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    Translocation across biological membranes: activity, structure and regulation of transporters

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    Alle cellen zijn omsloten door biologische membranen met selectief doorlatende membrane, die het mogelijk maken om omstandigheden "binnen" en "buiten" de cel te handhaven. De gereguleerde beweging van moleculen door deze membranen is nodig voor talrijke essentiële processen, waaronder het verkrijgen van voedingsstoffen, het regelen van de concentratie van specifieke verbindingen en het verwijderen van giftige stoffen. Dit wordt vergemakkelijkt door specifieke transportsystemen die moleculen van verschillende maten en chemische eigenschappen transporteren, waaronder ionen, suikers, lipiden, nucleïnezuren en eiwitten. Biologische membranen bestaan uit een lipide bilayer met ingebede eiwitten. De lipide bilayer is een structuur waarbij de hydrofobe (waterafstotende) uiteinden van membraanlipiden naar een denkbeeldig centraal vlak gericht zijn en hun hydrofiele (waterlichterende) uiteinden naar buiten gericht zijn. Gespecialiseerde eiwitten, genaamd integrale membraaneiwitten, bevinden zich in de lipide bilayer, verbonden met zowel de hydrofiele en hydrofobe uiteinden. Deze eiwitten vormen de basis van membraan transportsystemen. Dit proefschrift gaat over transportsystemen uit Saccharomyces cerevisiae (bakkersgist) en Listeria monocytogenes (een bacterie die de ziekte listeriose veroorzaakt). Hoofdstuk 2 beschrijft de productie van aminozuurtransporteurs van S. cerevisiae die gedetailleerde in vitro studies mogelijk te maken. Hoofdstuk 3 laat zien dat de groei van S. cerevisiae cellen kan worden geremd door aanwezigheid van te veel aminozuren. Hoofdstuk 4 identificeert een onderdeel van S. cerevisiae aminozuurtransporters die bijdragen aan hun activiteit en regulering. Hoofdstuk 6 presenteert nieuwe informatie over de structuur van BilE, een transporteur van L. monocytogenes die belangrijk is voor infectie

    Supplementing nursery pig feed with seaweed extracts increases final body weight of pigs

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    Probiotics have been used as an alternative method to antibiotic treatment. In this study, we evaluated the effect of seaweed extracts, commercially named OceanFeed Swine® (OFS), on body weight, average daily weight gain (ADG) and feed efficiency (FE) in nursery and fattening pigs of terminal lines. The study was conducted with 1809 piglets from weaning age until the end of the fattening phase on a commercial farm, divided into two groups (control and OFS; 905 and 904 pigs, respectively). Three replicates were made during the 6 weeks of production. Food was elaborated in the same productive unit and was given to the animals in the form of flour. OceanFeed Swine® (5 g/kg of diet) was added to the diet of the OFS groups during the nursery period, from 21 to 55 days of age. The faecal microbial population was evaluated at 35 and 60 days of life. In this paper, we observed a positive effect of administering OceanFeed Swine® on the production parameters analysed in the fattening phase, showing an improvement of 26 g in ADG and FE of 0.07. It can be concluded that the use of OceanFeed Swine® in the diets of the piglets, aged between 21 to 55 days old, improves FE (Control 2.36, OFS 2.29) and ADG (control 0.798 kg, OFS 0.824 kg). Moreover, its use exhibited an increase in the slaughter weight, a reduction of E coli CFU, and an increase in Lactobacillus sp. in fattening animals. All these improvements have a major positive economic impact per pig at time of slaughter

    Regulation of Amino Acid Transport in Saccharomyces cerevisiae

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    SUMMARYWe review the mechanisms responsible for amino acid homeostasis in Saccharomyces cerevisiae and other fungi. Amino acid homeostasis is essential for cell growth and survival. Hence, the de novo synthesis reactions, metabolic conversions, and transport of amino acids are tightly regulated. Regulation varies from nitrogen pool sensing to control by individual amino acids and takes place at the gene (transcription), protein (posttranslational modification and allostery), and vesicle (trafficking and endocytosis) levels. The pools of amino acids are controlled via import, export, and compartmentalization. In yeast, the majority of the amino acid transporters belong to the APC (amino acid-polyamine-organocation) superfamily, and the proteins couple the uphill transport of amino acids to the electrochemical proton gradient. Although high-resolution structures of yeast amino acid transporters are not available, homology models have been successfully exploited to determine and engineer the catalytic and regulatory functions of the proteins. This has led to a further understanding of the underlying mechanisms of amino acid sensing and subsequent downregulation of transport. Advances in optical microscopy have revealed a new level of regulation of yeast amino acid transporters, which involves membrane domain partitioning. The significance and the interrelationships of the latest discoveries on amino acid homeostasis are put in context

    Análisis de los factores limitantes en la implementación del proyecto de alpacas en la comunidad José Carlos Mariátegui – Incahuasi – Lambayeque : Setiembre 2016 – diciembre 2017

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    Esta investigación surge de la realidad de comunidades de zonas rurales de la sierra del departamento de Lambayeque, quienes por sus factores sociodemográficos, se sienten olvidadas y en oportunidades con el pensamiento que son utilizadas para el cumplimiento de temas políticos de inclusión y desarrollo social por parte del Estado a través de proyectos que no llegan a tener el resultado esperado; predominado por la falta de conocimiento de las verdaderas necesidades de las comunidades. Por ello, el objetivo principal de esta tesis es describir los factores limitantes en la implementación del proyecto de alpacas en la comunidad José Carlos Mariátegui – Incahuasi – Lambayeque, mediante el análisis de la información a partir de encuestas, entrevistas y focus group, para proponer medios de mejora que fortalezcan la implementación de futuros proyectos en la comunidad. El primer paso fue identificar la problemática y sentir de la comunidad con respecto al proyecto de alpacas desarrollado, a través de la aplicación de focus group a los jefes de familia partícipes en el proyecto, entrevistas a quienes estuvieron a cargo del proyecto y encuestas a algunos pobladores de la comunidad; posteriormente se realizó el estudio de Casos exitosos de comunidades aledañas para identificar factores de éxito en proyectos. La investigación realizada manifiesta que una comunidad con falta de solidez en la organización de las personas no presenta la base necesaria para implementar un proyecto; la comunidad José Carlos Mariátegui presenta desorganización, escaso conocimiento en capacidades técnico - productivas en tema de alpaca, débil trabajo en equipo, poco sentido de pertenencia. Surge esta propuesta de fortalecimiento con una visión asociativa integral, que une a los pobladores, organiza el trabajo y lo canaliza hacia un objetivo determinado como factor indispensable a las relaciones sociales, gestión administrativa y apoyo del Estado, para la sostenibilidad y éxito de los proyectos.This research arises from the reality of communities in rural areas of the Sierra de Lambayeque department, who for their sociodemographic factors, feel forgotten and in opportunities with the thought that are used for compliance with political issues of inclusion and social development by of the State through projects that do not have the expected result; dominated by the lack of knowledge of the real needs of the communities. Therefore, the main objective of this thesis is to describe the limiting factors in the implementation of the alpacas project in the José Carlos Mariátegui - Incahuasi - Lambayeque community, through the analysis of the information from surveys, interviews and focus group, to propose means of improvement that strengthen the implementation of future projects in the community. The first step was to identify the problems and feelings of the community regarding the alpacas project developed, through the application of focus group to the family heads involved in the project, interviews with those in charge of the project and surveys of some residents of the community; Afterwards, successful case studies of neighboring communities were conducted to identify success factors in projects. The research carried out shows that a community with a lack of solidity in the organization of people does not present the necessary basis to implement a project; the José Carlos Mariátegui community presents disorganization, little knowledge in technical-productive capacities in alpaca issues, weak teamwork, little sense of belonging. This proposal of strengthening arises with an integral associative vision, that unites the inhabitants, organizes the work and channels it towards a determined objective as an indispensable factor to the social relations, administrative management and support of the State, for the sustainability and success of the projects.Tesi

    Opiniones y valoraciones que subyacen en la experiencia educativa de estudiantes, padres, madres y docente en una escuela rural amazónica

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    El propósito de la presente investigación es analizar y comparar, en un colegio rural multigrado amazónico, cuáles son las opiniones educativas de los y las estudiantes, padres y madres y docente. Asimismo, se analiza el aprendizaje dentro y fuera de la escuela y la distancia entre la cultura escolar y la cultura del centro poblado. El abordaje utilizado fue cualitativo y se realizaron 15 entrevistas semiestructuradas. Los resultados de este estudio permiten concluir que se identificaron cinco opiniones claves en los participantes de la comunidad educativa, algunas compartidas por padres, madres, sus hijos e hijas y la docente y algunas que se manifiestan más claramente en uno u otro grupo. En primer lugar, los resultados nos muestran que la comunidad entiende la escuela como un medio para ascender socialmente y lograr dejar de ser agricultores. En segundo lugar, se identifica dos ideas que son complementarias y que se refuerzan entre sí, la noción de que la buena docencia implica únicamente enseñar, es decir que la docente es buena en tanto simplemente enseñe (más allá de qué enseñe y/o de cómo enseñe) y la idea de que los estudiantes son responsables de sus logros de aprendizaje sin que la docente o la familia tengan un rol en su aprendizaje. En tercer lugar, se observa que se le atribuye a la obediencia un rol fundamental en el proceso de enseñanza-aprendizaje y finalmente, los padres y madres reconocen en la escuela una distancia relativamente clara con la cultura de la comunidad.The purpose of the research is to analyze and compare, in a multi-grade Amazonian rural school, the educational opinions of students, parents and teachers. Also, the learning within and outside the school and the distance between the school culture and the culture of the indigenous community are analyzed. The methodology used was qualitative based on 15 semi-structured interviews. The results of this study allow us to conclude that five key ideas were identified in the participants of the educational community, some shared by parents, their children and the teacher and some that are more clearly expressed in one or the other group. First, the results show that the community understands the school as a means to rise socially and to stop being farmers. Secondly, two ideas are identified that are complementary and that reinforce each other, the notion that good teaching implies only teaching, that is to say that the teacher is good as long as she simply teaches (regardless of what she teaches or how she teach) and the opinion that students are responsible for their learning achievements without the teacher or family having a role in their learning. Third, the idea of obedience is observed as a fundamental aspect in the teaching-learning process. Finally, parents recognize in school a distance to the culture of the community.Tesi

    Del papel al digital: la experiencia evoluciona

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    Estos 13 años de experiencia profesional me han enseñado a ser constante y firme. Algunas campañas son parte importante en mi carrera como “Páginas vacías” para el diario El Bocón, “Te damos lo que prometemos” y “Viste el videíto” para Entel, “Bolívar enjuague” y el lanzamiento de la marca WOWMOM para Alicorp, entre otras. He trabajado campañas enfocadas en el mundo offline y, ahora, la mayoría de los esfuerzos a todo nivel -estratégico, creativo, producción, medios- está enfocado a ser efectivos en la plataforma online. Recién estamos a mitad de camino.These 13 years of professional experience have taught me to be constant and strong. Some campaigns are an important part of my career such as: ¨Empty pages¨ for El Bocón, “We give you what we promise” and “Viste el videíto” for Entel, “Bolívar rinse” and the launch of WOWMOM brand for Alicorp, among others. I’ve worked on campaigns focused on the offline world and, now, most of the efforts - strategic, creative, production, media- are focused on being effective at online platforms. We’re just half way there

    Implementación de la aplicación “RENIEC Móvil Facial” utilizando autenticación biométrica facial para consultas y trámites de DNI/DNIE en el RENIEC

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    El presente informe de experiencia profesional describe el desarrollo de la aplicación “RENIEC MÓVIL FACIAL”, que se implementó debido a que en el año 2016 RENIEC identificó una serie de problemas en sus agencias, entre algunas de ellas, las largas colas que los ciudadanos hacían diariamante para realizar trámites, y otras consultas. Reniec en busca de una solución por la gran demanda de la población, y estando a la vanguardia de las nuevas tecnologías, vio conveniente implementar una aplicación que le permita al ciudadano realizar un trámite y/o consulta de un DNI/DNIe a través de su teléfono móvil, desde cualquier lugar donde se encuentre. Gracias a esta implementación, se logró reducir la gran afluencia de los ciudadanos en las oficinas, brindando un servicio rápido y efectivo

    A Plasma Membrane Association Module in Yeast Amino Acid Transporters

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    Contains fulltext : 168741.pdf (Publisher’s version ) (Open Access)Amino acid permeases (AAPs) in the plasma membrane (PM) of Saccharomyces cerevisiae are responsible for the uptake of amino acids and involved in regulation of their cellular levels. Here, we report on a strong and complex module for PM association found in the C-terminal tail of AAPs. Using in silico analyses and mutational studies we find that the C-terminal sequences of Gap1, Bap2, Hip1, Tat1, Tat2, Mmp1, Sam3, Agp1, and Gnp1 are about 50 residues long, associate with the PM and have features that discriminate them from the termini of organellar amino acid transporters. We show that this sequence (named PMasseq) contains a amphipathic alpha-helix and the FWC signature, which is palmitoylated by palmitoyl transferase Pfa4. Variations of PMasseq, found in different AAPs, lead to different mobilities and localization patterns, whereas the disruption of the sequence has an adverse effect on cell viability. We propose that PMasseq modulates the function and localization of AAPs along the PM. PMasseq is one of the most complex protein signals for plasma membrane association across species, and can be used as a delivery vehicle for the PM

    Growth Inhibition by Amino Acids in Saccharomyces cerevisiae

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    Amino acids are essential metabolites but can also be toxic when present at high levels intracellularly. Substrate-induced downregulation of amino acid transporters in Saccharomyces cerevisiae is thought to be a mechanism to avoid this toxicity. It has been shown that unregulated uptake by the general amino acid permease Gap1 causes cells to become sensitive to amino acids. Here, we show that overexpression of eight other amino acid transporters (Agp1, Bap2, Can1, Dip5, Gnp1, Lyp1, Put4, or Tat2) also induces a growth defect when specific single amino acids are present at concentrations of 0.5-5 mM. We can now state that all proteinogenic amino acids, as well as the important metabolite ornithine, are growth inhibitory to S. cerevisiae when transported into the cell at high enough levels. Measurements of initial transport rates and cytosolic pH show that toxicity is due to amino acid accumulation and not to the influx of co-transported protons. The amino acid sensitivity phenotype is a useful tool that reports on the in vivo activity of transporters and has allowed us to identify new transporter-specific substrates
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