Estudo fitoquímico de Piper alatabaccum TREL & YUNCK , 1950 e avaliação da atividade larvicida sobre Aedes aegypti LINNAUS, 1762 (DIPTERA: CULICIDAE) em condições de campo simulado.

Dissertação apresentada ao Programa de Pós- Graduação: Mestrado em Biologia Experimental (PGBIOEXP) da Fundação Universidade Federal de Rondônia (UNIR) como requisito final para a obtenção do título de Mestre em Biologia Experimental. Orientador: Prof. Dr. Valdir Alves Facundo.As plantas do gênero Piper são de interesse aos estudos como bioinseticidas devido à grande variedade de metabólitos secundários que apresentam e por possuírem em suas células óleos voláteis, notadamente fenilpropanóides e terpenóides, com atividades inseticidas já comprovadas. O Aedes aegypti é o mosquito responsável pela transmissão do vírus da dengue, uma arbovirose endêmica em regiões tropicais e subtropicais do mundo. Esse mosquito tem preferência por criadouros artificiais que possam ser encontrados acumulando água, seja ocasionalmente no caso de entulhos de lixo que acumulam água de chuva, ou locais que armazenam água para a utilização humana, como piscinas e caixas d’água. Visando contribuir com a pesquisa científica em busca de novos inseticidas naturais foi realizado o estudo de semi campo com recipientes utilizados pelo mosquito para o desenvolvimento de sua forma larval (copo, garrafa pet, prato suporte para vaso de planta, garrafão de 20L, pneu), utilizando um larvicida extraído de Piper alatabaccum. Para a determinação da substância larvicida a ser utilizada foi realizado o estudo fitoquímico de P. alatabaccum e as substâncias resultantes desse estudo foram avaliadas quanto à atividade larvicida frente a larvas de Aedes aegypti (3º- 4º instar), foram elas: extrato etanólico das folhas, fração de acetato de etila das folhas, extrato etanólico das raízes, óleo essencial das folhas, as substâncias isoladas das fohas: piplartina e 5,5’,7-trimetoxi-3’,4’-metilenodioxiflavona; e dilapiol componente majoritário do óleo essencial, os CL50 encontrados foram, respectivamente, iguais a 751, 797, 33, 160, 269, 3345, 41 ppm, determinados através do programa MINITAB utilizando-se o procedimento PROC PROBIT e distribuição de Waibull. Os valores de CL50 = 33 ppm e CL90 =184 ppm encontrados para o extrato etanólico das raízes foram os menores e esse extrato foi utilizado nos experimentos de semi campo, onde a atividade larvicida foi avaliada em diferentes condições climáticas, estação chuvosa e seca. O extrato etanólico das raízes apresentou melhor atividade larvicida quando aplicado na estação seca, mantendo alto o nível de mortalidade por um período maior de tempo do que o apresentado na estação chuvosa. O extrato etanóloico das raízes de P. alatabaccum foi considerado satisfatório para o controle de Aedes aegypti, o que sugere que possa ser utilizado na fabricação de novos produtos larvicidas, com baixo efeito residual, prática aplicação e de baixo custo. É importante a realização de novos estudos relacionados ao isolamento da substância responsável pela atividade larvicida e à melhor maneira de aplicação em campo

Estudos fitoquímico dos constituintes voláteis e fixos de Piper hispidum SW. e avaliação in vitro da atividade leishmanicida e antiplasmodial

Dissertação apresentada como parte dos requisitos para obtenção do título de Mestre em Biologia Experimental, na área: Parasitologia com ênfase na relação patógeno/hospedeiro do Programa de Pós- Graduação em Biologia Experimental. Orientador: Prof. Dr. Valdir Alves FacundoO Presente trabalho relata o isolamento, caracterização estrutural, avaliação de atividade leishmanicida e antiplasmodial de constituintes voláteis e fixos de Piper hispidum SW. Foi realizado o levantamento bibliográfico da distribuição de metabólitos secundários nos óleos essenciais de plantas do gênero Piper pesquisadas no Brasil. Em virtude da ausência de padronização na literatura especializada, a respeito do habitat e condições a que as plantas estão submetidas, torna-se inviável o estabelecimento de correlação entre a distribuição dos metabólitos secundários com a variação de fatores bióticos e abióticos influentes na composição de tais produtos naturais desta espécie. Foram identificados 82,12% da composição do óleo essencial extraído das folhas de P. hispidum, o que corresponde a 28 substâncias, sendo 9,16% de monoterpenos, 71,68% de sesquiterpenos e 1,28% de fenilpropanóides. Já do óleo essencial extraído dos talos foram identificados 77,32% da constituição, isto é, 37 substâncias, sendo 5,25% de monoterpenos, 57,16% de sesquiterpenos e 14,91% de fenilpropanóides. Foi isolado um fenilpropanóide do óleo essencial dos talos (dilapiol), duas substâncias do extrato de acetato de etila, uma amida do tipo piperidina (Piplartina) e um ácido carboxílico derivado do ácido cinâmico (ácido 3,4,5- trimetoxifenil-propanóico). Avaliou-se o potencial leishmanicida in vitro frente a promastigotas de Leishmania amazonensis, de ambos óleos essenciais e do extrato de acetato de etila dos talos de P. hispidum. Também investigou-se o potencial antiplasmodial in vitro frente a cepas 3D7 e W2 de Plasmodium falciparum, de ambos óleos essenciais, da amida Piplartina, do ácido 3,4,5-trimetoxifenil-propanóico e de extratos de P. hispidum. Os resultados apresentados relatam uma inédita e eficiente atividade leishmanicida e antiplasmodial dos óleos essenciais das folhas e talos de P. hispidum, e também relatam pela primeira vez a promissora atividade antiplasmodial da amida Piplatina

Análise genotóxica e antiparasitária de extratos e substâncias isoladas de Maytenus guianensis klotzsch ex reissek( celastraceae), chichuá ( xixuá) Amazonico

Tese apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental da Universidade Federal de Rondônia, como requisito para a obtenção do título de Doutor em Biologia Experimental. Orientador: Prof. Dr. Valdir Alves Facundo.A espécie Maytenus guianensis é endêmica da Amazônia brasileira, sendo utilizada na medicina tradicional contra enfermidades como malária, leishmaniose e câncer. Acredita-se que essa ação farmacológica pode estar relacionada à presença de terpenóides ocorrentes no gênero Maytenus, visto que diversas pesquisas tem demonstrado o potencial antiparasitário e anticancerígeno desse gênero, o que justifica a realização do presente estudo que objetivou realizar uma análise genotóxica e antiparasitária de extratos e substâncias isoladas de M. guianensis. As análises da citotoxicidade e mutagênicidade do extrato aquoso foram realizadas pelos métodos de germinação dos meristemas, índice mitótico e micronúcleo em Allium cepa, enquanto os de genotoxicidade in vivo utilizaram as técnicas de ensaio cometa em sangue periférico, correlação eritrocitos policromáticos/ monocromáticos e ocorrência de micronúcleo em medula óssea de camundongos. O preparo dos eluatos e isolamento dos metabólitos secundários foram realizados por meio de cromatografia em coluna de vidro utilizando-se como fase fixa sílica gel. A identificação estrutural dos constituintes químicos foi realizada por meio de métodos espectroscópicos de ressonância magnética nuclear de hidrogênio-1 e carbono-13, uni e bidimensional, espectroscopia de massa e espectroscopia na região do infravermelho. Já para a avaliação da atividade anti-Plasmodium falciparum W2 e anti-Leishmania amazonensis utilizou-se os testes imunoenzimático anti-HRPII e brometo de 3-metil-[4-5-dimetiltiazol-2-il]- 2,5 difeniltetrazólio, respectivamente. Observou-se que o extrato aquoso da entrecasca de M. guianensis em concentrações até dez vezes maiores que a utilizada na etnofarmacologia apresenta ação anticitotóxica e antimutagênica nos testes em A. cepa, além de efeitos antigenotóxicos em camundongos tratados de forma aguda. A investigação fitoquímica em M. guianensis levou ao isolamento de nove triterpenos, incluindo friedelanos, friedo-nor-oleanano, oleanano e ursano e um esteróide, sendo todos isolados pela primeira vez a partir desta espécie. Nos testes atiplasmodial e anteishmanicida o Eluato Hexânico da Casca (EHC), apresentou os melhores resultados entre os eluatos com IC50=11,26 μg/mL contra P. falciparum e inibição entre 90 a 100% das formas promastigotas de L. amazonensis, porém, este eluato apresentou citotoxicidade contra linhagem celular HepG2. Já entre os metabólitos isolados do EHC, o que apresentou melhor resultado contra P. falciparum foi o Tingenina B com IC50=7,19 μg/mL, este que seguido do Tingenina + Tingenina B apresentam os melhores resultados contra promastigotas de L. amazonensis, com inibição ficando entre 80 a 90%. Constatou-se que a espécie M. guianensis possui potencial anticitotóxico, antimutagênico, antigenotóxico e antiparasitológico com atividade antiplasmodial e antileishmanial, sendo indicados estudos futuros para elucidação do mecanismo de ação para cada atividade e avaliação do potencial genotóxico dos eluatos e metabólitos secundários, a fim de potencializar a eficácia etnofarmacológica e minimizar os possíveis efeitos adversos

Vírus ser vivo ou não? Eis a questão

.Se correlacionarmos a descoberta dos ácidos nucleicos e alguns pontos da teoria de Charles Darwin, podemos descrever uma nova definição para ser vivo onde “todos os seres vivos apresentam DNA e/ou RNA e tem a capacidade de evoluir”, com base nessa teoria os vírus são definidos como seres vivos, pois apresentam DNA ou RNA e tem uma alta capacidade de adaptação e evolução, um exemplo recente ocorreu com o vírus H1N1. DESCRITORES: Vírus, Ácidos nucleicos e Evolução Biológica

Vírus ser vivo ou não? Eis a questão

.Se correlacionarmos a descoberta dos ácidos nucleicos e alguns pontos da teoria de Charles Darwin, podemos descrever uma nova definição para ser vivo onde “todos os seres vivos apresentam DNA e/ou RNA e tem a capacidade de evoluir”, com base nessa teoria os vírus são definidos como seres vivos, pois apresentam DNA ou RNA e tem uma alta capacidade de adaptação e evolução, um exemplo recente ocorreu com o vírus H1N1. DESCRITORES: Vírus, Ácidos nucleicos e Evolução Biológica

IDENTIFICAÇÃO DE CLASSES DE METABÓLITOS SECUNDÁRIOS NO EXTRATO ETANÓLICO DOS FRUTOS DE Solanum acanthodes HOOK E SEU POTENCIAL FUNGICIDA SOBRE Candida albicans in vitro

This study aimed to identify the classes of secondary metabolites from the ethanol extract of fruits of Solanum acanthodes and evaluate the fungicidal activity against Candida albicans in vitro. We carried out the identification of secondary metabolites with crude plant extract and chromatography test to identify potential substances in the ethanol extract as substances isolated patterns of other species of Solanum. For the test fungicide used the technique of fusion disc. For positive control, we used discs without the plant extract and as a negative control discs with emulsifying chemical Kasumin®. The design was completely randomized with three replicates per treatment. The evaluation consisted of checking the growth of fungus, every 24 hours for six days, measuring the colonies. Data were subjected to analysis of variance and means were compared by Tukey test at 5%. Regarding the recognition of secondary metabolites from the ethanol extract of the fruits of S. acanthodes tests, the presence of alkaloids, cardiac glycosides, coumarins, tannins, triterpenes and free antracênicos derivatives was found. However, the results were negative for flavonoids. In chromatographic technique it was possible to identify the glycoalkaloid solasodine. After 144 hours, noted that the ethanol extract of the fruits of S. acanthodes showed satisfactory results of C. albicans, which occurred inhibition of fungal growth (average 2,4 mm) demonstrating greater inhibitory spectrum compared to the chemical (average 3,4mm). We conclude that S. acanthodes presents secondary metabolites and that these had a direct relationship in the inhibition of growth of C. albicans, but new methods and concentrations need to be tested.O presente trabalho teve como objetivo identificar as classes de metabólitos secundários do extrato etanólico dos frutos de Solanum acanthodes e avaliar a atividade fungicida sobre Candida albicans in vitro. Realizou-se a identificação de metabólitos secundários com o extrato bruto da planta e teste de cromatografia para identificar as possíveis substâncias no extrato etanólico conforme substâncias padrões isoladas de outras espécies de Solanum. Para o teste fungicida, utilizou-se a técnica de disco de fusão. No controle positivo, utilizaram-se discos sem o extrato vegetal e como controle negativo, discos com produto químico emulsificante Kasumin®. O delineamento foi inteiramente casualizado, com três repetições por tratamento. A avaliação consistiu verificar o crescimento do fungo, a cada 24 horas, durante seis dias, medindo as colônias. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5%. Com relação aos testes de reconhecimento de metabólitos secundários do extrato etanólico dos frutos de S. acanthodes, verificou-se a presença de alcaloides, glicosídeos cardiotônicos, cumarinas, taninos, triterpenos e derivados antracênicos livres. Porém, os resultados foram negativos para flavonoides. Na técnica de cromatografia foi possível identificar o glicoalcaloide Solasodina. Após 144 horas, observou que o extrato etanólico dos frutos de S. acanthodes apresentou resultados satisfatórios de C. albicans, onde ocorreu inibição do crescimento do fungo (média 2,4mm) demonstrando maior espectro inibitório se comparado como o produto químico (média 3,4mm). Conclui-se que S. acanthodes apresenta metabólitos secundários e que estes tiveram uma relação direta na inibição de crescimento de C. albicans, porém novos métodos e concentrações precisam ser testados

Maytenus guianensis klotzsch ex reissek (celastraceae): Ethnopharmacological aspects and isolated constituents

This study consists of a literature review on the traditional use of the medicinal plant Maytenus guianensis, which was carried out using the databases: LILACS, SciELO, and PubMed. M. guianensis is popularly known as xixuá and occurs throughout the tropical and subtropical band of the world. In Brazil, its leaves, bark, and roots are used as tea or macerated for the treatment of inflammation and infections in general. It is also popularly used to treat rheumatism and worm infections. These medicinal uses which have experimental support seem to be mainly associated with the presence of triterpenes

ATIVIDADE ANTIFÚNGICA DO EXTRATO ETANÓLICO DAS CASCAS DE Maytenus guianensis KLOTZSCH EX REISSEK SOBRE Candida albicans

The present work aimed the evaluation of antifungal activity of the ethanolic extract of the barks of Maytenus guianensis against Candida albicans in vitro. Collected barks were properly dried and grinded, being subjected to Sohxlet extraction with ethanol p.a, after dillution with DMSO (2%). For the evaluation of biological activity against the fungus, agar well diffusion technique was used in the concentration of 1mg.mL-1, which was previously defined by the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) technique performed. Candida albicans yeasts were cultured in BDA medium during 24 hours with turbidity absorbance. For negative control, only the BDA medium was used; Positive control was performed with the emulsifier chemical Kasumin®. The design was totally randomized, with three replicas per treatment. The evaluation consisted in assessing inhibition halos of fungal growth, each 24 hours, during five days. After 120 hours, the ethanolic extract from the barks of M. guianensis presented results of growth inhibition halos of 1,52 mm against C. albicans, demonstrating a larger inhibitory spectrum, if compared to negative control (inhibition halos of 2,11 mm). The results highlight the antimicrobial potential of M. guianensis, which may be promising for drug development research.Keywords: Celastraceae; triterpenes; phytochemistry.O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade fungicida do extrato etanólico das cascas de Maytenus guianensis sobre Candida albicans in vitro. As cascas coletadas foram devidamente secas e trituradas, sendo submetidas à extração em aparelho de Soxhlet com etanol p.a., sendo posteriormente diluídas com DMSO a 2% e para avaliar o potencial biológico sobre o fungo, utilizou-se à técnica de difusão em ágar em poços na concentração de 1mg.mL-1, concentração esta já definida pela técnica de Menor Concentração Inibitória (MIC) realizada. Leveduras de C. albicans foram cultivadas em meio BDA durante 24 horas com a absorbância de turvação. Para o controle negativo, utilizou-se somente o meio BDA; controle positivo foi realizado com emulsificante Kasumin®. O delineamento foi inteiramente casualizado, com três repetições por tratamento. A avaliação consistiu em verificar os halos de inibição de crescimento fúngico, a cada 24 horas, durante cinco dias. Observou-se, que após 120 horas, o extrato etanólico das cascas de M. guianensis apresentou resultados dos halos de inibição sobre C. albicans, na qual os halos de inibição de crescimento foram de 1,52 mm do extrato etanólico, demonstrando maior espectro inibitório, se comparado com o controle negativo que foi de 2,87 mm, enquanto que no controle positivo o halo de inibição foi de 2,11 mm. Os resultados sinalizam o potencial antimicrobiano dessa planta, podendo ser promissoras para estudos de desenvolvimento de novos fármacos.Palavras-chave: Celastraceae, triterpenos, fitoquímica

Structural Aspects of Antioxidant and Genotoxic Activities of Two Flavonoids Obtained from Ethanolic Extract of Combretum leprosum

Combretum leprosum Mart., a member of the Combretaceae family, is a traditionally used Brazilian medicinal plant, although no evidence in the literature substantiates its antioxidant action and the safety of its use. We evaluated the antioxidant properties of the ethanolic extract (EE) from flowers of C. leprosum and its isolated products 5,3′-dihydroxy-3,7,4′-trimethoxyflavone (FCL2) and 5,3′,4′-trihydroxy-3,7-dimethoxyflavone (FCL5) in Saccharomyces cerevisiae strains proficient and deficient in antioxidant defenses. Their mutagenic activity was also assayed in S. cerevisiae, whereas cytotoxic and genotoxic properties were evaluated by MTT and Comet Assays, respectively, in V79 cells. We show that the EE, FCL2, and FCL5 have a significant protective effect against H2O2. FCL2 showed a better antioxidant action, which can be related to the activation of the 3′-OH in the presence of a methoxyl group at 4′ position in the B-ring of the molecule, while flavonoids did not induce mutagenesis in yeast, and the EE was mutagenic at high concentrations. The toxicity of these compounds in V79 cells increases from FCL2 = FCL5 < EE; although not cytotoxic, FCL5 induced an increase in DNA damage. The antioxidant effect, along with the lower toxicity and the absence of genotoxicity, suggests that FCL2 could be suitable for pharmacological use

Approach Phytochemistry of Secondary Metabolites of Maytenus Guianensis Klotzsch ex Reissek (Celastraceae)

The Brazilian Amazon rainforest, even for its richness and biological diversity, can offer the oppotunity for innovative and efficient discovery of molecules with potential use in large scale. The interest in secondary metabolites have grown tremendously in recent amazonian essential oils and plant extracts, the Maytenus guianensis is a shrub native to our region, being popularly known as fruit-werewolf. The leaves are used as anti-inflammatory and infections is also indicated in the treatment of arthritis and hemorrhoids. Thus, the present study aimed to identify the classes of secondary metabolites from the ethanol extract of the fruits, leaves and shell of M. guianensis. We carried out the identification of secondary metabolites with plant extract using specific reagents alkaloids, glycosides cardiotonic, coumarins, flavonoids, tannins, saponins and triterpenes, based on coloration and precipitation. It was found that all the studied structures show botanical alkaloids, coumarins, flavonoids and tannins using any specific reagents. However, the absence of a secondary metabolite which can serve as raw material for synthesis of bioactive substances, particularly drugs and are used in many preparations to benefit human health, such as in the production of food and biological activity against microrganisms