Nuevas terapias dirigidas para el tratamiento del cáncer

El cáncer es el término que se utiliza para englobar un conjunto de enfermedades que se caracterizan por el crecimiento descontrolado de células alteradas molecularmente por mutaciones o modificaciones epigenéticas.En la presente revisión describimos algunas terapias dirigidas que se están utilizando actualmente en clínic

Unraveling CK2 inhibition and temozolomide contribution to therapy response in preclinical GL261 glioblastoma: immune system implications and magnetic resonance based nosological imaging

El glioblastoma (GB) es el tumor primario más común en adultos. Debido a su mal prognóstico, es urgente encontrar mejoras en su tratamiento. El objetivo de esta tesis es estudiar el efecto de inhibidores de CK2 y del agente alquilante Temozolamida (TMZ) a la respuesta a terapia en el modelo de GB preclínico GL261 utilizando tanto métodos in vitro (línea celular GL261) como in vivo (ratones GL261 con tumores). La enzima CK2 es un tetrámero compuesto por dos subunidades catalíticas (α/ α') y dos subunidades reguladoras (β). En esta tesis, se describe el contenido diferencial de la subunidad CK2 α' en células GL261 con alto y bajo estado de proliferación. Esta diferencia podría afectar potencialmente a la susceptibilidad de estas células al tratamiento con inhibidores de CK2, dependiendo de su estado de proliferación. Además, el efecto del inhibidor dual de CK2 y Pim-1, TDB ha sido evaluado a nivel celular y sistémico utilizando el modelo GL261. Mientras el TDB ejerce efectos muy potentes en células tumorales in vitro, no hemos sido capaces de detectar ningún efecto inhibitorio en CK2 en la masa tumoral de animales GL261 tras la administración del fármaco. Estos resultados apuntan a que sería necesaria la reformulación del fármaco para mejorar su biodisponibilidad y sus efectos. Resultados preliminares de nuestro grupo mostraron una mayor supervivencia en ratones con tumor tratados con una terapia metrónomica inmunogénica (1 dosis cada 6 días) con la combinación de TMZ y el inhibidor de CK2 CX-4945, a pesar de que con otros esquemas de administración no se observara ninguna mejora. En este sentido, se ha descrito que ciertos fármacos inmunogénicos son capaces de desencadenar en células tumorales la exposición y liberación de señales de peligro que provocan la activación de una potente respuesta antitumoral por parte del sistema inmune del huésped. En esta tesis, se han realizado experimentos in vitro para determinar la presencia de señales de peligro en células tratadas con ambos tratamientos, ya sea por separado o en combinación. Los resultados muestran que las células tratadas con TMZ y con la combinación CX-4945+TMZ exponen calreticulina, una señal de daño temprana en la cascada inmunogénica. Además, las células tratadas con CX-4945 y CX-4945+TMZ liberan ATP, otra señal de daño que contribuye a la activación del sistema inmune. Por último, la evolución de ratones con tumores GL261 tratados con TMZ con un esquema de administración inmunogénico ha sido evaluada mediante imágenes nosológicas basadas en la acquisición secuencial en 2 dimensiones de resonancia magnética espectroscópica de imagen (MRSI) para el seguimiento de la respuesta a terapia no invasiva. Nuestro grupo ha descrito biomarcadores basados en imagen capaces de distinguir zonas del tumor respondedoras y no respondedoras, que podrían indicar cambios metabólicos locales, incluyendo la acción del sistema inmune del huésped en el tumor. Los resultados se muestran en forma de imágenes creadas con un código de colores (las llamadas nosológicas) analizadas por machine learning a partir de datos MRSI. El seguimiento de ratones tratados con TMZ mostró que el porcentaje de áreas tumorales identificadas como respondedoras oscilaba con los ciclos de terapia. Este periodo de oscilación (de una duración aproximada de 6 días) coincide con el ciclo inmunogénico descrito en ratones como respuesta al daño producido por TMZ. Esta información puede resultar de ayuda en la predicción de la respuesta y efectividad de una terapia y en el desarrollo de estrategias terapéuticas personalizadas. En conclusión, el uso de terapias no mutagénicas y de ciclos de administración de terapia respetuosos con el sistema inmune, combinado con un seguimiento preciso de la respuesta a terapia mediante estrategias no invasivas, podrían contribuir a la mejora del prognóstico del glioblastoma.Glioblastoma is the most common primary brain tumor in adults with a very poor prognosis, for which urgent improvements in treatment are needed. The aim of this thesis was to unravel the contribution of the CK2 inhibitors and the alkylating agent Temozolomide (TMZ) to therapy response in the preclinical glioblastoma (GB) murine model GL261 using in vitro (GL261 cell line) and in vivo (GL261 tumor bearing mice) approaches. The enzyme CK2 is a tetramer composed by two catalytic subunits (α/ α') and two regulatory subunits (β). In this Thesis, a differential content of the CK2 α' subunit was observed in highly and slowly proliferating GL261 cells, which could potentially affect the susceptibility of these cells to the treatment with CK2 inhibitors depending on their proliferative status. Moreover, the effect of the dual CK2 and Pim-1 inhibitor TDB was evaluated in the GL261 cell line and in GL261-tumor bearing mice. While TDB showed a potent effect in vitro, we were not able to detect any inhibitory effect on CK2 in the tumor site after administration to tumor-bearing animals, suggesting that changes in the formulation of this drug would be needed to improve bioavailability and performance. Preliminary results from our group showed an increased survival in GL261-tumor bearing mice when treated in a immune-enhanced metronomic schedule (1 dose every 6 days) with the combination of TMZ and the CK2 inhibitor CX-4945, although other administration schedules did not result in such improvement. In this sense, it has been described that tumor cells treated with certain immunogenic drugs expose and release certain molecules called danger signals, leading to the activation of a potent antitumoral host immune response. We have performed in vitro studies in order to assess danger signals after both treatments alone or in combination. Results showed that TMZ and TMZ+CX-4945 GL261 treated cells expose calreticulin, an early danger signal of the immune cycle cascade. Also, CX-4945 and CX-4945+TMZ has been shown to release ATP, another danger signal that binds to P2 receptors, also contributing to the activation of the immune system. Moreover, the evolution of GL261-tumor bearing mice treated with TMZ in an immune enhanced metronomic schedule was evaluated using multislice magnetic resonance spectroscopic image (MRSI) based nosological images for noninvasive therapy response follow-up. Our group has described imaging-based biomarkers that are able to distinguish responding and non-responding tumor zones, probably sampling local changes which include host immune system action over the tumor. Results are shown as a color-coded image (the aforementioned nosological image) resulting from machine learning analysis of MRSI data. The follow-up of TMZ treated mice showed an oscillatory behavior in the percentage of tumor area identified as “responding” within the tumor mass during the transient response to therapy. This oscillation period (ca. 6 days) is in agreement with the immune system cycle in mice in response to damage produced after TMZ administration. This information would be helpful in the future for prediction of therapy response/effectiveness and in the development of personalized therapeutic strategies. In conclusion, the use of non-mutagenic therapies and immune system respectful cycles for therapy administration combined with an accurate therapy response follow-up using non-invasive strategies could help to improve the poor outcome of glioblastoma

Unraveling CK2 inhibition and temozolomide contribution to therapy response in preclinical GL261 glioblastoma: immune system implications and magnetic resonance based nosological imaging

El glioblastoma (GB) es el tumor primario más común en adultos. Debido a su mal prognóstico, es urgente encontrar mejoras en su tratamiento. El objetivo de esta tesis es estudiar el efecto de inhibidores de CK2 y del agente alquilante Temozolamida (TMZ) a la respuesta a terapia en el modelo de GB preclínico GL261 utilizando tanto métodos in vitro (línea celular GL261) como in vivo (ratones GL261 con tumores). La enzima CK2 es un tetrámero compuesto por dos subunidades catalíticas (α/ α') y dos subunidades reguladoras (β). En esta tesis, se describe el contenido diferencial de la subunidad CK2 α' en células GL261 con alto y bajo estado de proliferación. Esta diferencia podría afectar potencialmente a la susceptibilidad de estas células al tratamiento con inhibidores de CK2, dependiendo de su estado de proliferación. Además, el efecto del inhibidor dual de CK2 y Pim-1, TDB ha sido evaluado a nivel celular y sistémico utilizando el modelo GL261. Mientras el TDB ejerce efectos muy potentes en células tumorales in vitro, no hemos sido capaces de detectar ningún efecto inhibitorio en CK2 en la masa tumoral de animales GL261 tras la administración del fármaco. Estos resultados apuntan a que sería necesaria la reformulación del fármaco para mejorar su biodisponibilidad y sus efectos. Resultados preliminares de nuestro grupo mostraron una mayor supervivencia en ratones con tumor tratados con una terapia metrónomica inmunogénica (1 dosis cada 6 días) con la combinación de TMZ y el inhibidor de CK2 CX-4945, a pesar de que con otros esquemas de administración no se observara ninguna mejora. En este sentido, se ha descrito que ciertos fármacos inmunogénicos son capaces de desencadenar en células tumorales la exposición y liberación de señales de peligro que provocan la activación de una potente respuesta antitumoral por parte del sistema inmune del huésped. En esta tesis, se han realizado experimentos in vitro para determinar la presencia de señales de peligro en células tratadas con ambos tratamientos, ya sea por separado o en combinación. Los resultados muestran que las células tratadas con TMZ y con la combinación CX-4945+TMZ exponen calreticulina, una señal de daño temprana en la cascada inmunogénica. Además, las células tratadas con CX-4945 y CX-4945+TMZ liberan ATP, otra señal de daño que contribuye a la activación del sistema inmune. Por último, la evolución de ratones con tumores GL261 tratados con TMZ con un esquema de administración inmunogénico ha sido evaluada mediante imágenes nosológicas basadas en la acquisición secuencial en 2 dimensiones de resonancia magnética espectroscópica de imagen (MRSI) para el seguimiento de la respuesta a terapia no invasiva. Nuestro grupo ha descrito biomarcadores basados en imagen capaces de distinguir zonas del tumor respondedoras y no respondedoras, que podrían indicar cambios metabólicos locales, incluyendo la acción del sistema inmune del huésped en el tumor. Los resultados se muestran en forma de imágenes creadas con un código de colores (las llamadas nosológicas) analizadas por machine learning a partir de datos MRSI. El seguimiento de ratones tratados con TMZ mostró que el porcentaje de áreas tumorales identificadas como respondedoras oscilaba con los ciclos de terapia. Este periodo de oscilación (de una duración aproximada de 6 días) coincide con el ciclo inmunogénico descrito en ratones como respuesta al daño producido por TMZ. Esta información puede resultar de ayuda en la predicción de la respuesta y efectividad de una terapia y en el desarrollo de estrategias terapéuticas personalizadas. En conclusión, el uso de terapias no mutagénicas y de ciclos de administración de terapia respetuosos con el sistema inmune, combinado con un seguimiento preciso de la respuesta a terapia mediante estrategias no invasivas, podrían contribuir a la mejora del prognóstico del glioblastoma.Glioblastoma is the most common primary brain tumor in adults with a very poor prognosis, for which urgent improvements in treatment are needed. The aim of this thesis was to unravel the contribution of the CK2 inhibitors and the alkylating agent Temozolomide (TMZ) to therapy response in the preclinical glioblastoma (GB) murine model GL261 using in vitro (GL261 cell line) and in vivo (GL261 tumor bearing mice) approaches. The enzyme CK2 is a tetramer composed by two catalytic subunits (α/ α') and two regulatory subunits (β). In this Thesis, a differential content of the CK2 α' subunit was observed in highly and slowly proliferating GL261 cells, which could potentially affect the susceptibility of these cells to the treatment with CK2 inhibitors depending on their proliferative status. Moreover, the effect of the dual CK2 and Pim-1 inhibitor TDB was evaluated in the GL261 cell line and in GL261-tumor bearing mice. While TDB showed a potent effect in vitro, we were not able to detect any inhibitory effect on CK2 in the tumor site after administration to tumor-bearing animals, suggesting that changes in the formulation of this drug would be needed to improve bioavailability and performance. Preliminary results from our group showed an increased survival in GL261-tumor bearing mice when treated in a immune-enhanced metronomic schedule (1 dose every 6 days) with the combination of TMZ and the CK2 inhibitor CX-4945, although other administration schedules did not result in such improvement. In this sense, it has been described that tumor cells treated with certain immunogenic drugs expose and release certain molecules called danger signals, leading to the activation of a potent antitumoral host immune response. We have performed in vitro studies in order to assess danger signals after both treatments alone or in combination. Results showed that TMZ and TMZ+CX-4945 GL261 treated cells expose calreticulin, an early danger signal of the immune cycle cascade. Also, CX-4945 and CX-4945+TMZ has been shown to release ATP, another danger signal that binds to P2 receptors, also contributing to the activation of the immune system. Moreover, the evolution of GL261-tumor bearing mice treated with TMZ in an immune enhanced metronomic schedule was evaluated using multislice magnetic resonance spectroscopic image (MRSI) based nosological images for noninvasive therapy response follow-up. Our group has described imaging-based biomarkers that are able to distinguish responding and non-responding tumor zones, probably sampling local changes which include host immune system action over the tumor. Results are shown as a color-coded image (the aforementioned nosological image) resulting from machine learning analysis of MRSI data. The follow-up of TMZ treated mice showed an oscillatory behavior in the percentage of tumor area identified as “responding” within the tumor mass during the transient response to therapy. This oscillation period (ca. 6 days) is in agreement with the immune system cycle in mice in response to damage produced after TMZ administration. This information would be helpful in the future for prediction of therapy response/effectiveness and in the development of personalized therapeutic strategies. In conclusion, the use of non-mutagenic therapies and immune system respectful cycles for therapy administration combined with an accurate therapy response follow-up using non-invasive strategies could help to improve the poor outcome of glioblastoma

Unraveling CK2 inhibition and temozolomide contribution to therapy response in preclinical GL261 glioblastoma: immune system implications and magnetic resonance based nosological imaging

El glioblastoma (GB) es el tumor primario más común en adultos. Debido a su mal prognóstico, es urgente encontrar mejoras en su tratamiento. El objetivo de esta tesis es estudiar el efecto de inhibidores de CK2 y del agente alquilante Temozolamida (TMZ) a la respuesta a terapia en el modelo de GB preclínico GL261 utilizando tanto métodos in vitro (línea celular GL261) como in vivo (ratones GL261 con tumores). La enzima CK2 es un tetrámero compuesto por dos subunidades catalíticas (α/ α') y dos subunidades reguladoras (β). En esta tesis, se describe el contenido diferencial de la subunidad CK2 α' en células GL261 con alto y bajo estado de proliferación. Esta diferencia podría afectar potencialmente a la susceptibilidad de estas células al tratamiento con inhibidores de CK2, dependiendo de su estado de proliferación. Además, el efecto del inhibidor dual de CK2 y Pim-1, TDB ha sido evaluado a nivel celular y sistémico utilizando el modelo GL261. Mientras el TDB ejerce efectos muy potentes en células tumorales in vitro, no hemos sido capaces de detectar ningún efecto inhibitorio en CK2 en la masa tumoral de animales GL261 tras la administración del fármaco. Estos resultados apuntan a que sería necesaria la reformulación del fármaco para mejorar su biodisponibilidad y sus efectos. Resultados preliminares de nuestro grupo mostraron una mayor supervivencia en ratones con tumor tratados con una terapia metrónomica inmunogénica (1 dosis cada 6 días) con la combinación de TMZ y el inhibidor de CK2 CX-4945, a pesar de que con otros esquemas de administración no se observara ninguna mejora. En este sentido, se ha descrito que ciertos fármacos inmunogénicos son capaces de desencadenar en células tumorales la exposición y liberación de señales de peligro que provocan la activación de una potente respuesta antitumoral por parte del sistema inmune del huésped. En esta tesis, se han realizado experimentos in vitro para determinar la presencia de señales de peligro en células tratadas con ambos tratamientos, ya sea por separado o en combinación. Los resultados muestran que las células tratadas con TMZ y con la combinación CX-4945+TMZ exponen calreticulina, una señal de daño temprana en la cascada inmunogénica. Además, las células tratadas con CX-4945 y CX-4945+TMZ liberan ATP, otra señal de daño que contribuye a la activación del sistema inmune. Por último, la evolución de ratones con tumores GL261 tratados con TMZ con un esquema de administración inmunogénico ha sido evaluada mediante imágenes nosológicas basadas en la acquisición secuencial en 2 dimensiones de resonancia magnética espectroscópica de imagen (MRSI) para el seguimiento de la respuesta a terapia no invasiva. Nuestro grupo ha descrito biomarcadores basados en imagen capaces de distinguir zonas del tumor respondedoras y no respondedoras, que podrían indicar cambios metabólicos locales, incluyendo la acción del sistema inmune del huésped en el tumor. Los resultados se muestran en forma de imágenes creadas con un código de colores (las llamadas nosológicas) analizadas por machine learning a partir de datos MRSI. El seguimiento de ratones tratados con TMZ mostró que el porcentaje de áreas tumorales identificadas como respondedoras oscilaba con los ciclos de terapia. Este periodo de oscilación (de una duración aproximada de 6 días) coincide con el ciclo inmunogénico descrito en ratones como respuesta al daño producido por TMZ. Esta información puede resultar de ayuda en la predicción de la respuesta y efectividad de una terapia y en el desarrollo de estrategias terapéuticas personalizadas. En conclusión, el uso de terapias no mutagénicas y de ciclos de administración de terapia respetuosos con el sistema inmune, combinado con un seguimiento preciso de la respuesta a terapia mediante estrategias no invasivas, podrían contribuir a la mejora del prognóstico del glioblastoma.Glioblastoma is the most common primary brain tumor in adults with a very poor prognosis, for which urgent improvements in treatment are needed. The aim of this thesis was to unravel the contribution of the CK2 inhibitors and the alkylating agent Temozolomide (TMZ) to therapy response in the preclinical glioblastoma (GB) murine model GL261 using in vitro (GL261 cell line) and in vivo (GL261 tumor bearing mice) approaches. The enzyme CK2 is a tetramer composed by two catalytic subunits (α/ α') and two regulatory subunits (β). In this Thesis, a differential content of the CK2 α' subunit was observed in highly and slowly proliferating GL261 cells, which could potentially affect the susceptibility of these cells to the treatment with CK2 inhibitors depending on their proliferative status. Moreover, the effect of the dual CK2 and Pim-1 inhibitor TDB was evaluated in the GL261 cell line and in GL261-tumor bearing mice. While TDB showed a potent effect in vitro, we were not able to detect any inhibitory effect on CK2 in the tumor site after administration to tumor-bearing animals, suggesting that changes in the formulation of this drug would be needed to improve bioavailability and performance. Preliminary results from our group showed an increased survival in GL261-tumor bearing mice when treated in a immune-enhanced metronomic schedule (1 dose every 6 days) with the combination of TMZ and the CK2 inhibitor CX-4945, although other administration schedules did not result in such improvement. In this sense, it has been described that tumor cells treated with certain immunogenic drugs expose and release certain molecules called danger signals, leading to the activation of a potent antitumoral host immune response. We have performed in vitro studies in order to assess danger signals after both treatments alone or in combination. Results showed that TMZ and TMZ+CX-4945 GL261 treated cells expose calreticulin, an early danger signal of the immune cycle cascade. Also, CX-4945 and CX-4945+TMZ has been shown to release ATP, another danger signal that binds to P2 receptors, also contributing to the activation of the immune system. Moreover, the evolution of GL261-tumor bearing mice treated with TMZ in an immune enhanced metronomic schedule was evaluated using multislice magnetic resonance spectroscopic image (MRSI) based nosological images for noninvasive therapy response follow-up. Our group has described imaging-based biomarkers that are able to distinguish responding and non-responding tumor zones, probably sampling local changes which include host immune system action over the tumor. Results are shown as a color-coded image (the aforementioned nosological image) resulting from machine learning analysis of MRSI data. The follow-up of TMZ treated mice showed an oscillatory behavior in the percentage of tumor area identified as "responding" within the tumor mass during the transient response to therapy. This oscillation period (ca. 6 days) is in agreement with the immune system cycle in mice in response to damage produced after TMZ administration. This information would be helpful in the future for prediction of therapy response/effectiveness and in the development of personalized therapeutic strategies. In conclusion, the use of non-mutagenic therapies and immune system respectful cycles for therapy administration combined with an accurate therapy response follow-up using non-invasive strategies could help to improve the poor outcome of glioblastoma

Successful partnerships : exploring the potential of immunogenic signals triggered by TMZ, CX-4945 and combined treatment in GL261 glioblastoma cells

Altres ajuts: Universitat Autònoma de Barcelona (13th PIF Call); XarTEC SALUT (2018 XARDI 00016 / IU68-013944)The relevance of the cancer immune cycle in therapy response implies that successful treatment may trigger the exposure or the release of immunogenic signals. Previous results with the preclinical GL261 glioblastoma (GB) showed that combination treatment of temozolomide (TMZ) + CX-4945 (protein kinase CK2 inhibitor) outperformed single treatments, provided an immune-friendly schedule was followed. Our purpose was to study possible immunogenic signals released in vitro by GB cells. Methods: GL261 GB cells were treated with TMZ and CX-4945 at different concentrations (25 µM-4 mM) and time frames (12-72 h). Cell viability was measured with Trypan Blue and propidium iodide. Calreticulin exposure was assessed with immunofluorescence, and ATP release was measured with bioluminescence. Results: TMZ showed cytostatic rather than cytotoxic effects, while CX-4945 showed remarkable cytotoxic effects already at low concentrations. Calreticulin exposure after 24 h was detected with TMZ treatment, as well as TMZ/CX-4945 low concentration combined treatment. ATP release was significantly higher with CX-4945, especially at high concentrations, as well as with TMZ/CX-4945. Conclusions: combined treatment may produce the simultaneous release of two potent immunogenic signals, which can explain the outperformance over single treatments in vivo. A word of caution may be raised since in vitro conditions are not able to mimic pharmacokinetics observed in vivo fully

Detecció no invasiva de la participació del sistema immunitari en la resposta a la teràpia en glioblastoma en un model preclínic de ratolí immunocompetent

Investigadors del Grup d'Aplicacions Biomèdiques de la RMN (GABRMN) de la Universitat Autònoma de Barcelona (UAB) han utilitzat tècniques no invasives d'imatge mèdica basades en ressonància magnètica, seguides d'anàlisi amb intel·ligència artificial, per obtenir biomarcadors de resposta a la teràpia en models murins de glioblastoma. En aquest estudi també s'ha detectat la curació de més de la meitat dels animals estudiats, amb generació de memòria immune antitumoral. Aquesta estratègia podria tenir aplicació translacional a pacients.Investigadores del Grupo de Aplicaciones Biomédicas de la RMN (GABRMN) de la Universitat Autònoma de Barcelona han utilizado técnicas no invasivas de imagen médica basadas en resonancia magnética, seguidas de análisis con inteligencia artificial, para obtener biomarcadores de respuesta a la terapia en modelos murinos de glioblastoma. En este estudio también se ha detectado la curación de más de la mitad de los animales estudiados, con generación de memoria inmune antitumoral. Esta estrategia podría tener aplicación traslacional a pacientes.Researchers from the Biomedical Applications Group from the RMN (GABRMN) at the Universitat Autònoma de Barcelona have used non-invasive medical imaging approaches based in magnetic resonance, followed by machine learning analysis, in order to obtain therapy response biomarkers for glioblastoma preclinical murine models. Moreover, in this study, more than a half of the studied animals were cured by the therapeutic protocol used, with development of anti-tumour immune memory. This strategy could have translational potential for patients

Detecció no invasiva de la participació del sistema immunitari en la resposta a la teràpia en glioblastoma en un model preclínic de ratolí immunocompetent

Investigadors del Grup d'Aplicacions Biomèdiques de la RMN (GABRMN) de la Universitat Autònoma de Barcelona (UAB) han utilitzat tècniques no invasives d'imatge mèdica basades en ressonància magnètica, seguides d'anàlisi amb intel·ligència artificial, per obtenir biomarcadors de resposta a la teràpia en models murins de glioblastoma. En aquest estudi també s'ha detectat la curació de més de la meitat dels animals estudiats, amb generació de memòria immune antitumoral. Aquesta estratègia podria tenir aplicació translacional a pacients.Investigadores del Grupo de Aplicaciones Biomédicas de la RMN (GABRMN) de la Universitat Autònoma de Barcelona han utilizado técnicas no invasivas de imagen médica basadas en resonancia magnética, seguidas de análisis con inteligencia artificial, para obtener biomarcadores de respuesta a la terapia en modelos murinos de glioblastoma. En este estudio también se ha detectado la curación de más de la mitad de los animales estudiados, con generación de memoria inmune antitumoral. Esta estrategia podría tener aplicación traslacional a pacientes.Researchers from the Biomedical Applications Group from the RMN (GABRMN) at the Universitat Autònoma de Barcelona have used non-invasive medical imaging approaches based in magnetic resonance, followed by machine learning analysis, in order to obtain therapy response biomarkers for glioblastoma preclinical murine models. Moreover, in this study, more than a half of the studied animals were cured by the therapeutic protocol used, with development of anti-tumour immune memory. This strategy could have translational potential for patients