Influxo de Ca2+ mediado por canais TRP em células secretoras de insulina

Dissertação de mestrado em Bioquímica apresentada ao Departamento Ciências da Vida da Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade de Coimbra.A célula-β está equipada com um mecanismo de influxo de Ca2+ distinto do mediado por canais CaV. Pretendeu-se neste trabalho identificar este mecanismo, recorrendo a técnicas de microscopia quantitativa de fluorescência para monitorizar a [Ca2+]i em ilhéus únicos de ratinho. A estimulação do influxo de Ca2+ foi efectuada, na maior parte dos casos, aumentando a [Ca2+]o para 7 mM (doravante designada como „pulso de Ca2+‟). A aplicação de um pulso de Ca2+ na presença de 3 mM glicose aumentou a [Ca2+]i. O efeito não foi afectado por hiperpolarização com o agonista de canais KATP diazóxido (100 μM), mas foi muito potenciado pelo bloqueador de canais CaV1.0 nifedipina (10 μM). Nifedipina aumentou a [Ca2+]i e acelerou o quenching da fluorescência de FURA-2 por Mn2+ no ponto isosbéstico do indicador. Os efeitos dos pulsos de Ca2+ na presença de nifedipina foram bloqueados por dois fenamatos, difenilamina-2-carboxilato (DPC, 500 μM) e ácido mefenâmico (3-80 μM; IC50=10.3 μM). O ácido mefenâmico é um inibidor aparentemente selectivo de canais TRPM3, uma sub-classe de canais TRP activada pelo esteróide neuroactivo pregnenolona. DPC aumentou a [Ca2+]i acentuadamente na ausência de nifedipina, pondo em evidência acções colaterais indesejáveis noutros transportadores de Ca2+; o efeito correspondente de ácido mefenâmico foi negligenciável. O ácido mefenâmico não afectou os aumentos da [Ca2+]i induzidos por pulsos de Ca2+ na ausência de nifedipina, indicando que os canais subjacentes são diferentes dos canais TRPM3. Também foram avaliados os efeitos de pulsos de Ca2+ utilizando células BRIN-BD11 únicas. Os pulsos de Ca2+ induziram respostas compostas por vários aumentos rápidos e transitórios, com latências variáveis, um padrão que era notoriamente diferente do registado em ilhéus. Esta observação sugere que, em células BRIN-BD11, o mecanismo subjacente ao efeito dos pulsos de Ca2+ é manifestamente diferente do que ocorre em ilhéus. Conclui-se que as células-β de ratinho estão equipadas com canais TRPM3 sensíveis a pregnenolona, nifedipina e ácido mefenâmico. Sendo estes canais permeáveis a outros catiões divalentes, é provável que sejam responsáveis por IV recapturar iões Zn2+, que são necessários para a estabilização da insulina nos grânulos da célula-β.There is evidence for the operation of a Ca2+ influx pathway distinct from CaV channels in pancreatic beta cells. I aimed at identifying this pathway, using quantitative FURA-2 fluorescence microscopy to monitor global [Ca2+]i from single mouse islets. Stimulation of Ca2+ influx was effected mostly by raising [Ca2+]o to 7 mM (henceforth designated as a „Ca2+ pulse‟). Applying a Ca2+ pulse in presence of 3 mM glucose raised the [Ca2+]i. The effect was insensitive to further hyperpolarization with the KATP channel opener diazoxide (100 μM) but was greatly enhanced by the CaV1.0 blocker nifedipine (10 μM). Nifedipine itself raised the [Ca2+]i and accelerated Mn2+ quenching of FURA-2 fluorescence at the dye‟s isosbestic point. The effects of Ca2+ pulses in presence of nifedipine were blocked by two fenamates, diphenylamine-2-carboxylate (DPC, 500 μM) and mefenamic acid (3-80 μM; IC50: 10.3 μM). Mefenamic acid is a seemingly selective inhibitor of TRPM3 channels, a TRP channel sub-class activated by the neuroactive steroid pregnenolone. DPC raised the [Ca2+]i markedly in absence of nifedipine, highlighting unwanted actions of the drug on Ca2+ transport mechanisms unrelated to TRPM3 channels; the corresponding effect of mefenamic acid was negligible. Mefenamic acid did not affect the [Ca2+]i rises evoked by Ca2+ pulses in absence of nifedipine, indicating that the underlying channels are distinct from TRPM3 channels. I have also assessed the effects of Ca2+ pulses using single insulin-secreting BRIN-BD11 cells. Ca2+ pulses elicited multi-spike responses with variable lag-times, a pattern that contrasted markedly with that in islets, suggesting that the underlying mechanism is different. It is concluded that mouse beta-cells are equipped with pregnenolone-, nifedipine- and mefenamic acid-sensitive TRPM3 channels. Since these channels are permeant to other divalent cations, they may provide the re-uptake of Zn2+ ions, required to stabilize insulin in the beta-cell granules

Pervasive gaps in Amazonian ecological research

Biodiversity loss is one of the main challenges of our time,1,2 and attempts to address it require a clear un derstanding of how ecological communities respond to environmental change across time and space.3,4 While the increasing availability of global databases on ecological communities has advanced our knowledge of biodiversity sensitivity to environmental changes,5–7 vast areas of the tropics remain understudied.8–11 In the American tropics, Amazonia stands out as the world’s most diverse rainforest and the primary source of Neotropical biodiversity,12 but it remains among the least known forests in America and is often underrepre sented in biodiversity databases.13–15 To worsen this situation, human-induced modifications16,17 may elim inate pieces of the Amazon’s biodiversity puzzle before we can use them to understand how ecological com munities are responding. To increase generalization and applicability of biodiversity knowledge,18,19 it is thus crucial to reduce biases in ecological research, particularly in regions projected to face the most pronounced environmental changes. We integrate ecological community metadata of 7,694 sampling sites for multiple or ganism groups in a machine learning model framework to map the research probability across the Brazilian Amazonia, while identifying the region’s vulnerability to environmental change. 15%–18% of the most ne glected areas in ecological research are expected to experience severe climate or land use changes by 2050. This means that unless we take immediate action, we will not be able to establish their current status, much less monitor how it is changing and what is being lostinfo:eu-repo/semantics/publishedVersio

Tuberculose pulmonar: perfil epidemiológico do sertão Pernambucano, Brasil / Pulmonary tuberculosis: epidemiological profile of sertão Pernambucano, Brazil

Atualmente, observa-se que a tuberculose pulmonar constitui um importante problema de Saúde Pública no mundo, uma vez que esse agravo apresentou, em 2015, 10,4 milhões de casos, dos quais, mais de um milhão de pessoas vieram a óbito. Sob essa perspectiva, o presente artigo tem como objetivo traçar um perfil epidemiológico dos casos de Tuberculose Pulmonar notificados no município de Serra Talhada, entre os anos de 2007 a 2017. Foi realizado um estudo de série histórica observacional do tipo transversal, no intervalo de tempo de 2007 a 2017.  No período investigado o número de casos de tuberculose pulmonar foi de 246 casos, o local que teve a maior prevalência foi Serra Talhada, 287 por 100 mil habitantes. Diante dos dados apresentados, é imprescindível concluir, portanto, que esse estudo corrobora o perfil epidemiológico brasileiro para a Tuberculose Pulmonar, o qual indica variabilidade nos índices de acometimento durante o período analisado

Anomalia de Ebstein com comunicação interatrial em paciente gestante com pré-eclâmpsia: um raro relato de caso

A Anomalia de Ebstein (AE) é uma cardiopatia congênita rara, ocorre em apenas 1% das más formações cardíacas. É uma alteração da implantação dos folhetos da valva tricúspide, ocorre o aumento do volume do átrio direito e a atrialização do ventrículo direito. Geralmente, possui uma evolução clínica lenta, com sintomas aparecendo em idade avançada. A comunicação interatrial (CIA), também consiste em uma cardiopatia congênita, do tipo acianótica, comumente assintomática, com prevalência de 5 a 10% de todas as cardiopatias, mais comum em mulheres. Baseia-se na formação de um “shunt” esquerdo-direito, podendo causar hiperfluxo da veia pulmonar. Por outro lado, a pré-eclâmpsia é uma complicação gestacional detectada na vigésima semana. É uma disfunção materno/placentária responsável por elevação da pressão arterial (> 140/90 mmHg), associada a lesão de órgão alvo, proteinúria ou disfunção útero/placentária. Neste estudo, o objetivo é relatar as complicações desenvolvidas durante a gestação em paciente que possuía essa rara associação de comorbidades. Paciente feminina, 20 anos, primigesta com 30 semanas e 4 dias, vista em USG obstétrico, com descontrole pressórico desde de o início da gestação. Cardiopata, sem acompanhamento, apresentando EA e IA (diagnóstico em laudo de 2008). Foi admitida em Unidade de Terapia Intensiva (UTI) com dispneia, saturação de O2 de 91%, pressão de 150/100 mmHg. Após estabilização, solicitados pareceres para cardiologia, obstetrícia e risco anestésico. USG obstétrico mostrou compartimento fetal alterado e relação cérebro/placentária alterada. No 2º dia, após corticoterapia, paciente retorna do centro-cirúrgico após cesariana, acoplada à ventilação mecânica invasiva, devido à descompensação. Radiografia pós-cirurgia mostrou pequeno derrame pleural bilateral. Mantida Cefalotina por mais 2 dias. No dia 3, TC de tórax revelou derrame persistente e consolidações, iniciando Ceftriaxone e Clindamicina. Noradrenalina iniciada após descompensação hemodinâmica. No dia 6, após teste de respiração espontânea bem-sucedido, o ecocardiograma evidenciou AE, insuficiência tricúspide acentuada e mitral leve. Sem critérios graves, a paciente foi transferida para a enfermaria para seguimento e término da antibioticoterapia. A gestação pode agravar riscos em pacientes com comorbidades raras como anomalias cardíacas congênitas. O acompanhamento específico é crucial e, em casos graves, a gravidez deve ser evitada

Os desafios do atendimento de pacientes com sequelas cardiovasculares decorrentes de trauma do tórax / Challenges in the care of patients with cardiovascular sequels resulting from chest trauma

Introdução: O tórax apresenta estruturas de diversos sistemas de sustentação da vida, dentre eles o respiratório e o cardiovascular. Por conter, estruturas nobres para a manutenção da vida, os potenciais para ocorrer lesões graves em decorrência de traumas são muito grandes, como dados mostram, 25% das mortes são secundárias a trauma torácico. Dentro deste contexto, questiona-se quais os desafios no atendimento de pacientes com sequelas cardiovasculares decorrentes de traumas torácicos? Portanto, esse estudo tem como objetivo identificar as dificuldades enfrentadas na assistência de saúde de pacientes com repercussões cardiovasculares devido a trauma de tórax, através da elaboração de um formulário baseado em revisão bibliográfica de dados da literatura científica publicados sobre esse tema. Metodologia: O trabalho baseia-se numa revisão integrativa de literatura, na qual foram analisados artigos publicados em revistas científicas, utilizando-se das bases de dados da BVS (Biblioteca Virtual da Saúde), como: Lilacs (Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde) e Scielo (Scientific Electronic Library Online). Resultados: Após as análises e seleção, restaram-se sete artigos para integrar a discussão. Os artigos selecionados, estão descritos na tabela, com autores, título, metodologia, resultados e conclusão. Em seguida, foi realizada uma discussão acerca destes artigos. Conclusão: Cada um dos casos revisados neste estudo demonstra a necessidade e a importância de acompanhamento cuidadoso de todos os pacientes que sofreram trauma torácico fechado, mesmo que a avaliação cardíaca inicial possa ser negativa.

The complete genome sequence of Chromobacterium violaceum reveals remarkable and exploitable bacterial adaptability

Chromobacterium violaceum is one of millions of species of free-living microorganisms that populate the soil and water in the extant areas of tropical biodiversity around the world. Its complete genome sequence reveals (i) extensive alternative pathways for energy generation, (ii) ≈500 ORFs for transport-related proteins, (iii) complex and extensive systems for stress adaptation and motility, and (iv) wide-spread utilization of quorum sensing for control of inducible systems, all of which underpin the versatility and adaptability of the organism. The genome also contains extensive but incomplete arrays of ORFs coding for proteins associated with mammalian pathogenicity, possibly involved in the occasional but often fatal cases of human C. violaceum infection. There is, in addition, a series of previously unknown but important enzymes and secondary metabolites including paraquat-inducible proteins, drug and heavy-metal-resistance proteins, multiple chitinases, and proteins for the detoxification of xenobiotics that may have biotechnological applications

Educomunicação e alfabetização midiática: conceitos, práticas e interlocuções

O livro organizado por Ismar de Oliveira Soares, Claudemir Edson Viana e Jurema Brasil Xavier apresenta uma série de artigos sobre o tema divididos em quatro partes: 1-Atualizando conceitos e práticas; 2-A educação midiática em diálogo com o currículo escolar; 3-A Educomunicação em interlocução com as políticas públicas; e, 4-A Educomunicação em interlocução com as políticas públicas. A obra dedica seus 24 artigos especificamente aos saberes e às práticas inerentes ao tema da alfabetização midiática. Numa perspectiva multidisciplinar, os leitores aqui encontrarão experiências alimentadas tanto pelos referenciais da mídia-educação quanto pelo paradigma da Educomunicação, que emerge dos movimentos sociais da América Latina, na confluência entre a comunicação alternativa e a educação popular freiriana, a partir dos anos de 1960 e 1970

Educomunicação e suas áreas de intervenção: Novos paradigmas para o diálogo intercultural

oai:omp.abpeducom.org.br:publicationFormat/1O material aqui divulgado representa, em essência, a contribuição do VII Encontro Brasileiro de Educomunicação ao V Global MIL Week, da UNESCO, ocorrido na ECA/USP, entre 3 e 5 de novembro de 2016. Estamos diante de um conjunto de 104 papers executivos, com uma média de entre 7 e 10 páginas, cada um. Com este rico e abundante material, chegamos ao sétimo e-book publicado pela ABPEducom, em seus seis primeiros anos de existência. A especificidade desta obra é a de trazer as “Áreas de Intervenção” do campo da Educomunicação, colocando-as a serviço de uma meta essencial ao agir educomunicativo: o diálogo intercultural, trabalhado na linha do tema geral do evento internacional: Media and Information Literacy: New Paradigms for Intercultural Dialogue