Aislamiento de cocaína y benzoilecgonina en muestras de orina por extracciones líquido-líquido y en fase sólida y confirmación por Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)

El consumo ilícito de cocaína se ha incrementado extraordinariamente en los últimos años, por lo que resulta indispensable el desarrollo de metodologías seguras, rápidas y eficientes para su detección. En este trabajo se desarrollo una técnica de HPLC de fase reversa con detector de UV para identificar y cuantificar a la cocaína y la benzoilecgonina, con resultados satisfactorios en los parámetros del control de calidad.Se realizó un estudio de recobrado para el aislamiento de la cocaína y la benzoilecgonina en orina con extracciones liquido liquido y en fase sólida con tres tipos de columnas comerciales (Bond Elut Certify, Extrelut 3 y Supelclean LC-18). Las fracciones obtenidas con la extracción líquido-líquido resultaron muy contaminados, con porcentajes de recobrados bajos (45% y 28% para la cocaína y la benzoilecgonina, respectivamente. En las extracciones en fase sólida para la cocaína resultaron muy eficientes las columnas Supelclean LC-18 (87-102 %) y Extrelut 3 (70-102 %), mientras que para el aislamiento de la benzoilecgonina resultaron más eficiente las columnas Extrelut 3 (86-101 %) y Supelclean LC-18 (73-89%). Las columnas Bond Elut Certify resultaron poco eficientes para el aislamiento de la cocaína (53-79%) y con un recobrado aún mas bajo para su metabolito (2-21% %)

Comparison of micronuclei frequency in bone marrow cells of three rat lines

The aim of this paper is to compare the spontaneous and induced with cyclophosphamide micronucleus indexes in bone marrow cells of the Sprague Dawley, Lewis and Wistar rat lines. Five experimental groups were formed (10 animals of each sex and of each line, in every group). The first group was used as the negative control (intact animals), the second one was exposed to oral administration of drugs; other conditions were the same as for the other groups. The third group was treated with 2 % Tween 65 and the fourth group was treated with 0.9 % NaCl. Both substances were administered by oral way to 2 ml/kg during 14 days. The fifth group was treated intraperitoneally with strong mutagen cyclophosphamide in the dose of 50 mg/kg (10 ml/kg in solution), on 48th and 24th hours before euthanasia. The Sprague Dawley line (both sexes) was significantly different from the other lines. Rats of this line had lower index of spontaneous formation of micronuclei, higher index of cyclophosphamide­induced micronucle formation, percent of micronucleated erythrocytes in bone marrow and the index of cytotoxicity. The results obtained make it possible to identify the most appropriate line of rats as model animals for studies of genotoxicity. It will allow also to obtain more accurate estimates of genotoxicity of various substances.Сравнивали спонтанные и индуцированные циклофосфамидом микроядерные индексы в клетках костного мозга трех линий крыс – Sprague Dawley, Льюис и Вистар. Сформировали пять экспериментальных групп (по 10 животных каждого пола и линии в каждой группе). Первую группу использовали в качестве негативного контроля (интактные животные), вторая служила контролем влияния перорального приема препаратов. Все условия содержания были одинаковыми для всех групп животных. Крыс третьей группы обрабатывали 2 % Tween 65, а четвертой группы – 0,9 % NaCl. Оба вещества вводили перорально в дозе 2 мл/кг в течение 14 дней. Животных пятой группы обрабатывали внутрибрюшинно циклофосфамидом в дозе 50 мг/кг (10 мл/кг раствора), за 48 и 24 ч до эвтаназии. Линия Sprague Dawley (оба пола) существенно отличается от других. Крысы этой линии имели низкие показатели спонтанного образования микроядер и высокий индекс при индукции циклофосфамидом, а также процент эритроцитов с микроядрами в костном мозге и индекс цитотоксичности. Полученные результаты позволяют определить наиболее подходящие линии крыс в качестве модельных животных для изучения генотоксичности. Это также позволит получать более точные оценки генотоксичности различных веществ. Порівнювали спонтанні та індуковані циклофосфамідом мікроядерні індекси в клітинах кісткового мозку трьох ліній щурів – Sprague Dawley, Люіс і Вистар.Сформували п’ять експериментальних груп (по 10 тварин кожної статі і лінії в кожній групі). Першу групу використали як негативний контроль (інтактні тварини), друга слугувала контролем впливу перорального прийому препаратів. Всі умови утримання були однаковими для всіх груп тварин. Щурів третьої групи обробляли 2 % Тween 65, а четвертої групи – 0,9 % NaCl. Обидві речовини вводили перорально в дозі 2 мл/кг впродовж 14 днів. Тварин п’ятої групи обробляли внутрішньочеревно циклофосфамідом в дозі 50 мг/кг (10 мл/кг розчину), за 48 і 24 год до евтаназії. Лінія Sprague Dawley (обидві статі) істотно відрізнялась від інших. Щури цієї лінії мали низькі показники спонтанного утворення мікроядер і високий індекс при індукції циклофосфамідом, а також відсоток еритроцитів з мікроядрами в кістковому мозку та індекс цитотоксичності. Отримані результати дозволяють визначити найбільш відповідні лінії щурів як модельних тварин для вивчення генотоксичності. Це також дозволить отримувати точніші оцінки генотоксичності різних речовин

Comparison of the Sprague Dawley rat’s response against cyclophosphamide and bleomycin in the head sperm morphology assay.

El ensayo de la morfología de la cabeza del espermatozoide permite el estudio del potencialgenotóxico de muestras problemas a nivel celular, esta herramienta evalúa los cambios efectuados enla concentración espermática, así como el aumento de la frecuencia espontánea de cabezas deespermatozoides morfológicamente anormales. En este artículo decidimos evaluar y comparar en elbiomodelo de ratas Sprague Dawley machos, el efecto de dos sustancias mutagénicas en este ensayo,la Ciclofosfamida (CF) en dosis de 50 mg/kg y la Bleomicina (BL) en dosis de 30 mg/kg,administradas por vía intraperitoneal durante 5 días consecutivos, siendo sacrificados los animales 52días después de la última administración de los mutágenos. Se obtuvo como resultado que ambosmutágenos disminuyeron la concentración espermática y aumentaron el índice espontáneo de cabezasanómalas en los espermatozoides, siendo observado un marcado efecto mutagénico en la CF encomparación con la BL. Al final de la experiencia se obtuvieron mayores resultados de inducción decabezas de espermatozoides anómalas con el uso de la CF. Estos resultados reafirman el uso de estemutágeno como control positivo eficiente y seguro en este ensayo el cual se encuentra incluido en losestudios de genotoxicidad y toxicología de la fertilidad.The head sperm morphology assay, allows the study of the genotoxic potencial of samples at thecellular level problems; this tool to evaluate the spermatic concentration changes, as well as theincrease of the spontaneous heads frequency of sperms morphology abnormal. In this article we decideto evaluate and to compare in the Sprague Dawley males rats, the effect of two mutagenic substancesin these assay, the Cyclophosphamide, (CF) in dose of 50 mg/kg and the Bleomycin (BL) in dose of30 mg/kg, administered by intraperitoneal route during 5 consecutive days, being sacrificed theanimals 52 days after the last administration of the mutagens. It was obtained that both mutagendiminished the spermatic concentration and they increased the spontaneous index of anomaloussperms heads, being observed a marked mutagenic effect in the CF in comparison with the BL. At theend of the experience bigger results of induction of anomalous heads sperms were obtained with theuse of the CF. These results reaffirm the use of this mutagen as efficient and safe positive control inthis assay which is included in the genotoxicity studies and fertility toxicology

Collaborative Augmented Digital Twin: A Novel Open-Source Augmented Reality Solution for Training and Maintenance Processes in the Shipyard of the Future

Presented at the 4th XoveTIC Conference, A Coruña, Spain, 7–8 October 2021.[Abstract] Large companies use a lot of resources on workshop operator training and industrial machinery maintenance since the lack of this practice or its poor implementation increases the cost and risks of operating and handling sensitive and/or hazardous machinery. Industrial Augmented Reality (IAR), a major technology in the Industry 4.0 paradigm that may enhance worker performance, minimize hazards and improve manufacturing processes, could be beneficial in this situation. This paper presents an IAR solution that allows for visualizing and interacting with the digital twin of a critical system. Specifically, the augmented digital twin of an industrial cooler was developed. The proposed IAR system provides a dynamic way to perform operator training with a full-size model of the actual equipment and to provide step-by-step guidance so that maintenance processes can be performed more safely and efficiently. The proposed system also allows several users to use devices at the same time, creating a new type of collaborative interaction by viewing the model in the same place and state. Performance tests with many simultaneous users have been conducted, with response latency being measured as the number of connected users grows. Furthermore, the suggested IAR system has been thoroughly tested in a real-world industrial environment.This work was supported by the Plant Information and Augmented Reality research line of the Navantia-UDC Joint Research Unit (IN853B-2018/02). The authors would like to thank CITIC for its support. CITIC, a research center accredited by Galician University System, is funded by “Consellería de Cultura, Educación e Universidades from Xunta de Galicia”, with 80% of funds coming from ERDF Funds, ERDF Operational Programme Galicia 2014-2020, and the remaining 20% from “Secretaría Xeral de Universidades” (Grant ED431G 2019/01).Xunta de Galicia; IN853B-2018/02Xunta de Galicia; ED431G 2019/0

Comparison of the Sprague Dawley rat’s response against cyclophosphamide and bleomycin in the head sperm morphology assay

El ensayo de la morfología de la cabeza del espermatozoide permite el estudio del potencial genotóxico de muestras problemas a nivel celular, esta herramienta evalúa los cambios efectuados en la concentración espermática, así como el aumento de la frecuencia espontánea de cabezas de espermatozoides morfológicamente anormales. En este artículo decidimos evaluar y comparar en el biomodelo de ratas Sprague Dawley machos, el efecto de dos sustancias mutagénicas en este ensayo, la Ciclofosfamida (CF) en dosis de 50 mg/kg y la Bleomicina (BL) en dosis de 30 mg/kg, administradas por vía intraperitoneal durante 5 días consecutivos, siendo sacrificados los animales 52 días después de la última administración de los mutágenos. Se obtuvo como resultado que ambos mutágenos disminuyeron la concentración espermática y aumentaron el índice espontáneo de cabezas anómalas en los espermatozoides, siendo observado un marcado efecto mutagénico en la CF en comparación con la BL. Al final de la experiencia se obtuvieron mayores resultados de inducción de cabezas de espermatozoides anómalas con el uso de la CF. Estos resultados reafirman el uso de este mutágeno como control positivo eficiente y seguro en este ensayo el cual se encuentra incluido en los estudios de genotoxicidad y toxicología de la fertilidad.The head sperm morphology assay, allows the study of the genotoxic potencial of samples at the cellular level problems; this tool to evaluate the spermatic concentration changes, as well as the increase of the spontaneous heads frequency of sperms morphology abnormal. In this article we decide to evaluate and to compare in the Sprague Dawley males rats, the effect of two mutagenic substances in these assay, the Cyclophosphamide, (CF) in dose of 50 mg/kg and the Bleomycin (BL) in dose of 30 mg/kg, administered by intraperitoneal route during 5 consecutive days, being sacrificed the animals 52 days after the last administration of the mutagens. It was obtained that both mutagen diminished the spermatic concentration and they increased the spontaneous index of anomalous sperms heads, being observed a marked mutagenic effect in the CF in comparison with the BL. At the end of the experience bigger results of induction of anomalous heads sperms were obtained with the use of the CF. These results reaffirm the use of this mutagen as efficient and safe positive control in this assay which is included in the genotoxicity studies and fertility toxicology

TERT and TERT promoter in melanocytic neoplasms: Current concepts in pathogenesis, diagnosis, and prognosis

Background and objectiveLocated on chromosome locus 5p15.33, telomerase reverse transcriptase (TERT or hTERT) encodes the catalytic subunit of telomerase which permits lengthening and preservation of telomeres following mitosis. Mutations in TERT promoter (TERT‐p) upregulate expression of TERT, allowing survival of malignant cells and tumor progression in wide variety of malignancies including melanoma. The objective of this review is to examine the roles of TERT and TERT‐p in the pathogenesis, diagnosis, and prognostication of cutaneous melanoma.MethodsAll studies of TERT or TERT‐p in cutaneous melanocytic neoplasms with the following inclusion criteria were reviewed: publication date between 2010 and 2019, English language, and series of ≥3 cases were reviewed for evidence supporting the role of TERT in pathogenesis, diagnosis, and prognosis. Studies with <3 cases or focused primarily on mucosal or uveal melanocytic tumors were excluded.Results and conclusionTERT‐p mutations are frequent in chronic and non‐chronic sun damage melanoma and correlate with adverse prognosis, inform pathogenesis, and may provide diagnostic support. While TERT‐p mutations are uncommon in acral melanoma, TERT copy number gains and gene amplification predict reduced survival. Among atypical spitzoid neoplasms, TERT‐p mutations identify biologically aggressive tumors and support the diagnosis of spitzoid melanoma. TERT‐p methylation may have prognostic value in pediatric conventional melanoma and drive tumorigenesis in melanoma arising within congenital nevi. Finally, TERT‐p mutations may aid in the differentiation of recurrent nevi from recurrent melanoma.Peer Reviewedhttp://deepblue.lib.umich.edu/bitstream/2027.42/156143/2/cup13691.pdfhttp://deepblue.lib.umich.edu/bitstream/2027.42/156143/1/cup13691_am.pd

In vitro antiatherogenicity of extracts from Halimeda incrassata seaweed: antioxidant activity and smooth muscle cell migration studies

Aim: The aim of this work was to evaluate the in vitro atheroprotective potential of the seaweed Halimeda incrassata in smooth muscle cell migration and lipoprotein oxidation in relation to its antioxidant activity. Material and methods: Antioxidant activity was determinate by DPPH• radical scavenging assay and ORAC method. The inhibitory effect of the aqueous extract on LDL oxidation mediated by Cu2+ ions was determinate by TBARS and conjugated diene quantification. The effect of the seaweed aqueous extract on smooth muscle cell migration was evaluated in MOVAS-1 mouse aortic smooth muscle cell. Results: The inhibitory effect of the aqueous extract on lipoprotein oxidation mediated by Cu2+ was demonstrated. Seaweed extract caused dose-dependent inhibition of TBARS (IC50 = 0.8 mg/mL) and conjugated dienes formation. The seaweed had a high antioxidant activity in the assays performed. The activity could be related to the phenolic content of Halimeda incrassata. Conclusions: In summary, the results of this study represent a further step in the characterization of the atheroprotective action of Halimeda incrassata and indicate the seaweed could be used for a nutraceutical and/or phytoterapeutic application.Objetivos: El objetivo de este trabajo fue evaluar el potencial ateroprotector in vitro del alga Halimeda incrassata en la migración de células de músculo liso de ratón y la oxidación de lipoproteínas en relación con su actividad antioxidante. Material y métodos: La actividad antioxidante fue determinada mediante los métodos de inhibición de radicales DPPH y la Capacidad antioxidante total (ORAC). La actividad inhibitoria de la oxidación de LDL mediada por iones Cu2+ se determinó por la cuantificación de TBARS y dienos conjugados. El efecto del extracto acuoso sobre la migración de las células de músculo liso se evaluó en la línea de células de músculo liso aórtica de ratón MOVAS-1. Resultados: Se demostró el efecto inhibidor del extracto sobre la oxidación de LDL mediada por Cu2+. El extracto del alga causa inhibición dosis-dependiente de la formación de TBARS (IC50 = 0,8 mg/mL) y dienos conjugados. Las algas tuvieron una alta actividad antioxidante en los ensayos realizados y podría estar relacionada con el contenido de compuestos fenólicos. Conclusiones: Los resultados de este trabajo representan un paso más en la caracterización de la acción ateroprotectora de Halimeda incrassata y evidencian sus posibles aplicaciones como nutracéutico y/o fitofármaco.The research was funded by IFS grant F/4897-1. Partial funding was also provided by CIHR grant MOP24447, the Canadian Research Chair award (D.B.) and a personal grant from GSEP, offered by the Canadian Bureau for International Education (A.C) and CNPq- (Brasil)

Moringa oleifera Lam. (Moringaceae): evaluación nutricional y clínica en modelos animales y correspondencia con investigaciones en humanos

Moringa oleifera es una especie vegetal que pertenece a la familia Moringaceae. Durante cientos de años, poblaciones de diferentes países han considerado que posee propiedades medicinales y nutritivas. Recientemente se le ha prestado atención en países tropicales y subtropicales de Europa del Este, América Latina, el Caribe y Asia, y se ha ganado un lugar en la industria de suplementos, ingredientes funcionales y en la fortificación de alimentos. El objetivo de este trabajo fue relacionar los hallazgos bioquímicos y fisiológicos determinados en modelos experimentales animales y los que se han logrado demostrar en humanos en los mismos aspectos, mediante el empleo de M. oleifera; con un llamado de atención a aquellas similitudes y diferencias entre el modelo animal y el prototipo humano. Los efectos beneficiosos de M. oleifera vinculados al tratamiento de la diabetes mellitus, dislipidemias y anemia se han asociado en gran medida al contenido y variedad de sustancias antioxidantes que posee y que complementan su valor en nutrientes. Esta revisión enfatiza en la necesidad de desarrollar experimentos controlados en humanos para estudiar el papel de los principios activos de M. oleifera en nutrición y clínica para establecer las formas idóneas de suministrar la planta y dosis óptimas que permitan lograr los efectos deseados, de manera que resulte aceptable al paladar y sea una solución sostenible en el tratamiento de estas enfermedades. Palabras clave: Moringa oleífera, modelos experimentales, antioxidantes, diabetes mellitus, dislipidemias, anemia

Evaluaciones toxicológicas de un extracto acuoso del alga marina Bryothamnion triquetrum (Gmelin) M.A.Howe en estudios in vitro y modelos animales

Objetivo: El objetivo de este trabajo fue evaluar la toxicidad de un extracto acuoso del alga marina Bryothamnion triquetrum. Métodos: El ensayo de Ames se desarrolló con las cepas de S. typhimurium TA 1535, TA 1537 y TA 1538 con y sin activación metabólica. El estudio de citotoxicidad se realizó con células intestinales Caco-2 durante 24 y 48 horas de exposición al extracto y la viabilidad fue evaluada con la técnica de yoduro de propidio. El Estudio de Toxicidad Aguda se realizó con ratones Balc/c machos por vía oral e intraperitoneal y el Ensayo de Toxicidad por Dosis Repetidas se desarrolló con ratas Wistar de ambos sexos, durante 3 meses por vía oral con dosis de 8 y 32 mg/kg. Resultados: En el estudio de citotoxicidad con células Caco-2 se obtuvieron CL50 de 9,3 y 4,5 mg/mL con exposiciones de 24 y 48 horas respectivamente. El ensayo de Ames evidencia que no es mutágeno directo ni promutágeno hasta 1000 μg. La DL50 del extracto por vía intraperitoneal fue de 1205 mg/kg y por vía oral no se observó mortalidad en dosis de 2000 mg/kg. En el estudio de Toxicidad por Dosis Repetidas no se observó toxicidad. Conclusiones: A partir de estos resultados se puede postular que el extracto acuoso del alga marina B. triquetrum es inocuo, consideración necesaria, entre otras, para su posible uso como nutracéutico y/o fitofármaco.Aim: The aim of this work was to evaluate the toxicity of an aqueous extract from seaweed Bryothamnion triquetrum. Materials and Methods: Ames assay was developed with S. typhimurium TA 1535, TA 1537 and TA 1538 with and without metabolic activation. Citotoxicity study was carried out with intestinal cells Caco-2 during 24 and 48 hours of exhibition to the extract and the viability was evaluated with the technique of Propidium iodide. Acute Toxicity was carried out with mice Balc/c males for via oral and intraperitoneal and the Toxicity for Repeated Dose was developed with rats Wistar of both sexes, during 3 months for via oral with dose of 8 and 32 mg/kg. Results: Results of Ames assays showed that this extract is not direct mutagen or promutagen in quantity until 1000 μg. The cytotoxic effect (LC50) of Caco-2 cells after 24 and 48 h of exposition were 9,3 and 4,5 mg/mL respectively. The LD50 of the extract, with intraperitoneal administration was 1205 mg/kg and by oral via not produce mortality in doses until 2000 mg/kg. At the doses of 8 and 32 mg/kg of extract, the repeated oral administration produced no toxic effects. Conclusions: In summary, this paper adds convincing evidences in support of innocuous of the aqueous extract of B.triquetrum. Altogether; these results represent another step towards the use of this natural product as phytotherapeutical agent.CNPq (Brasil), número de proyecto PV 400001/2009 8

Comparation of antioxidants properties and polyphenols content of aqueous extract from seaweeds Bryothamnion triquetrum and Halimeda opuntia

Objetivos. Evaluar y comparar las propiedades antioxidantes mediante ensayos in vitro de extractos acuosos de las algas roja Bryothamnion triquetrum y verde Halimeda opuntia y su relación con el contenido de polifenoles. Material y Métodos. Se utilizaron las técnicas in vitro: DPPH, Capacidad reductora, Inhibición de la peroxidación lipídica e inhibición de la hemólisis inducida por AAPH. Resultados. B. triquetrum: DPPH; CI50=1,15 ± 0,06, capacidad reductora a concentración; 128 mg/mL, DO=2,798, inhibición de la peroxidación lipídica; CI50=5,09± 0,25 e inhibición de la hemólisis con 12 mg/ mL; 35 %. H. opuntia: DPPH; CI50=12,34 ± 0,30 mg/mL, capacidad reductora; DO=0,800, inhibición de la peroxidación lipídica; CI50=1,25± 0,31 mg/mL e inhibición de la hemólisis; 82%. Conclusiones. Los resultados evidencian que B triquetrum resulto mucho más eficiente en los ensayos de DPPH y Capacidad reductora mientras H opuntia resulta más eficiente en Inhibición de la peroxidación lipídica e inhibición de la hemólisis. Se discuten algunos aspectos acerca de sus posibles mecanismos de acción.Objective. To evaluate and compare the antioxidant activity displayed by seaweed H. opuntia and B. triquetrum using different experimental in vitro antioxidant assessment models. Material and Methods. The following techniques are utilized: DPPH, Reducing power, inhibition of lipid peroxidation and inhibition of haemolysis. Results. B. triquetrum: DPPH; IC50=1.15 ± 0.06, Reducing power (concentration 128 mg/mL), OD=2.798, inhibition of lipid peroxidation; IC50=5.09± 0.25 and inhibition of haemolysis; with 12 mg/mL; 35 %. H. opuntia: DPPH; IC50=12.34 ± 0.30 mg/mL, reducing power; OD=0.800, inhibition of lipid peroxidation; IC50=1.25± 0.31 mg/mL, inhibition of lipid peroxidation; IC50=1.25± 0.31 mg/mL and inhibition of haemolysis; 82%. Conclusion. It was demonstrated that B.triquetrum extract was more effective than H. opuntia in reducing power and DPPH assays while H.opuntia was more effective in inhibition of lipid peroxidation in rat brain homogenates and the inhibition of red blood cell (RBC) haemolysis induced by AAPH. We discuss some aspects about their possible mechanisms of action.Este trabajo fue financiado parcialmente por CNPq (Brasil) a través del Proyecto No. 401852/2012-1