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    Evolução cromossômica de espécies do gênero Ctenomys

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    Ctenomys, popularmente conhecido como tuco-tucos, é o gênero mais especioso entre os roedores subterrâneos, cerca de 65 espécies. Entre os mamíferos, Ctenomys é o grupo com a maior variação cromossômica, com números diploides variando de 2n=10 para C. steinbachi, à 2n=70 para C. pearsoni e C. dorbignyi, além de variações intraespecíficas, C. minutus (2n=42 à 50) e C. lami (2n=54 à 58). No Brasil, são descritas oito espécies de Ctenomys: Ctenomys bicolor (Rondônia), Ctenomys rondoni (Mato Grosso), Ctenomys nattereri (Mato Grosso), Ctenomys flamarioni (Rio Grande do Sul), Ctenomys lami (Rio Grande do Sul), Ctenomys minutus (Santa Catarina e Rio Grande do Sul), Ctenomys ibicuiensi (Rio Grande do Sul) e Ctenomys torquatus (Rio Grande do Sul). Todas as espécies do Sul do Brasil possuem descrição cariotípica e padrão de bandeamento, sendo C. minutus e C. lami, espécies irmãs e que possuem a maior variação cariotípica intraespecífica. Apesar de muitos trabalhos descrevendo os diferentes cariótipos, estudos utilizando citogenética molecular são incipientes e ainda não se tem claro como os mecanismos de especiação cromossômica podem influenciar a diferenciação destas espécies. Enquanto as espécies do Centro-oeste e Norte, apenas C. bicolor possui a descrição do seu cariótipo (2n=40), assim carecem de informações e comparações entre as espécies destas regiões. Sabendo-se destas lacunas o objetivo desta tese foi contribuir no desenvolvimento do conhecimento sobre mecanismos de evolução cromossômica, por meio de diferentes abordagens de análise, aprofundando o conhecimento sobre a organização genômica e cromossômica nas espécies do gênero Ctenomys presentes no Brasil. Para isso, além de uma revisão dos dados citogenéticos do gênero, foram utilizadas métodos de citogenética clássica (NORs, Banda-C e G) e citogenética molecular (FISH – hibridização in situ fluorescente), com diferentes conjuntos de sondas de DNA (de cromossomos inteiros, microssatélites e elemento transponível) em espécies com ocorrência no Brasil. Empregando a técnica de FISH utilizando sondas de microssatélites e elemento transponível (L1) em diferentes citótipos de C. minutus, identificamos o papel das sequências repetitivas na variação cariótipica desta espécie, mostramos que diferentes citótipos apresentam diferenças no padrão de distribuição e na quantidade de sinais para as diferentes sondas. E utilizando sondas de cromossomos inteiros de C. flamarioni, realizamos a pintura cromossômica em diferentes citótipos de C. minutus e C. lami, identificamos os rearranjos intracromossômicos que ocorrerem entre os diferentes citótipos da mesma espécie e as homeologias entre as três espécies. Utilizando estas abordagens de citogenética clássica descremos dois cariótipos para espécies do centro-oeste, além dos padrões de heterocromatina, NORs e bandeamento G para C. bicolor, C. nattereri e C.sp. “xingu” e C. sp “central”. Assim, descrevemos os possíveis rearranjos ocorridos para diferenciação dos cariótipos destas espécies. Essas evidências encontradas demonstram como o gênero Ctenomys é um ótimo modelo para entender evolução cromossômica e os mecanismos de especiação cromossômicas.Ctenomys, popularly known as tuco-tucos, is the most specious genus among subterranean rodents, with about 65 described species. Among mammals, Ctenomys is the current group that has the greatest chromosomal variation, with diploid numbers ranging from 2n=10 for C. steinbachi, to 2n=70 for C. pearsoni and C. dorbignyi, in addition to intraspecific variations, as in C. minutus (2n=42 to 50) and C. lami (2n=54 to 58). In Brazil, eight species of Ctenomys were described, namely: Ctenomys bicolor (Rondônia), Ctenomys rondoni (Mato Grosso), Ctenomys nattereri (Mato Grosso), Ctenomys flamarioni (Rio Grande do Sul), Ctenomys lami (Rio Grande do Sul), Ctenomys minutus (Rio Grande do Sul and Santa Catarina), Ctenomys ibicuiensi (Rio Grande do Sul) and Ctenomys torquatus (Rio Grande do Sul). All species from southern Brazil have a karyotype description and banding pattern, with C. minutus and C. lami, sister species that have the greatest karyotype variation. Despite many works describing the different karyotypes, studies using molecular cytogenetic are incipient and it is still unclear how chromosomal speciation can influence the differentiation of these species. While the species from Midwest and North, only C. bicolor has the description of its karyotype (2n=40), thus, information and comparisons between the species of these regions are lacking. Knowing these gaps, the objective of this thesis was to contribute to the development of knowledge about the mechanisms of chromosomal evolution through different analysis approaches, deepening the knowledge about the genomic and chromosomal organization in species of the genus Ctenomys present in Brazil. For this, in addition to a review of the cytogenetic data of the genus, methods of classical cytogenetic (NORs, C-Band, and G) and molecular cytogenetic (FISH - fluorescent in situ hybridization) were used, with different sets of DNA probes (from chromosomes integers, microsatellites, and transposable element) in species occurring in Brazil. Employing the FISH technique using microsatellite probes and transposable element (L1) in different cytotypes of C. minutus, we identified the role of repetitive sequences in the karyotype variation of this species, we showed that different cytotypes present differences in the distribution pattern and the number of signals for the different probes. In addition, using probes of whole chromosomes of C. flamarioni, we performed the chromosome painting in different cytotypes of C. minutus and C. lami, we identified the intrachromosomal rearrangements that occur between the different cytotypes of the same species and the homeologies between the three species. Using these classical cytogenetic approaches, we describe two karyotypes for Midwestern species: heterochromatin, NORs, and G-banding patterns for C. bicolor, C. nattereri, and C.sp. "xingu". Thus, we describe the possible rearrangements that occurred to differentiate the karyotypes of these species. This evidence demonstrates how the genus Ctenomys is a great model for understanding chromosomal evolution and the mechanisms of chromosomal speciation

    Interpopulation variation of transposable elements of the hAT superfamily in Drosophila willistoni (Diptera: Drosophilidae): in-situ approach

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    Transposable elements are abundant and dynamic part of the genome, influencing organisms in different ways through their presence or mobilization, or by acting directly on pre- and post-transcriptional regulatory regions. We compared and evaluated the presence, structure, and copy number of three hAT superfamily transposons (hobo, BuT2, and mar) in five strains of Drosophila willistoni species. These D. willistoni strains are of different geographical origins, sampled across the north-south occurrence of this species. We used sequenced clones of the hAT elements in fluorescence in-situ hybridizations in the polytene chromosomes of three strains of D. willistoni. We also analyzed the structural characteristics and number of copies of these hAT elements in the 10 currently available sequenced genomes of the willistoni group. We found that hobo, BuT2, and mar were widely distributed in D. willistoni polytene chromosomes and sequenced genomes of the willistoni group, except for mar, which is restricted to the subgroup willistoni. Furthermore, the elements hobo, BuT2, and mar have different evolutionary histories. The transposon differences among D. willistoni strains, such as variation in the number, structure, and chromosomal distribution of hAT transposons, could reflect the genomic and chromosomal plasticity of D. willistoni species in adapting to highly variable environments

    DESCONFORTO OSTEOMUSCULAR E QUALIDADE DE VIDA DE MULHERES EM DIFERENTES FASES DO PERÍODO GESTACIONAL

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    INTRODUÇÃO: No período da gestação, o corpo passa por uma intensa mudança e a mulher se depara com uma nova imagem corporal. Começam então, as mudanças físicas, em que o corpo se modifica para o acolhimento deste bebê nos próximos nove meses. Durante esse período também há um grande envolvimento emocional e psicológico da mãe. Os medos aumentam, surgem dúvidas quanto à capacidade de cuidar de seu bebê corretamente, se será uma boa mãe, se irá amá-lo. É um período de adequação em que a rotina da futura mãe será completamente alterada, pois deverá dedicar 100% de sua atenção ao bebê, reorganizar seu tempo e sua energia. A gestante também apresenta alterações musculoesqueléticas que irão causar-lhe desconforto, pois afetarão sua marcha e postura. A alteração da biomecânica leva a uma instabilidade e maior probabilidade de quedas por desequilíbrio. As mudanças no corpo durante o terceiro trimestre afetarão as atividades e habilidades do dia-a-dia da gestante, comprometendo a qualidade de vida desta, pois dependendo do grau de desconfortos, ela perde parte de sua independência física. OBJETIVOS: Este estudo visa identificar e verificar o desconforto musculoesquelético, a qualidade de vida e a dor em diferentes fases da gestação para que futuramente tais dados possam contribuir para elaboração de tratamentos preventivos e específicos, oferecendo para essa população uma melhora na qualidade de vida. MÉTODO: Trata-se de um estudo, desenvolvido pelos alunos de Fisioterapia da Universidade Unicatólica de Quixadá. Participou do estudo uma voluntária do gênero feminino com faixa etária de (18 a 35 anos). Esta passou por uma avaliação inicial para coleta de dados pessoais e antropométricos: nome, idade, tempo de gestação, altura, peso e índice de massa corporal (IMC). Foi também aferida a pressão arterial (PA), frequência cardíaca (FC) e frequência respiratória (FR). Segundo o Ministério da Saúde, realizar atividade física regularmente ajuda no controle da pressão arterial, reduzindo o risco de doenças cardiovasculares, facilita o controle de peso e o pós-natal, e indica quando há necessidade de interromper a atividade em caso de sensação de cansaço. A participante do estudo assinou o “Termo de Consentimento Livre e Esclarecido”, cujos procedimentos adotados obedecem aos princípios éticos para pesquisa. Os desconfortos osteomusculares foram verificados por meio do Questionário Nórdico de Sintomas Osteomusculares em que a voluntária relatou a ocorrência de sintomas em regiões anatômicas considerando os últimos 6 meses. Para verificar a qualidade de vida foi utilizada a Versão Brasileira do Questionário de Qualidade de Vida SF-36. RESULTADOS: Este trabalho identificou a presença de desconfortos musculoesqueléticos e redução da qualidade de vida na gestante. Portanto, mostra-se importante a elaboração e intervenções de tratamento fisioterapêutico específico para o período gestacional. CONCLUSÃO: Conclui-se que a qualidade de vida é afetada e apresenta-se diminuída na gestante, comparado a mulheres não grávidas, principalmente a partir do terceiro trimestre de gestação

    Genomic Organization of Microsatellites and LINE-1- like Retrotransposons: Evolutionary Implications for Ctenomys minutus (Rodentia: Ctenomyidae) Cytotypes

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    Simple Summary In animals, several species contain substantial chromosomal and genomic variation among their populations, but as to what could have driven such diversification is still a puzzle for most cases. Here, we used molecular cytogenetic analysis to expose the main genomic elements involved in the population variation observed in the Neotropical underground rodents of the genus Ctenomys (Rodentia: Ctenomyidae), which harbor the most significant chromosomal variation among mammals (2n = 10 to 2n = 70). These data provide evidence for a correlation between repetitive genomic content and localization of evolutionary breakpoint regions (EBRs) and highlight their direct impact in promoting chromosomal rearrangements. Abstract The Neotropical underground rodents of the genus Ctenomys (Rodentia: Ctenomyidae) comprise about 65 species, which harbor the most significant chromosomal variation among mammals (2n = 10 to 2n = 70). Among them, C. minutus stands out with 45 different cytotypes already identified, among which, seven parental ones, named A to G, are parapatrically distributed in the coastal plains of Southern Brazil. Looking for possible causes that led to such extensive karyotype diversification, we performed chromosomal mapping of different repetitive DNAs, including microsatellites and long interspersed element-1 ( LINE-1 ) retrotransposons in the seven parental cytotypes. Although microsatellites were found mainly in the centromeric and telomeric regions of the chromosomes, different patterns occur for each cytotype, thus revealing specific features. Likewise, the LINE-1 -like retrotransposons also showed a differential distribution for each cytotype, which may be linked to stochastic loss of LINE-1 in some populations. Here, microsatellite motifs (A) 30 , (C) 30 , (CA) 15 , (CAC) 10 , (CAG) 10 , (CGG) 10 , (GA) 15 , and (GAG) 10 could be mapped to fusion of chromosomes 20/17, fission and inversion in the short arm of chromosome 2, fusion of chromosomes 23/19, and different combinations of centric and tandem fusions of chromosomes 22/24/16. These data provide evidence for a correlation between repetitive genomic content and localization of evolutionary breakpoints and highlight their direct impact in promoting chromosomal rearrangements

    Study of four Neotropical species of tree crickets Oecanthus Serville, 1831 (Orthoptera, Gryllidae) using cytogenetic and molecular markers

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    Karyotypes in the worldwide subfamily Oecanthinae show variations in diploid number, chromosome morphology, and sex-chromosome system. This study described the chromosome set and phylogenetic relationships of four Neotropical species, Oecanthus lineolatus, O. valensis, O. pallidus, and O. pictus. We used classical cytogenetics and Bayesian Inference for phylogenetic reconstruction, using the mitochondrial genes COI, 12S rRNA, and 16S rRNA; and analyzed the phylogenetic patterns of changes in chromosome numbers, using ChromEvol. We observed differences in chromosome number among species and two different sex-chromosome systems. Oecanthus pictus showed 2n = 21, X0♂/22, XX♀; O. lineolatus, 2n = 20, XY♂/XX♀; and O. valensis and O. pallidus, 2n = 18, XY♂/XX♀. The karyotype of Oecanthus was asymmetric, one group with large chromosomes and variation in heterochromatin distribution, and another with small acrocentric chromosomes. The phylogenetic tree recovered two main groups: one with the Palearctic species and another with species from different bioregions, but with low posterior probability. The Neotropical species grouped separately, O. valensis and O. pictus with Nearctic and Ethiopian species, and O. pallidus and O. lineolatus in another, well-supported clade. Together, the phylogenic and chromosome data suggest descending dysploidy events during the evolution of the group

    The molecular cytogenetic characterization of Conopophaga lineata indicates a common chromosome rearrangement in the Parvorder Furnariida (Aves, Passeriformes).

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    Cytogenetic analyses of the Suboscines species are still scarce, and so far, there is no karyotype description of any species belonging to the family Conopophagidae. Thus, the aim of this study is to describe and analyze the karyotype of Conopophaga lineata by chromosome painting using Gallus gallus (GGA) probes and to identify the location of the 18/28S rDNA cluster. Metaphases were obtained from fibroblast culture from two individuals of C. lineata. We observed a diploid number of 2n=78. GGA probes showed that most ancestral syntenies are conserved, except for the fission of GGA1 and GGA2, into two distinct pairs each. We identified the location of 18S rDNA genes in a pair of microchromosomes. The fission of the syntenic group corresponding to GGA2 was observed in other Furnariida, and hence may correspond to a chromosomal synapomorphy for the species of Parvorder Furnariida

    AVALIAÇÃO DO DESEMPENHO E RENDIMENTO DE CARCAÇA DE FRANGOS DE CORTE ALIMENTADOS COM DIETAS CONTENDO PROBIÓTICO NAS DIFERENTES FASES DE CRIAÇÃO

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    Foi realizado um experimento com frangos de corte machos, com duração de 42 dias, nas instalações experimentais da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV/UNESP) de Jaboticabal, SP. O objetivo foi avaliar o efeito da utilização de probiótico em diferentes fases de criação sobre o desempenho e rendimento de carcaça. Foram utilizados 600 pintos de um dia de idade da linhagem Cobb, distribuídos em um delineamento experimental inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e quatro repetições de 30 aves cada, totalizando 20 boxes. Aos 21 e 42 dias de idade as aves foram pesadas para a avaliação do desempenho (peso vivo, ganho de peso, consumo de ração, conversão alimentar e mortalidade).  Aos 41 dias de idade foram abatidos dois frangos por repetição, para a avaliação do rendimento de carcaça e suas partes. A inclusão do probiótico na ração não proporcionou diferença significativa entre ostratamentos para as características de desempenho avaliadas, assim como para os parâmetros de rendimento de carcaça e suas partes.Palavras-chave: Aditivos. Avicultura. Qualidade da carne. Substituto a antibióticos.

    Benznidazole Treatment : Time- and Dose-Dependence Varies with the Trypanosoma cruzi Strain

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    As the development of new drugs for Chagas disease is not a priority due to its neglected disease status, an option for increasing treatment adherence is to explore alternative treatment regimens, which may decrease the incidence of side effects. Therefore, we evaluated the efficacy of different therapeutic schemes with benznidazole (BNZ) on the acute and chronic phases of the disease, using mice infected with strains that have different BNZ susceptibilities. Our results show that the groups of animals infected by VL-10 strain, when treated in the chronic phase with a lower dose of BNZ for a longer period of time (40 mg/kg/day for 40 days) presented better treatment efficacy than with the standard protocol (100 mg/kg/day for 20 days) although the best result in the treatment of the animals infected by the VL-10 strain was with100 mg/kg/day for 40 days. In the acute infection by the Y and VL-10 strains of T. cruzi, the treatment with a standard dose, but with a longer time of treatment (100 mg/kg/day for 40 days) presented the best results. Given these data, our results indicate that for BNZ, the theory of dose and time proportionality does not apply to the phases of infectio
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