Prevalência e fatores de risco associados à infecção por Cryptosporidium spp. e comparação de protocolos de nPCR para a detecção desse agente em amostras fecais de bovinos leiteiros da região oeste do Paraná, Brasil

Orientador: Prof. Dr. Nelson Luis Mello FernandesCoorientadora: Profa. Dra. Adriana Fiorini RosadoDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor Palotina, Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal. Defesa : Curitiba, 28/01/2022Inclui referênciasResumo: O objetivo deste trabalho foi pesquisar a prevalência de Cryptosporidium spp.; determinar os principais fatores de risco associados à infecção, além de comparar protocolos de nPCR por meio da amplificação do gene 18S SSU (Small Subunit) e 28S LSU (Large Subunit), a fim de testar a especificidade e a capacidade de amplificação dos primers de cada protocolo para o diagnóstico do protozoário em amostras fecais de bovinos leiteiros da região Oeste do Paraná, Brasil. Após a realização do cálculo amostral foram coletadas 576 amostras fecais de bovinos com até 12 meses de idade, provenientes de 65 propriedades de quatro municípios da região: Cascavel, Marechal Cândido Rondon, Palotina e Toledo. Em todas as propriedades foi aplicado um questionário epidemiológico a fim de detectar os principais fatores de risco associados à infecção por Cryptosporidium spp. As amostras foram analisadas por meio de microscopia óptica, nested-PCR (nPCR) e sequenciamento do DNA. Das amostras analisadas, 22% (128) foram positivas na análise microscópica e a idade dos animais, área total da propriedade, sistema de produção e quantidade de animais que compõem o rebanho foram os principais fatores de risco associados à infecção. Todas as amostras positivas na análise microscópica foram submetidas a dois protocolos de nPCR. Das 126 amostras analisadas, 60,32% (76/126) foram amplificadas pelo protocolo do gene SSU, enquanto, 44,4% (55/126) das amostras amplificaram o segmento do gene LSU. Todas as amostras amplificadas foram submetidas ao sequenciamento genético e analisadas para identificação das espécies por meio da consulta ao banco de dados (BLAST®). A amplificação de cada gene possibilitou a identificação de quatro espécies, sendo estas C. parvum (41), C. bovis (8), C. ryanae (5) e C. muris (1) pelo amplificado do gene 28S rRNA (LSU) e C. parvum (34), C. bovis (8), C. ryanae (4) e C. andersoni (2), pelo amplificado do gene 18S rRNA (SSU). Embora o protocolo de nPCR (LSU) tenha apresentado maior especificidade, a análise filogenética evidenciou que o protocolo de nPCR amplificando o gene SSU permitiu maior diferenciação entre as espécies de Cryptosporidium. Desta forma o aprimoramento dos ensaios com a utilização de novos primers deve contribuir na busca de maior especificidade no diagnóstico.Abstract: The aim of this study was to investigate the prevalence of Cryptosporidium spp., to determine main risk factors associated with infection, and compare nPCR protocols by amplification of the 18S SSU (Small Subunit) and 28S LSU (Large Subunit) gene to test the specificity and amplification capacity of the primers of each protocol for the diagnosis of the protozoan parasite in fecal samples from dairy cattle in western Paraná, Brazil. After sample calculation, 576 fecal samples were collected from bovines up to 12 months old from 65 properties in four municipalities of the region: Cascavel, Marechal Cândido Rondon, Palotina and Toledo. An epidemiological questionnaire was applied to all properties to detect the main risk factors associated with Cryptosporidium spp. infection. Samples were analyzed by light microscopy, nested-PCR (nPCR) and DNA sequencing. Of the samples analyzed, 22% (128) were positive in the microscopic analysis and the age of the animals, total area of the property, production system and number of animals in the herd were the main risk factors associated with infection. All positive samples in the microscopic analysis were submitted to two nPCR protocols. Of the 126 samples analyzed, 60.32% (76/126) were amplified by the SSU gene protocol, while 44.4% (55/126) of the samples amplified the LSU gene segment. All amplified samples were submitted to genetic sequencing and analyzed for species identification by consulting the database (BLAST®). The amplification of each gene allowed the identification of four species: C. parvum (41), C. bovis (8), C. ryanae (5) and C. muris (1) using the amplified 28S rRNA gene (LSU), and C. parvum (34), C. bovis (8), C. ryanae (4) and C. andersoni (2), using the amplified 18S rRNA gene (SSU). Although the nPCR protocol (LSU) showed greater specificity, phylogenetic analysis showed that the nPCR protocol amplifying the SSU gene allowed greater differentiation between Cryptosporidium species. Thus, the improvement of assays with the use of new primers should contribute to the search for greater specificity in diagnosis

Aceptación y preferencia del uso de un dispositivo móvil para la evaluación de la fibromialgia

Setzenes Jornades de Foment de la Investigació (Any 2011)La fibromialgia, es una enfermedad que se caracteriza por la presencia de dolor crónico generalizado. Su prevalencia es mayor en mujeres y los síntomas de la misma no se limitan al dolor, sino que incluyen también fatiga, trastornos del sueño, trastornos del estado de ánimo y dificultades en la concentración, provocando una gran interferencia en la vida de las personas que la padecen. El dolor que sufren los pacientes con fibromialgia es de tipo generalizado y con gravedad variable. Para una evaluación precisa del dolor, la Initiative on Methods, Measurement, and Pain Assessment in Clinical Trials (IMMPACT, Turk et al., 2003) recomienda que el paciente registre la intensidad de dolor, la intensidad de fatiga y el estado de ánimo en diversos momentos del día. Tradicionalmente, esta evaluación diaria se realiza mediante autorregistros en papel. El presente estudio se centra en la utilización de un auto-registro a través de un dispositivo móvil, destinado a evaluar tres aspectos relevantes en el entendimiento de la fibromialgia: el dolor, la fatiga y el estado de ánimo. Nuestro objetivo fue evaluar la aceptación de este método de evaluación diaria por parte de las pacientes que sufren de fibromialgia. La muestra está compuesta por quince mujeres diagnosticadas de fibromialgia (criterios ACR, 1990) que utilizarán ambos dispositivos de evaluación mediante un diseño intrasujeto contrabalanceado. Nuestra hipótesis es que el uso de dispositivos móviles mejorará la evaluación en comparación con el autorregistro en papel en términos de mayor satisfacción con el procedimiento de evaluación y mayor facilidad y comodidad en su uso

El papel de factores físicos y psicológicos en la calidad de vida de pacientes con FM

Setzenes Jornades de Foment de la Investigació (Any 2011)La fibromialgia (FM) es una enfermedad de etiología desconocida que se caracteriza por dolor crónico generalizado que el paciente localiza en el aparato locomotor. La FM produce un gran impacto psicológico, siendo la depresión y la ansiedad las patologías más comúnmente asociadas a esta enfermedad. Estos pacientes perciben un mayor deterioro de su calidad de vida (CV) en comparación con otras personas con enfermedades reumáticas o crónicas. El curso impredecible del dolor, su presencia continuada y persistente, las limitaciones físicas y psicosociales, junto a los trastornos psicológicos comórbidos encontrados en la FM, hacen de esta enfermedad una de las más incapacitantes. El objetivo principal de este trabajo consistió en estudiar los factores tanto físicos como psicológicos que influyen en la CV de pacientes con FM. Participaron un total de 63 mujeres diagnosticadas de FM (media de edad: 49.53 años) y se utilizaron medidas relacionadas con el dolor, la fatiga, la salud general, depresión y otros síntomas psicopatológicos y la CV. Los resultados mostraron, tras el análisis de regresión, que las variables que mayor impacto tenían sobre la CV eran dos físicas (interferencia del dolor en las actividades y rol físico) y dos psicológicas (sintomatología obsesiva-compulsiva y de ideación paranoide). Estos resultados sustentan la idea de la necesidad de abordar esta enfermedad desde un punto de vista multidisciplina

Potenciando las emociones positivas y la activación comportamental en pacientes con fibromialgia mediante la utilización de nuevas tecnologías

Setzenes Jornades de Foment de la Investigació (Any 2011)La fibromialgia es un síndrome de dolor crónico de etiología desconocida, caracterizado por dolor musculoesquelético generalizado, a menudo acompañado de fatiga, trastornos del sueño y depresión. La complejidad del trastorno incluye factores biológicos, psicológicos y sociales, que causan un fuerte impacto en la calidad de vida de las personas. La mejor manera de abordar esta complejidad es desde una perspectiva multidimensional, en la cual los aspectos psicológicos han cobrado una gran relevancia. En los últimos años, se han desarrollado programas de intervención cognitivo-comportamental que han mostrado eficacia en el tratamiento de la fibromialgia. Estos programas incluyen distintos componentes como la relajación, mindfulness, programación de actividades y terapia cognitiva. Uno de los componentes centrales es la activación comportamental que intenta que las personas participen, de manera equilibrada, en un mayor número de actividades que les sean significativas. Pese a la utilidad de estos programas, la eficacia conseguida todavía es limitada. Nuestra hipótesis es que el uso de nuevas tecnologías puede potenciar la eficacia de algunos componentes del tratamiento. Es por esto que el objetivo central de este trabajo consiste en presentar los resultados preliminares de un sistema de realidad virtual diseñado para inducir emociones positivas y promover la actividad en pacientes con fibromialgia. En el contexto de un tratamiento grupal de seis sesiones, 20 pacientes recibieron un componente específico de inducción de emociones diseñado con el apoyo de un entorno virtual flexible, con el fin de mejorar el componente de activación conductual del tratamiento. Se realizó una evaluación Pre-Post inducción, en la que se evaluó la intensidad del dolor, la fatiga, el estado de ánimo, la intensidad de distintas emociones, la motivación y la capacidad para realizar actividades. Los resultados mostraron cambios significativos en su estado de ánimo, en las emociones positivas y en la capacidad y motivación para realizar actividades

La utilidad de las Tecnologías de la Información y la Comunicación (TICs) para la prevención de la depresión

Setzenes Jornades de Foment de la Investigació (Any 2011)Los problemas de salud mental generan costes importantes, tanto desde un punto de vista personal como económico y social. La Organización Mundial de la Salud estima que los problemas de salud mental suponen entre el 3% y 4% del PNB de los estados miembros de la Unión Europea (Gabriel, 2000). Estas enfermedades se refieren, principalmente, a los trastornos del estado de ánimo y a los trastornos de ansiedad. Estos datos subrayan la importancia de desarrollar estrategias y procedimientos para ayudar a las personas que padecen depresión, y también diseñar mejores herramientas para identificar a las personas en riesgo, así como programas de prevención. Tomando todo esto en consideración, en el marco del proyecto OPTIMI (Online Predictive Tools for Intervention in Mental Illness), financiado por el VII Programa marco de la Unión Europea, hemos diseñado herramientas basadas en las nuevas Tecnologías de la Información y la Comunicación (TICs) para la detección temprana y la prevención de la depresión. La hipótesis central del proyecto OPTIMI es que existe una relación importante entre depresión, estrés, y la capacidad de afrontamiento de la persona. En OPTIMI hemos desarrollado estrategias para monitorizar el comportamiento de personas expuestas a altos niveles de estrés. Contamos con herramientas de monitorización cognitiva, fisiológica y del comportamiento (verbal y motor), utilizando sensores de tasa cardiaca, actividad, electroencefalografía, reconocimiento de la voz, etc. Se han llevado a cabo una serie de ensayos de calibración que han servido para poner a prueba estos sensores en personas de alto riesgo con el objetivo de detectar los cambios asociados al estrés, el estado de ánimo y la capacidad de afrontamiento. Estas mediciones proporcionadas por los sensores se han complementado con información proporcionada por los participantes y por el clínico. El propósito de esta comunicación es presentar el diseño seguido en los estudios de calibración y algunos datos preliminares

An Investigation into the Stability of Graphitic C3N4 as a Photocatalyst for CO2 Reduction

The increasing CO 2 concentration in the atmosphere exerts a significant influence on global warming and climate change. The capture and utilization of CO 2 by conversion to useful products is an area of active research. In this work, the photodriven reduction of CO 2 was investigated using graphitic carbon nitride (g-C 3 N 4 ) as a potential photocatalyst. The photocatalytic reduction of CO 2 was investigated with g-C 3 N 4 powder immobilized on a glass support in a batch gas-phase photoreactor. The experiments were carried out under UV-vis irradiation at 70 \ub0C and an initial pressure of 2.5 bar. The only gas-phase product detected during the irradiation of the g-C 3 N 4 in the presence of CO 2 was CO, and the rate of production was observed to decrease over time. Oxygen-doped g-C 3 N 4 was also tested for CO 2 reduction but had efficiency lower than that of the parent g-C 3 N 4 . Repeated cycles of photocatalytic CO 2 reduction showed a decline in the activity of the g-C 3 N 4 . In the absence of CO 2 some CO generation was also observed. Characterization of used and unused materials, using FTIR and XPS, showed an increase in the oxygen functional groups following UV-vis irradiation or thermal treatment. While others report the use of g-C 3 N 4 as a photocatalyst, this work highlights the important need for replicates and control testing to determine material stability

AVANCES EN LA MORFOLOGÍA FLORAL DE CAESALPINIA SPINOSA (FEUILLÉE EX MOLINA) KUNTZE “TARA”, UN ÁRBOL NATIVO DE LA FLORA PERUANA

Se llevó a cabo una investigación descriptiva de la morfología floral de Caesalpinia spinosa (Feuillée ex Molina) Kuntze “tara” (Caesalpinioideae: Fabaceae), un árbol nativo de la flora peruana, e importante fuente de taninos. Las flores son de 13,3±1,2 mm de largo y 11,6±2,1 mm de ancho, de color amarillo, muy cigomorfas. La carina presenta marcas de miel, y el nectario está rodeado por los estambres, que forman una barrera densa, interrumpida por las ventanas. Se propone que la melitofilia es el síndrome de polinización más probable, dadas las características morfológicas exhibidas por la flor

Enveloped and non-enveloped viral-like particles in Trypanosoma cruzi epimastigotes

Electron microscopy is routinely used to identify viral infections in protozoan parasites. These viruses have been described as non-enveloped and icosahedral structures with a diameter of 30-60 nm. Most of them are classified within the non-segmented dsRNA Totiviridae family. We observed virus-like particles (VLPs) through transmission electron microscopy in the cytoplasm of Trypanosoma cruzi epimastigotes grown in cultures. Clusters of electrodense enveloped VLPs having a diameter of 48 nm were also observed. These clusters appear to have been released from distended Golgi cisternae. Furthermore, a paracrystalline array of electrodense, non-enveloped VLPs (with a diameter of 32 nm) were found in distended Golgi cisternae or as smaller clusters at a distance from the RE or Golgi. We cannot rule out that the 48 nm enveloped VLPs belong to the ssRNA Flaviviridae family because they are within its size range. The localization of enveloped VLPs is consistent with the replication strategy of these viruses that transit through the Golgi to be released at the cell surface. Due to the size and shape of the 32 nm non-enveloped VLPs, we propose that they belong to the dsRNA Totiviridae family. This is the first description of cytoplasmic enveloped and non-enveloped VLPs in T. cruzi epimastigotes