Memantine, Simvastatin, and Epicatechin Inhibit 7-Ketocholesterol-induced Apoptosis in Retinal Pigment Epithelial Cells But Not Neurosensory Retinal Cells In Vitro

Purpose: 7-ketocholesterol (7kCh), a natural byproduct of oxidation in lipoprotein deposits, is implicated in the pathogenesis of diabetic retinopathy and age-related macular degeneration (AMD). This study was performed to investigate whether several clinical drugs can inhibit 7kCh-induced caspase activation and mitigate its apoptotic effects on retinal cells in vitro. Method: Two populations of retinal cells, human retinal pigment epithelial cells (ARPE-19) and rat neuroretinal cells (R28), were exposed to 7kCh in the presence of the following inhibitors: Z-VAD-FMK (pan-caspase inhibitor), simvastatin, memantine, epicatechin, and Z-IETD-FMK (caspase-8 inhibitor) or Z-ATAD-FMK (caspase-12 inhibitor). Caspase-3/7, -8, and -12 activity levels were measured by fluorochrome caspase assays to quantify cell death. IncuCyte live-cell microscopic images were obtained to quantify cell counts. Results: Exposure to 7kCh for 24 hours significantly increased caspase activities for both ARPE-19 and R28 cells (P < 0.05). In ARPE cells, pretreatment with various drugs had significantly lower caspase-3/7, -8, and -12 activities, reported in % change in mean signal intensity (msi): Z-VAD-FMK (48% decrease, P < 0.01), memantine (decreased 47.8% at 1 μM, P = 0.0039 and 81.9% at 1 mM, P < 0.001), simvastatin (decreased 85.3% at 0.01 μM, P < 0.001 and 84.8% at 0.05 μM , P < 0.001) or epicatechin (83.6% decrease, P < 0.05), Z-IETD-FMK (68.1% decrease, P < 0.01), and Z-ATAD-FMK (47.7% decrease, P = 0.0017). In contrast, R28 cells exposed to 7kCh continued to have elevated caspase- 3/7, -8, and -12 activities (between 25.7% decrease and 17.5% increase in msi, P > 0.05) regardless of the pretreatment. Conclusion: Several current drugs protect ARPE-19 cells but not R28 cells from 7kChinduced apoptosis, suggesting that a multiple-drug approach is needed to protect both cells types in various retinal diseases

Imágenes, vinculación y salud: experiencia con talleres terapéuticos para mayores

Idosos possuem seus direitos garantidos em Constituição, principalmente no que se refere ao cuidado integral para que possam vivenciar um envelhecimento ativo e saudável. Portanto, objetivou-se discutir sobre as atividades de promoção de saúde realizadas junto a idosos por meio da facilitação de oficinas terapêuticas expressivas por estudantes do curso de Psicologia de uma universidade pública do norte do Paraná, pautando-se nos pressupostos de grupo operativo. Trata-se de um relato de experiência extensionista em um serviço de convivência e fortalecimento de vínculos. Participaram das oficinas de três a onze idosos por encontro, tendo ocorrido um total de doze encontros com rodas de conversas mediadas pela utilização de imagens - majoritariamente -, sons e movimentos. Foram trabalhados temas como história de vida, autoimagem, mudanças, adoecimento, autoconhecimento, autocuidado e redes de apoio. Para registrar os dados da intervenção foi utilizado o diário de campo como instrumento. Os resultados foram sistematizados e analisados a fim de discutir as aproximações entre lógica assistencial, ações em saúde e práticas psicológicas com viés terapêutico, apontando à importância da inserção de uma ação alinhada com a demanda e a comunicação de qualidade com o serviço. Essa construção coletiva buscou o envolvimento ativo dos participantes a partir de propostas que incentivaram a autonomia do indivíduo, a cooperação, a reflexão e o pensar criativo. Ademais, diante da alta demanda por um espaço de fala, percebeu-se que, apesar dos obstáculos ao desenvolvimento do grupo, a convivência grupal possibilitou vinculação, empatia e acolhimento entre os participantes, contando com a colaboração dos recursos na expressão de sentimentos, desejos e pensamentos. A partir disso, abordou-se a experiência do envelhecer, o que possibilitou reverberações afetivas, fortalecimento de vínculos interpessoais e aprendizagem. Assim, as oficinas terapêuticas funcionaram como estratégias promotoras de saúde em um espaço socioassistencial que preconiza o cuidado integralizado à terceira idade.   Elderly people have a right guaranteed by the constitution to comprehensive health care, so that they can experience active and healthy aging. The objective of the present work was to discuss health promotion activities carried out with the elderly, facilitated by therapeutic workshops conducted by Psychology students at a public university in the north of Paraná state. This extension work focused on the importance of coexistence and the strengthening of bonds. Three to eleven elderly people participated in each workshop, with a total of twelve meetings employing conversation wheels mediated by the use of mainly images, together with sounds and movements. The topics worked on included life history, self-image, changes, illness, self-knowledge, self-care, and support networks. The data obtained in the activities were recorded using a field diary. The results were organized and analyzed in order to discuss the associations among care logic, health actions, and psychological practices with therapeutic focus, highlighting the importance of adopting actions aligned with demand and ensuring quality communication with the service provided. This collective approach sought the active involvement of the participants, based on proposals to encourage individual autonomy, cooperation, reflection, and creative thinking. Furthermore, given the high demand for the opportunity to speak, it could be seen that despite obstacles to the development of the group, its formation enabled bonding, empathy, and a welcoming attitude among the participants, assisted by the provision of resources for the expression of feelings, desires, and thoughts. In this way, the experience of aging was addressed, strengthening affective aspects, interpersonal bonds, and learning. The therapeutic workshops constituted a strategy for the promotion of health in a space for social assistance that recognized the importance of integrated care for the elderly. Las personas mayores tienen garantizado por Constitución el derecho a una atención integral para que puedan vivir un envejecimiento activo y saludable. Por lo tanto, se objetivó discutir las actividades de promoción de la salud que se realizan junto a las personas mayores a través de la facilitación de talleres terapéuticos expresivos por parte de estudiantes de la carrera de Psicología en una universidad pública del norte de Paraná, a partir de los presupuestos de un grupo operativo. Se trata de un relato de una experiencia de extensión en un servicio de convivencia y fortalecimiento de vínculos. En los talleres participaron de cada encuentro entre tres y once personas mayores, en un total de doce encuentros con rondas de conversaciones mediadas por el uso de imágenes -en su mayoría-, sonidos y movimientos. Se trabajaron temas como historia de vida, autoimagen, cambios, enfermedades, autoconocimiento, autocuidado y redes de apoyo. Para registrar los datos de la intervención, se utilizó como instrumento el diario de campo. Los resultados fueron sistematizados y analizados con el fin de discutir las aproximaciones entre lógica asistencial, acciones de salud y prácticas psicológicas con sesgo terapéutico, señalando la importancia de insertar una acción alineada con la demanda y la comunicación de calidad con el servicio. Esta construcción colectiva buscó que los participantes se involucraran activamente a partir de propuestas que fomentaron la autonomía del individuo, la cooperación, la reflexión y el pensamiento creativo. Además, ante la alta demanda de un espacio del habla, se notó que, a pesar de los obstáculos para el desarrollo del grupo, la convivencia grupal permitió la vinculación, la empatía y la acogida entre los participantes, a través del uso de recursos para la expresión de sentimientos, deseos y pensamientos. Con ello, se abordó la experiencia del envejecimiento, que ha permitido reverberaciones afectivas, fortalecimiento de vínculos interpersonales y aprendizaje. Por ende, los talleres terapéuticos funcionaron como estrategias de promoción de la salud en un espacio socio-asistencial que preconiza la atención integral a las personas mayores.

DADOS PSICOLÓGICOS EM PRONTUÁRIO MULTIPROFISSIONAL: RELATOS DE UMA EQUIPE DE SAÚDE

O registro psicológico em prontuário multiprofissional é imprescindível quando a atuação é realizada por uma equipe multiprofissional com funcionamento interdisciplinar. Com base na obrigatoriedade de documentar as ações do psicólogo em serviços de saúde, objetivamos descrever a prática de registroda Psicologia em prontuário multiprofissional no campo da saúde, destacar sua importância, apontaritens (des)necessários à elaboração da evolução clínicae listar os principais desafios e facilidades da prática em equipe multiprofissional. A partir do método de relato de experiência, percebemos que, apesar dosavanços científicos e das contribuições da nossa prática com registros em prontuário, temos limites significativos no que diz respeito à dificuldade de comunicaçãodevido à falta de padronização na linguagem utilizada nos documentos. Contudo, consideramos que o encontro entre a universidade e o serviço público tem sido uma experiência promotora de desenvolvimento do saberfazer psicológico no campo da saúde

cGAS Drives Noncanonical-Inflammasome Activation in Age-Related Macular Degeneration

Geographic atrophy is a blinding form of age-related macular degeneration characterized by retinal pigmented epithelium (RPE) death; the RPE also exhibits DICER1 deficiency, resultant accumulation of endogenous Alu-retroelement RNA, and NLRP3-inflammasome activation. How the inflammasome is activated in this untreatable disease is largely unknown. Here we demonstrate that RPE degeneration in human-cell-culture and mouse models is driven by a noncanonical-inflammasome pathway that activates caspase-4 (caspase-11 in mice) and caspase-1, and requires cyclic GMP-AMP synthase (cGAS)-dependent interferon-β production and gasdermin D-dependent interleukin-18 secretion. Decreased DICER1 levels or Alu-RNA accumulation triggers cytosolic escape of mitochondrial DNA, which engages cGAS. Moreover, caspase-4, gasdermin D, interferon-β, and cGAS levels were elevated in the RPE in human eyes with geographic atrophy. Collectively, these data highlight an unexpected role of cGAS in responding to mobile-element transcripts, reveal cGAS-driven interferon signaling as a conduit for mitochondrial-damage-induced inflammasome activation, expand the immune-sensing repertoire of cGAS and caspase-4 to noninfectious human disease, and identify new potential targets for treatment of a major cause of blindness

AVALIAÇÃO ULTRAESTRUTURAL DE ESPERMATOZOIDE CAPRINO CRIOPRESERVADO, ATRAVÉS DA MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE TRANSMISSÃO

The ultrastructure evaluation allows the analysis of the sperm cell in a subcellular proportion that is not observed in optical microscopy. Transmission electron microscopy (MET) is a tool used to determine the size and shape of inorganic and biological structures based on the interaction of electrons incident on matter. In this sense, with the use of MET, the objective was to evaluate the ultrastructural changes after the semen manipulation, mainly in the freeze-thaw process, which were not observed in tests using optical microscopy, that is, the morphological integrity of the membranes and goat sperm organelles. The evaluation took place at the Institute of Biosciences of the University of Brasília (UnB). The semen straws were thawed and washed in PBS. Then, they were centrifuged and fixed, contrasted in bloc and subjected to dehydration. The samples were placed for polymerization and ultrathin cuts were made and stored until the time of MET evaluation. In the ultrastructural analyzes by MET in the present work, no harmful actions occurred in either the control or experimental groups. The head regions (plasma membrane and acrosome) remained preserved, with no change in DNA. In conclusion, MET is especially useful tool for cell evaluation.A avaliação da ultraestrutura permite a análise da célula espermática em uma proporção subcelular que não é observada na microscopia óptica. A microscopia eletrônica de transmissão (MET) é uma ferramenta utilizada para determinar o tamanho e a forma de estruturas inorgânicas e biológicas com base na interação de elétrons incidentes na matéria. Nesse sentido, com o uso do MET, objetivou-se avaliar as alterações ultraestruturais após a manipulação do sêmen, principalmente no processo de congelamento-descongelamento, que não foram observadas em testes com microscopia óptica, ou seja, a integridade morfológica das membranas e organelas de esperma de cabra. A avaliação aconteceu no Instituto de Biociências da Universidade de Brasília (UnB). As palhetas de sêmen foram descongeladas e lavadas em PBS. Em seguida, foram centrifugados e fixados, contrastados em bloco e submetidos à desidratação. As amostras foram colocadas para polimerização e cortes ultrafinos foram feitos e armazenados até o momento da avaliação do MET. Nas análises ultraestruturais por MET no presente trabalho, nenhuma ação prejudicial ocorreu nos grupos controle ou experimental. As regiões da cabeça (membrana plasmática e acrossoma) permaneceram preservadas, sem alterações no DNA. Em conclusão, MET é uma ferramenta especialmente útil para avaliação celular

TÉCNICA DO COMETA PARA AVALIAÇÃO DA INTEGRIDADE DO DNA DE ESPERMATOZOIDES CAPRINOS CRIOPRESERVADOS EM ACP-101/102®

Animal reproduction represents one of the most important factors, and the use of reproductive biotechnologies that help increase production is essential. The comet technique is the simple and quick way to detect pre-mutagenic lesions and assist in studies on environmental biomonitoring, toxicological genetics, biological radiation, DNA repair process and genetic ecotoxicology. The objective of this study was to evaluate the viability of DNA from sperm cells from goat semen submitted to the cryopreservation process in powdered coconut water (ACP-101c/102c). The experiment was carried out at the Federal University of Piauí with two goats of reproductive age. The evaluation of the spermatic DNA integrity was performed using an immunofluorescence microscope. Classes from 0 to 3 were used, 0 being no damage and 3, the tail of the comet greater than twice the size of the nucleoid. The results obtained in the G2 test group (ACP 101c-102c) showed a slight tail formation, indicating a slight fragmentation of DNA. It was concluded that in the control group GC1 (TRIS + egg yolk of Gallu gallus domesticus) and experimental group (ACP 101c - 102c) there was no significant difference.A reprodução animal representa um dos fatores mais importantes, sendo imprescindível o uso de biotecnologias reprodutivas que auxiliem no aumento da produção. A técnica do cometa é a maneira simples e rápida de detectar lesões pré-mutagênicas e auxiliar em estudos de biomonitoramento ambiental, genética toxicológica, radiação biológica, processo de reparo de DNA e ecotoxicologia genética. O objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade do DNA de espermatozoides de sêmen caprino submetido ao processo de criopreservação em água de coco em pó (ACP-101c/102c). O experimento foi realizado na Universidade Federal do Piauí com duas cabras em idade reprodutiva. A avaliação da integridade do DNA espermático foi realizada em microscópio de imunofluorescência. Foram utilizadas classes de 0 a 3, sendo 0 nenhum dano e 3, a cauda do cometa maior que o dobro do tamanho do nucleoide. Os resultados obtidos no grupo teste G2 (ACP 101c-102c) mostraram uma leve formação de cauda, indicando uma leve fragmentação do DNA. Concluiu-se que no grupo controle GC1 (TRIS + gema de ovo de Gallu gallus domesticus) e no grupo experimental (ACP 101c - 102c) não houve diferença significativa