乌鳢免疫球蛋白M重链和免疫球蛋白轻链的克隆与特征分析

应用RACE-PCR方法克隆并鉴定了乌鳢免疫球蛋白M(i mmunoglobulin M,Ig M)重链(H)和免疫球蛋白轻链(L)全长cDNA。乌鳢IgH cDNA全长1 912个核苷酸(nt),包含1 797 nt的开放阅读框,编码598个氨基酸(aa)。IgH恒定区(CH)均包含1对保守的半胱氨酸残基形成链内二硫键,其中CH1区氨基末端存在保守的半胱氨酸残基与轻链形成链间二硫键,4个推测的N-糖基化位点(NXT和NXS)则分别位于CH1、CH2和CH4。序列比对发现乌鳢IgHCH1与CH2交界处氨

母乳喂养结合音乐播放对新生儿足跟采血疼痛缓解的观察

目的:观察母乳喂养结合音乐播放对足月健康新生儿足跟采血的止痛效果。方法:于2014年8月至2015年2月期间在厦门市某三甲医院抽取292例足月新生儿,随机分为对照组、母乳喂养组、音乐组、音乐联合母乳喂养组共4组,每组73人。在足跟采血接受新生儿疾病筛查时,对照组新生儿给予常规足跟采血,干预组在采血前2 MIn到采血结束5 MIn分别给予纯母乳喂养、音乐疗法、以及音乐联合母乳喂养的相应干预。采血疼痛评分采用新生儿面部编码系统(nfCS)。结果:给予母乳喂养结合音乐播放干预的新生儿采血中和采血后1 MIn的nfCS明显低于音乐组和对照组,痛苦面容开始时间显著晚于对照组和音乐组,痛苦面容持续时间显著短于对照组和音乐组,差异均具有统计学意义(P0.05)。音乐组和对照组新生儿之间在上述各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:母乳喂养可以有效缓解新生儿足跟采血的疼痛程度,单纯音乐疗法不能够加强母乳喂养的止痛效果

Screening, cloning and expression analysis of immune-relevant genes in Chinese soft-shelled turtle Trionyx sinensis

摘 要 本研究在最为薄弱的爬行动物免疫学研究领域进行了有意义的探索。应用抑制性差减杂交技术，首次构建了一个与嗜水气单胞菌 (Aeromonas hydrophila) 感染有关的中华鳖 (Trionyx sinensis) 主要内脏器官的差减cDNA文库。从200多个克隆中筛选到42个差异或上调表达的基因，其中16个与免疫相关基因系爬行类首次鉴定。经虚拟Northern 杂交和RT-PCR验证，其中的6个基因（IL-8、SAA、CD9、ATF4、CL和毒素样蛋白）在中华鳖感染组织均上调表达。 通过RACE方法得到中华鳖IL-8、SAA、毒素样蛋白、CD9和Fg基因的全长cDNA序列并进行了分子结构和进化分析；通过Genome Walking方法得到前3个基因的基因组及启动子序列。中华鳖IL-8基因组全长4924 bp，由三个内含子和四个外显子组成；cDNA全长为1188 bp，开放阅读框包含312 bp，编码蛋白为104个氨基酸，含有保守的CXC结构域、4个半胱氨酸和与功能相关的ELR基序。SAA基因组全长3153 bp，由两个内含子和三个外显子组成；cDNA全长为554 bp，开放阅读框包含381 bp，编码蛋白为127个氨基酸，C-端氨基酸十分保守，N-端由疏水氨基酸组成。毒素样蛋白基因组全长1995 bp，由两个内含子和三个外显子组成；cDNA全长为580 bp，开放阅读框包含267bp，编码蛋白为89个氨基酸，含有8个保守的半胱氨酸和三指蛋白家族的标志序列C-末端CCXXXCN基序。CD9 cDNA全长为1146 bp，开放阅读框包含672bp，编码蛋白为224个氨基酸，包含四个跨膜结构域（TM）和大小两个胞外环（LEL和SEL），LEL内含有保守的CCG基序和4个半胱氨酸，SEL内含一个N-端糖基化位点。Fg cDNA全长为1605 bp，开放阅读框包含1320bp，编码蛋白为440个氨基酸，含有FReD结构域、N-末端球形结构域C-gamma、Ca2+结合位点和聚合口袋结构等。系统进化分析显示，除毒素样蛋白与一种美洲大毒蛇的毒素样蛋白聚为一支外，其余四个蛋白均与鸟类的同源分子聚为一支。 RT-PCR分析显示在中华鳖相关组织中均检测到IL-8、CD9和毒素样蛋白基因的转录产物。其中IL-8基因为组成型表达；CD9基因主要在肝和脾组织表达；而毒素样蛋白基因主要在肝和肾组织中表达。RT-PCR结果表明，除SAA外，其余4种急性期蛋白（APP）Fg、C3、ALB和 CL基因均在肝组织表达。 通过RQ-PCR，发现在嗜水气单胞菌感染条件下，IL-8、CD9和毒素样蛋白在中华鳖相关组织中呈现动态表达变化。其中IL-8基因于感染后第4天以肝、脾和肾组织上调表达最明显；而CD9基因在2-4天以肝、脾和血液上调表达最明显；毒素样蛋白基因于感染后第1–2天以肝、脾、心脏和血液上调表达最明显；除ALB基因下调表达外，其它4种APP基因在肝组织均有不同程度的诱导表达，其中SAA于感染后第2天在肝组织上调至2000倍；表明这些基因的表达变化与爬行类抗细菌免疫密切相关。 完成了中华鳖IL-8基因的原核表达和蛋白纯化。趋化实验表明，rIL-8蛋白浓度为1.0―20ng/ml时对中华鳖嗜中性粒细胞有趋化作用，对淋巴细胞趋化作用不明显。首次证实了爬行动物rIL-8对嗜中性粒细胞的趋化作用

The Determinants of Foreign Banking Expansions

本論文的研究目的在探討影響多國籍銀行（Multinational Bank）進行海外擴張的決定因素。本文採用多國籍銀行在當地設立經營據點的直接投資（Foreign Direct Investment, FDI）方式為代理變數，且有別於之前的跨國研究，同時考量到地主國直接投資的銀行家數與設立的分支機構數。 本文共有三個研究子題，第一個子題以台灣為樣本，分析多國籍銀行進行海外擴張，與在當地同國籍的顧客間的關係。實證結果顯示，當以實體分支機構的擴張為外國銀行擴張的代理變數時，完全支持追隨顧客理論，但以財務擴張為外國銀行擴張的代理變數時，幾近完全支持追隨顧客理論。 第二個子題分析台北、香港和上海（兩岸三地）對外國銀行的吸引力，探討影響外國銀行選擇三個城市進行海外擴張的因素。在國家總體銀行家數的實證結果中顯示，母國GDP愈高、母國與地主國的地理距離愈近、母國與地主國的雙邊貿易愈多以及群聚效果，與在地主國投資的多國籍銀行家數呈現正向關係。至於銀行選擇在這三個城市投資後，會設立多少個分支機構，主要受兩個因素影響，當銀行總資產愈多，以及母國與地主國的文化距離愈近，銀行設立的分支機構愈多。 第三個子題分析多國籍銀行選擇亞洲十個主要城市進行海外擴張的決定因素。實證結果顯示，影響多國籍銀行在亞洲城市直接投資的因素可區分為三方面，首先是母國因素，當母國經濟規模愈大或大銀行家數愈多，在地主城市設立營運據點的銀行較多，設立的分支機構亦較多。其次是母國與地主國間的整合程度，當兩國間的雙邊貿易額增加以及兩國距離較近，在地主城市設立營運據點的銀行家數較少，分支機構也較少。最後是地主國因素，當地主國的經濟環境愈自由、地主國的法規品質愈高或地主國本身為國際金融中心，也會吸引較多的外國銀行，並設立較多分支機構

Do Banks Follow Their Corporate or Non-corporate Customers to Taiwan? A Test of "Follow the Customers" Hypothesis

本文的目的在檢驗「追隨顧客」理論，探討多國籍銀行是否會隨著顧客至臺灣進行海外擴張。不同於以往探討銀行海外擴張的研究只考慮「企業顧客」，本文的「顧客」包含法人企業與自然人勞工顧客，企業顧客以「雙邊貿易額」與「來臺投資金額」為代理變數，勞工顧客以「在臺外籍勞工人數」為代理變數。本文外國銀行海外擴張的代理變數可分成二類，第一類為實體分支機構的擴張，第二類為財務面的擴張，包括銀行資本、資產、存放款、營業收入與人事費用。實證結果顯示，實體分支機構的擴張完全支持「追隨顧客」理論，外國銀行會追隨企業與勞工顧客到臺灣進行實體擴張，而財務面的擴張結果因財務代理變數不同稍有差異。This paper investigates the "follow the customer" hypothesis using the case of foreign bank expansions in Taiwan. Our customers here contain both corporate entities and individuals, where the former is commonly seen in the literature, the latter has not yet been explored except for Esperanca and Gulamhussen (2001). Because of Taiwan's unique features, our individual customers include only the Philippine and Thai laborers. Furthermore, we also consider two types of foreign expansions, where the first one is physical expansion by setting up new branches by foreign banks and the second one is financial expansion, including increasing invested capital, asset, deposit, loan, revenue and personnel expenses. Our results show that when foreign expansion is the physical expansion, the hypothesis holds for both corporate and individual customers. However, when it is financial expansion, results change slightly for different proxies of financial expansion

嗜水气单胞菌感染的中华鳖主要器官差减cDNA文库的构建

以致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)人工感染的中华鳖(Trionyx sinensis)肝、脾、肾组织为材料,应用抑制性差减杂交(SSH)技术,构建了嗜水气单胞菌感染组织的差减cDNA文库。以中华鳖管家基因-βactin作为差减指标检测该文库差减效率达210倍,表明感染细菌后某些差异表达基因得到了相应倍数的富集。将获得的cDNA片段连接到pMD18-T载体并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。PCR阳性检测显示差减片段在150—800bp之间。该差减cDNA文库的构建为快速分离和

乌鳢(Channa argus)干扰素刺激基因Viperin和ISG15及其启动子的克隆与特征分析

应用抑制差减杂交、末端快速扩增和基因步移技术,克隆并鉴定了乌鳢干扰素刺激基因Viperin和ISG15及其启动子序列.Viperin cDNA全长1474nt,包含1059nt的开放阅读框,编码352个氨基酸.除N末端70个氨基酸外,Viperin蛋白氨基酸序列在鱼类和哺乳类具有高度的保守性.ISG15 cDNA全长758nt,包含468nt的开放阅读框,编码155个氨基酸,含有两个泛素样(UBL)结构域,C末端具有保守的UB偶联结构(LRGG).Viperin和ISG15启动子区存在保守的干扰素刺激反

养殖乌鳢类立克次体感染的超微病理学研究

应用电子显微镜技术,观察了养殖乌鳢RLO感染主要内脏器官超微结构病理变化,并初步探讨了发病机制。观察发现:RLO寄生细胞明显肿大,胞质电子密度低,细胞器肿大、溶解,RLO可随肿胀、破裂的细胞进入组织间隙;在一些寄生细胞内尚发现变性的RLO。内脏组织细胞普遍肿大,细胞器分散、稀少,线粒体除明显肿胀、嵴断裂消失外,尚发现坏死性变化即出现致密核心或无定形的电子密度物质;粗面内质网扩张、破裂和脱颗粒;部分细胞内溶酶体增多,胞质内发现明显的髓鞘样结构;核肿大或核固缩、溶解,并可见核内出现髓鞘样结构和核包含物