Uma carta de João Baptista Lavanha a respeito das agulhas de Luís da Fonseca Coutinho

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Desenvolvimento de bancada de ensaio para caracterização do comportamento dinâmico de sistemas de medição de deslocamento

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Metrologia Científica e Industrial, Florianópolis. 2010A medição do deslocamento do pistão de compressores herméti- cos, por exemplo, na caracterização do diagrama PV, proporciona não somente dados concretos para a etapa de pesquisa e desenvolvimento, como também oferece informações importantes para o controle da qua- lidade desses produtos. Atualmente há uma forte tendência à miniaturi- zação de compressores. Nesse caso, a redução dos volumes das câma- ras de compressão é compensada pelo aumento da frequência de ope- ração. Estudo realizado junto à empresa líder mundial na fabricação de compressores evidenciou que os métodos de medição de deslocamento do pistão para compressores que operam a 60 Hz atendem as neces- sidades. Não há segurança, no entanto, para frequências de operação acima de 100 Hz. Para que esse comportamento seja melhor com- preendido, é necessária a determinação do comportamento dinâmico do transdutor de deslocamento atualmente utilizado, especialmente do atraso de fase. Para determinação do atraso, compara-se o sinal de des- locamento do transdutor atualmente utilizado com o de um transdutor de referência cujo comportamento é conhecido. Essa comparação deve ser feita em diferentes frequências, estabelecendo assim uma tendên- cia para o comportamento do atraso. O objetivo deste trabalho é a construção de uma bancada de testes capaz de simular o deslocamento do pistão de um compressor que opera a frequências elevadas, com possibilidade de controle e seleção da frequência de operação. São mostradas as etapas de desenvolvimento do sistema, com especifica- ção e seleção dos componentes utilizados. Além disso, é proposto um método de cálculo do atraso baseado no cruzamento dos sinais por um valor de referência. Como resultado, tem-se uma bancada funcional e automatizada. Ademais, a validação do método proposto permitiu a caracterização do atraso do transdutor atualmente empregado

Functional analysis of the Burkholderia cepacia bceN gene encoding a GDP-D-mannose dehydratase involved in Cepacian biosynthesis

Tese de mestrado. Biologia (Microbiologia Aplicada). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2011A diversidade e multifuncionalidade dos exopolissacáridos (EPSs) produzidos pelos organismos procariotas são consideráveis, supondo-se que estes têm um papel fundamental na protecção dos microrganismos que os produzem. Mais de 70% das estirpes pertencentes ao complexo Burkholderia cepacia (Bcc), consideradas importantes patogénios oportunistas em doentes com fibrose quística (FQ) ou com doença granulomatosa crónica, são produtoras do EPS Cepaciano. O Bcc é um grupo de bactérias da subdivisão _-proteobacteria, que são genotipicamente distintas, mas fenotipicamente semelhantes, estando estas divididas em pelo menos 17 espécies diferentes. Recentemente, vários estudos têm evidenciado o papel do Cepaciano como um factor de virulência que contribui para a patogenicidade global dos membros do Bcc e portanto para o seu sucesso como patogénios. Observou-se que a produção de EPS por um isolado clínico mucóide de B. cenocepacia interfere com a fagocitose das bactérias pelos neutrófilos humanos e facilita a persistência bacteriana nos ratinhos BALB/c, usados como modelo de infecção. Por outro lado, usando-se os ratinhos gp91phox-/- como modelo de infecção, verificou-se que os mutantes relativamente à produção de EPS eram menos virulentos ou completamente avirulentos quando comparados com a estirpe selvagem produtora de EPS. Estes resultados sugerem que a produção de EPS por bactérias do Bcc pode contribuir para a persistência das infecções pulmonares. Foi também descrito que o Cepaciano produzido por um isolado clínico de B. cenocepacia interfere com a função dos neutrófilos humanos in vitro, inibe a quimiotaxia e a produção de espécies reactivas de oxigénio, que são componentes essenciais da resposta imune inata do hospedeiro. Vários estudos têm demonstrado a capacidade das bactérias do Bcc para formarem biofilmes sozinhas ou em associação com outras bactérias. Estudos realizados com mutantes defectivos na produção de EPS demonstraram que apesar de não ser requerido para a formação inicial dos biofilmes, o EPS é importante para a formação de biofilmes espessos e maduros. O Cepaciano é composto por uma unidade repetitiva heptassacarídica ramificada e acetilada apresentando na sua constituição D-ramnose, D-manose, D-glucose, D-galactose e ácido Dglucurónico, numa proporção de 1:1:1:3:1. Curiosamente este polímero apresenta duas características incomuns, a presença de um D-isómero da ramnose que é mais comum no antigénio O dos lipopolissacáridos e a presença de um resíduo de ácido glucorónico tri-substituído, que confere ao polímero uma estrutura secundária rígida e alongada. Só após ter sido proposta a via biossintética dos precursores dos nucleótidos de açúcar do Cepaciano, é que se tentaram identificar os genes codificantes das enzimas intervenientes nesta via, estando estes localizados nos agrupamentos de genes bce-I e bce-II do cromossoma 2 do Bcc. O agrupamento bce-I foi identificado após mutagénese aleatória através da inserção de plasposões e seleccionando os mutantes defectivos na produção de EPS. O agrupamento bce-II foi identificado posteriormente recorrendo a análises bioinformáticas e a genómica comparativa. Ainda que tenham sido identificados cinco dos genes que codificam proteínas provavelmente envolvidas na síntese dos precursores dos nucleótidos de açúcar (BceA, BceC, BceM, BceN e BceT), apenas as proteínas BceA e BceC foram funcionalmente caracterizadas. A via biossintética da D ramnose não se encontra ainda caracterizada nas bactérias do Bcc. No entanto, análises bioinformáticas sugerem que o gene bceN, que se encontra no agrupamento genético bce-II, codifica para uma proteína com actividade de GDP-D-manose 4,6-desidratase (GMD), envolvida na síntese do precursor GDP-D-ramnose a partir de GDP-D-manose. Desta forma, as actividades descritas no presente trabalho visam a análise funcional do gene bceN e o estudo do seu papel na síntese do EPS Cepaciano, bem como o seu envolvimento na formação de biofilmes. As sequências aminoacídicas das proteínas BceN de B. cepacia IST408 e B. cenocepacia J2315 foram analisadas bioinformaticamente, verificando-se a presença de motivos conservados da família das proteínas Desidrogenases/reductases de cadeia curta (SDR), nomeadamente o motivo de Wierenga, importante para a ligação do co-factor; a tríade catalítica, essencial para a catálise; e o domínio de Rossman, igualmente associado à ligação do co-factor à região N-terminal da proteína. Os motivos e os resíduos típicos das enzimas com actividade GMD, nomeadamente os resíduos conservados glutamato (posição 133) e arginina (posição 190), e a região do “RR loop”, também estão presentes na proteína BceN. Com vista a confirmar os resultados bioinformáticos obtidos o gene bceN foi clonado num vector de expressão, e a proteína BceN foi sobrexpressa com cauda de histidinas e purificada por cromatografia de afinidade. Através da análise dos produtos obtidos por espectroscopia de ressonância magnética nuclear (NMR), demonstrou-se in vitro que a proteína BceN catalisa a conversão de GDP-D-manose em GDP-4-ceto-6-desoxi-D-manose, tendo portanto actividade GDP-Dmanose 4,6-desidratase. Ainda que os resultados obtidos sugerissem que esta proteína apresenta um modelo cinético de inibição pelo substrato, os ensaios realizados não possibilitaram a determinação dos parâmetros cinéticos da proteína BceN. No entanto foi possível constatar que a actividade GMD desta proteína é bastante dependente da presença de iões bivalentes Mg2+, que os co-factores oxidados NAD e NADP não são essenciais para a actividade da mesma e que esta é inibida pelo substrato GDP-D-manose. Ainda que algumas proteínas com actividade GMD tenham a capacidade de catalisar a reacção de desidratação e redução que leva à formação de GDP-Dramnose a partir de GDP-D-manose, os ensaios realizados sugerem que a proteína BceN não tem dupla actividade. Um outro objectivo deste trabalho consistiu no estudo do papel da proteína BceN na produção do EPS Cepaciano na estirpe clínica mucóide B. cepacia IST408, construindo-se para tal um mutante de inserção do gene bceN. Uma vez que este gene está envolvido na síntese da ramnose, um dos açúcares que constituem o Cepaciano, seria de esperar que a capacidade de produzir EPS fosse afectada na estirpe mutante. Todavia, a capacidade de produzir EPS é mantida pela estirpe mutada, sendo a quantidade de EPS produzida apenas ligeiramente inferior à da estirpe selvagem. Ainda que não se tenha determinado a composição do EPS produzido pelo mutante relativamente à estirpe selvagem, os resultados obtidos sugerem que a proteína BceN não é essencial para a síntese do EPS Cepaciano. A capacidade da estirpe mutante para produzir EPS sugere assim que outros genes funcionais homólogos ao gene bceN possam existir no genoma de B. cepacia IST408. A pesquisa destes genes nas sequências genómicas disponíveis de 14 estirpes do género Burkholderia revelou a presença de um, dois ou três genes que possivelmente codificam proteínas com actividade GMD. Esta constatação sugere assim que a mutação do gene bceN em B. cepacia IST408 pode ser compensada por homólogos funcionais deste gene. Uma vez que a produção de EPS está envolvida na formação de biofilmes e esta por sua vez está relacionada com a motilidade por swarming, estes dois últimos comportamentos multicelulares foram comparados entre a estirpe selvagem e o mutante no gene bceN de B. cepacia IST408. A quantidade de biofilmes produzida pelo mutante foi inferior à produzida pela estirpe selvagem, o que é consistente com a ligeira redução da capacidade do mutante para produzir o Cepaciano, e com o requerimento deste para a formação de biofilmes de dimensões máximas. Por outro lado a mutação do gene bceN também afectou a motilidade por swarming, apresentando o mutante uma diminuição desta capacidade. Com base nos estudos realizados e com vista a melhorar a percepção do papel da actividade GDP-D-manose 4,6-desidratase na virulência das bactérias do Bcc seria necessária a construção de uma estirpe mutante em que todos os genes homólogos ao gene bceN estivessem inactivados.Burkholderia cepacia complex (Bcc) bacteria have gained notoriety as pathogens in cystic fibrosis (CF) because they are easily transmitted among CF individuals, difficult to identify and almost impossible to eradicate. Isolates of the Bcc may produce large amounts of the exopolysaccharide (EPS) Cepacian, a virulence factor contributing to the overall pathogenicity of Bcc members and thus to their success as pathogens. The genes required for Cepacian biosynthesis by Bcc strains are located in clusters bce-I and bce-II of chromosome 2. One of the clustered genes, bceN, encodes a 39 kDa protein with GDP-D-mannose 4,6- dehydratase (GMD) activity. This dehydratase activity of BceN protein is strongly dependent on the presence of Mg2+ ions, is unaffected by the addition of exogenous NAD(P) and is susceptible to inhibition by the substrate GDP-D-mannose. This protein appears to have the substrate inhibition kinetic model, however additional assays are required to confirm this hypothesis and to determine kinetic parameters. The disruption of the B. cepacia IST408 bceN gene resulted in a slightly reduced EPS production yield compared to the wild type strain. The search for putative bceN homologues revealed the presence of one, two or three bceN orthologues in the Burkholderia genomes available. This suggests that in B. cepacia IST408 putative bceN functional homologues may compensate the bceN mutation. However, the size of the biofilm produced in vitro by the bceN mutant strain is smaller than the size of the biofilm formed by the parental strain and the mutant showed a decreased swarming ability

Bioelectricity generation using long-term operated biocathode: RFLP based microbial diversity analysis

FRH/BPD/33864/2009 UIDB/50006/2020 UIDP/50006/2020In the present work, power generation and substrate removal efficiencies of long-term operated microbial fuel cells, containing abiotic cathodes and biocathodes, were evaluated for 220 days. Among the two microbial fuel cell (MFC) types, the one containing biocathode showed higher power density (54 mW/m2), current density (122 mA/m2) coulombic efficiency (33%), and substrate removal efficiency (94%) than the abiotic cathode containing MFC. Voltammetric analysis also witnessed higher and sustainable electron discharge for the MFC with biocathode, when compared with the abiotic cathode MFC. Over the tested period, both MFC have shown a cell voltage drop, after 150 and 165, days, for the MFC with biocathode and abiotic cathodes, respectively. Polymerase chain reaction (PCR) based restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis identified 281 clones. Bacteria belonging to Acinetobacter, Acidovorax, Pseudomonas and Burkholderia were observed in the abiotic cathode MFC. Bacteria belonging to Geobacter, Cupriavidus and Acidobacteria were observed in the biocathode MFC. Almost similar types of archaea (Methanosarcinales, Methanolinea, Nitrososphaera and Methanomicrobiales) were observed in both MFCs.publishersversionpublishe

Posicionamento em Imagens Digitais do Sistema Goes

Este trabalho mostra como se pode transformar coordenadas geodésicas (latitude, longitude), de pontos previamente escolhidos, em coordenadas retangulares (linha, coluna) de uma imagem digital do satélite meteorológico GOES-7 por meio de transformações polinominal ou projetiva. O objetivo principal dessa transformação é permitir a localização de sítios potenciais para investigar o grau de nebulosidade existente numa região com vistas à instalação de observatórios astronômicos. É investigada a eficiência da transformação polinominal e projetiva para esse tipo de imagem as quais, parecem resolver o problema com acurácia

Orçamento Participativo: estudo comparativo sobre duas experiências no interior da Bahia

Este artigo apresenta a análise das fases iniciais de implantação das experiências de Orçamento Participativo nas cidades baianas de Lauro de Freitas e Vitória da Conquista, tendo buscado apontar, por meio da comparação das variáveis analíticas utilizadas pela literatura, as convergências e distinções entre os dois projetos, situando-as no debate sobre a deliberação participativa. Para isto, indicadores usados por autores que estudaram diversas experiências de OP foram utilizados, com destaque para a experiência de Porto Alegre e para os trabalhos de Leonardo Avritzer. A metodologia utilizada foi o estudo de casos múltiplos, em pesquisa exploratória e descritiva. A análise demonstrou a influência das variáveis políticas nas experiências das cidades e apontou possibilidades de estudos neste campo

Analysis of the chemical composition of the essential oils extracted from Lippia lacunosa Mart. & Schauer and Lippia rotundifolia Cham. (Verbenaceae) by gas chromatography and gas chromatography-mass spectrometry

Lippia lacunosa and L. rotundifolia (Verbenaceae) are two Brazilian species of complex taxonomic delimitation. The composition of the essential oils from leaves and flowers of these plants was investigated by gas chromatography (GC) and gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS) analysis. The major components of the essential oils of flowers and leaves of L. lacunosa were: myrcene (14.7% and 11.9%), myrcenone (45.2% and 64.2%), Z-ocimenone (5.7% and 5.2%), and E-ocimenone (14.7% and 4.1%), respectively; whereas in L. rotundifolia (flowers and leaves) were a-pinene (8.7% and 1.8%), myrcene (5.1% and 3.6%), limonene (26.0% and 7.9 %), cis-pinocamphone (4.5% and 3.1%) and myrtenal (22.3% and 16.7%), respectively. The essential oils from L. lacunosa exhibited a strong and pleasant mango aroma, which was related to the presence of myrcene and myrcenone. The marked differences in the chemical composition of their essential oils may represent a powerful tool for the botanical classification.Lippia lacunosa e L. rotundifolia são duas espécies brasileiras que formam um complexo de difícil delimitação taxonômica. A composição química do óleo essencial das folhas e flores dessas plantas foi investigada por cromatografia com fase gasosa (CG) e por cromatografia com fase gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). Principais constituintes dos óleos essenciais de L. lacunosa (flores e folhas): mirceno (14,7% e 11,9%), mircenona (45,2% e 64,2%), Z-ocimenona (5,7% e 5,2%), e E-ocimenona (14,7% e 4,1%), respectivamente; L. rotundifolia (flores e folhas): a-pineno (8,7% e 1,8%), mirceno (5,1% e 3,6%), limoneno (26,0% e 7,9 %), cis-pinocanfona (4,5% e 3,1%) e mirtenal (22,3% e 16,7%), respectivamente. Os óleos essenciais de L. lacunosa apresentaram um forte e agradável aroma de manga, que foi relacionado à presença de mirceno e mircenona. Diferenças fundamentais na composição química de seus óleos essenciais podem representar uma poderosa ferramenta na classificação botânica das espécies

Pubertal maturation and health risk behaviors in adolescents: a systematic review

Objective: The objective of this academic work is to demonstrate evidences available in literature about the association among the pubertal maturation and health risk behavior in adolescents. Methods: It was used the database from MEDLINE/Pubmed, Scopus, Lilacs and Web of Science. The terms used in the research, with its variations, were “puberty”, “maturation”, “maturity”, “risk behaviors”, “risk factors”, “adolescent” and “student”. Results: Out of 838 manuscripts found in the databases, after the sorting and applied the eligibility criteria, remained in this systematic review 13 articles. Early maturation was associated significantly with the use of alcohol, cigarettes and illegal drugs, early sexual initiation, sedentary behaviors and involvement in fights, where girls showed higher prevalence. Conclusions: Henceforth, the results from the current study indicates that the early maturation is associated with health risk behaviors in adolescents, especially with the use of alcohol and cigarettes.&nbsp

Câmara inalatória para ensaios biológicos in vivo

DepositadaCâmara inalatória para ensaios biológicos in vivo, particularmente de uma câmara que visa viabilizar estudos farmacológicos e toxicológicos in vivo de substâncias vaporizadas e/ou nebulizadas. Para tal, não se exige o controle de pressão, pelo contrário, a câmara objeto da invenção apresenta orifícios para saída do ar interiorizado na mesma, possibilitando renovação desse ar sem que haja alteração de pressão em seu interior. De maneira mais específica, a presente câmara objetiva avaliar a atividade terapêutica e toxicidade de formulações para administração pela via pulmonar, em modelo in vivo para roedores. Além disso, também poderá ser empregada para avaliar os malefícios causados ao organismo por vapores, gases e fumaças. A invenção contempla uma câmara de inalação com pelo menos cinco juntas esmerilhadas 'fêmeas' receptoras dos tubos de vidro de acondicionamento dos animais, referidos tubos de vidro recebendo, cada qual, uma tampa, sendo que, na extremidade da câmara inalatória propriamente dita, se acopla a 'cabeça', enquanto que, esta câmara inalatória propriamente dita possui uma área de liberação do ar próximo ao fundo da mesma; a referida 'cabeça' se acopla a uma mangueira de silicone e esta a uma junção de vidro cilíndrica que se acopla, na extremidade oposta à mangueira de silicone, ao copo de nebulização e este ao aparelho de nebulização