The involvement of CDH1 in cancer angiogenesis

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em BiotecnologiaCancer is one of the leading causes of death worldwide. Biological hallmarks such as induced and sustained angiogenesis are implicated in tumour progression, as well as invasion and metastasis which are the major causes of cancer-related mortality. E-Cadherin impairment on the cell membrane is intimately related with invasion and metastasis. Also, increased levels of vascular endothelial growth factor (VEGF), an angiogenic marker, and its receptor on the plasma membrane can be implicated in tumour progression. This work was focused on how the inactivation of E-Cadherin, a molecule associated to an invasive phenotype can be related with angiogenesis, probably through VEGF-A expression. Two different cell lines without expression of E-Cadherin and stably transduced to express wild-type (WT) E-Cadherin were used to carry out this study: AGS Par/WT (from stomach) and MDA-435 Mock/WT (from breast). Immunohistochemical staining was performed to determine the cellular localization and western blot analysis was performed to assess the expression levels of E-Cadherin. VEGFA mRNA levels were assessed by quantitative Real-time PCR. Additionally, we determined the levels phosphorylated (phospho) ERK1/2, as well as the expression levels of total ERK1/2. To study the angiogenic role of E-cadherin the chick embryo Chorioallantoic Membrane (CAM) assay was used. We characterise in vivo the different cell lines concerning both angiogenic and tumorigenic responses dependent on E-Cadherin. Only cell lines stably expressing WT human E-Cadherin showed levels of expression of this protein at the cell membrane regardless of their tissue of origin. In vitro, AGS and MDA-435 cells expressing WT E-Cadherin revealed an increased expression of VEGFA in comparison to the control although not statically significant. In addition, both phospho-ERK1/2 and total ERK1/2 presented similar levels of expression regardless of the tissue of origin and E-Cadherin expression. Both angiogenic and tumorigenic responses in AGS WT was significantly increased in comparison to the control. The MDA-435 WT cells revealed increased tumorigenic response in comparison to the control. Overall, these results suggest that E-Cadherin expression is important for micro-tumour formation as well as for neovascularisation but this effect is dependent on the in vivo context

The impact of renewable energy sources on economic growth and CO2 emissions:Evidence from Iberian Peninsula

During the last years, due to a constant increase of the concern about environmental questions and an accompanying development of related policies, there has been an increase in energy production from renewable sources. In this line of thought, the aim of this dissertation is to examine the relationship between renewable energy production, economic growth and CO2 emissions in the Iberian Peninsula, using a Structural Vector Autoregressive model. The innovative contribution of this dissertation is the incorporation of oil prices, as an exogenous variable, since the increase in the price of this raw material in the international market have had very negative impacts on the economies of both countries. This study covers the sample period from 1960 to 2009 and it approaches two distinct analyses: one for aggregate energy production (TRES), considering the total of renewable energy sources; another for disaggregated energy sources, considering hydroelectricity separately from the other renewable sources, due to the high weight of the first in energy production. For the two cases, both the structural factorization results and the impulse-response functions show that, contrary to what was expected, a shock on energy does not have a significant impact on GDP. Total RES and hydro only affect negatively CO2 emissions during the first year. This situation led to conclude that hydroelectric is the main source that contributes to the total RES. Another important result is the positive impact of CO2 emissions to a shock on GDP that occurs at least most during six years. The variance decomposition shows, for both countries, a large amount of uncertainty in the forecast of the growth rate of CO2 emissions, mainly due to a shock on TRES (30% in Portugal and 20% in Spain) for aggregate analysis and due to a shock on hydro (28% in Portugal and 20% in Spain) for disaggregate analysis and almost no uncertainty in predicting the growth rate of TRES and GDP

An approach on disrupting sexism in the work place: mechanisms to break the glass ceiling

Women are a major part of today’s working force but still are not a representative part of leadership roles. Executive boards worldwide and top management positions are predominantly male and despite advances in terms of government policies, education and corporate measures to include women in senior positions, there is still a small percentage of women in leadership roles. This paper analyzes the perceived challenges women face

Functional analysis of lysB gene from the lysis module of mycobacteriophage Ms6

Tese de doutoramento, Farmácia (Microbiologia), Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2012Most described bacteriophages end their replication cycle by lysing their hosts. This characteristic has attracted researchers all over the world aiming to develop new alternatives to fight bacterial infectious diseases. All double stranded DNA phages achieve lysis by synthesizing two essential proteins: an endolysin, a protein with peptidoglycan hydrolase activity, and a holin, a small membrane protein that disrupts the cytoplasmic membrane and allows the access of the endolysin to its target or its activation. Holins have been described as essential to determine the optimum timing of lysis, so that the phage release is productive for phage survival. In addition to the endolysin and holin genes, new genes have been identified in the lysis cassette of bacteriophages that infect Gram-negative bacteria. These genes, exemplified by the λ Rz and Rz1 encoded proteins that compromise the stability of the outer membrane, eliminating the last barrier to the release of the progeny virions. No homologues of Rz/Rz1 genes have been identified in mycobacteriophage genomes. The lytic cassette of mycobacteriophage Ms6, a phage that infects Mycobacterium smegmatis cells, comprises, in addition to an endolysin and a holin, three accessory lysis proteins encoded by genes gp1, gp3 (lysB) and gp5. Despite being classified as Gram-positive bacteria, mycobacteria have a complex cell wall. This cell wall consists of peptidoglycan covalently linked to arabinogalactan, which is in turn esterified to a variety of long chain (C60–C90), α-branched, β-hydroxy fatty acids (mycolic acids). The present work describes the characterization of the protein encoded by the mycobacteriophage Ms6 gene lysB and its role in mycobacteria lysis. A BLAST search within the sequences of protein databases revealed similarities to other putative proteins encoded by mycobacteriophages. After His6-LysB protein production in E. coli, it was possible to test its activity in several lipolytic enzymes substrates. Bioinformatics analysis revealed the presence of a conserved motif (GYSQG), characteristic of enzymes with lipolytic activity. The results show that LysB is indeed a lipolytic enzyme showing higher affinity towards substrates of longer chain length (C16 and C18). It is demonstrated that the natural substrates of LysB are mycobacterial lipids containing mycolic acids and that that its main target is mycolyl-arabinogalactan peptidoglycan complex, as it was shown to release mycolic acids from mAGP. Additionally, LysB is also able to hydrolyze the trehalose 6,6’-dimycolate (TDM) from both fast and slow growing mycobacteria species. Construction of a mycobacteriophage Ms6 ΔlysB demonstrated that the gene product of lysB is nonessential for phage viability, but is involved in the lysis mechanism. Given the complexity of the mycobacterial cell envelope, it is easy to understand why mycobacteriophages have evolved new lysis strategies by acquiring them through their evolution.A maioria dos bacteriófagos descritos na literatura são capazes de terminar um ciclo de replicação lisando as suas células hospedeiras. Esta característica tem atraído os investigadores no sentido de explorar esta propriedade para desenvolver novas alternativas para combater doenças infecciosas de origem bacteriana. Todos os bacteríofagos de cadeia dupla de DNA atingem a lise através da síntese de 2 proteínas essenciais: uma endolisina, uma proteína com actividade de hidrólise, e uma holina. Proteína de pequenas dimensões que destrói a membrana citoplasmática permitindo que a endolisina aceda ao seu substrato ou seja activada. As holinas estão descritas como sendo essenciais para determinar o tempo óptimo da lise, de modo a que a libertação de fagos seja produtiva para a sobrevivência do fago. Para além destas duas proteínas essenciais, têm sido identificados novos genes nas cassetes de lise de bacteriófagos que infectam bactérias Gram-negativa. Estes genes, exemplificados pelas proteínas Rz e Rz1 codificadas pelo bacteriófago λ, comprometem a estabilidade das proteínas da membrana externa, eliminando a última barreira para a libertação dos viriões produzidos. Até à data nunca foram identificados homólogos destes genes em micobacteriófagos. A cassete lítica do micobacteriófago Ms6, fago que infecta Mycobacterium smegmatis, para além de codificar as duas proteínas essenciais, compreende três proteínas acessórias à lise codificadas pelos genes gp1, gp3 (lysB) e gp5, restritos aos micobacterófagos. Apesar de serem classificadas com bactérias Gram-positivas, as micobactérias apresentam uma parede celular complexa. Esta parede celular consiste num peptidoglicano ligado covalentemente ao arabinogalactano, que por sua vez se encontra esterificado a uma variedade de ácidos gordos de cadeia longa (ácidos micólicos). - A presente dissertação caracteriza a proteína codificada pelo gene lysB do micobacteriófago Ms6 e o seu papel durante a lise. A análise bioinformática revelou a presença de um motivo conservado (GYSQG), característico de enzimas com actividade lipolítica. Usando a sequência de aminoácidos de LysB, foi realizada uma procura de similaridades nas bases de dados, através do programa BLAST, que identificou um grande número de proteínas similares. Após produção de uma proteína recombinante, His6-LysB, em E. coli foi possível testar a sua actividade em diferentes substratos de enzimas lipolíticas. Os resultados demonstraram que LysB apresenta uma maior afinidade para substratos de cadeia longa (C16 e C18). Foi possível demonstrar que o alvo de Ms6 LysB é a membrana externa de Mycobacterium smegamtis, ao clivar a ligação ester que liga os ácidos micólicos ao arabinogalactano no complexo micolil-arabinogalactano peptidoglicano. No entanto este substracto não é único uma vez que LysB também é capaz de hidrolisar o 6,6’-trealose dimicolato (TDM) de diferentes espécies de micobactérias. A construção de um micobacteriófago delecionado no gene lysB, demonstrou que o produto deste gene não é essencial - xv - para a viabilidade do fago, mas participa no mecanismo de lise. Tendo em conta a complexidade do envelope das micobactérias, é fácil entender a necessidade dos micobacteriófagos adquirirem, durante a sua evolução, genes que lhes conferem uma vantagem evolutiva sobre aqueles que não os adquiriram de modo a conseguirem atingir uma lise mais rápida e eficiente.Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT, SFRH/BD/29167/2006, PTDC/SAL-FCF/73017/2006

Participação ativa: Um olhar atento sobre o caminho de aprendizagem da criança

Relatório da Prática de Ensino Supervisionada apresentado no ISPA – Instituto Universitário para obtenção do grau de Mestre em Educação Pré-EscolarO presente relatório apresenta um estudo sobre a participação ativa das crianças em idade PréEscolar. O estudo foi desenvolvido numa sala de Jardim de Infância com um grupo de vinte e quatro crianças com idades compreendidas entre os 3 e 6 anos. Através da realização deste estudo, procurou-se conhecer as conceções da educadora cooperante e respetivo grupo, alusivas à prática de participação ativa, tais como os obstáculos e estratégias na sua mobilização. Assim, o objetivo foi compreender a importância da participação das crianças no jardim de infância, como é concebida, concretizada e vivenciada e que fatores a podem condicionar. O presente estudo é de cariz qualitativo e recorreu-se a técnicas e instrumentos como a observação, fundamentada através das notas de campo, a análise documental, as entrevistas realizadas às educadoras cooperantes e uma entrevista informal realizada às crianças que pertenciam à sala onde o estudo foi desenvolvido. Os resultados revelaram que as educadoras valorizavam a participação ativa das crianças como um elemento indispensável nas suas práticas através do respeito pelas necessidades e singularidades das crianças, envolvendo-as nas rotinas e nas decisões do seu processo de aprendizagem; a utilização de instrumentos de pilotagem; a partilha de responsabilidade entre adultos-crianças e entre as próprias crianças. Importa ressalvar a necessidade de as crianças terem consciência do seu papel e se sentirem apoiadas e independentes. Assim, o papel do adulto é determinante através da sua observação atenta, podendo oferecer suporte e incentivar a participação das crianças.ABSTRACT: This report presents a study regarding the active participation of preschool children. The study was conducted in a kindergarten room with a group of twenty-four children aged between 3 and 6 years old. Through this study we aimed to understand the kindergarten teacher’s and children’s conceptions, referring to the practice of active participation, as well as the obstacles and strategies in its implementation. Thus, the aim was to understand the importance of child participation in kindergarten, how it is conceived, implemented and experienced and what factors may condition it. This is a qualitative study using techniques and instruments such as observation, field notes, document analysis, interview with the kindergarten teachers, and an informal interview with the children from the room where the study was carried out. The results revealed that the kindergarten teachers valued the active participation of children and considered it as an indispensable element in their practices through respect for the children's needs and singularities, involving them in routines and decisions in their learning process; the use of piloting tools; the sharing of responsibility between adult-children and among the children themselves. It is important to emphasize the need for children to be aware of their role and to feel supported and independent. Thus, the role of the adult is determinant, since through his/her attentive observation, being able to support and encourage the children's participation

A comercialização no desporto: gestão orientada para a promoção do clube: Relatório de estágio profissionalizante na Área Comercial e Relações Públicas do Boavista Futebol Clube

O presente relatório diz respeito ao Estágio Profissionalizante elaborado na Área Comercial e Relações Públicas do Boavista Futebol Clube, mais concretamente no Departamento Comercial.O principal objetivo deste estágio passou pela aquisição e desenvolvimento de competências fundamentais para o desempenho do papel de gestor desportivo, bem como, a compreensão e consciencialização da realidade de uma organização de futebol com as dimensões do Boavista Futebol Clube, clube de primeira divisão.No trabalho prático, as atividades desenvolvidas no estágio iam de encontro aos objetivos do departamento que, em suma, se baseavam na promoção do Boavista FC, através do lançamento de produtos/serviços e campanhas, aumentando a visibilidade e confiança no Clube, com vista o aumento das vendas e satisfação das expetativas do cliente.As atividades e tarefas realizadas foram enquadradas em duas áreas essenciais, a área administrativa e a área de promoção, sendo a última composta pelo campo da comunicação e o campo dos produtos/serviços.O marketing esteve presente, nas nas suas diversas vertentes, nas ações de planeamento e desenvolvimento de projetos do departamento. Neste campo, a comunicação revelou-se fundamental para a superação dos desafios que foram surgindo. Por outro lado, fatores como a escassez de recursos humanos e financeiros oprimiram o desenvolvimento do departamento. Apesar disso, os objetivos propostos foram cumpridos, esperando um futuro de mudanças.Este relatório foi estruturado em 5 partes, correspondentes a 5 capítulos. No primeiro capítulo é efetuada um enquadramento da prática profissional. No segundo abordam-se, no enquadramento conceptual, as temáticas relevantes para o trabalho prático. No terceiro diz respeito às atividades desenvolvidas no estágio profissionalizante. Já no quarto capítulo elabora-se uma reflexão crítica do estágio. O quinto capítulo diz respeito às referências bibliográficas.The following report details the professional internship held in the Commercial Area and Public Relations of Boavista Futebol Clube, more specifically, in the Commercial Department.The primary purpose of the internship was the acquisition and development of fundamental skills in performing as a sports manager, as well as for the knowledge and awareness of the circumstances that a football organization sizing such as Boavista Futebol Clube, first division team, entails.With respect to the practical duties, all the internship activities met the department's agenda that overall was based on Boavista FC promotion, through the launching of products/services and campaigns, boosting the club exposure and reliance, thus leading to an increase in sales and client satisfaction.The performed activities and tasks were framed into two key areas: administrative and marketing, with the latter being comprised by the communications and products/services field.Marketing was present, in several aspects, in the planning and development process of the department's projects. In this department, communication proved to be key to overcoming the challenges that have emerged. On the other hand, aspects such as the shortage of human and financial resources hindered the development of the department. Nevertheless, the proposed goals have been fulfilled, awaiting a future of changes.The report is structured as follows: 5 parts pertaining to 5 chapters. In the first chapter, a professional practice context is done. The second addresses all the relevant topics for the practical work, via a conceptual framework. The third chapter discusses the activities developed in the internship. In the forth, a critical analysis of the internship is considered. And lastly, the fifth chapter refers to the bibliographic references

Uma viagem por várias terapias : o uso de diferentes abordagens terapêuticas na perspetiva de uma cliente

Dissertação de Mestrado apresentada no ISPA - Instituto Universitário para obtenção do grau de Mestre na especialidade de Psicologia ClínicaA investigação em psicoterapia, recentemente, tem-se debruçado sobre a Aliança Terapêutica (AT), as rupturas e a monitorização do processo terapêutico, tentado compreender as características que são susceptíveis de influenciar o progresso da terapia. A AT, em particular tem sido um dos focos principais da investigação em psicoterapia. Contudo, existem, poucos estudos com pacientes que têm um histórico de drop outs ou de várias mudanças de terapias e terapeutas. O presente trabalho procurou colmatar esta lacuna, e teve como objetivo compreender a experiência de uma pessoa que recorre a diversas terapias e terapeutas, as variáveis que estão associadas a esta procura, bem como os aspetos positivos e negativos que tiveram maior relevância ao longo do seu processo terapêutico. Realizou-se uma entrevista semi-aberta e foi utilizada uma metodologia qualitativa, nomeadamente uma análise de conteúdo, onde foram consideradas três categorias principais: (1) “Características e contexto pessoal (Visão do mundo)”, (2) “Razões que levaram ao processo terapêutico/objetivos” e a (3) “Experiência do percurso terapêutico”. Verificou-se que os resultados, na generalidade, foram ao encontro da investigação mais recente sobre AT, rupturas e drop outs, sobretudo no sentido em que, para a participante, é a presença dos constituintes centrais da AT que mais parecem moldar a sua adesão à terapia.esearch in psychotherapy has recently been focused on the Therapeutic Alliance (TA), ruptures and monitoring of the therapeutic process, aiming to understand the characteristics that are likely to influence the therapy process. TA, in particular, has been one of the main focus of the research in psychotherapy. However,there is a lack of studies with patients who have a history of constant drop outs or various changes in therapies and therapists. The present study sought to fill this gap, and aimed to understand the experience of a person who resorted to different therapies and therapists, trying to understand the variables that are associated with her process, as well as relevant positive and negative aspects throughout her own process. A semi-open interview was carried out and a qualitative methodology was used, namely a content analysis,in which three main categories were found: (1) “Characteristics and personal context (Worldview)”, (2) “Reasons that led to the therapeutic process / objectives ”and (3)“ Experience of the therapeutic process”. It was found that the results, in general, were in line with the most recent research on TA, ruptures and drop outs. For the participant, the presence of the main constituents of TA adherence her to therapy

A (In)dependência da Comissão de Auditoria nas Sociedades

Este trabalho tem como objetivo o estudo da comissão de auditoria, órgão de algumas sociedades anónimas, o contexto em que surge no nosso ordenamento jurídico, o seu regime jurídico e, em particular, se os seus membros agem sob a égide da independência. Numa época assolada por escândalos financeiros, em empresas de referência a nível internacional, tornou-se urgente controlar o caos e restaurar a confiança dos mercados no relato financeiro das sociedades. Neste sentido, vários países recorreram quer a normas injuntivas, quer a recomendações quer ainda a códigos de boas práticas, para instituir regras de fiscalização das sociedades, que permitissem uma real proteção dos interesses de acionistas e dos stakeholders, em geral. De entre as várias normas e recomendações, destaca-se, sobretudo pela importância que assume neste nosso estudo, a criação da figura da comissão de auditoria, no seio do conselho de administração, composta em parte por administradores independentes. À comissão de auditoria é incumbida a tarefa de fiscalizar a atuação do órgão de administração da sociedade, facilitada pelo facto de os membros da Comissão serem administradores não executivos do conselho de administração, o que lhes confere um acesso privilegiado à administração, facilitando assim o controlo da mesma. Todavia, esta medida revela-se controversa visto que nos deparamos com o facto de os membros da comissão de auditoria se encontrarem a fiscalizar os atos onde, na verdade, intervêm e dos quais tomam parte enquanto membros não executivos do conselho de administração, podendo assim a sua independência ser colocada em causa. O nosso estudo centra-se sobretudo na análise da evolução legislativa, com a necessária referência às fontes inspiradoras de cariz internacional. O nosso método apoia-se na revisão da literatura associada ao tema e revisão do seu enquadramento legal, possibilitando uma análise crítica ao regime jurídico da comissão de auditoria. Concluiremos, como tentaremos demonstrar ao longo das páginas que se seguem, que, apesar das vicissitudes identificadas, a figura do administrador independente reveste importância, não sendo, por isso de abandonar, face aos interesses que se pretendem acautelar. Quanto à comissão de auditoria, e por forma a minimizar as controvérsias e possíveis entraves ao seu funcionamento, concluiremos que melhor seria se a mesma se focasse exclusivamente nas tarefas e nos afazeres inerentes à fiscalização abandonado as funções de administração sem, no entanto, se impedir o seu acesso ao conselho de administração que é verdadeiramente imperioso para o bom exercício das funções que lhe são confiadas

Atitudes idadistas contra os jovens: sofrem ou não influência do contexto?

Classificações e códigos da American Psychological Association: 3000 Psicologia Social, 3400 Perceção Social & CogniçãoAtualmente, nas sociedades modernas, a discriminação contra os jovens atinge uma expressão elevada nos países europeus. Esta discriminação baseia-se, muitas vezes, em estereótipos que surgem, normalmente, associados à categoria dos jovens. No entanto, a ativação destes estereótipos parece depender do contexto em que a categoria dos jovens se encontra. O presente estudo experimental, procura verificar se a manipulação do contexto produz um efeito significativo na perceção que os participantes têm do alvo, neste caso de um jovem. Pretende-se igualmente testar a hipótese de que um contexto negativo vai ativar estereótipos desfavoráveis. Para tal foram criados 2 grupos experimentais: grupo da biblioteca e grupo do graffiti. Aos participantes do primeiro grupo é-lhes dado o inquérito que apresenta a fotografia de um jovem à frente de uma biblioteca, enquanto aos participantes do segundo grupo é-lhes aplicado o inquérito que apresenta a fotografia do mesmo jovem à frente de um graffiti. Os inquéritos aplicados aos grupos divergem apenas no contexto-alvo (biblioteca vs graffiti). Os resultados do atual estudo correspondem ao esperado, sendo que o grupo do graffiti, atribui características mais negativas ao jovem, do que o grupo da biblioteca, verificando-se algumas diferenças significativas entre os dois grupos. Conclui-se assim que o contexto social tem um papel importante na representação associada aos jovens.Today, in modern societies, discrimination against young people has a high expression in European countries. This discrimination is based often on stereotypes that come normally associated with the category of the young. However, activation of these stereotypes appears to depend on the context in which the category appears. This experimental study seeks to determine whether the manipulation of context provides a significant effect on the perception participants have of the target, in this case of a young man. It also aims to test the hypothesis that a negative context will enable unfavorable stereotypes. Two experimental groups were created where the photography of a young man appears whether in from of a library or in front of a graffiti wall. The results of the current study correspond to the expected hypotheses. In the group of graffiti, more negative traits were attributed to the young group than in the library group. These results show the effects of the context on the representations of young peopl