Local sustainable mobility management. Are Portuguese municipalities aware?

Urban mobility has become an international problem and several countries have joined together in different consortia, signing international agreements and developing projects with a view to establishing new standards for current mobility levels and the development of the transport systems of the future. Although such worldwide increasing effort regarding sustainable mobility issue, namely by the most proactive European cities, it is not yet clear why measures towards sustainable mobility are not implemented by the generality of local authorities. The main goal of this paper is to identify the different sustainable mobility strategies and the corresponding perceptions by local public authorities. Such local governance aspects have yet to be dealt with appropriately and in a credible way. This shortcoming is particularly acute in Portugal where sustainable urban mobility management is still highly underdeveloped and very few studies have been dedicated to the matter. We provide new evidence on the perceptions and strategies of the Portuguese local public authorities regarding sustainable urban mobility management. Through a survey to all Portuguese municipalities we provide brand new evidence on their perceptions and strategies regarding sustainable urban mobility management. Estimates based on econometric regressions indicate that the most mobility-conscious municipalities are, on average, those that are richer, more cultural and educated, possess alternative transport parks and routes, have larger and more human capital intensive mobility departments. Results show that more than simply participating in urban regeneration programs it is necessary a more committed attitude, namely that municipalities’ urban plans explicitly mention mobility issues and indicators. All the models estimated clearly evidence a higher awareness of North municipalities towards sustainable mobility issues.Zona Euro; Sustainability; mobility management; regions; human capital

Development of a new biophotocatalytic system for biofuel production

Currently, global energy requirements rely heavily on fossil fuels, the primary contributors to global warming and severe climate changes. It is imperative to decarbonize the energy supply sector, by utilizing an alternative, clean and sustainable energy source, like hydrogen, that can be generated from renewable resources, such as solar energy. The aim of this dissertation was the construction of a new biophotocatalytic system using non-photosynthetic anaerobic bacteria coupled with semiconductor metal sulfide nanoparticles, for light-driven H2 production. In this system, nanoparticles act as light-harvesting material, enabling the microorganism to capture and absorb sunlight energy, using it for H2 generation. In the present work, four bacteria Citrobacter freundii , Clos tridium acetobutylicum , Desulfovibrio vulgaris and Desulfovibrio desulfuricans were used as biocatalysts with self-produced cadmium sulfide (CdS) nanoparticles to produce hydrogen. The performance of these biohybrids was further compared with the control system Escherichia coli -CdS. Moreover, new semiconductor combinations were tested, by loading cocatalysts metals tungsten (W), nickel (Ni) and molybdenum (Mo) into CdS. The D. desulfuricans -CdS biohybrid was demonstrated to be the best photocatalytic system for light-driven H2 production from the four biohybrids proposed and E. coli -CdS control system. D. desulfuricans -CdS system presented a remarkable H2 production both in the presence and absence of the electron mediator methyl viologen (MV), with 46.0±4.8 and 31.7±8.1 µmol of H2, respectively, after 45 and 142 h of light irradiation. The D. desulfuricans -CdS performance was improved by adding cocatalysts, especially Mo, that allowed the increase of H2 production rate from 34.0±0.8 to 130.8±9.3 µmol gdcw-1h-1, without MV. Finally, D. desulfuricans -CdS-MoS2 was successfully immobilized in calcium alginate beads and a batch photoreactor for H2 production was constructed. These results show the high potential of D. desulfuricans -CdS-MoS2 biohybrid photosystem for an efficient and clean hydrogen production

Expectations on team performance, collective efficacy and team effectiveness

O objetivo deste estudo é contribuir para a investigação sobre a eficácia de equipas, investigando o impacto das expectativas dos membros sobre o desempenho da equipa a que pertencem, considerando-se o papel mediador da eficácia coletiva, para promover a performance da equipa e satisfação. Existindo já diversa pesquisa empírica sobre a importância da eficácia coletiva como um preditor de eficácia, este estudo pretende contribuir para uma melhor compreensão do seu efeito no papel de mediador, no modelo de de eficácia da equipas, IMOI (Input-mediador-Input-Output), assumindo as expectativas de desempenho como um importante input no processo. Os dados para este estudo correlacional foram obtidos a partir de 175 equipas (799 pessoas) que participaram numa competição de estratégia e gestão, Global Management Challenge. Uma simulação da vida empresarial onde equipas são responsáveis pela gestão de uma empresa fictícia com o objetivo de alcançar o maior valor de ação na simulada bolsa de valores. Os resultados mostram que as expectativas dos membros da equipa sobre o desempenho estão relacionados com a eficácia coletiva, o desempenho da equipa e satisfação, e as regressões múltiplas levadas a cabo e analisadas apoiaram parcialmente o papel mediador da eficácia coletiva entre o input (expectativas) e os outputs (performance e satisfação),considerados no modelo de eficácia da equipa analisado nesta pesquisa.The purpose of this study is to contribute to research on the effectiveness of team, investigating the impact of members’ expectations about the team performance they belong to, considering the mediating role of collective efficacy, to promote team performance and satisfaction. Existing already diverse empirical research on the importance of collective efficacy as a predictor of efficacy, this study aims to contribute to a better understanding of its effect in the role of mediator, in IMOI (Input-Mediator-Output-Input) model of team effectiveness, having performance expectations as an important input in the process. Data to this correlational study was obtained from 175 teams (799 individuals) who participated on a strategy and management competition, Global Management Challenge. A simulation of business life were teams are responsible for running a fictitious company with the aim to achieve the highest share price on the simulated stock exchange. Results show that team members’ expectations on performance are related with collective efficacy, team performance and satisfaction, and the applied multiple regression analyzes partially support collective efficacy mediating role between the input (expectations) and outputs (performance and satisfaction) considered in the effectiveness team model analyzed on this research

Are the self-esteem and the adult attachment affected by previous experiences of youth victimization?

Poster presented at the 4th International Congress of CiiEM – “Health, Well-being and Ageing in the XXI Century.” 2-5 June 2019, Campus Egas Moniz, Monte de Caparica, PortugalN/

Are self-esteem and adult attachment affected by previous experiences of youth victimisation?

Abstract in proceedings of the Fourth International Congress of CiiEM: Health, Well-Being and Ageing in the 21st Century, held at Egas Moniz’ University Campus in Monte de Caparica, Almada, from 3–5 June 2019.This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/), which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Epitranscriptomic deregulation in bladder cancer: implications for tumour aggressiveness

Tese de mestrado, Biologia Molecular e Genética, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2019O cancro de bexiga é o nono cancro mais incidente no mundo e a décima terceira principal causa de morte por cancro, de acordo com o estudo GLOBOCAN 2018. A maioria dos casos de cancro de bexiga (> 90%) surge no revestimento interno do trato urinário (urotélio) e são designados por carcinoma de células uroteliais. Os subtipos menos comuns são o carcinoma espinocelular, adenocarcinoma, carcinoma de pequenas células e sarcoma. Adicionalmente, o cancro de bexiga pode ser classificado em não músculo-invasivo e em músculo-invasivo. Este primeiro, é responsável por aproximadamente 75% de todos os cancros de bexiga diagnosticados. Apesar destes tumores, geralmente, não representarem uma ameaça à vida dos doentes, a taxa de recorrência é elevada. Por outro lado, tumores músculo-invasivos, que representam cerca de 25% dos casos, são tumores clinicamente mais agressivos, que podem progredir rapidamente, apresentando capacidade de invadir e metastizar para outros órgãos. Assim, há uma necessidade urgente de compreender os mecanismos de progressão do cancro de bexiga, para assim desenvolver novas estratégias de diagnóstico, bem como abordagens terapêuticas efetivas. Nos últimos anos, o número de estudos na área da genética, epigenética e epitranscriptómica aumentaram drasticamente, principalmente devido ao rápido aprimoramento das tecnologias de sequenciação de alto rendimento de nova geração. CH Waddington, definiu originalmente o termo Epigenética como o estudo de "mecanismos causais pelos quais os genes do genótipo produzem efeitos fenotípicos". Ao longo do tempo, esta definição sofreu algumas alterações, sendo, hoje, definida como “o estudo de alterações hereditárias na expressão génica que ocorrem independentemente das alterações na sequência primária de ADN". Recentemente foram identificados novos mecanismos de regulação da expressão génica, ao nível do ácido ribonucleico (ARN), designado por epitranscriptómica. Esta refere-se ao estudo de modificações químicas, reversíveis, que podem ocorrer quer em moléculas de ARN, quer em ARN não codificante (ncARN) e em ARN mensageiro (mARN). A N6-metiladenosina (m6A), metilação da adenosina na posição nitrogénio-6, é a modificação química interna mais abundante nos mARNs dos seres eucarióticos. Esta modificação ocorre, preferencialmente, na sequência DRACH (onde D indica A/G/U; R indica A/G e H indica A/C/U), sendo especificamente enriquecida próximo do codão stop, nas regiões 3' não-traduzidas e em grandes exões internos. O seu potencial na regulação da expressão génica foi recentemente explorado e sabe-se que, esta modificação pode afetar diferentes vias do mARN, como a transcrição, splicing, exportação do núcleo e tradução. Nas células de mamíferos, esta modificação é catalisada pelo complexo m6A metiltransferase ("writters") e pode ser removida pelas desmetilases ("erasers"). Além disso, existem proteínas que se ligam diretamente à modificação m6A, mediando a sua função. Estas são conhecidas como “readers”. Vários estudos revelaram que a metilação do m6A, bem como das suas proteínas reguladoras, desempenha um papel crucial no processo de tumorigénese em diferentes modelos. No entanto, o envolvimento desta modificação no cancro de bexiga é ainda limitado, sendo, portanto, necessário investigar as suas funções no contexto desta neoplasia. O objetivo do nosso estudo é descobrir o papel da m6A no cancro de bexiga, a fim de perceber quais os mecanismos moleculares subjacentes à agressividade tumoral. A seleção das proteínas reguladoras da m6A mais informativas para o nosso projeto foi realizada pela análise in silico dos dados de ARN-seq de doentes com cancro de bexiga músculo-invasivo, disponíveis na base de dados do TCGA. Esta análise revelou que as principais proteínas reguladoras da m6A desreguladas eram o METTL3, METTL14, VIRMA, WTAP, que formam um “writter complex”, sendo o METTL3 a única proteína com atividade catalítica, o ALKBH5 e FTO, que têm a capacidade de desmetilar o m6A, e o YTHDF3 que tem como função “ler” a marca no citoplasma, determinando se o mARN é traduzido ou degradado. Assim, foi selecionada (n=120) uma série de tecidos de cancro de bexiga primário, sem qualquer tratamento, dos quais 50% são músculo-invasivo e 50% não músculo-invasivo), bem como uma série de tecidos normais. Em seguida, foi realizada quantificação proteica, por imunohistoquímica. Tal serviu para comparar a expressão em tecidos tumorais e tecidos normais, sendo que, dentro dos tecidos tumorais, a expressão diferencial nos músculo-invasivo e não músculo-invasivo também foi avaliada. A METTL3, METTL14, VIRMA, ALKBH5 e YTHDF3 apresentam uma expressão significativamente menor nos tumores por comparação com tecidos normais. Além disso, a METTL3 e a METTL14, que formam um heterodímero estável, apresentam uma redução de expressão significativa nos tumores músculo-invasivo, quando comparado com os não músculo-invasivos. Analisámos a correlação da expressão destas proteínas reguladores e da m6A entre si. Para além disso, observámos que a expressão do reader (YTHDF3) e de todos os writters estudados se correlacionou positivamente com a expressão da m6A. O mesmo foi observado em relação à expressão das erasers. Curiosamente, também foram observadas correlações entre a expressão dos writters e erasers, com exceção da WTAP com ambas as erasers, bem como do VIRMA e do FTO. Assim, estes resultados sugerem que a correlação observada entre os writters e as erasers pode ser explicada através de um feedback compensatório, ou seja, a diminuição dos escritores vai diminuir consequentemente a m6A, levando a uma diminuição das erasers que desmetilam esta modicação. A metilação desta modificação no ARN e a expressão das suas proteínas reguladoras, foi avaliada em linhas celulares de bexiga através do ensaio colorimétrico e Western blot, respetivamente. Uma linha celular normal, SVHUC-1, e sete linhas celulares tumorais foram usadas. Relativamente à modificação da m6A, não foram observadas diferenças significativas nas diferentes linhas celulares. Em relação às proteínas reguladoras, também não se observaram diferenças significativas para a expressão destas entre as linhas celulares testadas, com exceção do METTL14 que apresentou níveis bastantes variáveis, sendo a linha UMUC3, aquela com valores mais elevados desta proteína. Nesta sequência, com o objetivo de induzir in vitro a ablação da expressão do METTL14, foi realizado o knockdown deste gene na linha celular UMUC3, recorrendo ao sistema CRISPR-Cas9. Para avaliar a eficiência desta técnica, realizámos Western blot, onde foi comparada a expressão do METTL14 na linha celular com knockdown e na linha UMUC3 normal. Após confirmar a eficiência da redução da expressão em pelo menos 50% do METTL14, os níveis da modificação da m6A foram avaliados, a fim de perceber a importância desta proteína no complexo. Posteriormente, foram realizados ensaios fenotípicos para determinar o impacto da diminuição da sua expressão na linha celular de cancro de bexiga. Os ensaios in vitro demonstraram que a redução da expressão do METTL14 promoveu uma redução de 50% na modificação da m6A. Destes, os ensaios de viabilidade e proliferação celular, demonstram que a redução de METTL14 aumenta significativamente a viabilidade e proliferação das células de cancro de bexiga. Além disso, verificámos igualmente, que havia um aumento na capacidade de invasão e migração, comparativamente com as linhas controlo. Em sentido inverso, o knockdown do METTL14 traduziu-se numa redução na taxa de apoptose das células tranfectadas. Em resumo, a expressão das proteínas modeladoras da marca m6A encontram-se desregulada no cancro de bexiga. Particularmente, a regulação negativa do complexo METTL3/METTL14 metiltransferase associou-se à progressão do cancro de bexiga não musculo-invasivo para o cancro de bexiga músculo-invasivo. Estudos anteriores indicam que, embora a METTL14 não possua uma função catalítica, é capaz de formar um heterodímero com a METTL3, sendo necessário para a estabilização e função do complexo. Interações específicas entre o domínio METTL14- MTD14 e o domínio do METTL3- MTD3 são necessárias para a atividade catalítica da METTL3. Na mesma linha, descobrimos que a redução da expressão da METTL14 diminui a atividade do complexo writter e, portanto, a capacidade de estabelecer m6A nas moléculas de ARN. Estes resultados sugerem que a METTL14 poderá desempenhar um papel supressor tumoral, estando a redução da sua expressão associada a características celulares tumorais de maior agressividade.N6-methyladenosine (m6A) modification is the most abundant internal chemical modification of mRNAs in eukaryotes. Several studies revealed that m6A RNA methylation and the associated regulatory proteins, play crucial roles in the tumorigenesis processes of numerous types of cancers. However, knowledge of the mechanistic network between m6A and bladder cancer (BC) is limited and therefore it is necessary to investigate the functions of this modification. The aim of our study is to uncover the role of this modification in BC in order to understand the mechanisms associated with tumour aggressiveness. In silico analysis of TCGA data disclosed altered expression of the major m6A regulatory proteins, prompting subsequent validation. M6A, METTL3, METTL14, VIRMA, WTAP, ALKBH5, FTO and YTHDF3 protein expression were evaluated in a series of primary BC (n=120) and normal bladder (n=40) tissues. M6A RNA methylation and respective regulatory proteins expression were also assessed in bladder cell lines. METTL14 knockdown was performed in UMUC3 cell line using CRISPR-Cas9 system in order to study its relevance in bladder carcinogenesis. METTL3, METTL14, VIRMA, ALKBH5 and YTHDF3 showed significantly lower expression levels in tumour compared to normal tissues. Moreover, METTL3 and METTL14 (heterodimeric catalytic core) showed a significant reduction in muscle invasive (MIBC) comparing with non-muscle bladder cancer (NMIBC). No differences were apparent for m6A regulatory proteins’ expression among the tested cell lines, except for METTL14, that presented heterogenous levels of this writer in the different cells comparing with normal cell line. The in vitro METTL14 downregulation promoted a 50% reduction in m6A modification. METTL14 knockdown showed increased cell viability/proliferation, invasion and migration capacity, whereas decreased apoptosis was found in the same cells compared with the control. Our results suggest that METTL14 might have an important role in bladder cancer, and its expression associated with bladder cancer aggressiveness