Design, Synthesis And Characterization Of New Two-photon Absorbing (2pa) Fluorescent Dyes And Bioconjugates, And Their Applications In Bioimaging

The development of new multiphoton absorbing materials has attracted the attention of researchers for the last two decades. The advantages that multiphoton absorbing materials offer, versus their one-photon absorbing counterparts, rely on the nature of the nonlinearity of the absorption process, where two photons are absorbed simultaneously offering increased 3D resolution, deeper penetration, and less photobleaching and photodamage as a result of a more confined excitation. The applications of efficient two-photon absorbing materials have been extensively expanding into the fields of photodynamic therapy, microscopy, and optical data storage. One of the fields where an increased interest in multiphoton absorbing materials has been most evident is in bioimaging, in particular, when different cellular processes and organelles need to be studied by fluorescence microscopy. The goal of this research was to develop efficient two-photon absorption (2PA) compounds to be used in fluorescence bioimaging, meaning that such compounds need to posses good optical properties, such as high fluorescence quantum yield, 2PA cross section, and photostability. In the first chapter of this dissertation, we describe the synthesis and structural characterization of a new series of fluorescent donor–acceptor and acceptor-acceptor molecules based on the fluorenyl ring system that incorporated functionalities such as alkynes and thiophene rings, through efficient Pd-catalyzed Sonogashira and Stille coupling reactions, in order to increase the length of the conjugation in our systems. These new molecules proved to have high two-photon absorption (2PA), and the effect of these functionalities on their 2PA cross section values was evaluated. Finally, their use in two-photon fluorescence microscopy (2PFM) imaging was demonstrated. iii One of the limitations of the compounds described in Chapter 1 was their poor water solubility; this issue was addressed in Chapter 2. The use of micelles in drug delivery has been shown to be an area of increasing interest over the last decade. In the bioimaging field, it is key to have dye molecules with a high degree of water solubility to enable cells to uptake the dye. By enclosing a hydrophobic dye in Pluronic® F-127 micelles, we developed a system that facilitates the use of 2PA molecules (typically hydrophobic) in biological systems for nonlinear biophotonic applications, specifically to image the lysosomes. Furthermore, we report in this chapter the efficient microwave-assisted synthesis of the dye used in this study. In addition, linear photophysical and photochemical parameters, two-photon absorption (2PA), and superfluorescence properties of the dye studied in Chapter 2, were investigated in Chapter 3. The steady-state absorption, fluorescence, and excitation anisotropy spectra of this dye were measured in several organic solvents and aqueous media. In Chapter 4, we describe the preparation and the use of an efficient and novel twophoton absorbing fluorescent probe conjugated to an antibody that confers selectivity towards the vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR-2) in porcine aortic endothelial cells that express this receptor (PAE-KDR). It is known that this receptor is overexpressed in certain cancer processes. Thus, targeting of this receptor will be useful to image the tumor vasculature. It was observed that when the dye was incubated with cells that do not express the receptor, no effective binding between the bioconjugate and the cells took place, resulting in very poor, nonspecific fluorescence images by both one and two-photon excitation. On the other hand, when the dye was incubated with cells that expressed VEGFR-2, efficient imaging of the cells was obtained, even at very low concentrations (0.4 μM). Moreover, incubation of the bioconjugate iv with tissue facilitated successful imaging of vasculature in mouse embryonic tissu

what role for central banking and supervisors to build a climate and environmental resilient financial system

O conceito de ‘Finanças Verdes’ surgiu como uma resposta à necessidade de compatibilizar a economia global com os esforços para combater as alterações climáticas e assim, prosseguir um desenvolvimento ambientalmente sustentável. Para o sistema financeiro, esta abordagem implica tratar dos riscos financeiros relacionados com o clima, que resultam dos impactos adversos das alterações climáticas, assim como das externalidades negativas decorrentes da transição para uma economia neutra na emissão de carbono. No entanto, os bancos centrais e os quadros regulamentares existentes negligenciaram até então estas fontes de risco, resultando numa ausência de informação financeira e nãofinanceira relativa à exposição dos bancos a riscos climáticos e numa potencial falta de credibilidade em produtos financeiros verdes e sustentáveis. Esta pesquisa visa definir, caracterizar e analisar os riscos financeiros relacionados com o clima no sector bancário, incluindo os desafios de adaptação das carteiras de empréstimos aos fatores de transmissão micro e macroeconómicos de riscos físicos e transitórios. Em particular, centra-se no papel da regulação e supervisão financeira, bem como dos bancos centrais no panorama internacional e, em particular, da União Europeia, a fim de assegurar um sistema financeiro sólido e estável face aos crescentes impactos adversos das alterações climáticas, nomeadamente na transformação dos fundamentos económicos e na mudança das preferências dos consumidores em direção a uma economia sustentável. Esse papel poderá implicar um alargamento dos mandatos dos supervisores financeiros e dos bancos centrais a fim de considerarem fatores de sustentabilidade nas suas tomadas de decisão. Seguindo uma abordagem tradicional baseada no risco, analisam-se os principais instrumentos micro e macroprudenciais à luz dos três pilares dos Acordos de Basileia, bem como possíveis alterações à política monetária e aos seus instrumentos financeiros tradicionais.The concept of "Green Finance" emerged as a response to the need of aligning the global economy with the efforts to fight climate change and thus, pursuing an environmentally sustainable development. For the financial system, this includes addressing climate-related financial risks, which arise from the adverse impacts of climate change, and the negative externalities of the transition to a carbonneutral economy. However, central banks and the existing regulatory frameworks have traditionally neglected these sources of risk, resulting in a lack of financial and non-financial information on banks' exposure to climate risks and a lack of trust in green and sustainable financial products. This research aims to define, characterise and analyse climate-related financial risks in the banking sector, including the challenges in adapting lending portfolios to physical and transitional micro and macroeconomic transmission channels. In particular, it focuses on the role of financial regulation and supervision, as well as central banks, in the international landscape (especially in the context of the European Union) to ensure a sound and stable financial system in light of the rising negative effects of climate change, the changing economic fundamentals, and shifting consumer preferences towards a sustainable economy. Furthermore, supervisors and central banks may be persuaded to prioritise sustainability factors in their decision-making processes, which may entail an extension of their mandates. Using a traditional risk-based approach, key micro and macroprudential instruments are analysed in the light of the three pillars of the Basel Accords, as well as possible changes to monetary policy and its traditional financial instruments

Perceções dos turistas sobre as práticas de sustentabilidade ambiental no turismo rural : o caso de São Miguel

Dissertação de Mestrado, Gestão de Empresas (MBA), 2 de Outubro de 2015, Universidade dos Açores.Este trabalho de investigação aborda a influência das práticas de sustentabilidade ambiental implementadas pelos empreendimentos de turismo rural sobre o processo de escolha do destino e o grau de satisfação com a visita. A partir de uma ampla revisão de literatura, expondo os conceitos e princípios mais pertinentes relacionados com a sustentabilidade do turismo rural, pretende-se determinar se os turistas procuram informação sobre as práticas ambientais adotadas antes de escolher o destino turístico, qual o grau de importância atribuído à implementação dessas práticas ambientais no destino turístico e nas unidades de alojamento turístico onde ficam hospedados e qual o grau de satisfação obtido após a estadia e se essas perceções e opiniões dependem das caraterísticas sociodemográficas dos turistas. A abordagem metodológica do estudo empírico engloba a construção e implementação de um questionário aos turistas que ficaram hospedados nas unidades de turismo rural na ilha de São Miguel, Açores, entre o segundo semestre de 2014 e o primeiro trimestre de 2015. Os resultados permitem confirmar que a implementação de práticas ambientais nos alojamentos do turismo rural influencia a decisão de compra do destino turístico e o nível de satisfação do turista. Para que haja um desenvolvimento sustentável da atividade turística, quer a nível ambiental, quer a nível social e económico, é necessária uma orientação para o desenvolvimento de produtos e serviços inovadores e diversificados, delineando estratégias que lhes confiram vantagens competitivas através da diferenciação, que assegurem a satisfação dos turistas.ABSTRACT: This research addresses the influence of environmental sustainability practices implemented by rural tourism accommodations over the process of choosing the destination and degree of satisfaction with the visit. From an extensive literature review and outlining the most relevant concepts and principles related to sustainability of rural tourism, we itend to determine if tourists look for information on the adopted environmental practices before choosing the tourist destination. Furthermore what degree of importance is assigned to the implementation of these environmental practices in the tourist destination and the tourist accommodations where they are staying, and what degree of satisfaction is obtained after the stay and if these perceptions and opinions depend on the sociodemographic characteristics of tourists. The methodological approach of the empirical study includes the construction and implementation of a questionnaire to tourists who have stayed in the rural tourism units on the island of São Miguel, Azores, between the second half of 2014 and the first quarter of 2015. The results confirm that the implementation of environmental practices in rural tourism accommodations influence the buying decision of the tourist destination and tourist satisfaction. To ensure a sustainable development of tourism, whether environmental level, or social and economic level, is required guidance and conduction for the development of innovative products and diversified services, outlining strategies that give them a competitive advantage through differentiation. This way we can ensure the satisfaction of tourists

Effect of ethnic composition of primary schools on academic achievement, cross-ethnic friendships, discrimination and school well-being

3020 Group & Interpersonal Processes; 3550 Academic Learning & AchievementThe aim of this study was to investigate the effects of primary schools’ ethnic composition on academic achievement, school well-being, cross-ethnic friendships and discrimination, with the purpose of adding knowledge to this controversial research area in which national research is limited. Participants were students from the 4th grade (M age = 9.82, 49%), White natives (n = 48) and Black immigrants from Portuguese-speaking African countries (n = 54). The school ethnic compositions were of 10% to 30%, 31% to 59% and 60% or more of children from minority groups. Results found that White students performed better in all subjects, but both White and Black students performed worse in Mathematics and Social Environmental studies when in the 60% or more minority condition, in comparison to their peers in the other conditions. When the school ethnic composition was more balanced (31% to 59%) both native and immigrant children have the same number of cross-ethnic friendships. For discriminative behaviours, Black children rated White children more negatively than Black children when in the school ethnic composition of 60% or more. School well-being was higher for White native students than for Black immigrants, regardless of the schools’ ethnic composition. Results were discussed as a potential contribute to the design of public policies of Education for Portuguese primary schools, in order to provide greater equality of opportunities for success and well being between minority and the majority students.O presente estudo teve como objetivo investigar os efeitos da composição étnica de escolas públicas de 1º ciclo com crianças Brancas e Negras no desempenho académico, no bem-estar na escola, nas amizades interétnicas e na discriminação intergrupal, de modo a contribuir com mais conhecimento nesta área controversa e com reduzido número de estudos nacionais. Os participantes foram 102 alunos de 4° ano (M idade = 9.82, 49% do género masculino), incluindo crianças Brancas (n = 48) e Negras de Países Africanos de Língua Oficial Portuguesa (n = 54). As composições étnicas das escolas foram de 10% a 30%, 31% a 59% e 60% ou mais de crianças da minoria. Verificou-se que, em geral, as crianças Brancas têm melhor sucesso académico em todas as disciplinas, mas tanto Brancas como Negras têm pior sucesso em Matemática e no Estudo do Meio quando a composição é de 60% ou mais, em comparação com os seus pares nas restantes condições. Apenas quando a composição étnica da escola é equilibrada (31% a 59%) as crianças Brancas e Negras têm o mesmo número de amizades interétnicas. As crianças Negras avaliam as crianças Brancas mais negativamente do que as Brancas, quando a composição étnicas é de 60% ou mais. O bem-estar na escola é mais alto em crianças Brancas do que em crianças Negras, independentemente da composição étnica da escola. Os resultados são discutidos no âmbito das políticas públicas de Educação para as escolas de primeiro ciclo em Portugal, de forma a proporcionar uma maior igualdade de oportunidades de sucesso e de bem-estar entre a minoria e a maioria

Characterization of a new genetically modified Plasmodium berghei parasite: development of a pre-erythrocyte malaria vaccine

Tese de mestrado, Biologia (Biologia Humana e Ambiente), Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2015Malaria is an infectious disease caused by a protozoan parasite of the genus Plasmodium and transmitted to humans and other animals by infected female Anopheles mosquitoes. Although there are five species of Plasmodium that can infect humans, the majority of the deaths are caused by P. falciparum and P. vivax. Unfortunately, there is still no licensed vaccine against malaria. Whole-organism pre-erythrocytic malaria vaccines have been shown to elicit sterile immunity in both humans and rodents. They induce effective CD8+ T cell responses, required for sterilizing immunity in malaria. Nevertheless, current whole-organism pre-erythrocytic malaria vaccination approaches, which rely on the use of human-infective sporozoites, present risks and limitations that cannot be overlooked. According to the 2013 World Health Organization guidelines, a malaria vaccine should be available for use and licensed by 2030, with at least 75% efficacy and capable of protecting against both P. falciparum and P. vivax. Here, we propose a vaccination approach where a genetically modified rodent P. berghei parasite is used as a platform to deliver immunogenic antigens against the two major human infective Plasmodium species: P. falciparum and P. vivax – the PbTriCS parasite. Our results show that PbTriCS development during the sporogonic stage and in vitro hepatic stage is not impaired, having similar infectivity to wild-type parasites. Although our results in C57BL/6J mice have shown a reduced fitness by PbTriCS parasites in establishing an in vivo liver infection, we demonstrated by ELISA assays that this parasite is able to trigger humoral responses against P. falciparum and P. vivax CS peptides. We conclude that PbTriCS has the potential to be a good malaria vaccine candidate as it is able to elicit strong antibody responses against both P. falciparum and P. vivax. Further studies should be pursued to functionally demonstrate the protective capacity of the immune response induced through immunization with PbTriCS.A malária é uma doença infecciosa endémica em 97 países, causada por um protozoário do género Plasmodium e transmitida por um mosquito fêmea do género Anopheles. Existem cinco espécies capazes de causar infecção em seres humanos, P. falciparum, P. vivax, P. malariae, P. ovale e P. knowlesi. Destas, P. falciparum é o parasita predominante no continente africano e é o responsável pelo maior número de mortes. A Organização Mundial de Saúde (OMS) estima que em 2013 a malária foi responsável pela morte de 584 mil pessoas, sendo que destas, 453 mil correspondem a crianças abaixo dos cinco anos.1 4 5O ciclo de vida do parasita da malária inicia-se quando um mosquito infectado se alimenta de sangue num hospedeiro humano, depositando na sua pele centenas de esporozoítos – a forma do parasita residente nas glândulas salivares do mosquito e capaz de infectar o fígado. Os esporozoítos entram rapidamente na circulação sanguínea chegando ao fígado, onde atravessam os sinusoides hepáticos e diversos hepatócitos, até invadirem um hepatócito com formação dum vacúolo parasitóforo, onde o parasita reside durante todo o seu desenvolvimento hepático14. A fase hepática da infeção por Plasmodium é uma etapa obrigatória do seu ciclo de vida, ainda que clinicamente silenciosa. No fígado, o parasita prolifera, diferenciando-se numa forma replicativa, a forma exo-eritrocítica. Em humanos, a infecção por P. vivax ou P. ovale pode dar origem a formas hepáticas dormentes, os hipnozoítos, que podem causar recaídas na doença, meses ou anos após a infecção.4 5 A fase hepática termina com a libertação de vesículas cheias de merozoítos – os merosomas – para a corrente sanguínea.16 Na corrente sanguínea os merosomas libertam os merozoitos que infectam os eritrócitos, iniciando assim o estádio eritrocítico da infeção. 4 16 Os merozoítos infetam os eritrócitos em ciclos de invasão, crescimento intracelular, multiplicação e re-infeção de novos eritrócitos.18 As células-filhas dos merozoítos podem desenvolver-se em formas assexuadas ou sexuadas do parasita. As primeiras continuam o ciclo de invasão e multiplicação nos eritrócitos ao passo que as segundas originam gametócitos. É na fase sanguínea da infecção que a sintomatologia da malária aparece.19 13 Aquando da ingestão de sangue por uma fêmea Anopheles num humano infectado, há a entrada de gametócitos presentes no sangue para o intestino médio do mosquito. Aqui, os gametócitos diferenciam-se em gâmetas, que se fundem, dando origem a um zigoto diplóide que inicia a meiose. Os zigotos transformam-se numa forma móvel, o oocineto que migra e penetra o epitélio do intestino médio do mosquito, onde se transforma numa forma séssil, o oócisto. O oócisto sofre replicação mitótica produzindo esporozoítos, que após a ruptura do oócisto ficam livres na hemolinfa indo invadir as glândulas salivares do mosquito. O parasita está então pronto para iniciar um novo ciclo num novo hospedeiro.19 Atualmente, as medidas de controlo de malária envolvem o controlo do vetor e o tratamento da doença. Infelizmente, não se encontra atualmente licenciada nenhuma vacina contra a malaria, a qual será sempre uma ferramenta essencial para a erradicação desta doença. Em 2013 a OMS lançou orientações em relação ao desenvolvimento / licenciamento de uma vacina para a malária segundo as quais 2030 deverá haver uma vacina contra ambas as espécies P. falciparum e P. vivax e ter pelo 75% de eficácia. Tradicionalmente, as estratégias de vacinação contra a malária incluem: as vacinas pré-eritrocíticas (têm como alvo o esporozoíto e a fase hepática da infeção); as vacinas eritrocíticas (têm como alvo a fase assexuada do parasita no sangue); e as vacinas que bloqueiam a transmissão (têm como alvo os gametócitos/gâmetas do parasita e/ou outros estádios no mosquito).25 As vacinas pré-eritrocíticas são até ao momento as mais promissoras, podendo dividir-se em dois tipos: as de subunidade e as de organismo inteiro. As vacinas de subunidade baseiam-se no uso de uma pequena porção do parasita, uma proteína ou um péptido, para evocar uma resposta imune. Por seu lado, as de organismo inteiro baseiam-se no uso do parasita todo, administrado numa forma atenuada, ou sob o tratamento com antimaláricos. Atualmente, o candidato a vacina mais avançado, e o único que chegou a estudos clínicos fase 3, é uma vacina de subunidade, a RTS,S, que usa a proteína circumsporozoite (CS) de P. falciparum para evocar respostas imunes.32 No entanto, a sua eficácia é de cerca de 30% e diminui ao longo do tempo.33 As vacinas de organismo inteiro mostraram ser as mais eficazes visto que foi possível induzir respostas imunes em roedores e em humanos capazes de prevenir uma infecção subsequente por Plasmodium.27 28 37 Além disso, as vacinas de organismo inteiro são capazes de espoletar respostas imunes mediadas por células T CD8+.38 39 No entanto, as vacinas de organismo inteiro apenas são contra uma espécie de Plasmodium e baseiam-se no uso de esporozoítos capazes de infetar humanos, o que representa riscos e limitações. O PrudêncioLab do Instituto de Medicina Molecular, tem vindo a investigar o uso do P. berghei como uma estratégia de vacinação contra a malária. P. berghei é um dos parasitas de malária em roedores e em trabalhos anteriores ficou provada a sua capacidade de infectar células do fígado humano, bem como a sua incapacidade de se reproduzir em eritrócitos humanos, impedindo-o de causar a doença. Assim, P. berghei é uma abordagem de vacinação mais segura em relação a outros candidatos a vacina préeritrocítica de organismo inteiro. O PrudêncioLab caracterizou um P. berghei geneticamente modificado (GM) que expressa a proteína CS de P. falciparum sob o controlo do promotor UIS4 de P. berghei. Os resultados deste trabalho mostram que este parasita GM é capaz de suscitar uma resposta imune contra uma infeção causada por P. falciparum. Tendo em conta as diretrizes da OMS, o PrudêncioLab criou recentemente um novo parasita P. berghei GM que expressa simultaneamente as proteínas CS de P. falciparum e P. vivax em loci neutros, o parasita PbTriCS. Este projeto de mestrado teve como objetivo a caracterização deste parasita, avaliando a sua capacidade de desenvolvimento e infeção em mosquitos Anopheles, in vitro em células Huh7, e in vivo em ratinhos C57BL/6J. Para concluir, avaliaram-se as respostas humorais contra péptidos das CS de P. berghei, P. falciparum e P. vivax. espoletadas pela imunização com PbTriCS. A primeira parte da caracterização consistiu em avaliar o desenvolvimento do parasita em mosquitos Anopheles. Para tal, contaram-se os números de oócistos no intestino médio e os números de esporozoítos presentes nas glândulas salivares. Comparados os resultados com os de PbGIMO, a linha inicial não-transfetada e caracterizada como correspondendo ao P. berghei selvagem, não foram encontradas diferenças significativas entre parasitas, permitindo concluir então que a inserção de dois genes em loci neutros não tem impacto no desenvolvimento do parasita no mosquito. Procedemos então à análise do movimento de gliding dos esporozoítos numa superfície de vidro, não tendo sido encontradas diferenças significativas no número de círculos relativamente ao PbGIMO e concluíndo também que as 3 CS são expressas no esporozoíto. Na segunda parte do trabalho, caracterizámos o parasita in vitro através da infeção da linha celular de hepatoma humano Huh7. Concluímos, através da de microscopia de imunofluorescência, que PbTriCS possui uma infetividade semelhante a PbGIMO, sendo o seu desenvolvimento normal, às 48 após a infeção. Foi-nos possível também observar que todas as CS estão a ser corretamente expressas. Decidimos então avançar para a caracterização da infeção in vivo em ratinhos C57BL/6J às 46 horas após a infeção tendo-se observado por qRT-PCR uma redução na infeção do fígado por PbTriCS comparativamente a PbGIMO. A análise de secções de fígado por microscopia de imunofluorescência mostrou que esta redução de infeção se deve a um menor número de parasitas no fígado ao invés de um menor desenvolvimento dos mesmos. No entanto, todas as CS estão a ser corretamente expressas in vivo em PbTriCS. Para entender esta observação, realizámos um ensaio de atravessamento celular, tendo-se concluído que o atravessamento por PbTriCS é cerca de 50-60% inferior ao de parasitas PbGIMO. Isto foi indiretamente confirmado pela observação experimental que o número de parasitas PbTriCS capaz de estabelecer uma infeção no fígado de ratinhos C57BL/6J é menor que PbGIMO. Por último, na terceira parte do trabalho, utilizamos o parasita PbTriCS para imunizar ratinhos C57BL/6J e, por ELISA, foi possível concluir que o soro dos ratinhos imunizados possui anticorpos capazes de reconhecer os péptidos das CS de P. berghei, P. falciparum e P. vivax. Em conclusão, apesar do parasita PbTriCS ter uma menor capacidade de estabelecer uma infeção hepática in vivo em comparação com PbGIMO, os parasitas capazes de infetar o fígado não têm o seu desenvolvimento comprometido e expressam corretamente as várias proteínas CS, permitindo que uma imunização com PbTriCS induza a produção de elevados títulos de anticorpos contra a CS de P. falciparum e P. vivax. Embora mais estudos devam ser feitos, nomeadamente ao nível de respostas imunes e de eficácia, podemos concluir que o parasita PbTriCS constitui um bom candidato a vacina contra P. falciparum e P. vivax

Biodegradable materials based on poly(vinyl alcohol) (PVA) and poly (lactic acid) (PLA) with antioxidant and antimicrobial activity for food packaging applications

Tesis por compendio[ES] El uso masivo de plásticos y su impacto medioambiental, así como la necesidad de mejorar la conservación de los alimentos, hace necesario el desarrollo de alternativas biodegradables para el envasado activo de alimentos. La presente Tesis Doctoral, se ha centrado en el desarrollo de películas activas, basados en polímeros biodegradables con propiedades complementarias, con el fin de obtener materiales con propiedades mecánicas y de barrera adecuadas para cumplir con los requisitos del envasado alimentario. Para ello, se consideraron el poli (vinil alcohol) (PVA) y el poli (ácido láctico) PLA. Asimismo, el carvacrol y los ácidos ferúlico y cinámico fueron elegidos como compuestos activos naturales. Se estudió la encapsulación del carvacrol en liposomas de diferentes tipos de lecitina para mejorar su retención durante la etapa de formación del film. La lecitina de soja enriquecida en fosfatidilcolina fue la más eficaz para mantener la estabilidad de la emulsión de carvacrol, resultando en films con mayor retención. La incorporación de carvacrol (encapsulado o no), modificó ligeramente la microestructura y las propiedades físicas de los films, así como la cristalinidad y el comportamiento térmico del polímero. El PVA totalmente hidrolizado proporcionó films con un mejor desempeño mecánico y capacidad de barrera al oxígeno, pero con menor retención de carvacrol. Por el contrario, el PVA parcialmente hidrolizado dio lugar a films más homogéneos, con mayor contenido de carvacrol. Mientras que los grupos acetilos protegieron al polímero de la termodegradación, permitiendo la obtención de films mediante las técnicas habituales del procesado industrial. Por lo tanto, el PVA parcialmente hidrolizado tiene un gran potencial para la producción de films activos, con más posibilidades de procesamiento que el PVA totalmente hidrolizado. Se incorporaron también ácido cinámico y ferúlico, con menor impacto sensorial que el del carvacrol, al PVA parcial y totalmente hidrolizado, mediante casting de las soluciones acuosas con glicerol para mejorar la solubilidad de los ácidos. Los films de PVA plastificados con glicerol mostraron una menor capacidad de barrera que los no plastificados. La incorporación del ácido ferúlico promovió mayores cambios en las propiedades de los films que el ácido cinámico, debido a un efecto de reticulación, que promovió la cristalinidad, la rigidez y la capacidad de barrera del material. También se obtuvieron películas plastificadas a base de PVA parcialmente hidrolizado con ácidos fenólicos, mediante mezclado en fundido y moldeo por compresión. Los films termoprocesados fueron menos extensibles y resistentes a la rotura y más permeables al oxígeno y al vapor de agua. Estudios in vitro demostraron que los films con ácidos fenólicos obtenidos por casting o termoprocesado presentaron actividad antioxidante y antimicrobiana, especialmente con ácido ferúlico. Con el objetivo de cumplir los requisitos de envasado de alimentos, se obtuvieron films tricapa por termocompresión, compuestos por una capa central de PVA, cargada con compuestos activos (carvacrol o ácido ferúlico), y dos capas externas de PLA. La termocompresión fue eficaz para la adhesión interlaminar. Las multicapas mostraron un rendimiento mecánico próximo al de los films de PLA y una elevada capacidad de barrera al oxígeno y al vapor de agua. Todos los laminados con compuestos activos incorporados a la capa de PVA fueron eficaces para controlar el crecimiento microbiano en filetes de carne de vacuno envasada. Por tanto, el laminado de films de PVA y PLA parcialmente hidrolizado representa una estrategia adecuada para obtener materiales de envasado con propiedades funcionales más próximas a las de algunos plásticos convencionales utilizados en el envasado alimentario. Asimismo, estos materiales con carvacrol o ácido ferúlico incorporados podrían utilizarse para el envasado de alimentos altamente susceptibles a procesos oxidativos o de degradación microbiológica para alargar su vida útil.[CA] L'ús massiu de plàstics i el seu impacte mediambiental, així com la necessitat de millorar la conservació dels aliments, fa necessari el desenvolupament d'alternatives biodegradables per a l'envasament actiu d'aliments. La present Tesi Doctoral, s'ha centrat en el desenvolupament de pel·lícules actives, basats en polímers biodegradables amb propietats complementàries, amb la finalitat d'obtindre materials amb propietats mecàniques i de barrera adequades per a complir amb els requisits de l'envasament alimentari. Per a això, es van considerar el poli (vinil alcohol) (PVA) i el poli (àcid làctic) PLA. Així mateix, es van triar el carvacrol i els àcids ferúlic i cinàmic, com a compostos actius. Es va estudiar l'encapsulació del carvacrol en liposomes de diferents tipus de lecitina per a millorar la seua retenció durant l'etapa de formació del film. La lecitina de soja enriquida en fosfatidilcolina va ser la més eficaç per a mantindre l'estabilitat de l'emulsió de carvacrol, resultant en films amb major retenció. La incorporació de carvacrol (encapsulat o no), va modificar lleugerament la microestructura i les propietats físiques dels films, així com la cristalinitat i el comportament tèrmic del polímer. El PVA totalment hidrolitzat va proporcionar films amb un millor exercisc mecànic i capacitat de barrera a l'oxigen, però amb menor retenció de carvacrol. Per contra, el PVA parcialment hidrolitzat va donar lloc a films més homogenis, amb major contingut de carvacrol. Mentre que els grups acetils van protegir el polímer de la termodegradació, permetent l'obtenció de films mitjançant les tècniques habituals del processament industrial. Per tant, el PVA parcialment hidrolitzat té un gran potencial per a la producció de films actius, amb una més àmplia gamma de possibilitats de processament que el PVA totalment hidrolitzat. Es van incorporar també àcid cinàmic i ferúlic, amb menor impacte sensorial que el del carvacrol, al PVA parcial i totalment hidrolitzat, mitjançant càsting de les solucions aquoses amb glicerol per a millorar la solubilitat dels àcids. Els films de PVA plastificats amb glicerol van mostrar una menor capacitat de barrera que els no plastificats. La incorporació de l'àcid ferúlic va promoure majors canvis en les propietats dels films que l'àcid cinàmic, a causa d'un efecte de reticulació, que va promoure la cristalinitad, la rigidesa i la capacitat de barrera del material. També es van obtindre pel·lícules plastificades a base de PVA parcialment hidrolitzat amb àcids fenòlics, mitjançant barrejat en fos i emotlament per compressió. Els films termoprocessats van ser menys extensibles i resistents al trencament i més permeables a l'oxigen i al vapor d'aigua. Estudis in vitro van demostrar que els films amb àcids fenòlics obtinguts per càsting o termoprocessat van presentar activitat antioxidant i antimicrobiana, especialment amb àcid ferúlic. Amb l'objectiu de complir els requisits d'envasament d'aliments, es van obtindre films tricapa per termocompressió, compostos per una capa central de *PVA, carregada amb compostos actius (carvacrol o àcid ferúlic), i dues capes externes de PLA. La termocompressió va ser eficaç per a l'adhesió interlaminar. Les multicapes van mostrar un rendiment mecànic pròxim al dels films de PLA i una elevada capacitat de barrera a l'oxigen i al vapor d'aigua. Tots els laminatges amb compostos actius incorporats a la capa de PVA van ser eficaces per a controlar el creixement microbià en filets de carn de boví envasada. Per tant, el laminatge de films de PVA i PLA parcialment hidrolitzat representa una estratègia adequada per a obtindre materials d'envasament amb propietats funcionals més pròximes a les d'alguns plàstics sintètics utilitzats en l'envasament alimentari. Així mateix, aquests materials amb carvacrol o àcid ferúlic incorporats podrien utilitzar-se per a l'envasament d'aliments altament susceptibles a processos oxidatius o de degradació microbiològica per a allargar la seua vida útil.[EN] The massive use of synthetic plastics and their environmental impact, as well as the need of improving food preservation, makes necessary the development of biodegradable alternatives for food active packaging. The use of active compounds from natural origin to obtain this kind of materials is a new trend based of the consumer demand for safer and healthier products. The present Doctoral Thesis, has been focused on the development of active packaging films, based on biodegradable polymers with complementary properties, in order to obtain materials with adequate mechanical and barrier properties to meet food packaging requirements. To this end, poly (vinyl alcohol) (PVA) and poly (lactic acid) (PLA) were considered. Likewise, carvacrol and ferulic and cinnamic acid, were chosen as active natural compounds. The liposomal encapsulation of carvacrol, using different kinds of lecithin was evaluated in order to improve the carvacrol retention in the polymer matrix during the film formation step. Soy lecithin enriched in phosphatidylcholine was the most effective at maintaining the stability of the carvacrol emulsion, leading to its highest retention in the PVA films. Incorporation of carvacrol (lecithin encapsulated or not) slightly modified the film microstructure and physical properties and polymer crystallinity and thermal behaviour. The fully hydrolysed PVA provided films with a better mechanical performance and oxygen barrier capacity, but with less carvacrol retention. In contrast, partially hydrolysed PVA gave rise to more homogenous films with a higher carvacrol content. Acetyl groups protect the polymer for thermodegradation, allowing the film production using the common industrial thermoplastic processing techniques. Therefore, partially hydrolysed PVA has a great potential for the production of active films, with a wider range of processing possibilities than fully hydrolysed PVA. Cinnamic and ferulic acids, with lower potential sensory impact than of carvacrol, were also incorporated into partially and fully hydrolysed PVA by casting of aqueous solutions containing glycerol to improve the acid solubility. Glycerol plasticized PVA films exhibited poorer barrier capacity than those non-plasticized. The incorporation of ferulic acid promoted greater changes in the film properties than cinnamic acid, due to a crosslinking effect, which promoted crystallinity, stiffness and barrier capacity of the material. Glycerol plasticized films based on partially hydrolysed PVA with phenolic acids were also obtained by melt blending and compression moulding. Termoprocessed films were less stretchable and resistant to break and more permeable to oxygen and water vapor. In vitro studies demonstrated that cast and termoprocessed films containing phenolic acids exhibited antioxidant and antimicrobial activity, especially with ferulic acid. Three-layer films composed of a central layer of PVA loaded with active compounds (carvacrol lecithin encapsulated or not, or ferulic acid) and two external PLA layers were obtained by thermo-compression, aimed to meet food packaging requirements. Thermocompression was effective for the interlaminar adhesion. Multilayers exhibited mechanical performance close to the PLA sheets and high oxygen and water vapour barrier capacity. All laminates with active compounds incorporated into the PVA sheet were effective at controlling microbial growth in packaged beef meet. Therefore, lamination of partially hydrolysed PVA and PLA films represents a successful strategy to obtain packaging materials with functional properties closer to those of some conventional plastics commonly used in food packaging. Likewise, these materials incorporating carvacrol or ferulic acid could be used for packaging of foods highly susceptible to oxidative or microbiological degradative process to extend their shelf life.The authors acknowledge the financial support of the Agencia Estatal de Investigacion, Ministerio de Economía y Competitividad (MINECO) of Spain through the projects AGL2016-76699-R and PID2019-105207RB-100. Author Johana Andrade thanks the Departamento de Nariño-Colombia y la Fundación CEIBA for the doctoral grant. The authors also thank the services rendered by the Electron Microscopy Service of the UPV.Andrade Chapal, JC. (2021). Biodegradable materials based on poly(vinyl alcohol) (PVA) and poly (lactic acid) (PLA) with antioxidant and antimicrobial activity for food packaging applications [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/175566TESISCompendi

Imaginarios de la muerte en el Mundo Andino : estudio de caso en el pueblo kichwa Otavalo

Vida y muerte son dos términos cuyo significado varía de acuerdo a las diferentes épocas y contextos que han existido en la historia; sin embargo, el concepto de muerte que tenían las culturas indígenas del mundo Andino antes de la colonia, no difiere totalmente de su concepción actual; pues, para ellos, especialmente para los pueblos Kichwa de la Sierra, la muerte es hasta hoy el fin de la vida en este mundo para recomenzar otra vida en un mundo nuevo. Con la llegada de los españoles y consecuentemente del cristianismo, el sentido de la muerte cambió en los pueblos indígenas, lo que se puede evidenciar en el uso de iconografías que son utilizadas en el mundo cristiano, donde la muerte suele ser personificada por un atleta que llega a la meta y al que se le entrega una corona como símbolo de triunfo; además se evidencia la frecuente utilización de la corona de flores que son depositadas en las tumbas, aunque es una costumbre que la practican la mayoría de la población. Existe poco conocimiento de los imaginarios acerca de la muerte en el mundo andino, la prueba más antigua de una tradición funeraria ha sido adjudicada al hombre Neanderthal que pintaba a sus muertos con ocre rojo, lo vestía con ropas especiales y además lo adornaba con amuletos. En lo posterior, los egipcios creían que el cuerpo tenía que estar intacto para que el alma lograra pasar a la siguiente vida. Los griegos también daban importancia a las honras fúnebres y enterraban a sus héroes y guerreros de forma solemne en sarcófagos de piedra. El aspecto clave en esta investigación parte de entender que en el mundo andino la muerte es algo que no se puede evadir, ya que siempre está presente, porque a partir de la llegada de los españoles, el andino vio morir más fácilmente a los miembros de su comunidad y no a los miembros de los otros estratos sociales

Understanding the experience of adolescent depression : qualitative studies with adolescents from Porto Alegre, Brazil

Adolescence is a time of physical and psychosocial change, as well as a period of intense growth, learning, adaptation, and development. Nonetheless, the current conceptualization of depression in adolescence pays limited attention to important differences that might occur in terms of the manifestation of the disorder in this specific developmental stage. In this sense, the idea of understanding how adolescents experience depression arises as part of a broader scope to understand psychopathology, highlighting the need for exploring the complexities and subtleties of mental health disorders. Therefore, this dissertation has as main objective to contribute to the understanding of the experience of adolescent depression using qualitative methods. Two studies are here presented. The first aimed to understand adolescents’ and other stakeholders’ conceptualizations of depression, focusing on their accounts of how depression changed the lives of adolescents. This approach had as a goal to include different voices and points of view, aiming to gather a comprehensive understanding of the contextual factors of the environments of adolescents who suffered from depression. The second study explores adolescents’ initial reactions after receiving a clinical diagnosis of Major Depressive Disorder. In this sense, we queried adolescents to explore the subjective experience of receiving the diagnosis, but also how this affects the contextualization of past experiences in light of this new diagnosis. Overarchingly, these studies present the vital role of interpersonal relationships in adolescent depression, recognizing the importance of impaired social functioning in depression. Finally, this dissertation contributes to addressing gaps in the contemporary literature about adolescent depression. It presents information on an understudied sample - Brazilian adolescents - and adds to a modest body of literature that uses qualitative methodologies as a powerful tool for building in-depth interpretations regarding how one interprets, understands, and shares their experiences.A adolescência é um período de mudança física e psicossocial, além de um período de intenso crescimento, aprendizado e desenvolvimento. Entretanto, a conceitualização atual de depressão na adolescência dá pouca atenção às diferenças importantes que podem ocorrer em termos da manifestação do transtorno nesse estágio específico do desenvolvimento. Nesse sentido, a ideia de compreender como os adolescentes vivenciam a depressão surge como parte de um escopo mais amplo de compreensão da psicopatologia, destacando a necessidade de explorar as complexidades e sutilezas da vivência dos transtornos mentais. Portanto, esta dissertação tem como objetivo principal contribuir para a compreensão da vivência da depressão em adolescentes por meio de métodos qualitativos. Dois estudos são aqui apresentados. O primeiro teve como objetivo compreender as conceitualizações de depressão de adolescentes e outras partes interessadas, com foco em seus relatos de como a depressão mudou a vida dos adolescentes. Essa abordagem teve como objetivo incluir diferentes vozes e pontos de vista, visando reunir uma compreensão abrangente dos fatores contextuais dos ambientes de adolescentes com depressão. O segundo estudo explora as reações iniciais dos adolescentes após receberem um diagnóstico clínico de Transtorno Depressivo Maior. Nesse sentido, buscamos explorar a experiência subjetiva de receber o diagnóstico, mas também como isso afeta a contextualização de experiências passadas à luz desse novo diagnóstico. De maneira geral, esses estudos apresentam o papel vital das relações interpessoais na depressão na adolescência, reconhecendo a importância de prejuízos no funcionamento social na depressão. Por fim, esta dissertação aborda lacunas na literatura contemporânea sobre depressão na adolescência, apresentando informações sobre uma amostra pouco estudada - adolescentes brasileiros. Dessa forma, soma-se a um modesto corpo de literatura que utiliza metodologias qualitativas como ferramenta para construir interpretações aprofundadas sobre como adolescentes interpretam, compreendem e compartilham suas experiências

Inconsistencies over time in 5% of NetAffx probe-to-gene annotations

BACKGROUND: DNA microarray probes are designed to match particular mRNA transcripts, often based on expressed sequences like ESTs, or cDNAs, many times incomplete. As a result, the relations between probes and genes can change as the sequence data are updated. However, it is frequent that the reported results of microarray analyses are given just as lists of genes without any reference to the underlying probes. RESULTS: We show for a particular commercial microarray design that the number of probes associated to some genes change with time. These changes concern approximately 5% of the probe sets across the history of annotation releases over a two year span. CONCLUSION: We recommend to report probe set identifiers when publishing microarray results, and to submit those analyses to microarray public databases to ensure that the interpretation of the data is updated with the latest set of annotations