13,791 research outputs found
The Budgeting of Portuguese Public Museums: a dynamic panel data analysis
In this paper, the first panel on sources of funding for Portuguese publicly owned museums is explored. There has been little work in this field worldwide, and none for Portugal. Evidence in this paper seems contrary to that relating to the UK and to the US. We find that incremental budgeting still plays a major role on the funding of Portuguese museums, allowing for inefficient management and moral hazard: the interests of museums’ management may diverge clearly from those of the authorities ruling them and from those of the general public. We also find that the ability to generate their own revenues plays no role in the funding allocated to museums every year. Budgeting is mainly determined by past operating costs. Policy changes seem to be advisable. The scarce relevance of museum patronage by the private sector makes a discussion of possible crowding out effects irrelevant in the current Portuguese context.museums; incremental budgeting; moral hazard; dynamic panel data;
Behavioral modulation of the coexistence between Apis melifera and Varroa destructor: A defense against colony colapse disorder?
Colony Collapse Disorder has become a global problem for beekeepers and for
the crops which depend on bee polination. Multiple factors are known to
increase the risk of colony colapse, and the ectoparasitic mite Varroa
destructor that parasitizes honey bees is among the main threats to colony
health. Although this mite is unlikely to, by itself, cause the collapse of
hives, it plays an important role as it is a vector for many viral diseases.
Such diseases are among the likely causes for Colony Collapse Disorder.
The effects of V. destructor infestation are disparate in different parts of
the world. Greater morbidity - in the form of colony losses - has been reported
in colonies of European honey bees (EHB) in Europe, Asia and North America.
However, this mite has been present in Brasil for many years and yet there are
no reports of Africanized honey bee (AHB) colonies losses.
Studies carried out in Mexico showed that some resistance behaviors to the
mite - especially grooming and hygienic behavior - appear to be different in
each subspecies. Could those difference in behaviors explain why the AHB are
less susceptible to Colony Collapse Disorder?
In order to answer this question, we propose a mathematical model of the
coexistence dynamics of these two species, the bee and the mite, to analyze the
role of resistance behaviors in the overall health of the colony, and, as a
consequence, its ability to face epidemiological challenges
Mínimos de funcionais integrais e a validade da equação de Euler-Lagrange
Mestrado em MatemáticaNesta dissertação estudam-se problemas de mínimo, com especial atenção ao
problema clássico do Cálculo das Variações. Nomeadamente, após algumas
considerações gerais, estuda-se a existência de mínimos para certas classes
de funcionais, incluindo os funcionais integrais do Cálculo das Variações e
prova-se a existência de mínimos Lipschitzianos para funcionais integrais sob
a "Condição de Pendência Limitada".
Na segunda parte apresenta-se a equação de Euler-Lagrange como condição
necessária para a existência de mínimos ilustrando a sua utilidade e a sua
relação com o Fenómeno de Lavrentiev.
O último capítulo contém uma apresentação de resultados recentes sobre a
validade da equação de Euler-Lagrange e sobre o Fenómeno de Lavrentiev.
ABSTRACT: In this dissertation minimum problems, with special attention to the classic
problem of the Calculation of the Variations, are studied. Namely, after some
general considerations, the existence of minimum for certain functional
classes, are studied, including the integral functional for the classic problem of
the Calculus of Variations and under the Bounded Slope Condition, the
existence of Lipschitzians minimum for the integral functional.
In the second part we present the Euler-Lagrange equation as necessary
condition for the existence of minimum illustrating its usefulness and its relation
with Lavrentiev phenomenon.
The last chapter contains a presentation of recent results on Euler-Lagrange
equation’s validity and the Lavrentiev phenomenon
Comportamiento de las rocas cuarcíticas de las sierras septentrionales (Tandil) frente a la RAS
Uno de los temas más investigados vinculado a la durabilidad de las estructuras de hormigón es la reacción álcali-sílice (RAS), ya que esta reacción se produce dentro del hormigón y provoca fallas estructurales de gran importancia. Para que se produzca necesitamos un agregado potencialmente reactivo (que tenga algún tipo de sílice), álcalis (cemento portland) y humedad, además de otros factores como la temperatura y el tiempo.
La reacción origina como producto un gel silico-alcalino expansivo que genera fisuras y deterioro de las estructuras de hormigón. Otros factores que controlan la RAS son el porcentaje y el tamaño de partícula de agregado reactivo, que puede provocar un efecto de “pessimum” produciendo valores de máxima expansión en morteros u hormigones. Además el tamaño de grano de los componentes líticos, sobre todo en rodados y agregados de trituración, así como también la estabilidad estructural y la deformación de las partículas constituyen un rol fundamental en la velocidad en la que la reacción se desarrolla.
Las ortocuarcitas de la provincia de Buenos Aires, sobre todo las de la región de Tandilia son calificadas en estudios previos como de reacción lenta. En este trabajo se presentan estudios petrográficos preliminares de las variedades texturales de las cuarcitas de esta región y se las compara con rocas de similar origen de otras regiones de Argentina (Sierra de la Ventana y de Chaco). Esto permite establecer el diferente comportamiento de las rocas frente a la reacción álcali-sílice (RAS).One of the most researched topics linked to the durability of concrete structures is the alkali-silica reaction (ASR), since this reaction – produced in the concrete because of the presence of a potentially reactive aggregate, alkali (present in Portland cement) and humidity – causes structural failures of great importance when it is not controlled.
The reaction produces a silico-alkaline expansive gel generating cracks and deterioration of the concrete structures. Other factors controlling the ASR are the percentage and the particle size of reactive aggregate, which can generate an effect of “pessimum” on mortar and concrete studied.
The orthoquartzites in Buenos Aires (Tandilia area) were qualified in previous studies as slow reaction.
In this preliminary paper, petrographic studies of the textural varieties of quartzites from this region are presented and compared with rocks of similar origin to other regions of Argentina (Sierra de la Ventana and Chaco). This allows to show the different behavior respect to the alkali-silica reaction (ASR) in the concrete
Molecular characterization and functional analysis of ORF P1192R from African swine fever virus
Tese de Doutoramento em Ciências Veterinárias. Especialidade de Ciências Biológicas e BiomédicasAfrican swine fever virus (ASFV) is a nucleo-cytoplasmic large DNA arbovirus and the
single member of the family Asfarviridae. It infects soft ticks of the genus Ornithodoros as
well as all members of the family Suidae, representing a global threat for pig husbandry for
which there is currently no effective vaccine or treatment. Since the ASFV viral cycle is
mainly cytoplasmic, it has been found/predicted to code for many components of the
replicative and transcriptional machineries. Of these, and based in sequence homologies, a
putative type II DNA topoisomerase-coding ORF (P1192R) was identified in the ASFV
genome. DNA topoisomerases are enzymes that modulate the topological state of DNA
molecules. They are ubiquitous and essential, participating in processes such as DNA
replication, recombination and repair and also in transcription. Since ASFV has a large linear
genome, with 170 to 190 kbp depending on the isolate, containing terminal inverted repeats
and covalently closed ends, a type II topoisomerase may be indispensable for viral replication
and/or transcriptional events. The main objectives of this work were to deepen the study on
ORF P1192R and determine if it indeed codes for a type II DNA topoisomerase and, if so, to
characterize its activity. Bioinformatics and phylogenetic analyses showed that ORF P1192R
is highly conserved among the fourteen ASFV isolates analyzed and, although its amino acid
sequence clearly diverges from other type II topoisomerases, the structural organization is
preserved and conserved motifs and domains essential for activity are present. Transient
expression of GFP-pP1192R in COS-7 cells revealed an exclusively cytoplasmic distribution
of the protein, which remained unaltered by treatment with leptomycin B. Using Vero cells or
swine macrophages infected with ASFV isolate Ba71V or L60, respectively, expression of
pP1192R was observed in the late phase of infection, co-localizing with the viral factories,
where the bulk of viral replication and transcription occurs. Heterologous expression of
pP1192R in Saccharomyces cerevisiae demonstrated that it functionally complements a top2
thermo-sensitive mutation and that it exhibits ATP-dependent decatenation activity. The
purified recombinant pP1192R was found to efficiently decatenate kDNA and to processively
relax supercoiled plasmid DNA, which are characteristics of a type II topoisomerase. The
optimal requirements in terms of pH, temperature and salt, divalent ions and ATP
concentrations for pP1192R activity in vitro were determined and its sensitivity to a panel of
topoisomerase poisons and inhibitors was tested. Our results indicate that P1192R may be a
target for studying, and possibly controlling, ASFV transcription and replication.RESUMO - O vírus da peste suína africana (VPSA) é um arbovírus icosaédrico núcleo-citoplasmático
de DNA de cadeia dupla, classificado no género Asfivirus da família Asfarviridae, da qual é o
único membro conhecido. Este vírus infecta carraças do género Ornithodoros assim como
todos os membros da família Suidae, constituindo uma ameaça global para a suinicultura para
a qual não existe actualmente qualquer vacina ou tratamento. A prevenção da peste suína
africana é feita através de medidas que visam reduzir o risco de introdução de animais ou
produtos de origem animal infectados em regiões livres da doença, enquanto o controlo de um
surto se baseia exclusivamente em medidas que incluem o abate sanitário de todos os animais
susceptíveis na área do foco e a proibição de movimentos e comercialização de animais.
Embora o VPSA tenha sido inicialmente descrito como um vírus com replicação
exclusivamente citoplasmática, actualmente sabe-se que o núcleo da célula hospedeira é
indispensável na fase inicial da infecção. Contudo, a grande maioria do ciclo infeccioso
ocorre no citoplasma da célula infectada, não sendo por isso surpreendente que, das 150 a 167
grelhas de leitura aberta (ORF, do inglês “open reading frame”) identificadas no genoma do
VPSA, algumas codifiquem para componentes das maquinarias de replicação e de transcrição.
Dentre estas, prevê-se, com base em homologia de sequências aminoacídicas, que a ORF
P1192R codifique para uma topoisomerase de DNA do tipo II.
As topoisomerases de DNA estão presentes em todas as células e são responsáveis pela
modulação do estado topológico do DNA, estado esse que se altera durante processos como a
replicação, a recombinação e a reparação do DNA, assim como a transcrição, e dos quais
resultam torções das moléculas de DNA que, não sendo resolvidas, podem comprometer a
integridade genómica e consequentemente a viabilidade celular. Todas as topoisomerases
exercem a sua actividade através da criação de quebras no DNA devido ao ataque nucleofílico
de um resíduo de tirosina catalítico ao esqueleto fosfodiéster da molécula de DNA, gerandose
assim uma ligação fosfotirosina covalente. As topoisomerases são classificadas em dois
tipos, tendo por base a forma como quebram a molécula de DNA: as topoisomerases do tipo I,
cuja actividade é independente de ATP e que geram quebras em cadeia única no DNA,
facilitando assim o desenrolamento; e as topoisomerases do tipo II, que necessitam de ATP
para gerar uma quebra nas duas cadeias do DNA, através da qual fazem passar uma dupla
cadeia intacta. Considerando que o VPSA tem um genoma linear de grandes dimensões, com
170 a 190 quilopares de bases dependendo do isolado, e que contém repetições terminais invertidas fechadas covalentemente, uma topoisomerase do tipo II pode efectivamente ser
essencial para eventos de replicação e/ou transcrição virais.
Os objectivos centrais deste trabalho foram os seguintes: (i) realização de um estudo
bioinformático e filogenético aprofundado da ORF P1192R do VPSA; (ii) estudo da proteína
codificada por esta ORF (pP1192R), através da sua clonagem, expressão em sistema
heterólogo, purificação da proteína recombinante e caracterização in vitro da sua actividade;
(iii) determinação do efeito sobre a actividade da proteína recombinante dum painel de
compostos químicos descritos como sendo inibidores de topoisomerases; (iv) identificação
dos níveis de expressão e da localização intracelular da pP1192R em células infectadas pelo
VPSA, a diferentes tempos de infecção; (v) avaliação do efeito de mutações dirigidas em
resíduos ou motivos identificados como reguladores da actividade enzimática ou localização
subcelular da pP1192R, tendo por base a informação gerada nos estudos bioinformáticos
acima mencionados.
A ORF P1192R do isolado L60 do VPSA foi amplificada por PCR e clonada e a sua
sequência nucleotídica foi determinada e utilizada em análises bioinformáticas e filogenéticas.
Verificou-se que esta ORF é altamente conservada entre os catorze isolados do VPSA cujo
genoma se encontrava disponível nas bases de dados e, embora a sua sequência aminoacídica
seja claramente divergente das de outras topoisomerases do tipo II incluídas neste estudo,
quer sejam elas de origem procariota, eucariota ou viral, a organização estrutural da proteína
está preservada e estão presentes motivos e domínios conservados que são essenciais para a
actividade enzimática. O estudo da localização celular da pP1192R iniciou-se com a
construção de plasmídeos quiméricos para a expressão da pP1192R em fusão com a proteína
verde fluorescente (GFP) ou com uma variante vermelha (RFP). Transfectaram-se
transientemente células de linha COS-7 com estas construções tendo-se observado que a
proteína de fusão se distribuía exclusivamente pelo citoplasma. Esta distribuição não foi
alterada após tratamento com leptomicina B que bloqueia uma das vias de exportação de
proteínas do núcleo. Já a infecção das células a expressarem GFP-pP1192R com um isolado
do VPSA adaptado a células Vero (Ba71V) induziu uma redistribuição da proteína de fusão,
deixando de estar homogeneamente distribuída pelo citoplasma para estar principalmente
concentrada nas fábricas virais a partir das 8 horas pós-infecção. Utilizando células de linha
Vero infectadas com o isolado Ba71V, utilizado como modelo de infecção, ou macrófagos
derivados de monócitos de sangue periférico de suíno (células alvo do vírus na infecção
natural) infectados com o isolado virulento L60, e utilizando um soro anti-pP1192R
produzido no decurso destes trabalhos, foi possível constatar que a pP1192R viral é produzida na fase intermédia/tardia da infecção (observável a partir das 6/8 horas pós-infecção) e que
acumula nas fábricas virais ao longo da infecção.
A expressão em sistema heterólogo da pP1192R iniciou-se num sistema procariota,
baseado em Escherichia coli, mas embora tenha sido possível obter proteína recombinante em
grandes quantidades, a sua purificação só foi conseguida recorrendo a agentes desnaturantes,
impedindo a obtenção de proteína activa. Assim, avançou-se para um novo sistema de
expressão baseado na levedura Pichia pastoris que apresenta diversas vantagens sobre o
anterior, nomeadamente o facto de ser um sistema eucariota e por isso mais semelhante ao
contexto em que a pP1192R é expressa em condições naturais. Contudo, neste sistema não foi
possível obter proteína recombinante e o sistema foi abandonado. Tentou-se por fim a
expressão heteróloga na levedura Saccharomyces cerevisiae. Neste organismo, a utilização
das estirpes JCW26 e SD117 que contêm uma mutação termo-sensível no gene que codifica
para a topoisomerase do tipo II endógena, permitiu demonstrar, quer in vivo através da
complementação da mutação termo-sensível, quer in vitro recorrendo a ensaios funcionais de
decatenação, que a pP1192R é efectivamente uma topoisomerase do tipo II funcional.
Utilizando ainda S. cerevisiae como sistema de expressão, foi possível obter e purificar
pP1192R recombinante para caracterização da sua actividade em ensaios funcionais in vitro.
Observou-se que a pP1192R é capaz de relaxar DNA superenrolado, de decatenar DNA
catenado e, quando em elevadas concentrações, de catenar DNA plasmídico, não tendo sido
detectada actividade de superenrolamento de DNA relaxado. Determinaram-se também as
condições óptimas de funcionamento em termos de temperatura, pH e concentrações de sal
(NaCl ou KCl), ATP ou iões divalentes (Mg2+, Mn2+, Zn2+, Cu2+ e Ca2+), que foram
posteriormente utilizadas para avaliar a sensibilidade da pP1192R recombinante a um painel
de inibidores de topoisomerases, entre os quais se incluem drogas frequentemente utilizadas
como agentes antimicrobianos ou antitumorais. Dos compostos testados, aqueles para os quais
foram obtidos resultados mais promissores, i.e., os que revelaram níveis de inibição mais
elevados, foram a coumermicina A1, a doxorubicina, a amsacrina e a genisteína. Pelo
contrário, as quinolonas, normalmente utilizadas como antibióticos visando infecções
provocadas por organismos procariotas, foram dos compostos com menor eficácia.
Em suma, os resultados deste trabalho indicam que a ORF P1192R é um alvo promissor
para o estudo e, eventualmente, o controlo dos processos replicativos e transcricionais do
vírus da peste suína africana
Impacto da formação sobre a assertividade e o burnout dos médicos: uma investigação com médicos do internado de medicina geral e familiar
Dissertação de mest., Psicologia da Saúde, Faculdade de Ciências Humanas e Sociais, Universidade do Algarve, 2009A presente investigação decorre da nossa experiência formativa, desenvolvida durante longos
anos, com médicos que procuravam um melhor saber-fazer na sua prática clínica diária.
Assim, procuramos a actualização, num primeiro tempo, dos conhecimentos experienciais de
outros pesquisadores nesta área.
Para isso tivemos de enquadrar a formação médica no plano mais vasto do modelo humanista
das profissões com o denominador comum de ajuda presencial a outra pessoa em que a
medicina vai a par da psicologia, da enfermagem, da docência.
Passamos em revista o modelo humanista da medicina após difíceis conquistas históricas e
detivemo-nos na comunicação médico-paciente e médico-equipa multidisciplinar e nos modos
assertivos dessa comunicação.
Abordamos, logo de seguida, as condições que contribuem para a saúde e o bem-estar após as
conceptualizarmos. Questionamos o como da actual formação a médicos que continuam a sofrer
de stresse, ansiedade e depressão chegando ao burnout com nefastas consequências não só para
a sua vida clínica como também para a pessoal e social.
Demos exemplo de acções de formação para professores, enfermeiros e médicos. Com estes
últimos profissionais apresentamos o testemunho da nossa própria experiência no Instituto do
Clínico Geral (Zona Norte), no Centro de Saúde da Batalha (Porto) no âmbito da Psicologia
Consiliar/Ligação, no Internato Médico de Medicina Geral e Familiar (Zona Norte). Estas
acções visaram atender às necessidades sentidas pelos formandos na sua praxis clínica
respeitantes ao relacionamento humano sem diminuir a orientação profissional.
Na parte empírica do nosso trabalho fizemos sobressair a importância da formação apresentando
os resultados da pesquisa a 83 médicos quanto às suas condições de ansiedade, depressão e
stresse, quanto aos comportamentos assertivos, quanto ao nível do seu possível burnout, quanto
ao provável mal-estar relacionado com o seu trabalho – antes e depois da formação levada a
cabo durante o seu tempo de internato médico.
Apresentamos e discutimos os resultados obtidos. Por fim, reflectimos sobre as implicações
futuras da pesquisa encetada considerando a possibilidade da sua continuidade em novos
estudos
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