Avances en el conocimiento del patógeno de peces "Tenacibaculum maritimum", implicaciones en el diagnóstico y prevención de la enfermedad

En esta memoria hemos llevado a cabo la caracterización bioquímica, serológica y molecular de Tenacibaculum maritimum, agente causal de la tenacibaculosis o flexibacteriosis, enfermedad que causa importantes pérdidas en el cultivo de peces. Asimismo, determinamos la presencia de mecanismos de captación de hierro y los aspectos epizootiológicos de este microorganismo.In this work we conducted the biochemical, antigenical and molecular characterization of Tenacibaculum maritimum, the etiological agent of tenacibaculosis or flexibacteriosis. This disease constitutes one of the main problems in marine aquaculture, causing serious mortalities and hence severe economic losses. Likewise the presence of iron uptake mechanisms and the epizootiological aspects of this microorganism were also determined

Premio a la Investigación e Innovación Educativa: Experiencias 2021

232 pàginasEstas experiencias pedagógicas de investigación e innovación son la muestra de las resistencias que surgen desde la escuela para enfrentar un mundo convulsionado por la violencia, la crisis existencial, el cambio climático y la incertidumbre, pues son los maestros y maestras quienes al reflexionar sobre su práctica logran llevar al máximo todo su poder transformador y mantener viva la esperanza en la siguiente generación. Por ello, la Secretaría de Educación del Distrito (SED) y el Instituto para la Investigación Educativa y el Desarrollo Pedagógico (IDEP), se enorgullecen en ofrecer a Bogotá y al país esta obra que contiene las propuestas ganadoras del XV Premio a la Investigación e Innovación.Serie Premio n.º 5, de 202

Producción de substancias inhibitorias entre bacterias de biopelículas en substratos marinos (Artículo en español)

Se estudió la relación antagónica entre bacterias bénticas que conforman biopelículas en diferentes substratos marinos. Se examinó un total de 29 cepas aisladas a partir de la macroalga Lessonia nigrescens y los substratos artificiales utilizados en el asentamiento de larvas de ostión (Argopecten purpuratus) y abalón (Haliotis discus hannai). Además, se realizaron ensayos de antibiosis de los 29 aislados contra una bacteria conocida por producir substancias inhibitorias (Vibrio C33). Los resultados confirmaron la ocurrencia de interacciones antagonistas entre los microorganismos aislados a partir de la microbiota adherida a superficies marinas (20,7%). En ninguna de las 329 pruebas de inhibición, se detectó actividad auto-inhibitoria entre los morfotipos seleccionados. L. nigrescens mostró una población microbiana estable con la dominancia de cuatro cepas, siendo una bacteria del grupo ß-Proteobacteria (SL5) susceptible a las substancias inhibitorias producidas en el mismo microhábitat. Actividad inhibitoria entre bacterias aisladas de colectores de ostión fue observada solamente con un Vibrio sp. (7,7%). Al evaluar el efecto de la cepa Vibrio C33 contra los 29 aislados, detectamos un efecto antibacteriano frente al 53,8% de las cepas aisladas de los colectores de ostión. No se observaron efectos inhibitorios en los ensayos realizados con las cepas aisladas de la macroalga y colectores de abalón. El análisis filogenético de las cepas susceptibles al Vibrio C33 mostró que todas las bacterias pertenecen al grupo ?-Proteobacteria. Los resultados indican que la producción de substancias inhibitorias es un fenómeno común entre bacterias aisladas de biopelículas, causando ventajas competitivas sobre otras bacterias y jugando importante rol en el control de funciones en microhábitat epifíticos

Producción de substancias inhibitorias entre bacterias de biopelículas en substratos marinos (Artículo en español)

Se estudió la relación antagónica entre bacterias bénticas que conforman biopelículas en diferentes substratos marinos. Se examinó un total de 29 cepas aisladas a partir de la macroalga Lessonia nigrescens y los substratos artificiales utilizados en el asentamiento de larvas de ostión (Argopecten purpuratus) y abalón (Haliotis discus hannai). Además, se realizaron ensayos de antibiosis de los 29 aislados contra una bacteria conocida por producir substancias inhibitorias (Vibrio C33). Los resultados confirmaron la ocurrencia de interacciones antagonistas entre los microorganismos aislados a partir de la microbiota adherida a superficies marinas (20,7%). En ninguna de las 329 pruebas de inhibición, se detectó actividad auto-inhibitoria entre los morfotipos seleccionados. L. nigrescens mostró una población microbiana estable con la dominancia de cuatro cepas, siendo una bacteria del grupo ß-Proteobacteria (SL5) susceptible a las substancias inhibitorias producidas en el mismo microhábitat. Actividad inhibitoria entre bacterias aisladas de colectores de ostión fue observada solamente con un Vibrio sp. (7,7%). Al evaluar el efecto de la cepa Vibrio C33 contra los 29 aislados, detectamos un efecto antibacteriano frente al 53,8% de las cepas aisladas de los colectores de ostión. No se observaron efectos inhibitorios en los ensayos realizados con las cepas aisladas de la macroalga y colectores de abalón. El análisis filogenético de las cepas susceptibles al Vibrio C33 mostró que todas las bacterias pertenecen al grupo ?-Proteobacteria. Los resultados indican que la producción de substancias inhibitorias es un fenómeno común entre bacterias aisladas de biopelículas, causando ventajas competitivas sobre otras bacterias y jugando importante rol en el control de funciones en microhábitat epifíticos

Utilización de biopelículas bacterianas en el asentamiento de larvas de Argopecten purpuratus (Lamarck 1819) en un hatchery comercial

Una de las etapas crítica en la producción artificial de ostión en cultivo comercial o �hatcheries� es el asentamiento artificial de post-larvas realizados sobre colectores de netlon. Este procedimiento es comúnmente utilizado en Chile, obteniendo resultados de asentamientos variables e irregulares. En el presente estudio se evaluó la factibilidad de realizar pre-tratamientos o �biologización� en los colectores de asentamiento utilizando cepas de biopelículas bacterianas específicas, las cuales podrían favorecer el asentamiento y metamorfosis de larvas de ostión. Se aislaron tres cepas bacterianas desde la superficie de colectores con altos porcentajes de asentamiento larval. Los colectores se expusieron en forma simple y combinadas a las bacterias seleccionadas para comparar a) el asentamiento en los tratamientos con bacterias y b) en condiciones normales de cultivo. Un segundo grupo de colectores en las mismas condiciones antes descritas se incubó con adición de peptona y extracto de levadura para aumentar el desarrollo de las películas bacterianas en la superficie de los colectores. Los resultados sugieren un incremento en el asentamiento de post-larvas de los colectores tratados con las bacterias perifíticas y adición de nutriente con respecto a los controles. En los resultados obtenidos sobre la sobrevivencia después de 30 días de cultivo en el mar, se detectó un significativo número de semillas en los colectores tratados con la combinación de las tres cepas de bacterias siendo 243,45% mayor que el control. Los resultados indican que es aconsejable el empleo de bacterias perifíticas en la etapa de asentamiento larval

Establecimiento de bacterias benéficas en el tracto digestivo y gónada de adultos de Argopecten purpuratus (Lamarck, 1819) en cultivo masivo

El objetivo del presente estudio es evaluar la factibilidad de establecer las bacterias benéficas 11, C33 y 77 en el tracto digestivo de reproductores de Argopecten purpuratus y determinar la infección gonadal de los organismos tratados, utilizando como vector de incorporación cultivos axénicos de Isochrysis galbana. El estudio se realizó en tres etapas experimentales: 1) �in vitro�, correspondiente a experiencias de ingestión de bacterias benéficas, 2) ensayos pilotos, en estanques de 200 L y 3) ensayos masivos en estanques de 2000 L en un cultivo comercial. Los resultados de ingestión en adultos de A. purpuratus revelaron la ingestión de las cepas 11 y C33 en un 92% (P<0,05). Al evaluar el establecimiento en el tracto digestivo de los ejemplares alimentados con la dieta I. galbana asociada a las cepas 11, C33 y 77 (Microalga y Bacterias Probióticas, MBP), sólo se detectó la presencia de la cepa 11 (41,8%). El análisis de los cortes histológicos reveló en los organismos expuestos al tratamiento de dieta MBP un incremento de bacterias adheridas a las microvellosidades del tracto digestivo. Los resultados en los ensayos masivos mostraron el asentamiento de la cepa 11 en todos los ejemplares alimentados con la dieta MBP, fluctuando entre 34,12 a 75,64% UFC x g-1. De igual modo, se detectó la infección gonadal de los organismos examinados mediante cultivos tradicionales. Nuestros resultados permiten concluir que es factible utilizar el vector alimento para establecer la cepa 11 en el tracto digestivo y gónada de A. purpuratus. Además, la adición de estas bacterias no causa efectos negativos en la sobrevivencia de reproductores de estos organismos

Serological diversity in Flavobacterium psychrophilum: A critical update using isolates retrieved from Chilean salmon farms

International audienceChile is currently the second largest producer of farmed salmon worldwide, but Flavobacterium psychrophilum, as one of the most detrimental pathogens, is responsible for major losses during the freshwater culturing step in salmonid fish farms. An antigenic study conducted 10 years ago reported four serological groups using 20 F. psychrophilum Chilean strains. To reduce disease outbreaks and to develop vaccine candidates, antigenic knowledge needs to be regularly updated using a significant number of additional recent F. psychrophilum isolates. The present study aimed at investigating the serological diversity of 118 F. psychrophilum isolates collected between 2006 and 2018 from farmed Atlantic salmon (Salmo salar), rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) and coho salmon (Oncorhynchus kisutch). The current study supports an expansion of the known antigenic groups in Chile from 4 to 14. However, the use of the slide-agglutination technique for serotyping is costly, is labour-intensive and requires significant technical expertise. Addressing these points, the mPCR-based procedure was a very useful tool for serotyping the collected Chilean F. psychrophilum isolates. This technique revealed the presence of diverse mPCR serotypes (i.e. types 0, 1, 2 and 4). Therefore, mPCR should be employed to select the bacterial strain(s) for vaccine development and to conduct follow-up, selective breeding or epidemiological surveillance in Chilean fish farms. Given the presented findings, changes to Chilean fish-farming practices are vital for ensuring the continued productivity and well-being of farmed salmonids

Evaluation of different DNA-based fingerprinting methods for typing Photobacterium damselae ssp. piscicida

This study evaluates the effectiveness of three different molecular techniques, repetitive extragenic palindromic PCR (REP-PCR), enterobacterial repetitive intergenic consensus sequence PCR (ERIC-PCR) and the random amplified polymorphic DNA (RAPD-PCR) for rapid typing of Photobacterium damselae ssp. piscicida strains isolated from different species of marine fish and geographic areas. The results obtained by the three methods showed that RAPD and ERIC-PCR were more discriminative for suitable rapid typing of Ph. damselae ssp. piscicida than REP-PCR. The analysis of DNA banding patterns generated by both molecular methods (RAPD and ERIC-PCR) clearly separated the strains into two main groups that strongly correlated with their geographic origin. Moreover, the REP-PCR analysis was less reproducible than the RAPD and ERIC-PCR methods and does not allow the establishment of genetic groups. RAPD and ERIC-PCR constitute valuable tools for molecular typing of Ph. damselae ssp. piscicida strains, which can be used in epidemiological studies of photobacteriosis infection

The fish pathogen Vibrio ordalii under iron deprivation produces the siderophore piscibactin

Vibrio ordaliiis the causative agent of vibriosis, mainly in salmonid fishes, and its virulencemechanisms are still not completely understood. In previous works we demonstrated thatV. ordaliipossess several iron uptake mechanisms based on heme utilization and siderophore production.The aim of the present work was to confirm the production and utilization of piscibactin as asiderophore byV. ordalii. Using genetic analysis, identification by peptide mass fingerprinting (PMF)of iron-regulated membrane proteins and chemical identification by LC-HRMS, we were able toclearly demonstrate thatV. ordaliiproduces piscibactin under iron limitation. The synthesis andtransport of this siderophore is encoded by a chromosomal gene cluster homologous to another onedescribed inV. anguillarum, which also encodes the synthesis of piscibactin. Usingβ-galactosidaseassays we were able to show that two potential promoters regulated by iron control the transcriptionof this gene cluster inV. ordalii. Moreover, biosynthetic and transport proteins corresponding topiscibactin synthesis and uptake could be identified in membrane fractions ofV. ordaliicells grownunder iron limitation. The synthesis of piscibactin was previously reported in other fish pathogenslikePhotobacterium damselaesubsp.piscicidaandV. anguillarum, which highlights the importance ofthis siderophore as a key virulence factor in Vibrionaceae bacteria infecting poikilothermic animalsThis work was supported by Grants CONICYT/FONDAP/15110027 and FONDECYT Nº 1190283 from the Comisión Nacional de Investigación Científica y Tecnológica (CONICYT, Chile), and by grants AGL2015-63740-C2-1-R and AGL2015-63740-C2-2-R from the State Agency for Research (AEI) of Spain, both co-funded by the FEDER Programme from the European Union. Grants from Xunta de Galicia (Spain) supporting work at University of Santiago de Compostela (grant GRC2018/18) and University of A Coruña (grant GRC2018/39 and CICA-INIBIC support ED431E2018/03) are also acknowledgedS