25 research outputs found
Eggs and chicken embryos as potential sentinels for flock and hatchery health
Tese de Doutoramento em Ciências Veterinárias, especialidade Sanidade AnimalSuccessful hatching of strong, healthy chicks with a potential for good productive and
reproductive performance depends on the assurance of as normal and ideal as
possible embryonic development. The latter, however, can be negatively affected by a
series of factors intrinsic to either the egg, its handling, or the incubator.
This project aimed at collecting and interpreting essential and extensive information
regarding embryonal response to physical challenges (temperature, relative humidity
and carbon dioxide concentration) in the incubation environment, to infectious
challenge with vertically transmitted Salmonella serovars Enteritidis and Typhimurium
and, ultimately, to apply the knowledge obtained to a field survey of a commercial
hatchery.
For this purpose, eggs were incubated under different, controlled environments or after
infection with a vertically transmitted pathogen, and an extensive list of parameters
used to monitor subsequent changes in embryonic behavior, metabolism, growth and
viability. The information gathered was then applied to a sample of non-viable eggs
incubated at a major hatchery.
Overall, the effects of manipulating temperature were more prominent than those of
manipulating humidity and carbon dioxide. The most significantly affected parameters
pertained to embryo metabolism, embryo weight, mortality and malformation rates.
Changes in the development of the lymphoid follicles in the bursa of Fabricius and of
the glandular epithelium of the gizzard were also found.
Vertical infection with Salmonella was associated with higher embryonic mortality rates.
No changes in performance or growth were observed in infected but viable embryos.
The results obtained during the field survey did not directly correlate to the variables
studied. However, the issues detected allowed for the designation of critical control
points and opportunities for performance improvement that could have otherwise gone
undetected at the hatchery and at the breeder farm, highlighting the importance of
embryodiagnosis in the monitoring of hatchery and flock health.A operação eficiente e lucrativa de uma exploração industrial produtora de espécies
aviárias (Gallus gallus) depende, entre outras coisas, do acesso a pintos saudáveis e
com bom potencial produtivo, obtidos por incubação artificial de ovos de um bando
reprodutor. É com a incubação destes ovos, levada a cabo em grande escala por
máquinas altamente especializadas, que se inicia o desenvolvimento das aves, tendo
esta influência directa sobre a viabilidade e futura performance do pinto eclodido.
Vários factores podem intervir negativamente no sucesso da incubação, estando estes
relacionados com o ovo em si, com o seu manuseamento ou com a própria
incubadora.
Por essa razão, este trabalho teve por objectivo adquirir, coligir e interpretar
informação essencial sobre a resposta embrionária a alterações físicas do ambiente
de incubação (temperatura, humidade relativa (RH) e concentração de dióxido de
carbono), assim como à infecção com agentes patogénicos com transmissão vertical
conhecida (Salmonella enterica vars. Enteritidis e Typhimurium). Estes ensaios foram
conduzidos em laboratório, em ambiente cuidadosamente controlado. Numa segunda
fase, o conhecimento obtido através de experimentação laboratorial foi aplicado na
análise de uma amostra de ovos incubados provenientes de um centro de incubação
industrial, com o objectivo de verificar a compatibilidade dos dados experimentais com
os dados obtidos em situação real.
Com vista a estudar a influência de alterações no ambiente de incubação sobre o
desenvolvimento embrionário, procedeu-se à incubação de 2300 ovos specificpathogen
free, dividos em dez grupos diferentes. O primeiro grupo foi incubado sob
condições controlo (temperatura - 37.8ºC; RH - 50-55% durante os primeiros 18 dias
de incubação e 60-65% durante os últimos 3 dias) e os restantes cinco grupos
incubados sob: A) temperatura elevada constante (38.9ºC) e RH padrão; B)
temperatura inferior constante (36.7ºC) e RH padrão; C) temperatura e RH padrão
com um período (3 h) de elevação da temperatura (38.9ºC) aos dias 3 e 18 de
incubação; D) temperatura e RH padrão com um período (3 h) de redução da
temperatura (36.7ºC) aos dias 3 e 18 de incubação; E) humidade relativa elevada
constante (63%) e temperatura padrão; F) humidade relativa inferior constante (43%) e
temperatura padrão; G) humidade relativa e temperatura padrão com um período (3 h)
de elevação da RH (63%) aos dias 3 e 18 de incubação; H) temperatura padrão com
um período (3 h) de redução da RH (43%) aos dias 3 e 18 de incubação; I) ausência
de renovação de ar/concentração de CO2 elevada constante durante incubação sob
temperatura e RH padrão.
Para investigar a influência da infecção com microrganismos transmitidos
verticalmente, foram utilizados 576 ovos specific-pathogen free, divididos por oito
grupos, quatro grupos controlo e quatro grupos inoculados. O primeiro grupo tratado
foi inoculado com 105 CFU/ml de uma cultura de referência de S. enterica var.
Enteritidis (CECT-4300) em NaCl (0,9%) estéril. O segundo grupo foi inoculado com
102 CFU/ml (dose de inoculação semelhante à concentração destas bactérias
previamente reportada em ovos naturalmente infetados) da mesma cultura de
referência. O terceiro grupo foi inoculado com 105 CFU/ml de uma cultura de
referência de S. enterica var. Typhimurium (CECT-443) em NaCl (0,9%) estéril.
Finalmente, o quarto grupo foi inoculado com 102 CFU/ml da mesma cultura de
referência. Cada grupo tratado foi incubado juntamente com um grupo controlo
inoculado com NaCl (0.9%) estéril. A presença ou ausência de Salmonella em cada
grupo foi confirmada através de PCR multiplex convencional.
Em todos os ensaios, foi retirada uma amostra de ovos da incubadora a cada 48 horas
de incubação para análise dos efeitos das diferentes manipulações sobre o
desenvolvimento embrionário. Uma extensa lista de parâmetros relacionados com o
comportamento, metabolismo, crescimento e viabilidade dos embriões foi depois
analisada.
Em relação ao estudo de campo, foi efetuada análise morfológica, histológica e
microbiológica de uma amostra de 51 ovos não viáveis, obtidos após 21 dias de
incubação, num centro de incubação industrial.
Relativamente aos ensaios de manipulação do ambiente físico de incubação, os
resultados obtidos permitiram concluir que as alterações de temperatura, em qualquer
direção, exerceram efeitos mais marcados sobre o desenvolvimento embrionário do
que as alterações na humidade relativa ou na concentração de CO2 no interior da
incubadora, enquanto que estas duas últimas variáveis produzem efeitos na sua maior
parte sobreponíveis. Dos parâmetros monitorizados, aqueles que mais
consistentemente apresentaram alterações encontravam-se relacionados com o
comportamento e metabolismo embrionários, nomeadamente com a diminuição do
metabolismo embrionário como consequência do stress induzido pela manipulação. O
crescimento embrionário, representado pelo peso do embrião e por parâmetros
alométricos, foi igualmente afetado, tendo-se verificado que as alterações de
temperatura resultaram em embriões mais leves, enquanto as alterações de humidade
relativa e CO2 produziram embriões de tamanho semelhante mas peso superior aos
dos restantes tratamentos. À análise histológica, os embriões sujeitos a alterações
contínuas de temperatura apresentaram ainda atraso na formação do tecido linfoide da
bolsa de Fabricius e alterações celulares com distorção da arquitetura do epitélio
glandular da moela, estas últimas em embriões sujeitos a aumentos de temperatura).
Os embriões sujeitos a modificações da humidade relativa produziram efeitos
temporários sobre o desenvolvimento do tecido hepático. As lesões microscópicas
encontradas em animais mortos durante a incubação não permitiram o diagnóstico
fiável da(s) causa(s) imediata de morte. Nenhum dos tratamentos produziu elevação
significativa dos níveis de mortalidade, à exceção da incubação sob temperaturas
inferiores ao normal. Dos restantes tratamentos, a elevação da humidade relativa
resultou num aumento da mortalidade no final do período de incubação. Ainda
relativamente à viabilidade embrionária, verificou-se que apenas as manipulações da
temperatura de incubação resultaram num aumento significativo na incidência de
malformações espontâneas. Finalmente, é de notar que, para todas as variáveis
estudadas, a alteração contínua de uma variável produziu efeitos mais pronunciados e
duradouros, enquanto a alteração pontual e temporária de uma variável produziu
efeitos mais limitados, tanto em amplitude como em duração.
Ao contrário dos ensaios de manipulação do ambiente de incubação, a inoculação de
ovos specific-pathogen free não incubados com serovars de Salmonella enterica e sua
posterior incubação não produziu alterações significativas no comportamento,
metabolismo ou desenvolvimento embrionários. A inoculação de S. Enteridis, tanto em
inóculo alto como em inóculo baixo, resultou num aumento significativo da taxa de
mortalidade, sendo que esta se encontrou limitada aos primeiros 7 dias de incubação.
A inoculação com qualquer dos inóculos de S. Typhimurium produziu, igualmente,
níveis de mortalidade superiores comparados com os controlos, limitados aos
primeiros dias de incubação, mas inferiores aos produzidos por S. Enteritidis. As
lesões microscópicas observadas em animais encontrados mortos não permitiram o
diagnóstico fiável da(s) causa(s) imediata de morte, sendo que a única diferença
significativa encontrada se restringiu a alteração da afinidade tintoral dos tecidos
provenientes de embriões infetados, indicativa de decomposição mais acelerada
provavelmente devido a maior proliferação bacteriana. Contudo, nenhum dos embriões
viáveis inoculados apresentou qualquer alteração macroscópica ou histológica
significativa e em nenhum destes animais se observaram agregados bacterianos à
análise microscópica, apesar da presença de infeção confirmada por métodos de
biologia molecular. Os resultados obtidos sugeriram, ainda, que ambos os serovars de
Salmonella utilizados apresentam tropismo para o embrião, possuindo a capacidade
de não só sobreviver dentro do ovo, mas também de atravessar compartimentos
orgânicos em direção ao embrião. Estas observações evidenciam algumas das razões
para a eficiência demonstrada por estes serovars (e particularmente S. Enteritidis) na
transmissão vertical e estabelecimento de portadores assintomáticos.
Em relação ao estudo de campo, a análise dos ovos não viáveis não evidenciou
diminuição de performance ou viabilidade embrionária devido a qualquer das variáveis
estudadas em laboratório. Contudo, o exame externo, macroscópico dos ovos, assim
como a sua análise microbiológica evidenciaram problemas na seleção e calibração
dos ovos para incubação, assim como na possível higiene e práticas de recolha dos
ovos na exploração de reprodutores, sinalizando potenciais pontos de intervenção
futura com vista ao melhoramento da performance de incubação que de outra forma
não seriam detetados.
Finalmente, este trabalho permitiu a aquisição de informação essencial para a
compreensão da resposta embrionária aos desafios da incubação, permitindo ainda
confirmar a importância do embriodiagnóstico na monitorização da saúde da
incubadora e do bando
The Retina in Health and Disease
Vision is the most important sense in higher mammals. The retina is the first step in visual processing and the window to the brain. It is not surprising that problems arising in the retina lead to moderate to severe visual impairments. We offer here a collection of reviews as well as original papers dealing with various aspects of retinal function as well as dysfunction. New approaches in retinal research are described, such as the expression and localization of the endocannabinoid system in the normal retina and the role of cannabinoid receptors that could offer new avenues of research in the development of potential treatments for retinal diseases. Moreover, new insights are offered in advancing knowledge towards the prevention and cure of visual pathologies, mainly AMD, RP, and diabetic retinopathy
Upper airways segmentation using principal curvatures
Esta tesis propone una nueva técnica para segmentar las vías aéreas superiores. Esta propuesta
permite la extracción de estructuras curvilíneas usando curvaturas principales. La propuesta
permite la extracción de éstas estructuras en imágenes 2D y 3D. Entre las principales novedades
se encuentra la propuesta de un nuevo criterio de parada en la propagación del algoritmo de
realce de contraste (operador multi-escala de tipo sombrero alto). De la misma forma, el criterio
de parada propuesto es usado para detener los algoritmos de difusión anisotrópica. Además, un
nuevo criterio es propuesto para seleccionar las curvaturas principales que conforman las
estructuras curvilíneas, que se basa en los criterios propuestos por Steger, Deng et. al. y
Armande et. al. Además, se propone un nuevo algoritmo para realizar la supresión de nomáximos
que permite reducir la presencia de discontinuidades en el borde de las estructuras
curvilíneas. Para extraer los bordes de las estructuras curvilíneas, se utiliza un algoritmo de
enlace que incluye un nuevo criterio de distancia para reducir la aparición de agujeros en la
estructura final. Finalmente, con base en los resultados obtenidos, se utiliza un algoritmo
morfológico para cerrar los agujeros y se aplica un algoritmo de crecimiento de regiones para
obtener la segmentación final de las vías respiratorias superiores.This dissertation proposes a new approach to segment the upper airways. This proposal allows
the extraction of curvilinear structures based on the principal curvatures. The proposal
allows extracting these structures from 2D and 3D images. Among the main novelties is the
proposal of a new stopping criterion to stop the propagation of the contrast enhancement algorithm
(multiscale top-hat morphological operator). In the same way, the proposed stopping
criterion is used to stop the anisotropic diffusion algorithms. In addition, a new criterion is
proposed to select the principal curvatures that make up the curvilinear structures, which is
based on the criteria proposed by Steger, Deng et. al. and Armande et. al. Furthermore, a
new algorithm to perform the non-maximum suppression that allows reducing the presence
of discontinuities in the border of curvilinear structures is proposed. To extract the edges of
the curvilinear structures, a linking algorithm is used that includes a new distance criterion to
reduce the appearance of gaps in the final structure. Finally, based on the obtained results, a
morphological algorithm is used to close the gaps and a region growing algorithm to obtain
the final upper airways segmentation is applied.Doctor en IngenieríaDoctorad
Textbook of Plastic and Reconstructive Surgery
Written by experts from London’s renowned Royal Free hospital, Textbook of Plastic and Reconstructive Surgery offers a comprehensive overview of the vast topic of reconstructive plastic surgery and its various subspecialties for introductory plastic surgery and surgical science courses. The book comprises five sections covering the fundamental principles of plastic surgery, cancer, burns and trauma, paediatric plastic surgery and aesthetic surgery, and covers the breadth of knowledge that students need to further their career in this exciting field. Additional coverage of areas in which reconstructive surgery techniques are called upon includes abdominal wall reconstruction, ear reconstruction and genital reconstruction. A section on aesthetic surgery includes facial aesthetic surgery and blepharoplasty, aesthetic breast surgery, body contouring and the evolution of hair transplantation. The broad scope of this volume makes this a unique contribution to the field.Heavily illustrated throughout, Textbook of Plastic and Reconstructive Surgery is essential reading for anyone interested in furthering their knowledge of this exciting field