Molecular and phytochemical analyses of the genus Origanum L. (Lamiaceae)

Die Gattung Origanum (Lamiaceae) umfaßt 43 Arten. Majoran (O. majorana) und Oregano (verschiedenen Origanum Arten) werden als Arznei- und Gewürzpflanzen genutzt. Die antimikrobielle und antioxidative Aktivität einiger Origanum Arten eröffnet auch eine Reihe von neuen Anwendungsfeldern in der Pharma-, Kosmetik- sowie Lebens- und Futtermittelindustrie. Origanum ist eine schwierige Gattung und nahezu alle seiner 9 Sektionen sind mit taxonomischen Unsicherheiten behaftet. Um das bestehende Gattungskonzept auf seine Anwendbarkeit zu prüfen wurden anhand von DNA-Sequenzinformation (ITS – Internal transcribes spacers; DXS – 1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase; psbA-trnH) die Verwandschaftsverhältnisse in der Gattung analysiert. Spezielle Aufmerksamkeit wurde hierbei Sektion Majorana gewidmet deren Mitglieder (O. majorana, O. syriacum, O. onites und O. dubium) zu den am stärksten genutzten Origanum Arten zählen (Lukas et al., in Vorbereitung). Die erarbeiteten Daten weisen O. onites und O. syriacum als alte Arten der Sektion Majorana aus. Origanum dubium ist eine Hybridart die Merkmale von O. onites, O. syriacum und einer dritten, unbekannten Art aufweist, O. majorana stammt direkt von O. syriacum ab. Die Analyse von fünf Mikrosatelliten-Loci zeigte, daß O. onites und O. dubium in ihrem Überschneidungsgebiet in der Türkei rezent miteinander hybridisieren. Die verwendeten SSR-Marker wurden anhand von „expressed sequence tags“ (ESTs) von O. vulgare entwickelt (Novak et al., 2007). Insgesamt dreizehn EST-SSR Loci wurden evaluiert. Alle der dreizehn Loci konnten auch in in der entfernt verwandten Art O. majorana amplifiziert werden und scheinen somit für evolutionäre Studien in der Gattung und eventuell auch in nah verwandten Gattungen wie Thymus oder Satureja geeignet. Für die Analyse der Mikrosatelliten wurde eine neue Methode entwickelt die auf High-resolution melting curve analyses (HRM) basiert (Mader et al., 2008). Bei der HRM wird im Anschluß and die PCR die Floureszenz eines interkalierenden Farbstoffes gemessen, der entsprechend eines Temperaturgradienten während der Dissoziation der doppelsträngigen DNA frei wird. Die Form der resultierenden Schmelzkurve ist spezifisch für das PCR-Produkt und hängt von GC-Gehalt, Länge und Sequenzkomposition des Amplikons ab. Zur Analyse von Mikrosatelliten werden die Schmelzkurven vergleichend analysiert und gruppiert. Zur korrekten Zuordnung von heterozygoten Proben werden die entsprechenden Schmelzkurven mit jenen von künstlichen DNA Mischungen homozygoter Proben verglichen. Die Methode hat sich als schnell, kostengünstig und sensitiver als herkömmliche Analyse-Methoden erwiesen. Im Zuge einer Untersuchung über die PPAR (peroxisome proliferator-activated receptors) Aktivierung durch Oregano oder Oregano-Komponenten wurden DNA-Seqenzanalysen (ITS und DXS) durchgeführt um den botanischen Ursprung des für die Studie verwendeten Pflanzenmaterials zu bestimmen (Müller et al., 2008). Im Falle handelsüblicher Oregano-Proben erlaubte die DNA-Analyse eine eindeutige Identifizierung des Pflanzenmaterials. Die Analyse von Oregano-Trockenextrakten erwies sich aufgrund der geringen Mengen an extrahierbarer DNA hingegen als schwierig. Bei der Arbeit mit DNA aus Trockenextrakten war eine Amplifikation von DXS nicht möglich, eine Amplifikation von ITS gelang lediglich bei einem Teil dieser Proben. Verschiedene Gruppen von Pflanzeninhaltsstoffen sind für den Gebrauch von Origanum Arten als Arznei- und Gewürzpflanzen verantwortlich. Zu den wichtigsten zählen hier die Mono- und Sesquiterpene (Bestandteile des ätherischen Öls) die für das Aroma und die antimikrobielle Aktivität verantwortlich sind. Um bestehende Wissenslücken über die intra- und interspezifische Variabilität dieser Inhaltsstoffe zu schließen, wurden Populationen ausgewählter Origanum Arten hinsichtlich dieser Inhaltsstoffe untersucht. In Populationen von korsischem O. vulgare waren drei verschiedene Chemotypen präsent: ein ‚cymyl’-Chemotyp mit Carvacrol oder Thymol als Hauptkomponente, ein ‚sabinyl’-Chemotyp mit hohem Gehalt an Sabinen und cis-Sabinenhydrat sowie ein ‚gemischter’Chemotyp (Lukas et al., 2008). Das Ätherische Öl von syrischem O. syriacum wurde von Thymol und/oder Carvacrol dominiert und enthielt außerdem hohe Mengen an Thymoquinon, einer für die Krebstherapie vielversprechende Substanz (Lukas et al., 2009). In Populationen von zypriotischem O. majorana wurden drei verschiedene Chemotypen detektiert: ein reiner sabinyl’-Chemotyp (mit typischem Majoran-Aroma), ein reiner alpha-terpineol-Chemotyp sowie ein ‚gemischter’ Chemotyp (Novak et al., 2008). Arbutin ist ein Inhaltsstoff der wegen seiner hohen biologischer Aktivität in Lebensmitteln unerwünscht ist. Eine umfassende Analyse ergab, daß O. dubium und O. majorana hohe Mengen an Arbutin anreichern und daß auch kommerziell gehandelter Majoran und Oregano hohe Arbutinmengen aufweisen. O. microphyllum, O. onites, O. saccatum, O. solymicum, O. husnucan-baseri, O. syriacum und O. vulgare enthalten nur geringe Mengen bzw. kein Arbutin (Lukas et al., 2010). Es wurde außerdem gezeigt, daß nur ein Gen für den Arbutin-Polymorphismus in Origanum verantwortlich ist. Durch gezielte Züchtungsarbeit wäre somit die Produktion von arbutinfreiem Majoran und Oregano möglich. Zur Analyse von Arbutin in Majoran und Beerenträubel-Blättern wurde eine neue, schnelle und selektive GC-Methode etabliert (Lamien-Meda et al., 2009). In der Gattung Origanum variiert die Komposition des Ätherischen Öls sowohl zwischen als auch innerhalb einzelner Arten. Um mehr über die genetischen Grundlagen der Chemotypen zu erfahren wurde ein Teil des γ-Terpinen Synthase Gens, ein Schlüssel-Gen für die Biosynthese der ‚cymyl’-Komponenten, sequenziert (Lukas et al., akzepiert). Sechs verschiedene Varianten des Gens wurden identifiziert wobei die Synthese der ‚cymyl’-Komponenten an das Vorhandensein bestimmter Genvarianten gebunden war. Die Komposition des Ätherischen Öls wird aber auch von Umweltfaktoren beeinflusst. Um den Einfluß der Temperatur zu untersuchen wurden Klone von O. vulgare x O. majorana (enthält ‘cymyl’- und ‘sabinyl’-Komponenten) und O. syriacum ssp. syriacum (enthält nur ‘cymyl’-Komponenten) unter unterschiedlichen Temperaturbedingungen kultiviert (Novak et al., akzeptiert). Die Biosynthese der wichtigsten ‚sabinyl’-Komponenten wurde durch die Temperatur nicht beeinflusst. Die Biosynthese der wichtigsten ‚cymyl’-Komponenten zeigte sich jedoch von der Temperatur beeinflusst.The genus Origanum (Lamiaceae) comprises 43 species and 18 hybrids. Majoram (O. majorana) and oregano (several Origanum species) have worldwide been used as kitchen herbs and folk remedies. The high antimicrobial and antioxidant activity of some Origanum species opens a wide range of further application possibilities of Origanum plant material in food-, feed-, pharmaceutical- and cosmetics-industry. The taxonomy of the genus Origanum is complex and nearly all of the nine sections are afflicted with taxonomic uncertainties. DNA sequence information of the two nuclear gene regions ITS (Internal transcribed spacers) and DXS (1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase) as well as of the chloroplast psbA-trnH intergenic spacer was used to test the currently accepted genus concept for its applicability. The investigation focused on the evolutionary relationships of the four essential oil rich taxa of section Majorana (O. majorana, O. onites, O. syriacum and O. dubium), which are amongst the most widely used Origanum species (Lukas et al., in preparation). The combined DNA data revealed O. onites and O. syriacum as ancient species in the section. Origanum dubium was found to be of hybridogeneous origin combining attributes of O. onites, O. syriacum and a third Origanum species that remained unknown. The results show that O. majorana directly derived from O. syriacum. Sequence analysis as well as the analysis of five microsatellite loci provided evidence for recent hybridisation between Turkish O. onites and O. dubium. The SSR markers used were developed from expressed sequence tags (ESTs) of essential oil glands of O. vulgare (Novak et al., 2007). In total, thirteen EST-SSR loci were evaluated using one population of O. vulgare and one of O. majorana. All primer developed for O. vulgare cross-amplified in the distantly related O. majorana and may therefore be useful for evolutionary analyses of the genus and of closely related Lamiaceae like Thymus or Satureja. To analyse microsatellites a novel strategy was introduced (Mader et al., 2008). HRM (high resolution melting curve analyses) is a technique that measures the decreasing fluorescence of an intercalating dye in the process of dissociation of double stranded DNA. The shape of the resulting melting curve depends on GC content, length and sequence composition of the amplicon. HRM can be used for microsatellite analysis but also for other codominant marker systems by implementing a protocol of comparative melting curve assignment. To aid the correct assignment of heterozygous samples artificial mixtures of homozygous samples have to be included. The method was shown to be fast, cheap and more sensitive than standard protocols for microsatellite analysis. In the course of an investigation dealing with PPAR (peroxisome proliferator-activated receptors) activation by oregano sequence analysis of ITS and DXS was performed to identify the botanical origin of the plant material investigated (Müller et al., 2008). In case of commercial plant material sequence analysis was useful to complement evidence from morphological characteristics. The two different DNA markers used allowed an unambigous determination of the respective plant material. In case of dried plant extracts sequence analysis was complicated by the tiny amounts of extractable DNA. When dealing with such traces of DNA the amplification of DXS was not possible and the amplification of ITS was successful for some of the dried extract samples only. Different groups of active compounds are responsible for the use of Origanum species as medicinal and aromatic plants. The most important are the mono- and sesquiterpenes, responsible for flavour and antimicrobial activity. Selected Origanum species were analysed for presence and quantity of these active compounds. In populations of Corsican O. vulgare three different chemotypes were present: a ‘cymyl’-type with either carvacrol or thymol as main compound, a ‘sabinyl’-type with large amounts of sabinene and cis-sabinene hydrate and a ‘mixed’ chemotype combining compounds of the ‘cymyl’- and the ‘sabinyl’-pathway (Lukas et al., 2008). In populations of Syrian O. syriacum the essential oil was dominated by carvacrol and/or thymol (Lukas et al., 2009). In Syrian O. syriacum thymoquinone, a promising substance for cancer therapy, was present in a wide range. Selected accessions of O. syriacum could be the basis for an oregano cultivar rich in thymoquinone. In populations of Cypriot O. majorana three different chemotypes were detected (Novak et al., 2008). Besides the standard ’marjoram’ composition (a pure ‘sabinyl’-chemotype), a pure alpha-terpineol chemotype and a mixed sabinyl/alpha-terpineol chemotype were also present. Arbutin, a hydroquinone derivate, is a substance non desired in the human diet. Within the genus Origanum the formation of arbutin is polymorphic, with arbutin present in considerable amounts (O. majorana and O. dubium), minor amounts (O. microphyllum, O. onites, O. saccatum, O. solymicum) or completely absent (O. husnucan-baseri, O. syriacum, O. vulgare) (Lukas et al., 2010). Whereas the most important commercial oregano species (O. onites and O. vulgare) contain no or only minor amounts of arbutin, marjoram (O. majorana) has considerably high amounts. From the results of an inheritance study it was concluded that only one gene is responsible for the arbutin polymorphism in Origanum. The absence of arbutin in O. vulgare and O. syriacum would enable the breeding of arbutin-free marjoram. For the analysis of arbutin in marjoram and bearberry a rapid and selective GC method was established (Lamien-Meda et al., 2009). Polymorphic essential oil variation can be observed among and within Origanum species. To learn more about the formation of essential oil chemotypes sequence analyses of the γ-terpinene synthase gene, a key enzyme in the biosynthesis of ‘cymyl’-compounds, were performed (Lukas et al., accepted). The analyses revealed six different variants of the gene. The formation of ‘cymyl’-compounds was associated with the presence of certain variants in a plant. In plants lacking these variants ‘cymyl’-compounds were absent or present in traces only. The composition of secondary metabolites is also modified by environmental conditions. To study the influence of temperature clones of O. vulgare x O. majorana (containing ‘cymyl’- and ‘sabinyl’-compounds) and O. syriacum ssp. syriacum (containing ‘cymyl’-compounds only) were cultivated at different temperature levels (Novak et al., accepted). The biosynthesis of the major ‘sabinyl’-compound was not effected by temperature while the biosynthesis of the major ‘cymyl’-compounds was significantly influenced

Akupunkturbehandlungsmodalitäten bei künstlicher Befruchtung – ein Vergleich der Behandlungspraxis in schweizerischen, deutschen und österreichischen Kinderwunschzentren mit Erhebungen in randomisierten kontrollierten Studien

One in 5 couples is affected by infertility. To increase the effectiveness of assisted reproductive technology (ART) adjuvant acupuncture treatments are frequently administered. However, little is known about acupuncture treatment modalities employed in fertility centers. The aim of our study was to assess modalities of acupuncture treatments in fertility centers and compare them with investigated acupuncture treatments in randomized controlled trials (RCTs) related to ART.Unerfüllter Kinderwunsch belastet jedes fünfte Paar. Zur Wirksamkeitssteigerung der künstlichen Befruchtung werden oftmals Akupunkturbehandlungen durchgeführt. Wenig ist über die Akupunkturbehandlungsmodalitäten in Kinderwunschzentren bekannt. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, diese zu erfassen und mit den in randomisierten kontrollierten Studien (RCTs) untersuchten Akupunkturbehandlungsmodalitäten zu vergleichen. Methoden: 180 Kinderwunschkliniken, die auf den Webseiten der schweizerischen, deutschen und österreichischen reproduktionsmedizinischen Vereinigungen aufgeführt waren, wurden zur Teilnahme an einer Onlinebefragung über das Akupunkturangebot bei künstlicher Befruchtung eingeladen. Die Umfrageergebnisse wurden den Angaben aus 17 RCTs gegenübergestellt. Ergebnisse: Akupunktur wird von 33 (38,4%) aller an der Umfrage beteiligten Kinderwunschkliniken (n = 86) angeboten (Rücklaufquote = 47,8%). Die Wahl der Akupunkturpunkte ist in 39,4% der Kliniken standardisiert, in 24,2% semi-standardisiert und in 27,3% erfolgt sie individuell nach TCM-Diagnose. Körperakupunktur mit Nadelstimulierung wurde am häufigsten genannt (84,8%). In einigen Kliniken wird ergänzend zur Körperakupunktur auch Ohrakupunktur (24,2%) und Moxibustion (21,2%) angewendet. Die Leistungserbringer sind überwiegend ärztliche Akupunkturtherapeuten (84,8%). Im Vergleich zu den RCTs wurden große Unterschiede hinsichtlich Bestimmung der Akupunkturpunkte, Stimulierungsverfahren und beruflichem Hintergrund der Akupunktur-Leistungserbringer festgestellt. Schlussfolgerungen: Weniger als 40% aller Akupunktur anbietenden Kinderwunschkliniken im deutschsprachigen Raum verwenden standardisierte Akupunkturpunkteprotokolle. Um die externe Validität der Aku- punkturforschung in der Reproduktionsmedizin zu erhöhen und die klinische Wirksamkeit dieser adjuvanten Behandlungsform zu untersuchen, sollten in zukünftigen Studien semi-standardisierte und individuelle Bestimmungen der Akupunkturpunkte berücksichtigt und der Einsatz von angelerntem Personal vermieden werde

Identifizierung biotischer Verunreinigungen durch Hochdurchsatzsequenzierung

Identification of biotical impurities by next-generation sequencin

Engineering vacuolar sorting pathways for efficient secretion of recombinant proteins

Recombinant protein production is an expanding branch of biotechnology with increasing economic importance. Currently, 20% of biopharmaceutical proteins and approximately half of the industrial enzymes are produced in yeasts. Many proteins are efficiently secreted by yeast systems, reaching product titers in the g L-1 range. The expression of more complex proteins, however, may overwhelm the folding and secretion capacity of the host cells. This triggers the unfolded protein response (UPR), which aims at restoring endoplasmic reticulum (ER) homeostasis. The UPR, in turn, is thought to activate ER-associated protein degradation (ERAD). Alternatively, trafficking of correctly folded proteins can be hampered on their way to the cell exterior leading e.g. to missorting and subsequent degradation in the vacuole. The methylotrophic yeast Pichia pastoris (Komagataella spp.) is a popular microbial host for the production of recombinant proteins. Vacuolar protein sorting has not been investigated in detail so far in P. pastoris, although there were a few indications that vacuolar mistargeting of recombinant products might occur also in this yeast. Thus we engineered the vacuolar sorting pathways in P. pastoris and investigated their impact on extracellular product titers as well as intracellular localization of the recombinant secretory product. Thereby, differences between vps (vacuolar protein sorting) mutant strains disrupted in genes involved either in the CORVET or the HOPS tethering complexes became obvious. Moreover, we were able to show that engineering of the vacuolar sorting pathways has a positive impact on heterologous protein secretion, however, in some cases simultaneous inactivation of specific vacuolar proteases was necessary. Taken together, these studies allowed us to gain deeper insight into the pathways leading to intracellular degradation of recombinant secretory proteins. Based on these findings, approaches how to efficiently adapt the host cell’s secretion capacity will be presented, which confirm that impairment of vacuolar protein sorting is an effective means of enhancing secretion of heterologous proteins

Recent advances in measurement techniques for atmospheric carbon monoxide and nitrous oxide observations

International audienceCarbon monoxide (CO) and nitrous oxide (N 2 O) are two key parameters in the observation of the atmosphere, relevant to air quality and climate change, respectively. For CO, various analytical techniques have been in use over the last few decades. In contrast, N 2 O was mainly measured using gas chromatography (GC) with an electron capture detector (ECD). In recent years, new spectroscopic methods have become available which are suitable for both CO and N 2 O. These include infrared (IR) spectroscopic techniques such as cavity ring-down spectroscopy (CRDS), off-axis integrated cavity output spectroscopy (OA-ICOS) and Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR). Corresponding instruments became recently commercially available and are increasingly used at atmospheric monitoring stations. We analysed results obtained through performance audits conducted within the framework of the Global Atmosphere Watch (GAW) quality management system of the World Meteorology Organization (WMO). These results reveal that current spectroscopic measurement techniques have clear advantages with respect to data quality objectives compared to more traditional methods for measuring CO and N 2 O. Further , they allow for a smooth continuation of historic CO and N 2 O time series. However, special care is required concerning potential water vapour interference on the CO amount fraction reported by near-IR CRDS instruments. This is reflected in the results of parallel measurement campaigns, which clearly indicate that drying the sample air leads to an improved accuracy of CO measurements with such near-IR CRDS instruments

Genetic differentiation between breeding lines, commercial samples and wild populations of Rooibos (Aspalathus linearis (Burm f.) R. Dahlgren)

Rooibos (Aspalathus linearis (Burm.f.) R. Dahlgren, Fabaceae), ist eine weltweit beliebte Teepflanze, die bisher aus dem Anbau von Wildpflanzen und deren klonaler Vermehrung gewonnen wurde. Ziel dieser Arbeit war es, mit molekularen Markern neue Zuchtlinien von Rooibos zu charakterisieren und ihre genetische Verwandtschaft und ihre Positionierung gegenüber handelsüblichen Herkünften und Wildpopulationen zu bestimmen. Es wurden sequenzbasierte Marker entwickelt, die mit HRM (High-Resolution-Melting) ausgewertet wurden. Mit elf molekularen Markern wurden insgesamt 91 Proben aus fünf Zuchtlinien, zwei Herkünften aus kommerziellem Anbau und eine Wildsammlungsherkunft untersucht. Die statistische Auswertung mittels Diskriminanzanalyse ergab eine nahe Verwandschaft der Zuchtlinien 16, 27 und 50, während die Selektion 48 genetisch am weitesten entfernt war. Die Linien 16 und 27 scheinen sogar genetisch ident zu sein. Die Selektionen waren von allen kommerziellen Proben und den Wildproben unterscheidbar, bei den Selektionen 32 und 50 war die Differenzierbarkeit allerdings mit einer größeren statistischen Unsicherheit behaftet, was durch die höhere Heterogenität dieser beiden Selektionen bedingt war. Eine statistisch besser abgesicherte Identifizierung wäre über zusätzliche Proben erreichbar. Die genetischen Analysen eignen sich gut für eine Identifizierung der Zuchtlinien bei vegetativer Vermehrung und lassen sich für eine weitere Zuchtund Vermehrungsplanung einsetzen.Roobios (Aspalathus linearis (Burm.f.) R. Dahlgren, Fabaceae) is a popular tea plant, so far produced by cultivating vegetatively propagated wild material. Aim of this work was the characterisation of newly derived breeding lines of Rooibos with molecular markers, the determination of their genetic relationships and the differentiation of breeding material to commercial samples and wild populations. Sequence-derived molecular markers were developed and analyzed with HRM (High-Resolution Melting). In total, 91 samples out of five breeding lines, two different accessions of commercial samples and one accession from the wild were analyzed with 11 molecular markers. Discriminant analysis showed a close relationship between breeding lines 16, 27 and 50, whereas the selection 48 was more distant. Lines 16 and 27 seem to be even genetically identical. All selections were distinguishable from the commercial samples and the wild accession. Anyhow, differentiation of lines 32 and 50 was statistically uncertain caused by the higher heterogeneity of these two lines. An improved statistical quality can be reached with additional samples. The genetical analysis is suitable for an identification of vegetatively propagated breeding lines and can be used for optimizing further breeding- and propagation planning

Komagataella phaffii Erp41 is a protein disulfide isomerase with unprecedented disulfide bond catalyzing activity when coupled to glutathione

In the methylotrophic yeast Komagataella phaffii, we identified an ER-resident protein disulfide isomerase (PDI) family member, Erp41, with a peculiar combination of active site motifs. Like fungal ERp38, it has two thioredoxin-like domains which contain active site motifs (a and a'), followed by an alpha-helical ERp29c C-terminal domain (c domain). However, while the a domain has a typical PDI-like active site motif (CGHC), the a' domain instead has CGYC, a glutaredoxin-like motif which confers to the protein an exceptional affinity for GSH/GSSG. This combination of active site motifs has so far been unreported in PDI-family members. Homology searches revealed ERp41 is present in the genome of some plants, fungal parasites and a few non-conventional yeasts, among which are Komagataella spp. and Yarrowia lipolytica. These yeasts are both used for the production of secreted recombinant proteins. Here, we analyzed the activity of K. phaffii Erp41. We report that it is non-essential in K. phaffii, and that it can catalyze disulfide bond formation in partnership with the sulfhydryl oxidase Ero1 in vitro with higher turnover rates than the canonical PDI from K. phaffii, Pdi1, but slower activation times. We show how Erp41 has unusually fast glutathione-coupled oxidation activity and relate it to its unusual combination of active sites in its thioredoxin-like domains. We further describe how this determines its unusually efficient catalysis of dithiol oxidation in peptide and protein substrates

Surface ozone in the Southern Hemisphere : 20 years of data from a site with a unique setting in El Tololo, Chile

The knowledge of surface ozone mole fractions and their global distribution is of utmost importance due to the impact of ozone on human health and ecosystems and the central role of ozone in controlling the oxidation capacity of the troposphere. The availability of long-term ozone records is far better in the Northern than in the Southern Hemisphere, and recent analyses of the seven accessible records in the Southern Hemisphere have shown inconclusive trends. Since late 1995, surface ozone is measured in situ at "El Tololo", a high-altitude (2200ma.s.l.) and pristine station in Chile (30°S, 71°W). The dataset has been recently fully quality controlled and reprocessed. This study presents the observed ozone trends and annual cycles and identifies key processes driving these patterns. From 1995 to 2010, an overall positive trend of ∼ 0.7ppb decade−1 is found. Strongest trends per season are observed in March and April. Highest mole fractions are observed in late spring (October) and show a strong correlation with ozone transported from the stratosphere down into the troposphere, as simulated with a model. Over the 20 years of observations, the springtime ozone maximum has shifted to earlier times in the year, which, again, is strongly correlated with a temporal shift in the occurrence of the maximum of simulated stratospheric ozone transport at the site. We conclude that background ozone at El Tololo is mainly driven by stratospheric intrusions rather than photochemical production from anthropogenic and biogenic precursors. The major footprint of the sampled air masses is located over the Pacific Ocean. Therefore, due to the negligible influence of local processes, the ozone record also allows studying the influence of El Niño and La Niña episodes on background ozone levels in South America. In agreement with previous studies, we find that, during La Niña conditions, ozone mole fractions reach higher levels than during El Niño conditions