizar los procesos internos del sector hotelero para generar un crecimiento en calidad y competitividad en Girardot, de este modo La capacidad que tiene un destino para insertarse en los mercados de manera sostenible, mediante la articulación de los actores públicos y privados y la creación de productos diferenciados de alta calidad, innovadores y atractivos, que generen experiencias positivas y alto valor agregado al turista y visitante (CEPTUR, 2019. p. 13). Por consiguiente, se crearon las normas técnicas sectoriales que son estándares de calidad para los diferentes sectores del turismo y tienen como fin promover la sostenibilidad en los territorios y dar cumplimiento a nivel ambiental, sociocultural y económico. En la presente investigación la Norma Técnica Sectorial de Turismo Sostenible (NTS-TS 002 2014) se tomó como base para realizar un análisis en distintos establecimientos de alojamiento y hospedaje en el municipio de Girardot. De esta manera, lo que se busca en la investigación es analizar los procesos de implementación de la norma en los establecimientos, realizando un diagnóstico y reconociendo los impactos que generan frente a la NTS-TS 002 2014 y, por último, proponer acciones que permitan desarrollar los procesos de implementación de esta. Es fundamental observar cada detalle de los procedimientos internos del sector hotelero, con el fin de mejorar la calidad y competitividad de la actividad turística del municipio. De esta forma, lo que se busca es integrar una oferta turística con una marca de responsabilidad con el medio ambiente donde se respete y aproveche de la mejor manera los recursos naturales, esto con el fin de generar un desarrollo sostenible a nivel del municipio para cumplir con procesos de calidad y crear una cultura de excelencia frente a la prestación de los servicios. Es así como, la implementación de la Norma para los Establecimientos de Alojamiento y Hospedaje trae diferentes beneficios al municipio, garantizando una buena forma de operación turística, generando progresivamente menos impactos negativos en los requisitos explicados en la misma y así lograr un desarrollo sostenible y una calidad del servicio o producto turístico que logre competitividad

Identificación de las expectativas del estudiantado de primer año del programa de Odontología de la Universidad CES. Medellín (Colombia)

Según la Real Academia de la Lengua, las expectativas, son la esperanza de ejecutar o conseguir algo. En el ámbito educativo, la relación entre expectativas y satisfacción se estudia desde dos perspectivas diferentes pero complementarias: una, centrada en la calidad del servicio educativo y otra, en el bienestar psicológico de cada estudiante. Así pues, las expectativas no son un tema de interés reciente y, en la actualidad, son un punto sobre el cual se crean estrategias para influir en la retención estudiantil universitaria. Este trabajo se propuso identificar las expectativas del estudiantado que ingresó a la carrera de odontología en la Universidad CES, ubicada en Medellín (Colombia), correspondiente a tres cohortes (2017-1, 2017-2 y 2018-1). Se realizó un estudio con enfoque cuantitativo, de tipo observacional, descriptivo y comparativo, con una muestra no aleatoria de 152 estudiantes de primer ingreso a la carrera de Odontología en la Universidad CES con sede en Medellín, Colombia. Se aplicó el cuestionario CIA-A validado en Chile con una población semejante (estudiantes de primer año de medicina). Respondieron principalmente mujeres (72,2%); la procedencia se concentró en Medellín y su área metropolitana; se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre las cohortes según procedencia y carrera previa. Los factores analizados, tuvieron un comportamiento semejante entre cohortes, aunque la cohorte del año 2017-2 mostró mejores promedios en cada uno de los ítems. La dimensión participación estudiantil es el componente con mayores expectativas. El valor que dan a la participación estudiantil es un asunto clave para facilitar su permanencia

Deciphering the Patterns of Genetic Admixture and Diversity in the Ecuadorian Creole Chicken

Latin American Creole chickens are generally not characterized; this is the case in Ecuador, where the lack of scientific information is contributing to their extinction. Here, we developed a characterization of the genetic resources of Ecuadorian chickens located in three continental agroecosystems (Pacific coastal, Andean, and Amazonian). Blood samples of 234 unrelated animals were collected in six provinces across Ecuador: Bolívar, Chimborazo, Cotopaxi, Guayas, Morona Santiago, and Tungurahua, in order to perform a genetic characterization and population structure assessment using the AVIANDIV project microsatellites panel (30 loci) and D-loop sequences of mitochondrial DNA and comparing with reference data from other breeds or genetic lines. The results indicate that Ecuadorian Creole chickens are the result of the admixture of different genetic groups that occurred during the last five centuries. While the influence of South Spanish breeds is demonstrated in the colonial age, genetic relationships with other breeds (Leghorn, Spanish fighter cock) cannot be discarded. The geographical configuration of the country and extreme climate variability have influenced the genetic isolation of groups constituting a homogeneous genetic status into the whole population. This is not only a source of genetic variation, but also a critical point because genetic drift produces a loss of genetic variants

Evaluation of modis-aqua and olci chlorophyll-a products in contrasting waters of the southwestern Atlantic ocean

Satellite chlorophyll-a concentration (Chl-a) estimations provide a valuable tool to study marine phytoplankton dynamics with unprecedented spatial and temporal coverage. Standard empirical Chl-a algorithms perform well where phytoplankton is the dominant optically active component in seawater, but usually fail in those regions where there is a high optical influence from multiple dissolved and particulate components that are not covariant with Chl-a (Prieur and Sathyendrenath, 1981). Therefore, in coastal regions, where colored dissolved and suspended particulate matter are dominant, it is crucial to perform an accuracy assessment of satellite Chl-a products to ensure their reliable use.Fil: Delgado, Ana Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto Argentino de Oceanografía. Universidad Nacional del Sur. Instituto Argentino de Oceanografía; ArgentinaFil: Pratolongo, Paula Daniela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida. Universidad Nacional del Sur. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Dogliotti, Ana Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Astronomía y Física del Espacio. - Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Astronomía y Física del Espacio; Argentina. Instituto Franco-Argentino sobre Estudios del Clima y sus Impactos; ArgentinaFil: Arena, Maximiliano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto Argentino de Oceanografía. Universidad Nacional del Sur. Instituto Argentino de Oceanografía; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Celleri, Carla. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida. Universidad Nacional del Sur. Centro de Recursos Naturales Renovables de la Zona Semiárida; ArgentinaFil: Garzon Cardona, John Edison. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto Argentino de Oceanografía. Universidad Nacional del Sur. Instituto Argentino de Oceanografía; ArgentinaFil: Martínez, Ana Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Química del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Química. Instituto de Química del Sur; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Química; Argentin

Fortaleciendo el conocimiento: Educación para un manejo óptimo de productos fitoterapéuticos en tiendas naturistas del Santuario, Antioquia

Anexos: Formato de encuesta para los colaboradores de las tiendas naturistas del municipio del Santuario – Antioquia: https://forms.gle/nnfRhbJsXhHTgzTH8 Estrategia educativa sobre el manejo responsable de productos fitoterapéuticos en tiendas naturistas del Santuario Antioquia Objetivo de la estrategia: Realizar estrategias educativas que brindan la información sobre el manejo responsable de productos fitoterapéuticos al personal que labora en las tiendas naturistas del municipio de Santuario Antioquia. (Bioser tienda saludable, tienda naturista manantial de vida, tienda naturista distribuciones Oriente y Natural conexión). Donde se manejará como es el uso adecuado de los productos fitoterapéuticos, reacciones adversas a productos fitoterapéuticos, indicaciones adecuadas y dando a conocer la normatividad vigente que rige este tipo de establecimientos. Responsables: Estudiantes del Diplomado de Profundización en Farmacovigilancia grupo N°152004_5, Universidad Nacional Abierta y a Distancia-UNAD. Normatividad aplicable: Se incluyen las siguientes normativas relacionadas con productos fitoterapéuticos y tiendas naturistas: 1. Decreto 1156 de 2018: Reglamenta el régimen de registro sanitario de productos fitoterapéuticos y establece otras disposiciones. 2. Resolución 4320 de 2004: Reglamenta la publicidad de los medicamentos y productos fitoterapéuticos de venta sin prescripción facultativa o de venta libre. 3. Decreto 2266 de 2004: Reglamenta los regímenes de registros sanitarios, vigilancia y control sanitario, y publicidad de los productos fitoterapéuticos. 4. Decreto 3553 del 2004 el cual se modifica el Decreto 2266 de 2004 y se dictan otras disposiciones. 4. Resolución 000126 de 2009: Establece las condiciones esenciales para la apertura, funcionamiento, vigilancia y control sanitario de las tiendas naturistas, y dicta otras disposiciones. Alcance: Aplica para el personal encargado de la dispensación de los productos fitoterapéuticos de las tiendas naturistas del municipio de Santuario Antioquia. (Bioser tienda saludable, tienda naturista manantial de vida, tienda naturista distribuciones Oriente y Natural conexión) Temas: - Uso adecuado de medicamento homeopáticos, naturales y fitoterapéuticos - Reacciones adversas a producto naturistas - Normatividad vigente que rige este tipo de establecimientos. Actividades a desarrollar: 1. Encuesta de conocimientos 2. Socialización del uso adecuado de medicamentos apoyados de una infografía informativa y diapositivas. 3. Socialización sobre la normatividad vigente sobre las tiendas naturistas 4. socialización de las reacciones adversas a productos naturistas Fechas de socialización de la estrategia: 26/05/2023 Material de apoyo Infografía sobre el uso adecuado de los productos fitoterapéuticos Link:https://www.canva.com/design/DAEpn8wR174/YZUEBZwBdMER2Eybj1xaSA/edit?utm_content=DAEpn8wR174&utm_campaign=designshare&utm_medium=link2&utm_source=sharebutton Folleto sobre las indicaciones a tener en cuenta según la normatividad vigente Link: https://www.canva.com/design/DAFgm-Cl5J0/ko-lHcGkIHvtcvdDT3zoHA/edit?utm_content=DAFgm-Cl5J0&utm_campaign=designshare&utm_medium=link2&utm_source=sharebutton Cartilla educativa Link: https://www.flipsnack.com/95A77BFF8D6/uso-adecuado-de-los-productos-naturales-xms7yq5unf.html Presentación reacciones adversas y como notificar una respuesta negativa a medicamentos homeopáticos, naturales y fitoterapéuticos. Link:https://www.canva.com/design/DAFic5zuQdQ/HxXTPxHMGHafNLw9x1GdMw/edit?utm_content=DAFic5zuQdQ&utm_campaign=designshare&utm_medium=link2&utm_source=sharebutton Presentación sobre las reacciones adversas a productos fitoterapéuticos Link: https://www.canva.com/design/DAFiqClpeMM/6hiUnDcAXTHOC84-hz59mg/edit?utm_content=DAFiqClpeMM&utm_campaign=designshare&utm_medium=link2&utm_source=sharebuttonEste estudio se realizó con el fin de abordar la falta de preparación del personal responsable del manejo de productos fitoterapéuticos en tiendas naturistas del Santuario, Antioquia, y buscar oportunidades para mejorar su capacidad en el manejo apropiado de dichos productos. Para obtener información relevante, se realizaron encuestas a los empleados de estas tiendas naturistas. Las encuestas abordaron diversos aspectos, como el nivel de conocimiento sobre los productos fitoterapéuticos, las prácticas de manejo actuales, las necesidades de capacitación y las dificultades encontradas en el manejo de dichos productos. Estas encuestas proporcionaron un panorama general de la situación ayudaron a identificar áreas clave en las que se requería mejorar la preparación del personal. Además de las encuestas, se desarrollaron materiales educativos específicos para abordar las necesidades identificadas. Estos materiales educativos incluyeron pautas de buenas prácticas en el manejo de productos fitoterapéuticos, información sobre interacciones medicamentosas y efectos secundarios, así como pautas para el almacenamiento adecuado de los productos. Estos recursos se diseñaron de manera clara y accesible, utilizando un lenguaje comprensible para asegurar una fácil comprensión de la información desde el área del personal. La implementación de capacitaciones basadas en los materiales educativos fue un componente clave de este estudio. Se organizaron sesiones de capacitación en las que se proporcionó información detallada sobre los productos fitoterapéuticos, sus propiedades y usos, así como las mejores prácticas para su manipulación y dispensación. Se alentó a los empleados a participar activamente en estas sesiones, compartiendo sus experiencias y haciendo preguntas para aclarar cualquier duda que tuvieran. Los resultados obtenidos revelaron un impacto positivo de las capacitaciones y los materiales educativos en el personal responsable del manejo de productos fitoterapéuticos. Se evidenció un crecimiento significativo en el conocimiento y la comprensión de los empleados sobre los productos, así como una mejora en las prácticas de manejo y una mayor confianza en su capacidad para brindar información precisa y segura a los clientes.This study was conducted to address the lack of preparedness among the personnel responsible for handling herbal products in natural stores in Santuario, Antioquia, and to seek opportunities to enhance their proficiency in the proper handling of such products. To gather relevant information, surveys were conducted among the employees of these natural stores. The surveys covered various aspects, including the level of knowledge about herbal products, current handling practices, training needs, and difficulties encountered in handling such products. These surveys provided a comprehensive overview of the situation and helped identify key areas where personnel preparedness needed improvement. In addition to the surveys, specific educational materials were developed to address the identified needs. These educational materials included guidelines for best practices in handling herbal products, information on drug interactions and side effects, as well as guidelines for proper product storage. These resources were designed in a clear and accessible manner, using understandable language to ensure easy comprehension of the information by the personnel. The implementation of training based on the educational materials was a key component of this study. Training sessions were organized where detailed information about herbal products, their properties and uses, as well as best practices for handling and dispensing, were provided. Employees were encouraged to actively participate in these sessions, sharing their experiences and asking questions to clarify any doubts they had. The results obtained revealed a positive impact of the training and educational materials on the personnel responsible for handling herbal products. There was a significant growth in the knowledge and understanding of the employees regarding the products, as well as an improvement in handling practices and increased confidence in their ability to provide accurate and safe information to customers

Clinical and radiological characteristics and outcome of wake-up intracerebral hemorrhage

There is little information on the characteristics of patients with wake-up intracerebral hemorrhage (WU-ICH). We aimed to evaluate frequency and relevant differences between WU-ICH and while-awake (WA) ICH patients. This is a retrospective study of a prospective database of consecutive patients with spontaneous ICH, who were classified as WU-ICH, WA-ICH or UO-ICH (unclear onset). We collected demographic, clinical and radiological data, prognostic and therapeutic variables, and outcome [(neurological deterioration, mortality, functional outcome (favorable when modified Rankin scale score 0-2)]. From a total of 466 patients, 98 (25.8%) were classified as UO-ICH according to the type of onset and therefore excluded. We studied 368 patients (mean age 73.9 ± 13.8, 51.4% men), and compared 95 (25.8%) WU-ICH with 273 (74.2%) WA-ICH. Patients from the WU-ICH group were significantly older than WA-ICH (76.9 ± 14.3 vs 72.8 ± 13.6, p = 0.01) but the vascular risk factors were similar. Compared to the WA-ICH group, patients from the WU-ICH group had a lower GCS score or a higher NIHSS score and a higher ICH score, and were less often admitted to a stroke unit or intensive care unit. There were no differences between groups in location, volume, rate of hematoma growth, frequency of intraventricular hemorrhage and outcome. One in five patients with spontaneous ICH are WU-ICH patients. Other than age, there are no relevant differences between WU and WA groups. Although WU-ICH is associated with worse prognostic markers vital and functional outcome is similar to WA-ICH patients

MFG-E8 (LACTADHERIN): a novel marker associated with cerebral amyloid angiopathy

Malaltia d'Alzheimer; Biomarcadors; Microdissecció de captura làserAlzheimer's disease; Biomarkers; Laser capture microdissectionEnfermedad de Alzheimer; Biomarcadores; Microdisección por captura láserBrain accumulation of amyloid-beta (Aβ) is a crucial feature in Alzheimer´s disease (AD) and cerebral amyloid angiopathy (CAA), although the pathophysiological relationship between these diseases remains unclear. Numerous proteins are associated with Aβ deposited in parenchymal plaques and/or cerebral vessels. We hypothesized that the study of these proteins would increase our understanding of the overlap and biological differences between these two pathologies and may yield new diagnostic tools and specific therapeutic targets. We used a laser capture microdissection approach combined with mass spectrometry in the APP23 transgenic mouse model of cerebral-β-amyloidosis to specifically identify vascular Aβ-associated proteins. We focused on one of the main proteins detected in the Aβ-affected cerebrovasculature: MFG-E8 (milk fat globule-EGF factor 8), also known as lactadherin. We first validated the presence of MFG-E8 in mouse and human brains. Immunofluorescence and immunoblotting studies revealed that MFG-E8 brain levels were higher in APP23 mice than in WT mice. Furthermore, MFG-E8 was strongly detected in Aβ-positive vessels in human postmortem CAA brains, whereas MFG-E8 was not present in parenchymal Aβ deposits. Levels of MFG-E8 were additionally analysed in serum and cerebrospinal fluid (CSF) from patients diagnosed with CAA, patients with AD and control subjects. Whereas no differences were found in MFG-E8 serum levels between groups, MFG-E8 concentration was significantly lower in the CSF of CAA patients compared to controls and AD patients. Finally, in human vascular smooth muscle cells MFG-E8 was protective against the toxic effects of the treatment with the Aβ40 peptide containing the Dutch mutation. In summary, our study shows that MFG-E8 is highly associated with CAA pathology and highlights MFG-E8 as a new CSF biomarker that could potentially be used to differentiate cerebrovascular Aβ pathology from parenchymal Aβ deposition.This work was funded by the Instituto de Salud Carlos III (ISCIII), (PI20/00465), co-financed by the European Regional Development Fund (FEDER). The Neurovascular Research Laboratory is part of the INVICTUS + network, ISCIII, Spain (RD16/0019/0021). P.M. held a predoctoral fellowship from the Vall d’Hebron Research Institute. MMV is supported by the BIONIC project (no. 733050822, which has been made possible by ZonMW as part of ‘Memorabel’, the research and innovation program for dementia, as part of the Dutch national ‘Deltaplan for Dementia’:the CAFÉ project (the National Institutes of Health, USA, grant number 5R01NS104147-02), and a grant from the Selfridges Group Foundation (NR170024). The BIONIC project is a consortium of Radboudumc, LUMC, ADX Neurosciences, and Rhode Island University

Circulating AQP4 Levels in Patients with Cerebral Amyloid Angiopathy-Associated Intracerebral Hemorrhage

Cerebral amyloid angiopathy (CAA) is a major cause of lobar intracerebral hemorrhage (ICH) in elderly patients. Growing evidence suggests a potential role of aquaporin 4 (AQP4) in amyloid-beta-associated diseases, including CAA pathology. Our aim was to investigate the circulating levels of AQP4 in a cohort of patients who had suffered a lobar ICH with a clinical diagnosis of CAA. AQP4 levels were analyzed in the serum of 60 CAA-related ICH patients and 19 non-stroke subjects by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The CAA-ICH cohort was divided according to the time point of the functional outcome evaluation: mid-term (12 +/- 18.6 months) and long-term (38.5 +/- 32.9 months) after the last ICH. Although no differences were found in AQP4 serum levels between cases and controls, lower levels were found in CAA patients presenting specific hemorrhagic features such as >= 2 lobar ICHs and >= 5 lobar microbleeds detected by magnetic resonance imaging (MRI). In addition, CAA-related ICH patients who presented a long-term good functional outcome had higher circulating AQP4 levels than subjects with a poor outcome or controls. Our data suggest that AQP4 could potentially predict a long-term functional outcome and may play a protective role after a lobar ICH