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    Ocean acidification: physiological response from fish to cell

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    The atmospheric concentrations of CO2 have increased at an unusually rapid rate, from pre-industrial levels of 280 μatm to current levels of 414 μatm. The oceans, one of the largest CO2 reservoirs, continuously absorb the atmospheric CO2, resulting in a decline of ocean pH and a decrease in carbonate saturation state. The study of the physiological effects induced by the predicted rise of seawater pCO2 levels will elucidate the capacity of marine fish to adapt or acclimate to future climate change scenarios. In this context, the marine fish intestine has an important role in the acclimatisation mechanisms to environmental stressors. Therefore, this Ph.D. thesis aimed to provide new insights into the intestinal response to a simulated predicted ocean acidification scenario at the functional and molecular level. Using the European sea bass (Dicentrarchus labrax) as an animal model, the present study’s main focus was on the effects of high pCO2 levels in the intestinal bicarbonate handling cascade. Additionally, the characterization of the basal HCO3- secretion as ion/water transport mechanisms unveiled the region-dependent organization of the fish intestine. The marine fish physiological phenotype under a high pCO2 environment was established by a comprehensive analysis not only at the intestinal level but also at the whole-body level. Moreover, the intestinal transcriptome was analysed to gain insights into the underlying cellular and molecular mechanisms present in the observed phenotype. RNA-Seq analysis identified novel gene markers involved in the intestinal response to high pCO2 levels. Overall, this study provided new insights into marine/euryhaline fish intestinal response, which contributed to a better understanding of the physiological adaptations and the regulatory mechanisms involved.Las concentraciones atmosféricas de CO2 han aumentado a un ritmo inusualmente rápido, desde los niveles preindustriales de 280 μatm hasta los niveles actuales de 414 μatm. Los océanos, una de las mayores reservas de CO2 exhiben una absorción continuad del CO2 atmosférico que provoca tanto una disminución del pH del océano como una disminución del estado de saturación de carbonato. El estudio de los efectos fisiológicos provocado por el aumento previsible de los niveles de pCO2 en el mar esclarecerá la posible capacidad de los peces marinos para adaptarse o aclimatarse a escenarios futuros de cambio climático. En este contexto, el intestino de los peces marinos tiene un papel importante en los mecanismos de aclimatación a los estresantes ambientales. Por lo tanto, esta tesis doctoral tiene como objetivo investigar la respuesta intestinal a nivel funcional y molecular, a un escenario previsto de acidificación de los océanos. Usando la lubina (Dicentrarchus labrax) como modelo animal, el enfoque principal de la tesis se centró en los efectos de los altos niveles de pCO2 en la cascada de transporte de bicarbonato a nivel intestinal. Además, se realizó la caracterización de la secreción basal de HCO3- y los mecanismos de transporte de iones/agua revelaron una organización funcional región-dependiente del intestino de la lubina. El fenotipo fisiológico de los peces marinos en un entorno de pCO2 elevado se estableció mediante un análisis exhaustivo no solo a nivel intestinal sino también a nivel de todo el cuerpo. Además, se analizó el transcriptoma intestinal para obtener información sobre los mecanismos celulares y moleculares subyacentes presentes en el fenotipo observado. El análisis de RNA-Seq identificó nuevos marcadores genéticos implicados en la respuesta intestinal a niveles elevados de pCO2. En general, este estudio proporcionó nuevos conocimientos sobre la respuesta intestinal de los peces marinos/eurihalinos, contribuyendo a una mejor comprensión de las adaptaciones fisiológicas y los mecanismos reguladores implicados

    Modulação da transmissão colinérgica no órgão eléctrico de Torpedo marmorata (Risso, 1810)

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    Dissertação de mest., Biologia Marinha, Faculdade de Ciências e Tecnologia, Universidade do Algarve, 2009Este estudo incidiu nos mecanismos envolvidos na modulação da transmissão colinérgica por receptores nicotínicos (nAChR) pré-sinápticos. Neste trabalho, utilizaram-se os electrócitos do órgão eléctrico de Torpedo marmorata, como detectores de libertação de ACh em tempo real através da medição de potenciais de electroplaca (EPP) numa pilha de electrócitos sobrepostos (prisma). Estes potenciais resultam da libertação síncrona de ACh a partir de uma miríade de sinapses e possibilitam estudos sobre a neuromodulação nicotínica com uma resolução de milisegundos. Para tal, avaliou-se o efeito da aplicação do agonista dos nAChR, iodeto de 1,1- dimetil-4-fenilpiperazínio (DMPP), durante 5 s sobre os potenciais eléctricos dos prismas. A presença de DMPP aumentou a amplitude (~ 20%) e a área (~ 37%) dos EPP, sendo este aumento dependente da concentração de agonista (n=10). O efeito facilitatório do DMPP (0,1-10 μM) na amplitude e na área dos prismas aumentou com a redução da concentração extracelular de Ca2+ de 3,4 mM (concentração fisiológica normal) para 1,7, 1,275 e 0,85 mM. Os resultados obtidos quando se avaliou a razão área/pico e latência demonstraram que os parâmetros relacionados com o tempo do sinal foram menos sensíveis à diminuição do Ca2+ extracelular. O efeito facilitatório da ACh libertada endogenamente foi prevenido na presença dos antagonistas nicotínicos, dihidro- beta-eritroidina (DH-β-E) e hexametónio (HE). Estes resultados mostram que a acetilcolina (ACh) aumenta a sua própria libertação através da activação de nAChR. Este mecanismo pode funcionar como um amplificador pré-sináptico, aumentando a margem de segurança da transmissão sináptica, semelhante ao que foi observado na junção neuromuscular do rato (Faria et al., 2003). Para avaliar se as respostas eléctricas dos prismas ao DMPP teriam origem pré ou pós-sináptica, bloqueou-se a condução do impulso nervoso com TTX (1 μM) e inibiu-se a actividade da acetilcolinesterase (AChE) com neostigmina (20 μM). Nestas circunstâncias, a aplicação de ACh (100 μM) produziu potenciais pós-sinápticos superiores a 100 mV durante alguns segundos, ao contrário do que se observou após a aplicação de DMPP (100 μM) (n=4). Os resultados mostram claramente que o DMPP actua pré-sinapticamente facilitando a libertação de ACh, e que a sua actividade póssináptica é negligenciável. Para confirmar esta hipótese, realizaram-se ensaios com terminais nervosos isolados (sinaptossomas) do órgão eléctrico de Torpedo, onde foi possível medir directamente a libertação de ACh através de um método de quimioluminescência. Nestas circunstâncias, o DMPP aumentou a libertação de ACh (~ 30%) induzida através da despolarização dos sinaptossomas com veratridina (100 μM) ou KCl (40 mM), confirmando a natureza pré-sináptica da acção do DMPP. À semelhança do que se observou nas experiências electrofisiológicas com os prismas de Torpedo, o efeito facilitatório do DMPP nos sinaptossomas foi prevenido pela DH-β-E (3 μM), um antagonista dos nAChR contendo sub-unidades α3/4β2 dos nAChR. A relação espacial entre os nAChR e as zonas activas de libertação de ACh foi avaliada electrofisiológicamente usando os quelantes de Ca2+ BAPTA-AM e EGTAAM. Esta metodologia, demonstrou a influência dos microdomínios de Ca2+ na modulação da libertação de ACh pelos nAChR pré-sinápticos. Os sensores de Ca2+ (da libertação de ACh) aparentam não estar co-localizados com os nAChR. Este trabalho constitui a primeira tentativa, de que se tem conhecimento, para avaliar o papel dos autoreceptores nicotínicos no órgão eléctrico do T. marmorata. Serão necessárias mais experiências para caracterizar melhor o subtipo de nAChR envolvido na facilitação de ACh nesta preparação

    Visita domiciliária no pós parto

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    Curso de mestrado em enfermagem de saúde materna obstetrícia e ginecologiapertinência desta temática é justificada pela importância da saúde da família e do apoio à maternidade, pois “os objetivos dos cuidados de saúde para famílias em gestação são uma gravidez saudável, um recém-nascido saudável e pais preparados e confiantes nos seus novos papéis” (RICE, 2004 p.412). Este estudo tem como objetivos avaliar a visita domiciliária efetuada às puérperas e determinar a existência de relação entre a avaliação da visita domiciliária e algumas variáveis. Participaram no estudo 175 puérperas, inscritas na UCSP de Resende, de Lamego e de Santa Marinha do Zêzere e na USF Douro Vita. O estudo realizado é quantitativo, descritivo, correlacional e transversal. O instrumento de colheita de dados inclui a escala de avaliação da visita domiciliária no pós-parto (Almeida, Duarte e Nelas, 2011) que foi construída e validada neste estudo. Os resultados obtidos da validação da escala revelam-nos 4 fatores que foram denominados: 1- Ensino; 2 – Importância; 3 – Empatia e relação; 4 – Informação. Relativamente à avaliação da visita domiciliária no pós-parto, 45,70% das puérperas considera-a insuficiente. Verificou-se ainda que as variáveis idade, escolaridade, número de gestações anteriores, funcionalidade familiar, suporte social, ansiedade e a depressão pósparto, influenciam a avaliação da visita domiciliária no pós-parto. Assim, as puérperas mais velhas, que possuem o ensino secundário, que tiveram três gestações anteriores, com famílias altamente funcionais, com suporte social alto, mais ansiosas e com suspeita de depressão são as que atribuem melhor avaliação à visita domiciliária no pós-parto. Palavras-chave: Puerpério, Visita Domiciliária, Avaliação.ABSTRACT In this research work, we studied the “postpartum home visit”. The relevance of this topic is justified by the importance of family health and the support given to motherhood, as “the goals of health care in families with pregnant women are directly related to a healthy pregnancy, a healthy newborn and confident and prepared parents towards their new roles” (RICE, 2004 p.412). This study aims to evaluate the home visits made to recent mothers and to determine the existence of a relationship between the home visit’s assessment and some other variables The study was developed with 175 mothers who belong to the UCSP from Resende, Lamego and Santa Marinha do Zêzere and also from the USF Douro Vita. This is a quantitative, descriptive, correlational and transversal study. The data research instrument is based on the evaluation scale of the postpartum home visits (Almeida, Duarte e Nelas, 2011) which was built and validated in this study. The obtained results from the scale’s validation reveal us four factors that were named: 1 - Education 2 - Importance, 3 - Empathy and relation; 4 - Information. In what concerns to the postpartum home visits’ assessment, 45.70% of the women considered it insufficient. It was also found that age, schooling, the number of previous pregnancies, family functioning, social support, anxiety and postpartum depression, influenced the postpartum home visits’ assessment. Thus, older mothers who have secondary education, with three previous pregnancies, with a high level of family functioning and social support, the most anxious and who may have a suspicious of a depression are the ones that give the best assessment to home visits after delivery. Key words: Puerperium, Home visits, Evaluation

    Assessing in vivo and in vitro biofilm development by Streptococcus dysgalactiae subsp. dysgalactiae using a murine model of catheter-associated biofilm and human keratinocyte cell

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    001 from Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). This work is also financed by national funds from FCT - Fundação para a Ciência e a Tecnologia, I.P., of the Research Unit on Applied Molecular Biosciences - UCIBIO and the project LA/P/0140/2020 of the Associate Laboratory Institute for Health and Bioeconomy - i4HBandStreptococcus dysgalactiae subsp. dysgalactiae (SDSD) is an important agent of bovine mastitis. This infection causes an inflammatory reaction in udder tissue, being the most important disease-causing significant impact on the dairy industry. Therefore, it leads to an increase in dairy farming to meet commercial demands. As a result, there is a major impact on both the dairy industry and the environment including global warming. Recurrent mastitis is often attributed to the development of bacterial biofilms, which promote survival of sessile cells in hostile environments, and resistance to the immune system defense and antimicrobial therapy. Recently, we described the in vitro biofilm development on abiotic surfaces by bovine SDSD. In that work we integrated microbiology, imaging, and computational methods to evaluate the biofilm production capability of SDSD isolates on abiotic surfaces. Additionally, we reported that bovine SDSD can adhere and internalize human cells, including human epidermal keratinocyte (HEK) cells. We showed that the adherence and internalization rates of bovine SDSD isolates in HEK cells are higher than those of a SDSD DB49998-05 isolated from humans. In vivo, bovine SDSD can cause invasive infections leading to zebrafish morbidity and mortality. In the present work, we investigated for the first time the capability of bovine SDSD to develop biofilm in vivo using a murine animal model and ex-vivo on human HEK cells. Bovine SDSD isolates were selected based on their ability to form weak, moderate, or strong biofilms on glass surfaces. Our results showed that SDSD isolates displayed an increased ability to form biofilms on the surface of catheters implanted in mice when compared to in vitro biofilm formation on abiotic surface. A greater ability to form biofilm in vitro after animal passage was observed for the VSD45 isolate, but not for the other isolates tested. Besides that, in vitro scanning electron microscopy demonstrated that SDSD biofilm development was visible after 4 hours of SDSD adhesion to HEK cells. Cell viability tests showed an important reduction in the number of HEK cells after the formation of SDSD biofilms. In this study, the expression of genes encoding BrpA-like (biofilm regulatory protein), FbpA (fibronectin-binding protein A), HtrA (serine protease), and SagA (streptolysin S precursor) was higher for biofilm grown in vivo than in vitro, suggesting a potential role for these virulence determinants in the biofilm-development, host colonization, and SDSD infections. Taken together, these results demonstrate that SDSD can develop biofilms in vivo and on the surface of HEK cells causing important cellular damages. As SDSD infections are considered zoonotic diseases, our data contribute to a better understanding of the role of biofilm accumulation during SDSD colonization and pathogenesis not only in bovine mastitis, but they also shed some lights on the mechanisms of prosthesis-associated infection and cellulitis caused by SDSD in humans, as well.publishersversionpublishe

    Perfil epidemiológico de sífilis adquirida diagnosticada e notificada em hospital universitário materno infantil

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    Objective: To characterize the epidemiologic profile of users with acquired syphilis.Method: This was an exploratory and descriptive study of quantitative approach, through secondary data collected in investigation forms/syphilis notification in women assisted in a Maternal-Child University Hospital in Santa Cruz-RN in 2012. The study was approved by the Research Ethics Committee under report number 772.884.Results: 67% of mothers reported they had only attended elementary school, 33% were single, 42% had undergone less than six prenatal consultations, 58% of them had performed previous treatment of syphilis, but only 25% of their partners had joined and performed it.Conclusion: This study shows progress regarding diagnosis of syphilis during prenatal care, but it evidences the non-accomplishment of treatment by pregnant women before delivery, as well as by their partners. Therefore, innovative strategies are needed aiming at an early and proper treatment of pregnant women and their partnersObjetivo: Caracterizar el perfil epidemiológico de las usuarias portadoras de sífilis adquirida.Método: Se realizó un estudio exploratorio y descriptivo, con abordaje cuantitativo, a través de datos secundarios recogidos en los formularios de investigación/notificación de la sífilis de las mujeres atendidas en Hospital Universitario materno infantil, en Santa Cruz-RN en 2012. El estudio fue aprobado por el Comité Ético de Investigación con el número 772.884.Resultados: 67% de las madres asistieron a la escuela primaria, 33% son solteras, 42% tenía menos de 06 consultas prenatales, 58% de estas realizaron tratamiento previo de la sífilis, pero sólo 25% de los esposos fueron examinados.Conclusión: El estudio muestra el progreso en relación con el diagnóstico de la sífilis durante la atención prenatal, señalándose la falta de funcionamiento del tratamiento de las mujeres embarazadas antes del parto, así como de sus esposos. Por lo tanto, se necesitan estrategias innovadoras con el objetivo de un tratamiento precoz y adecuado de las mujeres embarazadas y de sus parejas.Objetivo: Caracterizar o perfil epidemiológico das usuárias portadoras da sífilis adquirida.Método: Realizou-se um estudo exploratório e descritivo de abordagem quantitativa, através de dados secundários coletados nas fichas de investigação/notificação de sífilis de mulheres assistidas em Hospital Universitário Materno Infantil, no município de Santa Cruz-RN, em 2012. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa sob o parecer nº 772.884.Resultados: Indicaram que 67% das puérperas notificadas cursaram apenas o ensino fundamental, 33% são solteiras, 42% realizaram menos de 06 consultas de pré-natal, 58% delas realizaram tratamento prévio da sífilis, mas apenas 25% dos esposos aderiram e o realizaram.Conclusão: O estudo aponta avanços quanto ao diagnóstico da sífilis durante o pré-natal, porém ressaltou-se a não realização do tratamento das gestantes antes do parto, como também do esposo. Logo, estratégias inovadoras são necessárias visando o tratamento precoce e adequado das gestantes e seu(s) parceiro(s)

    Corrosion and tribocorrosion behaviour of Ti6Al4V produced by selective laser melting and hot pressing in comparison with the commercial alloy

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    The corrosion and tribocorrosion behaviour of SLM-produced Ti6Al4V alloy was studied in comparison with its HP and commercial counterparts in 9 g/L NaClsolution at body temperature. Results showed that SLM processing route influenced the electrochemical response of the SLM-produced alloy by leading to a relatively lower quality for the passive film due to decreased beta phase and the formation of alpha' phase. However, after tribocorrosion, neither the total volume loss nor the volume loss under the influence of mechanical wear and wear accelerated corrosion showed any statistically significant difference between the processing routes.This study was supported by FCT with the reference project UID/EEA/04436/2013, by FEDER funds through the COMPETE 2020 - Program Operacional Competitividade e Internacionalizacao (POCI) with the reference project POCI-01-0145-FEDER-006941, together with projects NORTE-01-0145-FEDER-000018-HAMaBICo and PTDC/EMS-TEC/5422/2014. The authors would also like to acknowledge Prof. Grata Minas for the provision of the profilometry

    Desafios no cuidado de crianças nascidas de mães com diagnóstico de COVID-19 durante a pandemia

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    Objetivo: Compreender os desafios no cuidado de crianças nascidas de mães com COVID-19 durante a pandemia.Método: Pesquisa qualitativa, realizada de novembro de 2020 a maio de 2021, em duas maternidades públicas, com mulheres que tiveram filhos na primeira onda da pandemia, diagnosticadas com COVID-19, durante a gestação e/ou parto. Realizaram-se 19 entrevistas semiestruturadas com análise temática. Utilizou-se do Interacionismo Simbólico como referencial teórico.Resultados: Identificaram-se mudanças nos cuidados a crianças recém-nascidas. No ambiente doméstico, as medidas de higiene com o recém-nascido foram redobradas, o isolamento social restringiu a rede de apoio e as mães se sentiram sozinhas e sobrecarregadas. No âmbito assistencial, houve retrocesso no cuidado neonatal e interrupção de cuidados profissionais, como suspensão de consultas.Conclusão: A pandemia reestruturou os modelos tradicionais de cuidados familiares, intensificou as dificuldades de acesso à saúde e expôs as crianças a riscos inerentes à falta de acompanhamento.Descritores: COVID-19. Cuidado da criança. Relações mãe-filho. Saúde da criança
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