DEVELOPMENT AND VALIDATION OF LC-MS/MS METHOD FOR ESTIMATION OF UROCARB IN HUMAN PLASMA

Objective: The present study was aimed to develop a rapid, specific and sensitive method based on LC-MS/MS method was developed for the determination of urocarb using etomidate as an internal standard. Methods: Chromatography was achieved on Discovery C18, 50 × 2.1 mm, 5 μm column. Samples were chromatographed in a gradient mode (eluent A (acetonitrile-water–formic acid, 5: 95: 0.1 v/v), eluent B (acetonitrile–formic acid, 100: 0.1 v/v)). The initial content of the eluent B of 8%, which increases linearly to 1.0 min to 100%, is maintained up to 1.5 min and returned to the original 8% to 1.51 min. The mobile phase was delivered at a flow rate of 0.400 ml/min into the mass spectrometer ESI chamber. The sample volume was 4 μl. Results: The total chromatographic run time was 2.0 min and the elution of urocarb and IS (etomidate) occurred at ~1.53 and 1.67 min, respectively. A linear response function was established at 1-100 ng/ml for urocarb and etomidate in human plasma. The % mean recovery for urocarb in LQC, MQC and HQC was 104.1 %, 100.0 % and 97.4 %. The lowest concentration with the RSD<20% was taken as LLOQ and was found to be 1.03 ng/ml for urocarb. The within-run coefficients of variation ranged between 0.271 % and 0.478 % for urocarb. The within-run percentages of nominal concentrations ranged between 99.12 % and 100.21 % for urocarb. The between-run coefficients of variation ranged between 0.388 % and 0.601 % for urocarb. The between-run percentages of nominal concentrations ranged between 98.78 % and 101.11 % for urocarb. Conclusion: A highly sensitive, specific, reproducible, rapid and high-throughput LC-MS/MS assay was developed and validated to quantify urocarb in human plasma as per the regulatory guidelines. Due to the sensitivity of the developed method, it can be applied to the monitoring of plasma levels in the analysis of drug in preclinical and clinical pharmacokinetic studies. All the parameters and results were found within the acceptance limit as given in the validation protocol

LC-MS/MS METHOD DEVELOPMENT AND VALIDATION FOR THE DETERMINATION OF CARDIAZOL IN HUMAN PLASMA

Objective: The main purpose of this study was to develop a simple, precise, rapid and accurate method for the quantification of cardiazol in human plasma. Methods: Chromatography was achieved on Discovery C18, 50 × 2.1 mm, 5 μm column. Samples were chromatographed in a gradient mode (eluent A (acetonitrile-water–formic acid, 5: 95: 0.1 v/v), eluent B (acetonitrile–formic acid, 100: 0.1 v/v)). The initial content of the eluent B of 8%, which increases linearly to 1.0 min to 100%, is maintained up to 1.5 min and returned to the original 8% to 1.51 min. The mobile phase was delivered at a flow rate of 0.400 ml/min into the mass spectrometer ESI chamber. The sample volume was 300 μl. Results: The total chromatographic run time was 2.5 min and the elution of cardiazol and IS (difenoconazole) occurred at ~2.15 and 1.98 min, respectively. A linear response function was established at 1-100 ng/ml for cardiazol and difenoconazole in human plasma. The % mean recovery for cardiazol in LQC, MQC and HQC was 102.8 %, 100.3 % and 95.9 %. The lowest concentration with the RSD<20% was taken as LLOQ and was found to be 1.10 ng/ml for cardiazol. The % accuracy of LLOQ samples prepared with the different biological matrix lots was found 109.7 %, which were found within the range of 80.00-120.00 % for the seven different plasma lots. % CV for LLOQ samples was observed as 11.9 %, which are within 20.00% of the acceptance criteria. The within-run coefficients of variation ranged between 0.311 % and 0.601 % for cardiazol. The within-run percentages of nominal concentrations ranged between 99.80 % and 100.41 % for cardiazol. The between-run coefficients of variation ranged between 0.332 % and 0.615 % for cardiazol. The between-run percentages of nominal concentrations ranged between 98.18 % and 101.21 % for cardiazol. Conclusion: A rapid method was developed for simultaneous determination of cardiazol in human plasma. The method was strictly validated according to the ICH guidelines. Acquired results demonstrate that the proposed strategy can be effortlessly and advantageously applied for routine examination of cardiazol in human plasma

Аналіз нозологій та ліків, що застосовуються здобувачами вищої медичної освіти у межах самолікування

Aim. To analyze nosologies and medicines used in self-treatment by the applicants of higher medical education.The research objectives were as follows: to determine which medicines were taken by the respondents with acute respiratory viral infections (ARI); to analyze the drug compliance, in particular when taking antibiotics, by the respondents; to study the issues of the use of analgesics, enzymatic drugs, biologically active additives (BAAs); to find out the list of medications taken by the questioned persons during the last month; to analyze diseases when the respondents take drugs constantly; to identify the factors that frightened the respondents in pharmacotherapy; to study the effect of the drug intake on the quality of life of the population. Materials and methods. The research was performed according to the results of the sociological study involving 400 applicants of education at the pre- and postgraduate levels at the Danylo Halytsky Lviv National Medical University (LNMU). The primary scientific material obtained through questionnaires was analyzed using statistical, structural and logical methods taking into account the principles of systematization. The calculation of relative values and their errors was carried out in the statistical analysis of the data obtained. The following methods were used: system analysis, sociological survey, statistical, analytical and comparative. Results. The majority of the respondents (56.50 ± 2.48) % systematically takes analgesics, mainly for headache. However, only (4.75 ± 1.06) % the questioned persons always take enzymatic drugs when feeling heaviness in the stomach. The vast majority of the respondents (79.25 ± 2.03) % has never administered BAAs. It was found that the respondents took medicines from the groups of non-narcotic analgesics, vitamins and antispasmodic remedies within the last month. The most frequent reasons why the respondents take medicines regularly are infectious and gastrointestinal diseases. Extremely rarely the respondents take medicines constantly in diseases of the musculoskeletal system and eyes. In (29.75 ± 2.29) % there are cases of combination of alcohol and drugs. The side effects and high costs of medicines are the most often the factors causing concern of the respondents regarding pharmacotherapy. Three times fewer respondents indicate the absence of drugs in pharmacies; the lack of knowledge of the mechanism of action and interaction with other medicines. In the overwhelming majority (75.50 ± 2.15 %) medicines affected the quality of life by improving health and the working capacity. However, every 7th respondent had side effects of medicines. Conclusions. In our opinion, the results obtained should serve as the basis for developing a comprehensive model of the program of prevention of negative consequences of self-treatment, first of all, among young people.Цель: анализ нозологий и лекарственных средств (ЛС), применяемых при самолечении соискателями высшего медицинского образования. Задачи исследования заключались в: определении лекарств, которые принимают респонденты при острой респираторной вирусной инфекции (ОРВИ); анализе соблюдения респондентами режима приема, в частности, антибиотиков; исследовании вопросов применения анальгетиков, ферментных средств, биологически активных добавок (БАДов); выяснении перечня лекарств, которые анкетированные принимали в течение последнего месяца; анализе заболеваний, при которых респонденты принимают лекарства постоянно; определении факторов, которые пугают респондентов в фармакотерапии; исследовании влияния приема лекарств на качество жизни населения.Материалы и методы исследования. Научная работа выполнена по результатам социологического исследования с привлечением 400 соискателей образования на до- и последипломном этапе во Львовском национальном медицинском университете им. Данила Галицкого (ЛНМУ). Полученный путем анкетирования первичный научный материал был проанализирован с использованием статистического и структурно-логического методов с учетом принципов системности. При статистическом анализе полученных данных был проведен расчет относительных величин и их погрешностей. Использовались методы системного анализа, социологического опроса, статистический, аналитико-сравнительный.Результаты. Большинство опрошенных (56,50 ± 2,48) % систематически принимали анальгетики, преимущественно при головной боли. Однако всегда принимают ферментные средства при ощущении тяжести в желудке только (4,75 ± 1,06) % опрошенных. Подавляющее большинство респондентов (79,25 ± 2,03 %) никогда не принимали БАДов. Установлено, что на протяжении последнего месяца респонденты принимали ЛС из групп ненаркотических анальгетиков, витаминов и спазмолитических препаратов. Частыми причинами, вследствие которых респонденты принимают лекарства постоянно, являются инфекционные и желудочно-кишечные заболевания. Крайне редко анкетированные принимают лекарства постоянно при заболеваниях опорно-двигательного аппарата и глаз. В (29,75 ± 2,29) % встречается сочетание приема лекарств с употреблением алкоголя. Среди факторов, которые вызывают опасение респондентов относительно фармакотерапии, чаще всего констатированы побочные эффекты и высокая стоимость ЛС. В три раза меньше анкетируемых указывают на отсутствие лекарств в аптеках, незнание механизма действия и взаимодействие с другими медикаментами. В подавляющем большинстве (75,50 ± 2,15 %) лекарства влияли на качество жизни улучшением самочувствия и работоспособности. Однако у каждого седьмого респондента возникали побочные эффекты.Выводы. Полученные и проанализированные результаты социологического исследования среди соискателей медицинского образования на до- и последипломном уровне, по нашему мнению, должны служить основой для разработки комплексной модели программы предупреждения негативных последствий при самолечении, в первую очередь среди молодежи.Мета: аналіз нозологій та лікарських засобів (ЛЗ), що застосовуються при самолікуванні здобувачами вищої медичної освіти. Завданнями дослідження було: визначення ліків, які приймають респонденти при гострій респіраторній вірусній інфекції (ГРВІ); аналіз дотримання респондентами режиму приймання, зокрема, антибіотиків; дослідження питань вживання аналгетиків, ферментних засобів, біологічно активних добавок (БАДів); з’ясування переліку ліків, які анкетовані приймали упродовж останнього місяця; аналіз захворювань, при яких респонденти приймають ліки постійно; визначення чинників, які лякають респондентів у фармакотерапії; дослідження впливу прийому ліків на якість життя населення.Матеріали та методи дослідження. Наукова робота виконана за результатами соціологічного дослідження із залученням 400 здобувачів освіти на до- та післядипломному етапі у Львівському національному медичному університеті ім. Данила Галицького (ЛНМУ). Отриманий шляхом анкетування первинний науковий матеріал був проаналізований із використанням статистичного та структурно-логічного методів з урахуванням принципів системності. При статистичному аналізі отриманих даних був проведений розрахунок відносних величин та їх похибок. Використовувалися методи системного аналізу, соціологічного опитування, статистичний, аналітико-порівняльний.Результати. Більшість опитаних (56,50 ± 2,48) % не систематично приймали аналгетики, переважно при болю голови. Проте завжди приймають ферментні засоби при відчутті тяжкості у шлунку лише (4,75 ± 1,06) % опитаних. Переважна більшість респондентів (79,25 ± 2,03) % ніколи не приймали БАДів. З’ясовано, що впродовж останнього місяця респонденти приймають ЛЗ із груп ненаркотичних аналгетиків, вітамінів та спазмолітичних препаратів. Найчастішими причинами, при яких респонденти приймають ліки постійно, є інфекційні та шлунково-кишкові захворювання. Вкрай рідко анкетовані приймають ліки постійно при захворюваннях опорно-рухового апарату та очей. У (29,75 ± 2,29) % опитаних трапляються випадки поєднання прийому ліків із вживанням алкоголю. Серед чинників, які викликають побоювання респондентів щодо фармакотерапії, найчастіше констатовані побічні ефекти та висока вартість ЛЗ. Утричі менше анкетованих вказують на відсутність ліків в аптеках, незнання механізму дії та взаємодію з іншими медикаментами. У переважній більшості (75,50 ± 2,15 %) ліки впливали на якість життя поліпшенням самопочуття та працездатності. Проте в кожного сьомого респондента виникали побічні ефекти.Висновки. Отримані та проаналізовані результати соціологічного дослідження серед здобувачів медичної освіти на до- та післядипломному рівні, на нашу думку, мають служити основою для опрацювання комплексної моделі програми попередження негативних наслідків при самолікуванні, передусім серед молоді

Розробка методик кількісного визначення субстанції кардіазол з використанням високоефективної рідинної хроматографії

The aim. Development of methods of quantitative determination of Cardiazol substance using high-performance liquid chromatography.Materials and methods. The method of high-performance liquid chromato-graphy (HPLC) was to determine of quantitative determination of Cardiazol substance ([3-Allil-4-(41-methoxyphenyl)-3H-thiazole-2-ylidene]-(32-trifluoro-methylphenyl)amine hydrobromide) using Shimadzu Nexera X2 LC -30AD (Shimad-zu, Japan). The acetonitrile of the HPLC grade (Sigma-Aldrich GmbH, Switzerland) was used in the work and other chemicals and solvents were of analytical grade. The test substance was diluted in acetonitrile at a final concentration of 400 μg/ml.Results and discussion. The method of quantitative determination of Cardiazol substance with the help of highly effective liquid chromatography is developed. The developed conditions of testing are selected experimentally. The following optimal conditions for the chromatographic distribution were found: column C8 (250 *4.6 mm; speed of the mobile phase 1 ml/min; thermostat temperature of the column 35 ° C; detecting wavelength 300 nm; holding time of the test compound is 13.9 min. Suitability of determination methods.The following optimal conditions for chromatographic separation were revealed: a C8 column (250*4.6 mm, a mobile phase speed of 1 ml/min, a column thermostat temperature of 35 °C, a detection wavelength of 300 nm. Under the proposed conditions, the retention time of the tested component is 13.9 minutes. The performance of the column was determined for its main indicators, such as the theoretical number of plates (over 65000) and the coefficient of symmetry (about 1.00). The method of quantitative determination was tested in accordance with the recommendations of the Ukrainian and European Pharmacopoeia. The proposed method meets all requirements. The method has been tested for the effects of various factors such as flow rate, the composition of the mobile phase and the temperature of the column thermostat. It is established that the influence of these factors is insignificant and does not affect the results obtained by this method.Conclusions. An analytical method for quantitative determination of Сardiazole substance with cardioprotective action has been developed on the basis of the high-performance liquid chromatography method. The conditions for chromatographic analysis (HPLC) were standardized. Requirements for the test "Checking the suitability of the chromatographic system" were established. The statistical processing of the results of the experiment shows that the relative uncertainty of the average result was within the permissible limits. The developed method for the determination of Сardiazole will be used for further study of substance as a component of various dosage formsЦель. Разработка методики количественного определения субстанции Кардиазол с использованием високоэффективной жидкостной хроматографииМатериалы и методы. Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) проводили анализ субстанции Кардиазол ([3-аллил-4 (41-метоксифенил)-3Н-тиазол-2-илиден] – (32-трифторметилфенил)амина гидро-бромид), используя систему ShimadzuNexeraX2 LC-30AD (Shimadzu, Япония). В работе использовались ацетонитрил класса HPLC (Sigma-Aldrich GmbH, Швейцария), другие химические вещества и растворители аналитического класса. Исследуемую субстанцию Кардиазол растворяли в ацетонитриле с конечной концентрацией 400 мкг/мл.Результаты и обсуждение. Выявлены следующие оптимальные условия хроматографического разделения: колонка C8 (250*4,6 мм, скорость подвижной фазы 1 мл/мин, температура термостата колонки 35 °С, длина волны детектирования 300 нм, время удерживания исследуемого соединения составляет 13,9 мин. Производительность колонки была определена для ее основных показателей, таких как количество теоретическихтарелок (более 65000) и коэффициент симметрии (около 1,00). Методика была валидирована согласно рекомендациям ГФУ. Методика была апробирована на воздействие различных факторов, таких как скорость потока, состав подвижной фазы и температура термостата колонки. Установлено, что влияние этих факторов является незначительным и не влияет на результаты, полученные по этой методике.Выводы. На основе метода высокоэффективной жидкостной хроматографии разработана аналитическая методика количественного определения субстанции кардиопротекторного действия Кардиазола. Стандартизированы условия проведения хроматографического анализа (ВЭЖХ). Установлены требования к тесту «Проверка пригодности хроматографической системы». Статистическая обработка результатов эксперимента показывает, что относительная неопределенность среднего результата находится в допустимых пределах. Разработанная методика будет использована для дальнейшего исследования субстанции как компонента различных лекарственных формМета. Розробка методики кількісного визначення субстанції Кардіазол з використанням високоефективної рідинної хроматографії.Матеріали і методи. Методом високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) проводили кількісне визначення субстанції Кардіазол ([3-алліл-4-(41-метоксифеніл)-3Н-тіазол-2-іліден]-(32-трифлуорометилфеніл)аміну гідробромід), використовуючи систему ShimadzuNexeraX2 LC-30AD (Shimadzu, Японія). В роботі використовувалися ацетонітрил класу HPLC (Sigma-AldrichGmbH, Швейцарія), інші хімічні речовини та розчинники були аналітичного сорту. Досліджувану субстанцію Кардіазол розчиняли в ацетонітрилі з кінцевою концентрацією 400 мкг/мл.Результати і обговорення. Виявлені наступні оптимальні умови хроматографічного розподілу: колонка C8 (250*4,6 мм; швидкість рухомої фази 1 мл /хв; температура термостату колонки 35 ºС; довжина хвилі детектування 300 нм, час утримування досліджуваної сполуки становить 13,9 хв. Продуктивність колонки була визначена для її основних показників, таких як кількість теоретичних тарілок(більше 65000) і коефіцієнт симетрії (близько 1,00). Методика була валідована згідно з рекомендаціями ДФУ. Методику було апробовано на вплив різних факторів, таких як, швидкість потоку, склад рухомої фази та температура термостату колонки. Встановлено, що вплив цих факторів є незначущим та не впливає на результати, отримані за цією методикою.Висновки. На основі методу високоефективної рідинної хроматографії розроблено аналітичну методику кількісного визначення субстанцiї кардіопротекторної дії Кардіазолу. Стандартизовано умови проведення хроматографічного аналізу (ВЕРХ). Встановлено вимоги до тесту «Перевірка придатності хроматографічної системи». Статистична обробка результатів експерименту свідчить, що відносна невизначеність середнього результату знаходиться у допустимих межах. Розроблена методика буде використана для подальшого дослідження речовини як компонента різних лікарських фор

Analysis of expectations and satisfaction of physicians (provisors)-interns in ukraine at the stage of primary specialization – internship training

The aim of the study is to identify the expectations of physicians (provisors)-interns for postgraduate education and assess their satisfaction with the course of primary specialization (internship). The sociological crossectional study was performed in 2021 by surveying interns of Danylo Halytsky Lviv National Medical University majoring in the following medical specialties: “Medicine” and “Pediatrics”, “Dentistry”, “Pharmacy”. The survey took place in two groups: applicants at the beginning of the internship (n=655) and after completion of the internship (n=623). Statistical methods (which are represented with confidence intervals calculated by the Fisher’s angular transformation method), structural-logical analysis and a systematic approach were used. The study revealed that the most effective form of training in the fulltime internship cycle are practical classes and conferences for physicians(provisors)-interns; the least effective form is independent work. The main factors that prevented the interns from mastering the professional knowledge, skills and abilities of the internship cycle are limited opportunities for independent supervision of patients, material and technical equipment of the clinical base of the department and the interns’ own inertia. Certain shortcomings in the organization of the practical part of the internship on the basis of the hospital / pharmacy were established, namely: lack of supervision of patients, lack of practical activities, unsatisfactory material and technical equipment and disinterest of the staff in the training of interns. According to interns, the ideal model of internship should be available, that would provide the optimal amount of theoretical knowledge and relevant practical skills and would be as relevant to the future work of the physician as possible. Applicants emphasize the qualitative component of obtaining postgraduate medical education: the use of new treatment protocols, training in hospital of the third level of medical care, the possibility of doing internships abroad. Such sociological surveys among physians (provisors)-interns on their satisfaction and compliance with expectations are an important component of the development of an optimized Model of postgraduate education of doctors / provisors in Ukraine, which will improve the quality of primary specialization (internship), the ultimate goal of which is health preservation and improvement of the life expectancy of Ukrainian citizens

Розробка методик кількісного визначення субстанції кардіазол з використанням високоефективної рідинної хроматографії

The aim. Development of methods of quantitative determination of Cardiazol substance using high-performance liquid chromatography.Materials and methods. The method of high-performance liquid chromato-graphy (HPLC) was to determine of quantitative determination of Cardiazol substance ([3-Allil-4-(41-methoxyphenyl)-3H-thiazole-2-ylidene]-(32-trifluoro-methylphenyl)amine hydrobromide) using Shimadzu Nexera X2 LC -30AD (Shimad-zu, Japan). The acetonitrile of the HPLC grade (Sigma-Aldrich GmbH, Switzerland) was used in the work and other chemicals and solvents were of analytical grade. The test substance was diluted in acetonitrile at a final concentration of 400 μg/ml.Results and discussion. The method of quantitative determination of Cardiazol substance with the help of highly effective liquid chromatography is developed. The developed conditions of testing are selected experimentally. The following optimal conditions for the chromatographic distribution were found: column C8 (250 *4.6 mm; speed of the mobile phase 1 ml/min; thermostat temperature of the column 35 ° C; detecting wavelength 300 nm; holding time of the test compound is 13.9 min. Suitability of determination methods.The following optimal conditions for chromatographic separation were revealed: a C8 column (250*4.6 mm, a mobile phase speed of 1 ml/min, a column thermostat temperature of 35 °C, a detection wavelength of 300 nm. Under the proposed conditions, the retention time of the tested component is 13.9 minutes. The performance of the column was determined for its main indicators, such as the theoretical number of plates (over 65000) and the coefficient of symmetry (about 1.00). The method of quantitative determination was tested in accordance with the recommendations of the Ukrainian and European Pharmacopoeia. The proposed method meets all requirements. The method has been tested for the effects of various factors such as flow rate, the composition of the mobile phase and the temperature of the column thermostat. It is established that the influence of these factors is insignificant and does not affect the results obtained by this method.Conclusions. An analytical method for quantitative determination of Сardiazole substance with cardioprotective action has been developed on the basis of the high-performance liquid chromatography method. The conditions for chromatographic analysis (HPLC) were standardized. Requirements for the test "Checking the suitability of the chromatographic system" were established. The statistical processing of the results of the experiment shows that the relative uncertainty of the average result was within the permissible limits. The developed method for the determination of Сardiazole will be used for further study of substance as a component of various dosage formsЦель. Разработка методики количественного определения субстанции Кардиазол с использованием високоэффективной жидкостной хроматографииМатериалы и методы. Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) проводили анализ субстанции Кардиазол ([3-аллил-4 (41-метоксифенил)-3Н-тиазол-2-илиден] – (32-трифторметилфенил)амина гидро-бромид), используя систему ShimadzuNexeraX2 LC-30AD (Shimadzu, Япония). В работе использовались ацетонитрил класса HPLC (Sigma-Aldrich GmbH, Швейцария), другие химические вещества и растворители аналитического класса. Исследуемую субстанцию Кардиазол растворяли в ацетонитриле с конечной концентрацией 400 мкг/мл.Результаты и обсуждение. Выявлены следующие оптимальные условия хроматографического разделения: колонка C8 (250*4,6 мм, скорость подвижной фазы 1 мл/мин, температура термостата колонки 35 °С, длина волны детектирования 300 нм, время удерживания исследуемого соединения составляет 13,9 мин. Производительность колонки была определена для ее основных показателей, таких как количество теоретическихтарелок (более 65000) и коэффициент симметрии (около 1,00). Методика была валидирована согласно рекомендациям ГФУ. Методика была апробирована на воздействие различных факторов, таких как скорость потока, состав подвижной фазы и температура термостата колонки. Установлено, что влияние этих факторов является незначительным и не влияет на результаты, полученные по этой методике.Выводы. На основе метода высокоэффективной жидкостной хроматографии разработана аналитическая методика количественного определения субстанции кардиопротекторного действия Кардиазола. Стандартизированы условия проведения хроматографического анализа (ВЭЖХ). Установлены требования к тесту «Проверка пригодности хроматографической системы». Статистическая обработка результатов эксперимента показывает, что относительная неопределенность среднего результата находится в допустимых пределах. Разработанная методика будет использована для дальнейшего исследования субстанции как компонента различных лекарственных формМета. Розробка методики кількісного визначення субстанції Кардіазол з використанням високоефективної рідинної хроматографії.Матеріали і методи. Методом високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) проводили кількісне визначення субстанції Кардіазол ([3-алліл-4-(41-метоксифеніл)-3Н-тіазол-2-іліден]-(32-трифлуорометилфеніл)аміну гідробромід), використовуючи систему ShimadzuNexeraX2 LC-30AD (Shimadzu, Японія). В роботі використовувалися ацетонітрил класу HPLC (Sigma-AldrichGmbH, Швейцарія), інші хімічні речовини та розчинники були аналітичного сорту. Досліджувану субстанцію Кардіазол розчиняли в ацетонітрилі з кінцевою концентрацією 400 мкг/мл.Результати і обговорення. Виявлені наступні оптимальні умови хроматографічного розподілу: колонка C8 (250*4,6 мм; швидкість рухомої фази 1 мл /хв; температура термостату колонки 35 ºС; довжина хвилі детектування 300 нм, час утримування досліджуваної сполуки становить 13,9 хв. Продуктивність колонки була визначена для її основних показників, таких як кількість теоретичних тарілок(більше 65000) і коефіцієнт симетрії (близько 1,00). Методика була валідована згідно з рекомендаціями ДФУ. Методику було апробовано на вплив різних факторів, таких як, швидкість потоку, склад рухомої фази та температура термостату колонки. Встановлено, що вплив цих факторів є незначущим та не впливає на результати, отримані за цією методикою.Висновки. На основі методу високоефективної рідинної хроматографії розроблено аналітичну методику кількісного визначення субстанцiї кардіопротекторної дії Кардіазолу. Стандартизовано умови проведення хроматографічного аналізу (ВЕРХ). Встановлено вимоги до тесту «Перевірка придатності хроматографічної системи». Статистична обробка результатів експерименту свідчить, що відносна невизначеність середнього результату знаходиться у допустимих межах. Розроблена методика буде використана для подальшого дослідження речовини як компонента різних лікарських фор

СТАВЛЕННЯ ДО ПРОЦЕСУ САМОЛІКУВАННЯ ЗДОБУВАЧІВ ВИЩОЇ МЕДИЧНОЇ ОСВІТИ НА ДО- ТА ПІСЛЯДИПЛОМНОМУ ЕТАПІ (ЗГІДНО З РЕЗУЛЬТАТАМИ СОЦІОЛОГІЧНОГО ДОСЛІДЖЕННЯ)

Мета роботи. Попередження негативних наслідків самолікування на основі його вивчення та аналізу поведінки щодо даного питання здобувачів вищої медичної освіти та курсантів-медиків. Матеріали і методи. Дослідження проводили за результатами соціологічного опитування 400 (p<0,05) здобувачів освіти на до- та післядипломному етапі у Львівському національному медичному університеті імені Данила Галицького. Отриманий шляхом анкетування первинний науковий матеріал був проаналізований з використанням статистичного та структурно-логічного методів із врахуванням принципів системності. При статистичному аналізі отриманих даних було проведено розрахунок відносних величин та їх похибок. Використано методи системного аналізу, статистичний, соціологічний, порівняння. Результати й обговорення. За результатами соціологічного дослідження встановлено, що більшість здобувачів вищої медичної освіти на до- та післядипломному етапі самостійно призначала лікування. Підставами для придбання ліків при гострих та хронічних захворюваннях найчастіше є призначення лікаря та особистий досвід опитаних. Третина анкетованих самостійно збільшували дозу ліків. Кожен 2-й респондент визнав, що змінював призначені лікарем лікарські засоби на більш дешеві аналоги. Кожен 2-й опитаний вважає, що за рецептом мають відпускатися зокрема оральні гормональні контрацептиви та антибіотики. Висновки. Отримані та проаналізовані результати виконаного соціологічного дослідження засвідчують, що більшість анкетованих (91,50±1,39) % ствердили, що займались самолікуванням. За даними їх самооцінки, з-поміж них у 64,5 % не відбулося досягнення терапевтичного ефекту ліків. Більшість респондентів (64,00±2,40) % визнали, що зазвичай приймають більше одного лікарського засобу одночасно. Перед прийманням ліків інструкцію до медичного застосування лікарського засобу вивчає більшість респондентів. Отримані результати, на нашу думку, повинні стати основою у комплексній моделі програми попередження негативних наслідків самолікування, особливо серед молоді

4-Thiazolidinone derivative Les-3833 effectively inhibits viability of human melanoma cells through activating apoptotic mechanisms

Aim To evaluate cytotoxic action of 4-thiazolidinone derivative Les-3833 and study the mechanisms of its pro-apoptotic action toward human melanoma cells and human tumor cell lines of other tissue origin. Methods The effect of Les-3833 or doxorubicin on the viability of 9 cell lines was studied using MTT assay, while human melanoma cells of WM793 line were additionally examined using light and fluorescent microscopies for evaluating cytomorphological changes. The Western-blot and flow cytometric analyses were carried out to study signaling pathways of melanoma cell cycling and death. Results Les-3833 was the most efficient against melanoma cells. Its half maximal inhibitory concentration (IC50) was 0.22 μg/mL for WM793 cells and 0.3 μg/mL for SK-Mel- 28 melanoma cells. For human lung A549, breast MCF-7, colon HCT116, and ovarian SKOV3 carcinoma cell lines IC50 was in between 2.5 to >5.0 μg/mL. Les-3833 was relatively not toxic (IC50 > 5 μg/mL) for human embryonic kidney HEK293 cells. Results of Annexin V/PI staining of melanoma cells and activation of caspase 3, PARP, MAPK, and EndoG protein suggest apoptosis in Les-3833-treated cells. Les- 3833 also induced ROS production in melanoma cells and their arrest in G0/G1 phase of cell cycle. Conclusion Novel 4-thiazolidinone derivative Les-3833 is effective against human melanoma cells in vitro, and such effect is tumor specific since it is much less pronounced in human carcinoma and leukemia cells. In melanoma cells Les-3833 induces apoptosis (morphological changes and increased pro-apoptotic proteins), ROS production, and arrest in G0/G1 phase of cell cycle

(5E)-5-(2,4-Dichloro­benzyl­idene)-2-(piperidin-1-yl)-1,3-thia­zol-4(5H)-one

In the title compound, C15H14Cl2N2OS, the piperidine ring adopts a chair conformation. The dihedral angle between the thia­zolidine ring and the dichloro­benzene ring is 9.30 (4)°; this near coplanar conformation is stabilized by the formation of an intra­molecular C—H⋯S hydrogen bond, which generates an S(6) ring. In the crystal, mol­ecules are linked by C—H⋯O hydrogen bonds, forming [001] chains. Weak π–π inter­actions [centroid–centroid separation = 3.5460 (5) Å] consolidate the structure

Study of molecular mechanisms of proapoptotic action of novel heterocyclic 4-thiazolidone derivatives

Цель. Исследовать механизмы индукции апоптических сигнальных путей новыми гетероциклическими производными 4-тиазолидонов со структурно отличающимися боковыми группами в злокачественных клетках млекопитающих. Методы. Окрашивание клеток аннексином V, иодидом пропидия, DAPI, Вестерн-блот анализ. Результаты. Структурно различающиеся производные 4тиазолидонов обладают схожей цитотоксической активностью (ІС50 = 5 мкМ) и индуцируют апоптоз в лейкозных (Jurkat, CCRF-CEM) и карциномных (MCF-7, MDA-MD-231) клетках. Вестерн-блот анализом с использованием ряда антител к белкам, функционирующим на разных стадиях апоптоза, показано, что структура боковых групп 4-тиазолидонов может непосредственно влиять на биологическую активность этих проапоптических белков в лейкозных клетках-мишенях. В частности, соединения Les-3120 (пиразолин-замещенный тиазолидинон) и Les-3166 (конъюгат тиазолидинона и бензтиазола) индуцируют рецептор-опосредованный апоптоз в клетках Т-лейкемии человека линии Jurkat. 4-Иминотиазолидинон Les-3372 предопределяет апоптоз митохондриального типа, опосредованный белком AIF. Выводы. Установлены структурно-функциональные взаимосвязи между специфическими боковыми группами в молекулах 4-тиазолидонов и сигнальными путями апоптоза, что позволяет конструировать новые, «гибридные» препараты с потенциальной способностью одновременно запускать несколько апоптических каскадов в клетках-мишенях. Ключевые слова: опухолевые клетки, апоптоз, 4-тиазолидоны, каспазы, AIF, структурно-функциональные взаимосвязи.Мета. Дослідити механізми індукції апоптичних сигнальних шляхів новими гетероциклічними похідними 4-тіазолідонів зі структурно відмінними бічними групами у злоякісних клітинах ссавців. Методи. Фарбування клітин аннексином V, йодидом пропідію, DAPI, Вестерн-блот аналіз. Результати. Структурно відмінним похідним 4-тіазолідонів притаманна схожа цитотоксична активність (ІС50 = 5 мкМ), вони також індукують апоптоз у лейкозних (Jurkat, CCRF-CEM) і карциномних (MCF-7, MDA-MD-231) клітинах. Вестерн-блот аналізом із використанням низки антитіл до білків, функціонуючих на різних стадіях апоптозу, показано, що структура бічних груп 4-тіазолідонів може безпосередньо впливати на біологічну активність цих апоптичних білків у лейкозних клітинах-мішенях. Зокрема, сполуки Les-3120 (піразолін-заміщений тіазолідинон) та Les-3166 (кон’югат тіазолідинону і бензтіазолу) індукують рецептор-опосередкований апоптоз у клітинах Т-лейкемії людини лінії Jurkat. 4-Імінотіазолідинон Les-3372 зумовлює апоптоз мітохондріального типу, опосередкований білком AIF. Висновки. Встановлено структурно-функціональні взаємозв’язки між специфічними бічними групами у молекулах 4-тіазолідонів та сигнальними шляхами апоптозу, що дозволяє конструювати нові, «гібридні» препарати з потенційною здатністю одночасно запускати кілька апоптичних каскадів у клітинах-мішенях. Ключові слова: пухлинні клітини, апоптоз, 4-тіазолідони, каспази, AIF, структурно-функціональні взаємозв'язки.Aim. Mechanisms of induction of apoptosis signaling pathways in mammalian tumor cells treated by novel heterocyclic 4-thiazolidones with different side groups were studied. Methods. Annexin V/propidium iodide and DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole) staining of cells, Western-blot analysis of specific proteins. Results. 4-Thiazolidone derivatives of various structure possess similar cytotoxic activity in vitro (IC50 = 5 µM), and induce apoptosis in both leukemia (Jurkat, CCRF-CEM) and carcinoma (MCF-7, MDA-MD-231) cells. Western-blot analysis of the expression of several proteins of apoptosis signaling showed that the structure of lateral groups of 4-thiazolidones may directly affect biological activity of these proteins in leukemia cells. In particular, compounds Les-3120 (pyrazoline-substituted thiazolidinone) and Les-3166 (thiazolidinone-benzothiazole conjugate) induced receptor-mediated apoptosis in Jurkat T-leukemia cells. 4-Iminothiazolidinone Les-3372 caused mitochondrial type apoptosis, mediated by AIF protein. Conclusions. Structure-functional relationships between the presence of specific side groups in novel 4-thiazolidones and the signaling apoptotic pathways induced by these compounds have been established. The obtained results allow designing new, «hybrid» compounds which can simultaneously induce more than one apoptotic pathway in tumor cells. Keywords: tumor cells, apoptosis, 4-thiazolidones, caspases, AIF, structure-functional relationships