Partner on looks for explanations. Attributions in conflictful and after failed partnerships

Der Artikel stellt Attributionsinhalte und Attributionsverhalten auf der Grundlage getrennt durchgeführter narrativer Interviews mit jeweils beiden Partnern dar. Die biografisch orientierten Interviews werden mit Partnern in konflikthaften Partnerschaften durchgeführt sowie mit Partnern, die sich getrennt haben. Die Auswertung erfolgt qualitativ vor dem Hintergrund der Attributionstheorien. Die Inhaltsanalyse zeigt, dass die geäußerten Attributionen bei beiden Gruppen – allerdings in unterschiedlicher Rangfolge der Häufigkeit – die Hauptthemen Kommunikation, Kinder und Sexualität nennen. Beim Attributionsverhalten ergibt sich für die Gruppe der Getrennten eine Rangfolge der Zuschreibungen: überwiegend wird der andere Partner für das Scheitern der Beziehung verantwortlich gemacht, gefolgt von der mangelhaften Paarinteraktion. Erst danach werden äußere Einflüsse für das Scheitern verantwortlich gemacht und sehr selten die eigene Person. Für die Gruppe der Konflikthaften ergibt sich bei den Zuschreibungen keine Rangfolge. Die meisten Zuschreibungen betreffen hier die mangelhafte Paarinteraktion.The article presents contents of attributions and attribution behavior on basis of narrative interviews with both partners separated accomplished. The biographically oriented interviews are raised with partners in conflictful partnerships and with partners, who are separated. The evaluation takes place qualitatively before the background of the attribution theories. The content analysis shows that the expressed attributions in both groups – however in different order of rank of the frequency – call the main topics communication, children und sexuality. In attribution behavior there is an order of rank of the attributions for the group of the separated pairs: predominantly the other partner is made responsible for the failure of the relationship, followed of the unsatisfactory pair interaction. After it external influences are made responsible for the failure and very rarely the own person. In the group of the conflictful pairs there does not result any order of rank. Most attributions are here the unsatisfactory pair interaction

Eignet sich das Mikrozensus-Panel für familiensoziologische Fragestellungen? Untersuchung am Beispiel der Frage nach den ökonomischen Determinanten der Familiengründung

The German microcensus is a rotating panel in which respondents are interviewed once per year for four years in a row. Recently, the microcensus panel 1996-1999 has been made available for scientific usage. This paper discusses the potential of the microcensus panel for inves-tigations in the field of fertility research. In the first part of the paper, we demonstrate how the data can be transformed into spell format so that event history models can be applied. Respondents become “under observation” when they are interviewed for the first time in 1996. The “risk set” are female respondents aged 16-38 who are childless at first interview. They contribute exposure time to our investigation until the last interview is conducted or have a first child. Based on this data set up, we have estimated a first birth model. Estimates are very much in line with previous findings on fertility behavior in Germany. But even though that our first investigations provide reasonable results, there are several shortcomings of the data, which we also discussed: First, fertility histories are not surveyed in the microcensus. As others have done before, we have reconstructed fertility careers of female respondents based on the ages and numbers of the children who live in the same family unit. This procedure gives fairly good results for female respondents who are below age 39 at time of interview. Older respondents, and therefore fertility at higher ages, cannot be investigated with this data. A second drawback is that there are no monthly employment histories available. However, information on the employment status at time of interview can be used. We assumed here that the employment status that we measure at time of interview is fixed for the period of twelve months after interview. This is a very strong assumption for some indicators, such as unemployment. However, for other employment indicators (such as whether the person is working in a public or private enterprise, whether the working contract is term-limited or not) this assumption should not be problematic. A third downturn of the data is panel-attrition. The microcensus is a household-survey. When respondents leave the household, they are not surveyed any longer. This involves that panel-attrition is related to residential mobility. In a ‘sensitivity analysis’ we show that panel attrition does not seem to bias our investigations. The paper concludes with a critical discussion on the scope and limits of the microcensus panel for fertility investigations.

Eignet sich das Mikrozensus-Panel für familiensoziologische Fragestellungen? Untersuchung am Beispiel der Frage nach den ökonomischen Determinanten der Familiengründung

"Ziel dieses Beitrags ist es, das Analysepotential des Mikrozensus-Panels für familiensoziologische Fragestellungen darzustellen. Dazu wird zum einen aufgezeigt, wie die Daten in Episodenformat aufgearbeitet werden können, um ereignisanalytische Modelle des Geburtenverhaltens zu schätzen. Des Weiteren wird ein Modell zu den ökonomischen Determinanten des Übergangs zur Erstelternschaft vorgestellt. In einer Sensitivitätsanalyse wird geprüft, inwiefern der Ausfall der räumlich mobilen Personen die Ergebnisse verzerrt. Der Beitrag schließt mit einer kritischen Reflektion über die Grenzen und Möglichkeiten des Mikrozensus-Panels für Fertilitätsanalysen." (Autorenreferat)"This paper discusses whether the German microcensus panel can be used for investigations in the field of family dynamics. We show how data can be set up as spell data so that event history techniques can be applied. Furthermore, a model on the economic determinants of first birth risks is estimated. A sensitivity analysis addresses the question whether panel attrition biases the investigations. The paper concludes with a critical discussion on the scope and limits of the microcensus panel for fertility investigations." (author's abstract

Bimodal antagonism of PKA signalling by ARHGAP36

Protein kinase A is a key mediator of cAMP signalling downstream of G-protein-coupled receptors, a signalling pathway conserved in all eukaryotes. cAMP binding to the regulatory subunits (PKAR) relieves their inhibition of the catalytic subunits (PKAC). Here we report that ARHGAP36 combines two distinct inhibitory mechanisms to antagonise PKA signalling. First, it blocks PKAC activity via a pseudosubstrate motif, akin to the mechanism employed by the protein kinase inhibitor proteins. Second, it targets PKAC for rapid ubiquitin-mediated lysosomal degradation, a pathway usually reserved for transmembrane receptors. ARHGAP36 thus dampens the sensitivity of cells to cAMP. We show that PKA inhibition by ARHGAP36 promotes derepression of the Hedgehog signalling pathway, thereby providing a simple rationale for the upregulation of ARHGAP36 in medulloblastoma. Our work reveals a new layer of PKA regulation that may play an important role in development and disease

Structural and functional relevance of conserved disulfid bonds of the vasopressin v2 receptor

Titelblatt u. Inhaltsverzeichnis 1\. Zusammenfassung 5 Summary 7 2\. Einleitung 9 2.1 Intrazellularer Transport von GPCR 11 2.2 Struktur der G-Protein-gekoppelten Rezeptoren 11 2.3 Bedeutung der Disulfidbrücken von GPCR für die Liganden bindung 12 2.4 Heteromerbildung von GPCR mit Hilfe von Disulfidbrücken 15 2.5 Struktur und Funktion des Humanen Vasopressin-V2-Rezeptor 15 2.6 Die Funktion des V2-Rezeptors 17 2.7 Rolle der Cysteine beim Nephrogenen Diabetes Insipidus (NDI) 19 2.8 Zielsetzung 20 3\. Material und Methoden 21 3.1 Material 21 3.2 Methoden 28 4\. Ergebnisse 47 4.1 Bedeutung der konservierten Cysteine für den V2-Rezeptor und Charakterisierung dreier, natürlich vorkommender, mutierter Rezeptoren mit zusätzlichen extrazellulären Cysteinen 47 4.2 Entwicklung eines dreidimensionalen Rezeptormodells 57 4.3 Einfluß von C195 auf die Rezeptorenfunktion 60 4.4 Die Substitution von C195 führt zur Wiederherstellung eines funktionellen Phänotyps bei den Rezeptormutanten G185C und R202C 64 4 Diskussion 74 6\. Literatur 81 7\. Abkürzungsverzeichnis 90Die meisten G Protein- gekoppelten Rezeptoren verfügen extrazellulär über zwei konservierte Cysteine, die zu einer Disulfidbrücke verknüpft werden. Es ist bekannt, daß diese Disulfidbrücke für die korrekte Ausbildung der Ligandenbindungsdomäne und/oder für den intrazellularen Transport wichtig ist. Mutationen im Gen des G-Protein gekoppelten V2-Rezeptors führen zum X-chromosomal vererbten nephrogenen Diabetes insipidus (NDI). Bei den meisten der bekannten extrazellularen missense Mutatio nen des V2-Rezeptors kommt es zur Einführung eines zusätzlichen Cysteins. In verschiedenen Veröffentlichungen wurde postuliert, daß diese zusätzlichen Cysteine die konservierte Disulfidbrücke beeinflussen und zur Bildung einer neuen Brücke führen können. In dieser Arbeit wurde diese Hypothese überprüft. Dazu wurde zunächst untersucht, welchen Phänotyp die Mutation der konservierten Cysteine bewirkt. Die konservierten Cysteine wurden durch Alanin bzw. Serin ersetzt. Die Expression der Rezeptoren erfolgte transient in humanen embryonalen Nierenzellen (HEK293). Die mutierten Rezeptoren (C112S, C112A und C192S, C192A) waren, zum größten Teil transportdefekt, nicht in der Lage, das Hormon Arginin-Vasopressin (AVP) zu binden und. Die konservierten Cysteine des V2-Rezeptors sind demnach sowohl für die korrekte Struktur der Ligandenbindungsdomäne als auch für den intrazellulären Transport von großer Bedeutung. Danach wurde überprüft, ob zwei der NDI-auslösenden Mutanten mit zusätzlich eingeführten Cysteinen (G185C und R202C), den gleichen, oben beschriebenen Phänotyp der Mutanten der konservierten Cysteine vermitteln. Diese Rezeptoren (G185C, R202C) wurden an die Zelloberfläche transportiert, waren dort aber bindungsdefekt. Die beobachtete Transportkompetenz der beiden NDI-bewirkenden Mutationen ließ schlußfolgern, daß diese zusätzlichen Cysteine höchstwahrscheinlich nicht die konservierte Disulfidbrücke beeinflussen. Um diese Ergebnisse zu verifizieren, wurde für die extrazellularen Rezeptordomänen des V2-Rezeptors ein Strukturmodell entwickelt. Nach diesem Modell könnten die zusätzlich eingeführten Cysteinreste auch, anstatt die bestehende, konservierte Verbindung zu lösen, eine zweite Disulfidbrücke mit dem freien, nichtkonservierten extrazellularen Cystein C195 des Rezeptors eingehen. Zum experimentellen Nachweis dieser Hypothese wurde in den NDI- verursachenden Rezeptoren G185C und R202C zusätzlich der Rest C195 durch ein Alanin ersetzt. Dadurch wird die potentielle Bildung einer zweiten Disulfidbrücke unterbunden. Diese Doppelmutation führte zu einer Wiederherstellung der Funktionen in beiden NDI-verursachenden Rezeptoren. Dies läßt darauf schließen, daß die zweite Disulfidbrücke bei den NDI-bewirkenden Rezeptormutanten G185C und R202C tatsächlich gebildet wird. In der Arbeit konnte ferner gezeigt werden, daß der freie Cysteinrest C195 keine Funktion für den V2-Rezeptor hat. Er ist sogar nachteilig, weil er den Rezeptor empfindlich für zusätzlich eingeführte Cysteine macht. Weitere Untersuchungen ergaben, daß dieser Rest in der Evolution erst auf der Stufe der höheren Primaten eingeführt wurde. Mit Hilfe der Datenbankanalysen konnte ferner gezeigt werden, daß das Vorhandensein einer ungeraden Anzahl an extrazellulären Cysteinen (wie beim V2-Rezeptor) bei Klasse I G Protein- gekoppelten Rezeptoren sehr selten ist. Es besteht also offenbar ein Selektionsdruck, Konstellationen mit einer ungeraden Anzahl von Cysteinen zu vermeiden, da diese den Rezeptor empfindlich für zusätzlich eingeführte Cysteine machen würden.The G protein-coupled vasopressin V2 receptor (V2 receptor) contains a pair of conserved cysteine residues (C112 and C192) which are thought to form a disulfide bond between the first and the second extracellular loop. The conserved cystein residues were found to be important for the correct formation of the ligand binding domain of some G protein-coupled receptors and for the efficient intracellular receptor transport. Mutations in the gene of the V2 receptor cause X- linked nephrogenic diabetes insipidus (NDI). Most of the missense mutations on the extracellular face of the receptor introduce additional cysteine residues. Several groups have proposed that the residues might disrupt the conserved disulfide bond of the V2 receptor. Here we assessed the properties of the V2 receptor after site-directed mutagenesis of its conserved cysteine residues in transiently transfected human embryonic kidney (HEK 293) cells. Mutant receptors (C112S, C112A and C192S, C192A) were non- functional and located mostly in the cell?s interior. The conserved cysteine residues of the V2 receptor are thus not only important for the structure of the ligand binding domain but also for intracellular receptor transport. We than analyzed the defects of two NDI-causing mutant V2 receptors with additionally introduced cysteins (G185C, R202C). The mutant receptors were efficiently transported to the plasma membrane but were defective in ligand-binding. Taking this unaffected intracellular transport of both NDI- causing mutant receptors into account, our results indicate that the observed impairment of ligand-binding by the additional cystein residues is not due to the prevention of disulfide bond formation between the conserved cystein residues. To verify this results, we calculated a structure model of the extracellular receptor domains. The model suggests that the additional cystein residues may form a second disulfide bond with the free, nonconserved extracellular cystein residue C195 rather than impairing the conserved bond. To address this question experimentally, we used the NDI-causing mutant receptors G185C and R202C. Their C195 residue were replaced by alanine to eliminate the hypothetical second disulfide bonds. This second-site mutation led to a functional rescue of both NDI-causing mutant receptors, strongly suggesting that the second disulfide bonds are indeed formed in the case of these two receptors. Furthermore we proved in this work that the presence of the cystein residue C195 is not essential for the V2 receptor function. Because makes the receptor sensitiv to ?additional cystein mutations? this residue even is disadvantageous. Furthermore it was shown that C195 is not conserved among the V2 receptors of other mamalian species and is only conserved in higher primates. With the help of data bank analyses we demonstrate that the presence of an uneven number of extracellular cystein residues, as in the human V2 receptor, is rare among class I G protein-coupled receptors. A strong selection pressure is obviously existing to avoid such a situation since these receptors would be predisposed to inactivation by the mutational introduction of additional extracellular cystein residues

Eignet sich das Mikrozensus-Panel für familiensoziologische Fragestellungen?: Untersuchung am Beispiel der Frage nach den ökonomischen Determinanten der Familiengründung

Ziel dieses Beitrags ist es, das Analysepotential des Mikrozensus-Panels für familiensoziologische Fragestellungen darzustellen. Dazu wird zum einen aufgezeigt, wie die Daten in Episodenformat aufgearbeitet werden können, um ereignisanalytische Modelle des Geburtenverhaltens zu schätzen. Des Weiteren wird ein Modell zu den ökonomischen Determinanten des Übergangs zur Erstelternschaft vorgestellt. In einer Sensitivitätsanalyse wird geprüft, inwiefern der Ausfall der räumlich mobilen Personen die Ergebnisse verzerrt. Der Beitrag schließt mit einer kritischen Reflektion über die Grenzen und Möglichkeiten des Mikrozensus-Panels für Fertilitätsanalysen

Correction: Endothelial PKA activity regulates angiogenesis by limiting autophagy through phosphorylation of ATG16L1.

status: Published onlin

Anoctamin-4 is a bona fide Ca2+-dependent non-selective cation channel

Abstract Changes in cell function occur by specific patterns of intracellular Ca2+, activating Ca2+-sensitive proteins. The anoctamin (TMEM16) protein family has Ca2+-dependent ion channel activity, which provides transmembrane ion transport, and/or Ca2+-dependent phosphatidyl-scramblase activity. Using amino acid sequence analysis combined with measurements of ion channel function, we clarified the so far unknown Ano4 function as Ca2+-dependent, non-selective monovalent cation channel; heterologous Ano4 expression in HEK293 cells elicits Ca2+ activated conductance with weak selectivity of K+ > Na+ > Li+. Endogenously expressed Ca2+-dependent cation channels in the retinal pigment epithelium were identified as Ano4 by KO mouse-derived primary RPE cells and siRNA against Ano4. Exchanging a negatively charged amino acid in the putative pore region (AA702–855) into a positive one (E775K) turns Ano4-elicited currents into Cl− currents evidencing its importance for ion selectivity. The molecular identification of Ano4 as a Ca2+-activated cation channel advances the understanding of its role in Ca2+ signaling

Small-Molecule Screening Identifies Modulators of Aquaporin-2 Trafficking

Contains fulltext : 117665.pdf (publisher's version ) (Closed access)In the principal cells of the renal collecting duct, arginine vasopressin (AVP) stimulates the synthesis of cAMP, leading to signaling events that culminate in the phosphorylation of aquaporin-2 water channels and their redistribution from intracellular domains to the plasma membrane via vesicular trafficking. The molecular mechanisms that control aquaporin-2 trafficking and the consequent water reabsorption, however, are not completely understood. Here, we used a cell-based assay and automated immunofluorescence microscopy to screen 17,700 small molecules for inhibitors of the cAMP-dependent redistribution of aquaporin-2. This approach identified 17 inhibitors, including 4-acetyldiphyllin, a selective blocker of vacuolar H+-ATPase that increases the pH of intracellular vesicles and causes accumulation of aquaporin-2 in the Golgi compartment. Although 4-acetyldiphyllin did not inhibit forskolin-induced increases in cAMP formation and downstream activation of protein kinase A (PKA), it did prevent cAMP/PKA-dependent phosphorylation at serine 256 of aquaporin-2, which triggers the redistribution to the plasma membrane. It did not, however, prevent cAMP-induced changes to the phosphorylation status at serines 261 or 269. Last, we identified the fungicide fluconazole as an inhibitor of cAMP-mediated redistribution of aquaporin-2, but its target in this pathway remains unknown. In conclusion, our screening approach provides a method to begin dissecting molecular mechanisms underlying AVP-mediated water reabsorption, evidenced by our identification of 4-acetyldiphyllin as a modulator of aquaporin-2 trafficking