Inhibition of connexin hemichannels alleviates non-alcoholic steatohepatitis in mice

While gap junctions mediate intercellular communication and support liver homeostasis, connexin hemichannels are preferentially opened by pathological stimuli, including inflammation and oxidative stress. The latter are essential features of non-alcoholic steatohepatitis. In this study, it was investigated whether connexin32 and connexin43 hemichannels play a role in non-alcoholic steatohepatitis. Mice were fed a choline-deficient high-fat diet or normal diet for 8 weeks. Thereafter, TAT-Gap24 or TAT-Gap19, specific inhibitors of hemichannels composed of connexin32 and connexin43, respectively, were administered for 2 weeks. Subsequently, histopathological examination was carried out and various indicators of inflammation, liver damage and oxidative stress were tested. In addition, whole transcriptome microarray analysis of liver tissue was performed. Channel specificity of TAT-Gap24 and TAT-Gap19 was examined in vitro by fluorescence recovery after photobleaching analysis and measurement of extracellular release of adenosine triphosphate. TAT-Gap24 and TAT-Gap19 were shown to be hemichannel-specific in cultured primary hepatocytes. Diet-fed animals treated with TAT-Gap24 or TAT-Gap19 displayed decreased amounts of liver lipids and inflammatory markers, and augmented levels of superoxide dismutase, which was supported by the microarray results. These findings show the involvement of connexin32 and connexin43 hemichannels in non-alcoholic steatohepatitis and, simultaneously, suggest a role as potential drug targets in non-alcoholic steatohepatitis

Grupo de estudos de enfermagem em lesões cutâneas: perspectivas e vivências na graduação / Group of nursing studies in cuts lesions: perspectives and experiences in graduation

Introduction: It is essential for Nursing to value scientific production for the development of an evidence-based practice. The research group is configured as a favorable space for the construction, improvement and development of intellectual skills. Objective: To report the experience of nursing students in founding a study group in the area of injuries. Methodology: Descriptive study of the experience report type about the experience in a group of nursing studies on skin lesions. Results: It was the first group of studies in the Nursing course of the aforementioned institution of higher education, focusing on undergraduate students. Social media were used to publicize the study group, which expanded the scope of the scientific content generated, in addition to exchanging experience with other professionals. The contents discussed in the group meetings were previously thought by the founding members and guiding professors. Active methodologies made it possible for academics to discover new skills, in addition to making them the center of learning Conclusion: The involvement of the academic in the study group allows and facilitates the advancement of knowledge production, which values nursing and allows to go beyond the execution of the technique and allows the action of a reflective practice.

Proteomic Profiling of the Outer Membrane Fraction of the Obligate Intracellular Bacterial Pathogen Ehrlichia ruminantium

International audienceThe outer membrane proteins (OMPs) of Gram-negative bacteria play a crucial role in virulence and pathogenesis. Identification of these proteins represents an important goal for bacterial proteomics, because it aids in vaccine development. Here, we have developed such an approach for Ehrlichia ruminantium, the obligate intracellular bacterium that causes heartwater. A preliminary whole proteome analysis of elementary bodies, the extracellular infectious form of the bacterium, had been performed previously, but information is limited about OMPs in this organism and about their role in the protective immune response. Identification of OMPs is also essential for understanding Ehrlichia’s OM architecture, and how the bacterium interacts with the host cell environment. First, we developed an OMP extraction method using the ionic detergent sarkosyl, which enriched the OM fraction. Second, proteins were separated via one-dimensional electrophoresis, and digested peptides were analyzed via nano-liquid chromatographic separation coupled with mass spectrometry (LCMALDI-TOF/TOF). Of 46 unique proteins identified in the OM fraction, 18 (39%) were OMPs, including 8 proteins involved in cell structure and biogenesis, 4 in transport/virulence, 1 porin, and 5 proteins of unknown function. These experimental data were compared to the predicted subcellular localization of the entire E. ruminantium proteome, using three different algorithms. This work represents the most complete proteome characterization of the OM fraction in Ehrlichia spp. The study indicates that suitable subcellular fractionation experiments combined with straightforward computational analysis approaches are powerful for determining the predominant subcellular localization of the experimentally observed proteins.We identified proteins potentially involved in E. ruminantium athogenesis, which are good novel targets for candidate vaccines. Thus, combining bioinformatics and proteomics, we discovered new OMPs for E. ruminantium that are valuable data for those investigating new vaccines against this organism. In summary, we provide both pioneering data and novel insights into the pathogenesis of this obligate intracellular bacterium

Cytotoxic indole alkaloids from Pseudovibrio denitrificans BBCC725

International audienceIn this study, we investigated a culture supernatant of a Pseudovibrio denitrificans strain isolated from sea water. Five indole alkaloids were isolated from this culture. These include four known compounds, arundine (1), vibrindole A (2), 1,1,1-tris(indol-3-yl)methane (3), 7,7-bis(indol-3-yl)-p-cresol (4) and the new tetra(indol-3-yl)ethanone (5). Compound 5 showed interesting cytotoxic effect against L929 cells (EC50 = 7 µM) and A549 cells (EC50 = 8 µM)

O ensino de Histologia e Neuroanatomia por meio de jogos e materiais didáticos: experiência extensionista de uma educação não-formal

O ensino de Neuroanatomia e Neuro-Histologia pode ser facilitado pelo uso de jogos e materiais didáticos. No “Conhecendo o Cérebro 2019”, ação extensionista executada por alunos e docentes da instituição focando na divulgação científica, dois estandes apresentaram atividades lúdicas abordando Neuroanatomia e Neuro-Histologia. O objetivo desse trabalho é relatar as propostas e fornecer subsídios para sua réplica. A ação foi dividida em três etapas: explicação sobre o encéfalo, com mostra de peças anatômicas reais e modelo didático; visualização de corte histológico do encéfalo, por meio do microscópio óptico e modelo didático inclusivo; e jogos para reforçar as informações apreendidas. Como resultado, 335 estudantes da Educação Básica, universitários e pessoas do público geral visitaram o evento e interagiram com as propostas didáticas fornecidas nos estandes. Eles fizeram perguntas, manipularam os materiais didáticos e jogaram o Jogo da memória dos lobos cerebrais. Além dessa interação e contribuição para com a alfabetização científica da comunidade externa, ações que divulgam a ciência também são importantes para o crescimento intelectual e profissional dos alunos. Sugere-se que os materiais didáticos descritos no trabalho sejam utilizados como recurso pedagógico, a fim de facilitar o aprendizado de Neuroanatomia e Neuro-Histologia. Palavras-chave: Neurociências; Educação Básica; Ensino; Extensão Universitária   Teaching of Neurohistology and Neuroanatomy through games and didactics materials: extension experience of a non-formal education   Abstract: Teaching neuroanatomy and neurohistology can be facilitated by the use of games and teaching materials. In "Knowing the Brain 2019", an extension action carried out by students and teachers of the institution focusing on scientific dissemination,  two stands proposed recreational activities addressing neuroanatomy and neurohistology. The purpose of this work is to report the proposals and provide subsidies for their reply. The action was divided into three stages: explaining the brain with a sample of real anatomical pieces and a didactic model; visualization of a histological section of the brain through the optical microscope and an inclusive didactic model; and games to reinforce the information learned. As a result, 335 Basic Education students, university students, and the general public visited the event and interacted with the stands' didactic proposal. The visitors asked questions, manipulated the teaching materials, and played with the memory game of the lobes.  In addition to this interaction and contribution to the scientific literacy of the external community, actions that disseminate science are also important for students' intellectual and professional growth. It is suggested that the teaching materials described here can be used to facilitate neuroanatomy and neurohistology learning. Keywords: Neuroscience; Basic Education; Teaching; University Extensio

Atmospheric molecular blobs shape up circumstellar envelopes of AGB stars

International audienceDuring their thermally pulsing phase, asymptotic giant branch (AGB) stars eject material that forms extended dusty envelopes1. Visible polarimetric imaging found clumpy dust clouds within two stellar radii of several oxygen-rich stars2-6. Inhomogeneous molecular gas has also been observed in multiple emission lines within several stellar radii of different oxygen-rich stars, including W Hya and Mira7-10. At the stellar surface level, infrared images have shown intricate structures around the carbon semiregular variable R Scl and in the S-type star π1 Gru11,12. Infrared images have also shown clumpy dust structures within a few stellar radii of the prototypical carbon AGB star IRC+10°216 (refs. 13,14), and studies of molecular gas distribution beyond the dust formation zone have also shown complex circumstellar structures15. Because of the lack of sufficient spatial resolution, however, the distribution of molecular gas in the stellar atmosphere and the dust formation zone of AGB carbon stars is not known, nor is how it is subsequently expelled. Here we report observations with a resolution of one stellar radius of the recently formed dust and molecular gas in the atmosphere of IRC+10°216. Lines of HCN, SiS and SiC2 appear at different radii and in different clumps, which we interpret as large convective cells in the photosphere, as seen in Betelgeuse16. The convective cells coalesce with pulsation, causing anisotropies that, together with companions17,18, shape its circumstellar envelope

EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS RESISTENTE À METICILINA CAUSANDO INFECÇÕES CUTÂNEAS E MUSCULOESQUELÉTICAS DE INÍCIO COMUNITÁRIO: UM CENÁRIO ALARMANTE DE RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA

Objetivo: O Staphylococcus aureus resistente à meticilina associado à comunidade (CA-MRSA) é comumente associado a casos graves de infecções cutâneas e musculoesqueléticas de início comunitário (Co-SMSI). A análise epidemiológica molecular de CA-MRSA recuperados de amostras de pele e partes moles é escassa na América Latina, especialmente no Brasil. Este estudo teve como objetivo identificar características fenotípicas e genotípicas de isolados de MRSA recuperados de pacientes com Co-SMSI. Métodos: Estudo de coorte prospectiva de pacientes com Co-SMSI internados de março de 2022 a junho de 2023 em um hospital universitário brasileiro, com seguimento em até 2 meses após a alta. Os isolados MRSA foram identificados por método automatizado e MALDI-TOF-MS, e submetidos a análise genotípica por PCR do gene mecA e gene lukF e PCR multiplex para a tipagem de Sccmec, testados para resistência antimicrobiana através de difusão em disco, microdiluição em caldo e tiras E-test para avaliação da concentração inibitória mínima (CIM), de acordo com as recomendações do Comitê Brasileiro de Testes de Suscetibilidade Antimicrobiana (BrCAST). Resultados: No total 74 pacientes foram avaliados, em 56 (75,7%) destes, o Staphylococcus aureus foi identificado em amostras de tecidos ou sangue. A biopsia de pele identificou S. aureus em 53,6%. A análise fenotípica caracterizou 28 (50%) isolados em MRSA, sendo o gene mecA identificado em 19 (33,9%) destes isolados. Sccmec tipo II e do tipo IVa foi identificado em 5 isolados e 2 isolados, respectivamente. Sccmec foi não tipável em 12 isolados. O gene LukF foi identificado em 6 isolados. Sensibilidade a sulfametoxazol/trimetoprima foi 94,7%. Todos os isolados foram sensibilidade à linezolida e a vancomicina, sendo 63,2% com MIC = 1 e 36,8% com MIC = 2. A sensibilidade às quinolonas foi preocupantemente baixa, com resistência a ciprofloxacino em 52,6%, enquanto 47,4% apresentaram sensibilidade se exposição aumentada. Levofloxacina 57,9% foram resistentes e 42,1% sensíveis se exposição aumentada. A resistência à gentamicina e tetraciclina foi de 15,8% e 21,1%, respectivamente, e apenas um isolado foi resistente à rifampicina. A taxa de mortalidade 10,5%. Conclusões: Nossos resultados evidenciaram que isolados de MRSA causadores de Co-SMSI demonstram um padrão alarmante de resistência, incluindo antibióticos β-lactâmicos e quinolonas, que normalmente são prescritos como terapia empírica nas infecções cutâneas/musculoesqueléticas

CIMENTO ORTOPÉDICO COM CULTURAS POSITIVAS APÓS A RETIRADA CIRÚRGICA NÃO ALTERA AS TAXAS DE SUCESSO DE TRATAMENTO NA OSTEOMIELITE CRÔNICA CAVITÁRIA.

Introdução: O tratamento ideal da osteomielite ainda é um motivo importante de debate na literatura. Devido à dificuldade de erradicar o biofilme, um dos tratamentos preconizados envolve desbridamento e terapia local com a colocação de espaçadores de polimetilmetacrilato carregado de antibiótico (PMMA+ATB). Há ainda dúvidas se a permanência in situ prolongada do PMMA+ATB no paciente causaria eventos adversos. O objetivo deste estudo foi investigar se a permanência de culturas positivas de fluido de sonicação de PMMA+ATB in situ alteram o desfecho clínico de pacientes com osteomielite crônica. Metodologia: Realizamos estudo preliminar em uma série de casos de 13 pacientes que possuíam diagnóstico de osteomielite em um hospital universitário de São Paulo no período entre 2021 e 2022. Todos receberam tratamento antimicrobiano sistêmico e local com PMMA eluído de Vancomicina e/ou Gentamicina. As culturas de tecido infectado do paciente; o tempo de retenção do PMMA+ATB maior que 4 semanas; e as culturas do fluido de sonicação do PMMA+ATB foram comparados ao sucesso terapêutico destes pacientes avaliados após 6 meses e um ano do tratamento local. O desfecho clínico “sucesso terapêutico” foi definido como ausência de: necessidade de novas terapias antimicrobianas sistêmicas; necessidade de reabordagem cirúrgica; sinais clínicos de osteomielite ativa; e morte relacionada ao procedimento ortopédico. Resultados: As culturas do fluido de sonicação de PMMA+ATB foram positivas em 54% (7/13) dos pacientes. Destes, 100% tiveram sucesso terapêutico após 6 meses. Após um ano, foi possível avaliar o desfecho de 9 pacientes, e 44% (4/9) possuíam cultura de fluido de sonicação de PMMA+ATB positiva. Entretanto, o sucesso terapêutico foi atingido em 78% destes. O tempo de permanência in situ do PMMA+ATB variou de 1,5 a 37 semanas (média= 9 semanas; mediana= 5 semanas). Após 6 meses de seguimento, não houve diferença nas taxas de sucesso de tratamento nos pacientes que mantiveram PMMA+ATB in situ por mais (78%) ou menos (75%) de 4 semanas. Conclusão: A terapia com PMMA+ATB parece ser uma forma efetiva de tratamento de osteomielite crônica. A positividade das culturas em fluido de sonicação de PMMA+ATB após a retirada cirúrgica não parecem estar correlacionadas ao desfecho clínico de sucesso terapêutico após 6 meses e um ano