Development of lipid-polymer hybrid nanoparticles as a strategy to treat Alzheimer’s Disease

Tese de mestrado, Ciências Biofarmacêuticas, 2022, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.A doença de Alzheimer (AD) é uma doença neurodegenerativa crónica responsável pela maioria dos casos de demência no mundo. Apesar da grande incidência da AD na população mundial, ainda não existe uma abordagem de tratamento eficaz para a patologia. A terapia farmacológica que existe para a doença de AD apenas trata os sintomas, não sendo capaz de induzir ou prevenir regressão da doença. Devido aos muitos fatores que estão envolvidos na patologia da AD, uma terapia de múltiplos alvos seria a ideal para esta patologia. Isto, aliado ao facto de a AD ser uma doença do sistema nervoso central (CNS) e de o CNS estar protegido por uma barreira altamente seletiva, a barreira hematoencefálica (BBB), explica a ausência de um tratamento eficaz da doença. Outra limitação para tratar a perturbação é a falta de um diagnóstico preciso. No passado, um diagnóstico preciso desta patologia era mais difícil. No entanto, hoje em dia o uso de técnicas de neuroimagem como a ressonância magnética (MRI) podem dar importantes informações sobre biomarcadores. Devido a todas as limitações existentes para criar um tratamento eficaz e local da AD, esta tese de mestrado propõe o desenvolvimento de um nanossistema composto por nanopartículas híbridas de tamanho suficientemente pequeno para passar pelo BBB, que encapsulam, por sua vez, nanopartículas superparamagnéticas de óxidos de ferro (SPIONs) e um fármaco (curcumina). O nanossistema incluirá também a funcionalização destas nanopartículas com um péptido penetrante de células (CPP) que permite a translocação de membranas celulares. O nanossistema proposto pode ser considerado um agente de teranóstico, uma vez que é capaz de ter tanto um efeito terapêutico como de diagnóstico na AD. O efeito terapêutico é dado pela curcumina presente nas nanopartículas, e o efeito de diagnóstico é dado pelas SPIONs encapsuladas uma vez que podem atuar como agentes de contraste para ressonância magnética, permitindo o diagnóstico da AD. Todas as nanopartículas foram caracterizadas durante as diferentes fases do trabalho. As SPIONs produzidas foram analisadas por microscopia eletrónica de transmissão e o tamanho médio obtido foi de 12,3 ± 2,3 nm. Em seguida, todas as nanopartículas produzidas durante a otimização das nanopartículas híbridas foram caracterizadas utilizando a técnica DLS. Os diâmetros hidrodinâmicos obtidos para as nanopartículas não funcionalizadas foram de 91,6 ± 1,6 nm e para o nanossistema final (funcionalizado) foram de 120,1± 0,1 nm. Para avaliar a eficiência de internalização das nanopartículas nas células, foi utilizada uma linha celular de células endoteliais humanas do cérebro. A mesma linha celular foi também utilizada para realizar ensaios de citotoxicidade. Os ensaios celulares mostraram que as nanopartículas conseguem internalizar nas células, sendo que o nanossistema mostrou uma capacidade de internalização mais elevada do que as nanopartículas híbridas + SPIONs. Os dois tipos de nanopartículas testados também mostraram uma tendência para se tornarem citotóxicos nas concentrações testadas mais elevadas. As características do nanossistema produzido nesta tese de mestrado mostram-se promissoras para atravessar a BBB devido à sua capacidade de internalização numa linha celular de células endoteliais do cérebro humano in vitro.Alzheimer’s disease (AD) is a chronic neurodegenerative disorder responsible for most cases of dementia in the world. Despite the large incidence of AD in the world population, there is still no effective treatment approach to the pathology. The pharmacologic therapy that exists for AD only treat the symptoms, it is not able to induce or prevent disease regression. Due to the many factors that are involved in AD pathology, a multiple-target therapy would be the preferred treatment for this pathology. This, allied to the fact that AD is a central nervous system (CNS) disorder and that the CNS is protected by a highly selective barrier, the blood-brain barrier (BBB), explains the absence of effective treatment for the disorder. Another limitation in treating the disorder is the lack of an accurate diagnosis. In the past, an accurate diagnosis of this pathology was more difficult. Nowadays the use of neuroimaging techniques such as magnetic resonance imaging (MRI) can give important biomarker information. Due to all the existing limitations to creating an effective and local treatment for AD, this master thesis proposes the development of a nanosystem composed of hybrid nanoparticles with a small enough size to pass through the BBB, that encapsulates superparamagnetic iron oxide nanoparticles (SPIONs) and a drug (curcumin). The nanosystem will also include the functionalization of these nanoparticles with a cell-penetrating peptide (CPP) that allows the translocation of cell membranes. The proposed nanosystem can be considered a theranostics agent, since it is able to both have a therapeutic and diagnostic effect on AD. The therapeutic effect is given by the curcumin present in the nanoparticles, and the diagnostic effect is given by the SPIONs encapsulated since they can act as contrast agents in MRI, allowing AD diagnosis. All nanoparticles were characterized during the different stages of the work. The produced SPIONs were analyzed by transmission electron microscopy and the obtained average size was 12.3 ± 2.3 nm. Then, all the nanoparticles produced during the optimization of the hybrid nanoparticles were characterized using DLS technique. The hydrodynamic diameters obtained for the nanoparticles not functionalized was 91.6 ± 1.6 nm and for the final nanosystem (functionalized) was 120.1± 0.1 nm. To assess the efficiency of the nanoparticles in internalizing in cells, a cell line of human brain endothelial cells was used. The same cell line was also used to perform cytotoxicity assays. Cellular assays showed that the nanoparticles can internalize in the cells. However, the nanosystem showed a higher internalization capacity when compared to the hybrid nanoparticles + SPIONs. Both types of nanoparticles tested also showed a tendency to become cytotoxic at the higher concentrations tested. The characteristics of the produced nanosystem in this master thesis are promising to overcome the BBB due to their ability to internalize in a cell line of human brain endothelial cells in vitro.Laboratório de Biomateriais, DCM/FCT-UNL e Faculdade de Farmácia da Universidade de Lisboa

Improving writing through creativity

Trabalho de Projecto apresentado para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Mestre em Ensino do InglêsThis project is the result of an attempt to answer the question “Can Creative Writing Be Taught?” proposed by Francine Prose (2007), in the first chapter of her book Reading Like a Writer. It also aims to show the difficulties of implementing such a project in the classroom, due to factors such as lack of time, the pressure of teaching a very tight syllabus, and the working conditions students and teachers have in order to succeed. In order to implement the project, a series of activities was set up. Through music, paintings, drawings, hand paintings and other materials, the students produced words and simple sentences, which were enlarged so as to become complex sentences and paragraphs. Each piece of material was prepared bearing in mind the ideas the students had produced during the previous session, so that a connection could be established between all elements. The main purpose of these strategies was to lead the students into writing a story. Lastly, this project aims at showing how the different creative writing activities contributed to a greater awareness of individual writing errors and error-correction, improving the students‟ writing skill as a whole

Vista alegre atlantis investment committee paper - returns

The proposed Investment Committee Paper is intended for academic purposes only. The project aims to study a private equity deal using a Leveraged Buyout (LBO) for Vista Alegre Atlantis (VAA), a market leader in the ceramic and glass tableware sector. Our goal is to understand how the LBO could be structured, what returns it could provide, and what exit strategies can be pursued. In addition, we will focus on analysing and forecasting the business plan and defining the optimal capital structure. The conclusion is that VAA is an attractive investment opportunity, able to leverage the market's growth

Consulting project for José de Mello Saúde: enhancing remote medical care in the portuguese market

The following report has the objective of assessing the remote health care market and defining how José de Mello Saúde can sustain its leadership position by establishing are mote clinical relationship with its clients. For that purpose, a market assessment was conducted, followed by an extensive analysis of the clients’ demand and of the health care professionals’ willingness to provide remote clinical services. Finally, the team focused its attention on there commendation of three services, which are the Teleconsultation ,the Clinical Contact Centre and the Direct Contact to Doctor. In the end, some limitations and future challenges were also analyse

The three main marine depositional cycles of the Neogene of Portugal

The present work follows a stratigraphic model for the marine Neogene of Portugal based on the definition of three main marine sedimentary cycles. Conceptually the I, II and III Neogene Cycles can be defined as 2nd order sedimentary sequences with duration ranging from 5 to 8 Ma. The I Neogene Cycle is fully represented only in the Lower Tagus Basin. Ranging from the Early Aquitanian to the Late Burdigalian the I Neogene Cycle testify a transgressive episode in the region of Lisbon and Setúbal Peninsula. Rapid lateral facies variations suggest a shallowmarine basin. This cycle ends with an important Late Burdigalian tectonic compressive event expressed by uplift of the surrounding areas and deformation affecting the Early Miocene deposits of the Arrábida Chain. The II Neogene Cycle includes thick sedimentary sequences covering Paleozoic and Mesozoic formations in the Algarve and Alvalade-Melides regions and it extends as far north as Santarém in the Lower Tagus Basin. Mainly controlled by global eustasy, it was generated by the important positive eustatic trend that characterized the Middle Miocene worldwide to which the Portuguese continental margin acted more or less passively. This cycle ended with a second and the most important compression event starting after the end of the Serravallian affecting the entire Portuguese onshore and shelf areas. This led to an important depositional hiatus of marine sediments for more than 2.5 Ma. During the Early and the Middle Tortonian occurred the clockwise rotation of the Guadalquivir Basin. The thickmarine units deposited afterwards in this basin produced a litostatic load, which seems to have induced subsidence farther west resuming the Neogene marine sedimentation in the Cacela region (Eastern Algarve), during the Late Tortonian. This marks the beginning of the III Neogene Cycle. To the north, in the Sado Basin (Alvalade-Melides region), a similar depositional sequence starts its sedimentation during the Messinian. Further north, in the Pombal-Caldas da Rainha region, marine sedimentation started during the Late Pliocene (Piacenzian). The migration in time, from south to north for the beginning of the marine sedimentation of this cycle is interpreted as reflecting a visco-elastic propagation of the deformation from the Betic chain northwards

Desempenho de sistema de monitorização capacitivo em implante ósseo instrumentado

Musculoskeletal disorders are becoming an ever-growing societal burden and, as a result, millions of bone replacements surgeries are performed per year worldwide. Although total joint replacements are recognized among the most successful surgeries of the last century, implant failure rates exceeding 10% are still reported. These numbers highlight the necessity of technologies to provide an accurate monitoring of the bone-implant interface state. This work aims to identify the performance of an instrumented implant to monitor implant stability using a planar capacitive technology. A 5x10x0.8 mm printed circuit with two 5x2 mm electrodes was fabricated to be integrated in an implantable device, with the objective of assessing the effect of a fully implantation into a biological specimen. The implant was fabricated with a conic geometry, to achieve a press-fit fixation, with 55 mm of length and a minimum/maximum diameters of 12 and 15 mm, respectively. After implantation, the system was put under compression and decompression cycles, so the bone-implant interface could be altered. In the compression cycle, the observed capacitance values decreased, indicating the sensor was moving away from the bone; and contrarily, in the decompression cycle, the capacitance increased with the progressive unloading. Values were obtained in intervals of [2.2090; 3.0764] pF for the compression and [1.9806; 3.1841] pF for the decompression. The mean percentage of capacitance change for the compression cycle was 3.67% and 5.06% for the decompression, indicating a greater change rate in the decompression cycle. Additional tests were carried where the implant and the sensor were rotated 90 and 180º, to show the influence of different interfaces in the measured capacitance. The latter tests allowed to support the results obtained without rotation, as different sensor positions provided different behaviors of the capacitance change. Further development is still needed related to the experimental setup, more specifically the in vitro specimens fixation and the environment control of the experiment room. In addition, energy harvesting to create self powering systems to avoid exernal links or finite-life alternatives are also a necessity for future instrumented implants. This work further demonstrated the potential of capacitive technologies to monitor the bone-implant fixation. Therefore, it also contributed towards the design of a new era of high-sophisticated implantable medical devices.Distúrbios musculares estão a tornar-se um fardo cada vez maior para a sociedade atual, e, como resultado, milhões de artroplastias são realizadas anualmente por todo o mundo. Apesar da artroplastia estar reconhecida entre os procedimentos mais bem sucedidos do último século, ainda se observa uma taxa de falha em implantes de cerca de 10%. Estes números realçam a necessidade das tecnologias conseguirem fornecer um diagnóstico preciso da interface osso-implante, podendo reduzir significativamente a necessidade de cirurgias de revisão. Este trabalho tem como objetivo avaliar o desempenho de um implante instrumentado para monitorizar a estabilidade em implantes, utilizando uma tecnologia capacitiva planar. De forma a verificar o efeito de uma inserção completa em espécimes biológicos, um circuito impresso de dimensões 5x10x0.8 mm com dois elétrodos de 5x2 mm foi fabricado com o objetivo de ser integrado dentro de um implante. O implante foi projetado com uma geometria cónica, de forma a obter uma fixação press-fit, com diâmetros mínimo/máximo de 12 e 15 mm, respetivamente, e um comprimento de 55 mm. Depois de implantado, o sistema foi posto sobre ciclos de compressão e de descompressão de forma a alterar a interface osso-implante. Nos ciclos de compressão, os valores observados da capacidade decresceram, indicando que o sensor se estava a afastar do osso; contrariamente, nos ciclos de descompressão, a capacidade tendia a aumentar com o descarregamento. Os valores foram obtidos no intervalo de [2.2090; 3.0764] pF para os ciclos de compressão e de [1.9806; 3.1841] pF para a descompressão. A percentagem média de variação da capacidade para os ciclos de compressão foi de 3.67% e de 5.06% para os de descompressão, indicando uma maior taxa de variação nos ciclos de descompressão. Adicionalmente, foram realizados testes em que o implante e o sensor foram rodados 90 e 180 de forma a verificar o efeito de interfaces diferentes na capacidade medida. Estes últimos testes permitiram também corroborar a validade dos testes de compressão e descompressão, visto que orientações diferentes do sensor deveriam dar tendências diferentes nas curvas de capacidade. No entanto ainda é necessário um desenvolvimento adicional relativamente ao setup experimental, mais concretamente na fixação dos espécimes biológicos durante os ensaios in vitro, assim como no controlo das condições ambiente do laboratório. Adicionalmente, o desenvolvimento de sistemas de energy harvesting são uma necessidade para o futuro dos implantes instrumentados de forma a ter um sistema auto-sustentável, evitando ligações com o exterior ou soluções de vida limitada. Este trabalho permitiu comprovar o potencial de tecnologias capacitivas para a monitorização do estado da interface osso-implante. Assim, também contribuiu para o desenvolvimento de uma nova era de dispositivos médicos implantáveis altamente sofisticados.Mestrado em Engenharia Mecânic

Certificação de idoneidade formativa do serviço de medicina interna do Hospital de São Bernardo

Na formação inicial de Enfermagem os ensinos clínicos são um momento de consolidação de saberes teóricos e simultaneamente um momento de aquisição de saberes práticos em contexto real de trabalho. Este momento de formação é supervisionado por Enfermeiros da prática clínica que assumem um importante papel no processo de formação dos estudantes de enfermagem. Para consolidar este processo de ensino/aprendizagem a Ordem dos Enfermeiros desenvolveu um extenso trabalho que visa a certificação de Enfermeiros Supervisores, em que propõe que os Licenciados em Enfermagem, realizem um período de Exercício Profissional Tutelado, acompanhados por esse mesmo Enfermeiro Supervisor. Para que esse período ocorra é necessário a convergência de dois fatores, um é a existência de um Enfermeiro Supervisor certificado pela Ordem dos Enfermeiros, outro é a certificação do serviço onde esse exercício profissional tutelado decorra, num espaço onde exista Certificação de Serviço com Idoneidade Formativa certificada pela Ordem dos Enfermeiros. Para que tal aconteça é necessário que o supervisor e o serviço cumpram os critérios preconizados pela Ordem dos Enfermeiros. Este trabalho surge com o objetivo de certificar o Serviço de Medicina Interna do Hospital de São Bernardo como unidade de saúde com Idoneidade Formativa certificada pela Ordem dos Enfermeiros para o Exercício Profissional Tutelado, naquele que é inerente ao Modelo de Desenvolvimento Profissional proposto pela Ordem dos EnfermeirosThe initial training of nursing clinical teaching is a time of consolidation of academic knowledge and simultaneously a moment of acquisition of practical skills in a real work environment. This time of training is supervised by nurses in clinical practice that play an important role in the training of nursing students process. To consolidate this process of teaching/learning the Nursing Council developed an extensive work aimed at Supervisors Nurses certification, and propose that the Licensed Nursing, undertake a period of Exercise Tutored Professional, accompanied by the same nurse supervisor. For this period occurs is necessary convergence of two factors, one is the existence of a Nurse Supervisor Certified by the Nursing Council, the other is the certification of service where that tutored professional practice arises in a space where there is service certification with the reputation Formative certified by the Nursing Council. For this to happen it is necessary that the supervisor and the service meet the criteria established by the Nursing Council. This work appears in order to make the Internal Medicine Service of the Hospital de São Bernardo as a health unit with Formative Reputation certified by the Nursing Council for the Professional Practice Tutored in what is inherent in the Professional Development Model proposed by the Nursing Council

A revisão textual em contexto institucional: relatório de estágio

O presente relatório tem como objetivo apresentar o trabalho desenvolvido durante o estágio realizado no Gabinete de Imagem e Comunicação da Unidade Hospitalar de Portimão do Centro Hospitalar do Algarve, no âmbito do Mestrado em Ciências da Linguagem da Faculdade de Ciências Humanas e Sociais da Universidade do Algarve. Com duração de 400 horas de trabalho, o estágio foi realizado entre setembro e dezembro de 2016. Durante este período, foram realizadas atividades de revisão textual e tradução, bem como tarefas do foro da comunicação institucional, entre as quais contacto com a comunicação social e organização de eventos. O relatório começará por apresentar o enquadramento do estágio, explicando o seu funcionamento e apresentando o Gabinete de Imagem e Comunicação, seguindo-se a exposição do trabalho realizado. Este estágio foi realizado na área da Revisão Textual e irá começar com uma apresentação do estado da arte. De seguida serão apresentadas duas questões selecionadas para figurarem neste relatório, pela sua relevância e por se terem provado problemáticas ao longo dos processos de revisão: a pontuação e a aplicação do Acordo Ortográfico da Língua Portuguesa de 1990 (AO90). Serão ainda apresentados alguns dilemas do foro estilístico, que se detetaram com maior frequência ou que suscitaram dúvidas. Para os problemas expostos, serão apresentadas sugestões de correção devidamente justificadas. Para concluir, será feita uma reflexão sobre o trabalho realizado durante o estágio e uma análise sobre a necessidade da existência de um especialista em ciências da linguagem numa instituição deste género

Estudo do desempenho a longo prazo de aterros

Nos últimos anos na área dos aterros viários foram desenvolvidas essencialmente duas linhas de investigação. A primeira corresponde à utilização de equipamentos de pequeno porte para controlo da compactação dos aterros. A segunda serve-se da teoria dos solos não saturados para explicar as deformações dos aterros a curto e a longo prazo. A presente tese é constituída por duas partes que juntam estas duas vertentes. Na primeira parte é avaliada a eficácia de novas metodologias de avaliação do desempenho em aterros viários, na ótica da sua deformabilidade e resistência, na segunda parte é apresentada a caracterização experimental e a modelação hidromecânica da resposta de um aterro considerando o efeito da sucção. Na primeira parte são utilizados os equipamentos de ensaio DIP e geogauge, que caracterizam a compacidade e a rigidez (deformabilidade) do meio, e o equipamento PDL, que possibilita estimar a compacidade e resistência do terreno. No aterro de uma barragem em construção foram realizados ensaios com estes equipamentos e com os métodos clássicos de controlo de aterros. A análise integrada destes resultados evidencia algumas tendências estatísticas entre os métodos clássicos e os resultados dos ensaios com o DIP, geogauge e PDL, bem como afasta a possibilidade, para o solo estudado, de estabelecer outras. Nos resultados obtidos é exposta a dualidade existente entre a compactação no lado seco e no lado húmido do ótimo Proctor. Esta dualidade conduz ao efeito do estado hídrico do solo – logo da sucção então instalada – nas propriedades estimadas experimentalmente. Na segunda parte é estudado o efeito da sucção na resposta hidromecânica laboratorial de uma areia bem graduada (SW, segundo os critérios da CUS). É demostrada a simulação do comportamento a longo prazo de aterros viários construídos nesse material, sob condições climáticas diversas e contrastantes, através de um modelo temporal de elementos finitos calculado no programa Code-Bright. Na modelação foi utilizado o modelo constitutivo BBM, de raiz inserida na Teoria dos Estados Críticos, cujos parâmetros elásticos, elastoplásticos e hídricos foram estimados com base num extenso programa laboratorial. Neste, foram realizados ensaios avançados para determinação da curva característica e da sua histerese, bem como ensaios de compressão isotrópica e triaxial, com ciclos de descarga-recarga

Compositional data analysis as a potential tool to study the (paleo)ecology of calcareous nannoplankton from the central portuguese submarine canyons (W off Portugal)

Submarine canyons are deep and steep incisions on the continental margins. The physical forcing mechanisms linked with these marine systems, such as the enhancement of upwelling and bottom sediment resuspension, are expected to provide a nutrient source that will increase phytoplankton density (Hickey, 1995, Kampf,2006). Coccolithophores are the predominant phytoplanktonic group within the calcareous nannoplankton and their sensitivity to a variety of surface water environmental parameters makes them important markers of oceanographic processes and proxies of sea surface water masses and temperatures, productivity and past climate changes (e.g. Ziveri et al., 2004; Silva et al., 2008). In the present work we propose to test compositional analysis (Buccianti & Esposito, 2004; Pawlowsky-Glahn & Egozcue, 2006) as a tool to: a) achieve a clearer distinction between opportunistic coastal-neritic species (r-strategists) and typical oceanic species (k-strategists) in the central Portuguese margin, and b) to identify a coccolith assemblage that might reflect favorable environmental conditions found in the vicinity of the canyon that promotes the productivity of calcareous nannoplankton. Our main difficulty will be in distinguishing the ecological signal from the effects of other environmental factors mentioned before (i.e. advection, dissolution, bottom resuspension). One way to infer the species’ ecological inter-relationships is by determining species relative percentages. The main concern is how the closure problem and the inconsistency of percentage determinations will affect our results. Compositional analysis was designed to provide more reliable and thus representative results, since the inference made on the coccolith assemblage features from which the data are drawn is correctly performed from a theoretical point of view (Buccianti & Esposito, 2004). Here, we present the first insights from applying compositional data analysis to coccolith assemblages from 85 surface sediment samples collected from the central Portuguese margin