EMQN best practice guidelines for genetic testing in dystrophinopathies.

Dystrophinopathies are X-linked diseases, including Duchenne muscular dystrophy and Becker muscular dystrophy, due to DMD gene variants. In recent years, the application of new genetic technologies and the availability of new personalised drugs have influenced diagnostic genetic testing for dystrophinopathies. Therefore, these European best practice guidelines for genetic testing in dystrophinopathies have been produced to update previous guidelines published in 2010.These guidelines summarise current recommended technologies and methodologies for analysis of the DMD gene, including testing for deletions and duplications of one or more exons, small variant detection and RNA analysis. Genetic testing strategies for diagnosis, carrier testing and prenatal diagnosis (including non-invasive prenatal diagnosis) are then outlined. Guidelines for sequence variant annotation and interpretation are provided, followed by recommendations for reporting results of all categories of testing. Finally, atypical findings (such as non-contiguous deletions and dual DMD variants), implications for personalised medicine and clinical trials and incidental findings (identification of DMD gene variants in patients where a clinical diagnosis of dystrophinopathy has not been considered or suspected) are discussed

Effect of flaxseed oil cake addition on antioxidant potential of grass pea tempeh

Celem pracy było określenie wpływu dodatku wytłoków z nasion lnu, jako kosubstratu nasion lędźwianu w fermentacji typu tempe, na potencjał antyoksydacyjny otrzymanych produktów. Sporządzono 5 rodzajów tempe: z samych nasion lędźwianu oraz z dodatkiem 5, 15, 25 i 35 % wytłoków lnianych. Otrzymane produkty zliofilizowano, odtłuszczono, a następnie sporządzono wodne i wodno-acetonowe (1 : 1, v/v) ekstrakty, w których oznaczono zawartość fenoli, aktywność antyrodnikową (ABTS+• i •OH lub DPPH•) oraz zdolność do redukcji. Zawartość fenoli w ekstraktach wodnych była o 20 ÷ 80 % większa w przypadku produktów zawierających wytłoki lniane w porównaniu z tempe z samych nasion lędźwianu. Ekstrakty te charakteryzowały się również o 50 ÷ 100 % większą aktywnością względem rodnika ABTS+•. Stosunkowo niewielki, 15-procentowy dodatek wytłoków do podstawowego substratu fermentacji spowodował również maksymalny wzrost zdolności do wygaszania rodnika hydroksylowego. Ekstrakty wodne z produktów zawierających 35-procentowy dodatek wytłoków wykazywały o 40 % wyższą i statystycznie istotną (p < 0,05) zdolność do redukcji niż tempe z samych nasion lędźwianu. Zawartość fenoli w ekstraktach wodno-acetonowych była 0,5 ÷ 3,5 razy większa w przypadku produktów z dodatkiem wytłoków lnianych. Ekstrakty te wykazywały również 1,5 ÷ 10 razy większą aktywność względem rodnika DPPH• oraz 1,7 ÷ 3 razy wyższą zdolność do redukcji w porównaniu z produktem powstałym po fermentacji samych nasion lędźwianu. Aktywność antyoksydacyjna była skorelowana z zawartością fenoli, niezależnie od rodzaju zastosowanego ekstrahenta.The objective of the research study was to determine the effect of flaxseed oil cake, added to grass pea seeds as a tempeh-type fermentation co-substrate, on the antioxidant potential of the products produced. Five types of tempeh were made: one type made from grass pea seeds only and 4 types with the addition of 5, 15, 25, and 35 % of flaxseed oil cake. The products produced were lyophilized, defatted and, next, aqueous and aqueous-acetone extracts (1:1, v/v) were made, and the following was determined therein: content of phenols, antiradical activity (ABTS+• and •OH or DPPH), and reducing power. As for the products containing flaxseed oil cake, the content of phenols in aqueous extracts was 20 – 80 % higher than in the tempeh from grass pea seeds only. Moreover, those extracts were characterized by a 50-100 % higher activity towards ABTS+• radical. Additionally, the addition of only 15% - a relatively low amount - of flaxseed oil cake to the basic fermentation substrate caused a maximal increase in the •OH scavenging activity potential. The reducing power of aqueous extracts from products with 35% of flaxseed oil cake added was 40% higher and statistically significant compared to the tempeh from grass pea seeds. The content of phenols in aqueous-acetone extracts was 0.5 – 3.5 times higher in the products with flaxseed oil-cake added. Additionally, these extracts showed a 1.5 - 10 times higher activity towards DPPH• and a 1.7- 3 times higher reducing power compared to the products produced after the fermentation of grass pea seeds only. The antioxidant activity was correlated with the content of phenols irrespective of the type of the used extract

The impact of preparation temperature of white tea extracts on the composition of flavan-3-ols and their interaction with the digestibility of nutrients contained in meat pate

Badano wpływ temperatury ekstrakcji herbaty białej na skład flawan-3-oli. W ekstraktach wodnych herbaty białej przygotowanych w temperaturze: 40°C , 60°C , 70°C , 80°C , 100°C oznaczono zawartość flawan-3-oli (EGCG, ECG, EC, GCG, CG, C). Wysoka temperatura ekstrakcji (80 i 100°C ) generowała reakcję epimeryzacji, czyli przejścia (-) epi-form (2R, 3R) w (-) formy (2S, 3R). Następnie sprawdzano wpływ ekstraktów herbaty białej na strawność białek, węglowodanów i lipidów pasztetu wieprzowego. Strawność związków odżywczych badano metodą in vitro symulującą układ trawienny człowieka. Stwierdzono, że dodatek ekstraktów przygotowanych w różnej temperaturze powodował zmniejszenie ilości uwalnianych do dializatu produktów hydrolizy badanych związków odżywczych. Proces epimeryzacji dodatkowo intensyfikował zmniejszenie strawności lipidów.The impact of white tea extraction temperature on the composition of flavan-3-ols was investigated. In the water extracts of white tea, prepared at 60°C , 70°C , 80°C , and 100°C , the contents of flavan-3-ols (EGCG, ECG, EC, GCG, CG, C) were determined. The high temperature of extraction (80°C , 100°C) generated an epimerization reaction, i.e. the conversion of (-) epi-forms (2R, 3R) into (-) forms (2S, 3R). Next, the impact of white tea extracts on the digestibility of proteins, saccharides, and lipids in pork pâté was studied The digestibility of nutrients was investigated using an in vitro method simulating human digestive system. It was found that the addition of extracts prepared at different temperatures to the pork pâté caused the amount of nutritive compounds being released to the dialyzate of the hydrolysis products of the nutrients studied to decrease. The epimerization process intensified additionally the decrease in the digestibility of lipids

Anti-atherosclerotic activity of catechins depends on their stereoisomerism

In terms of stereochemistry, catechins are divided into two groups: (-) epi forms (2R, 3R) and (-) forms (2S, 3R). Most of the catechins present in green tea are (-) epi forms (2R, 3R). Under the influence of high temperatures, in anaerobic conditions, as a result of epimerization the proportion of the (-) form (2S, 3R) increases. The data indicate that the presence of thermally modified catechins in the diet more efficiently reduces the development of atherosclerosis in apoE knockout mice than the presence of native catechins. The addition of the thermally modified formulations to the high-fat diet resulted in a reduction of the area of atherosclerotic lesions by about 28% (en face method) and 45% (cross-section method) compared to the group fed the high-fat diet without catechins. Furthermore, the body weight gain and plasma TBARS concentration in mice fed a diet with the addition of catechins depends on the degree of epimerization of catechins and decreases with increasing content of catechins belonging to the (-) form (2S, 3R). Moreover, plasma HDL cholesterol concentration in mice depends on catechins' stereoisomerism and increases along with the increasing content of catechins belonging to the (-) form (2S, 3R)