Clot Formation in the Sipunculid Worm Themiste petricola: A Haemostatic and Immune Cellular Response

Clot formation in the sipunculid Themiste petricola, a coelomate nonsegmented marine worm without a circulatory system, is a cellular response that creates a haemostatic mass upon activation with sea water. The mass with sealing properties is brought about by homotypic aggregation of granular leukocytes present in the coelomic fluid that undergo a rapid process of fusion and cell death forming a homogenous clot or mass. The clot structure appears to be stabilized by abundant F-actin that creates a fibrous scaffold retaining cell-derived components. Since preservation of fluid within the coelom is vital for the worm, clotting contributes to rapidly seal the body wall and entrap pathogens upon injury, creating a matrix where wound healing can take place in a second stage. During formation of the clot, microbes or small particles are entrapped. Phagocytosis of self and non-self particles shed from the clot occurs at the clot neighbourhood, demonstrating that clotting is the initial phase of a well-orchestrated dual haemostatic and immune cellular response

Modulación de la toxicidad inducida por trióxido de arsénico en leucemias mediante combinación con MG132 y drogas epigenéticas : relación con la muerte mediada por BNIP3

Fil: Lombardo, Tomás. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, ArgentinaLa búsqueda de alternativas terapéuticas a los fármacos actualmente utilizados como\ntratamiento de leucemias y linfomas, ha llevado a un uso cada vez más frecuente de terapias\ncombinadas. Este tipo de tratamiento propone el uso simultáneo de dos o más drogas, teniendo\ncomo objetivo la combinación de dos o más mecanismos de acción diferentes que se\ncomplementen para lograr el efecto deseado. De esta manera se pretende lograr una mayor\nefectividad terapéutica, junto a una reducción de la dosis utilizada de cada compuesto, logrando\nasí una disminución en la frecuencia y gravedad de los efectos adversos generados. El objetivo\nde este trabajo fue estudiar los cambios que ocurren en la potencia citotóxica del trióxido de\narsénico (TOA), un compuesto utilizado como monodroga en el tratamiento de la leucemia\npromielocítica aguda, al combinarse con el inhibidor de proteasoma MG132, en las líneas\ncelulares humanas U937 (leucemia promonocítica) y Raji (linfoma de Burkitt). Se evaluaron\nademás los mecanismos por los cuales se producen dichos cambios de potencia al combinar las\ndos drogas. La combinatoria TOA+MG132 fue sinérgica en la línea a U937. Este sinergismo\nresultó ser dependiente de la generación de bajos niveles de anión superóxido (O2\n.-) y bajos\nniveles de GSH intracelulares. Por el contrario, la combinatoria TOA+MG132 resultó antagónica\nen la células Raji. Pudo determinarse que el antagonismo TOA+MG132 en la línea Raji, ocurre\ndebido a que las células eliminan selectivamente las mitocondrias dañadas mediante mitofagia,\ny además tienen silenciado el gen de BNIP3 (una proteína de la familia bcl2 involucrada en la\nmuerte mediada por TOA). Finalmente, mediante un aumento en la expresión de BNIP3\nutilizando drogas con acción epigenética y la inhibición del flujo mitofágico, se logró una\ninteracción sinérgica entre TOA y MG132 en la línea Raji. Concluimos que el sinergismo\nTOA+MG132 en células U937, se debe a la falta de activación de la respuesta de GSH, que\ndepende a su vez de niveles elevados de O2.- como señal. Por otro lado, el antagonismo\nTOA+MG132 en células Raji, se debe a la eliminación de mitocondrias dañadas por mitofagia, lo\ncual constituye un poderoso mecanismo de resistencia al cual serían adictas ciertas neoplasias.\nSugerimos que los fármacos con acción de bloqueo sobre este mecanismo, serían de gran\nimportancia en el diseño de combinaciones, para aumentar la potencia citotóxica y la\nselectividad sobre las células neoplásicas, a la vez que permitirían reducir los efectos adversos\nsobre las células normales. Consideramos que los resultados derivados de este trabajo de tesis,\nacerca de las modificaciones en la potencia citotóxica que ocurren al combinar dos o más drogas,\ny el análisis personalizado de la respuesta de cada paciente en particular, permitirán contribuir\na mejorar la eficacia de la terapia antineoplásica

Reflexiones en torno a la aplicación de las celulas madre en la Medicina Regenerativa

Con fines de divulgación científica se abordaron aspectos de la revolución actual en Biomedicina que conducen a la clonación; se enfatizó en las repercusiones de su vertiente terapéutica en la cirugía cardiaca con transplantes celulares y el desarrollo de la medicina regenerativa. Se valoró el cambio de paradigma que se va configurando en la Medicina ; los obstáculos emergentes en el contexto del debate generado por implicaciones éticas, jurídicas, sociales, acerca de la obtención y empleo de células madre, y los peligros de asociación entre habilidades tecnológicas y finalidades aberrantes. Se expuso la posición cubana en este debate y las relaciones entre ciencia y sociedad que posibilitan los logros de la ciencia cubana. Se reconoce la capacidad de estos avances biomédicos para contribuir al bienestar humano; la necesidad de desarrollo bien regulado desde el punto de vista ético, legal y bioético, así como las responsabilidades de políticos y científicos en la adopción de decisiones, lo imperioso de socializar la información y asumir una comprensión dialéctica de los logros. Se concluye resaltando el papel decisivo de las interacciones propiciadoras entre ciencia y sociedad. Palabras clave: Medicina Regenerativa, Células Madre, Clonación Terapéutica, Clonación Reproductiva Humana, Paradigma, Dialéctica

A stochastic characterization of hydrogen peroxide-induced regulated cell death in microcystis aeruginosa

Regulated cell death (RCD) encompasses the activation of cellular pathways that initiate and execute a self-dismissal process. RCD occur over a range of stressors doses that overcome pro-survival cellular pathways, while higher doses cause excessive damage leading to passive accidental cell death (ACD). Hydrogen peroxide (HP) has been proposed as a potential tool to control harmful cyanobacterial blooms, given its capacity to remove cyanobacterial cells and oxidize cyanotoxins. HP is a source of hydroxyl radicals and is expected to induce RCD only within a limited range of concentrations. This property makes this compound very useful to better understand stress-driven RCD. In this work, we analyzed cell death in microcystin-producing Microcystis aeruginosa by means of a stochastic dose response model using a wide range of HP concentrations (0, 0.29, 1.76, 3.67, 7.35, 14.70, and 29.5 mM). We used flow cytometry and unsupervised classification to study cell viability and characterize transitional cell death phenotypes after exposing cells to HP for 48 and 72 h. Non-linear regression was used to fit experimental data to a logistic cumulative distribution function (cdf) and calculate the half maximal effective concentration (EC50). The EC50 of M. aeruginosa exposed to HP were 3.77 ± 0.26 mM and 4.26 ± 0.22 mM at 48 and 72 h, respectively. The derivative of cdf (probability density function; pdf) provided theoretical and practical demonstration that EC50 is the minimal dose required to cause RCD in 50% of cells, therefore maximizing the probability of RCD occurrence. 1.76 mM HP lead to an antioxidant stress response characterized by increased reactive oxygen species (ROS) levels and HP decomposition activity. The exposure of 3.67 mM HP induced a dose-related transition in cell death phenotype, and produced several morphological changes (a less dense stroma, distortion of the cell membrane, partial disintegration of thylakoids, extensive cytoplasmic vacuolation and highly condensed chromatin). The EC50 and the stochastic cdf and pdf together with the multidimensional transitional phenotypic analysis of single cells contribute to further characterize cell death pathways in cyanobacteria.Fil: Giannuzzi, Leda. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Lombardo, Tomás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Juárez, Ivan. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Aguilera, Anabella. Linnaeus University; SuizaFil: Blanco, Guillermo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentin

Sipunculan celomocytes increase the resistance to H2O2-induced cell death under hypoxia

Themiste petricola is a marine intertidal endolithic worm that experiences transient hypoxia within its habitat, owing to natural sediment movements or increased organic enrichment. We characterized and quantified the cytotoxic effect of H2O2 in celomocytes of the sipunculan Themiste petricola under normoxia and hypoxia (O2 < 0.1 %) through the median effect method. The 50 % cell death H2O2 dose at 24 h (EC50) under normoxia was 1.5 mM. The range EC10-EC90 was 0.6 mM - 3.9 mM. The fraction of cells having collapsed mitochondrial membrane potential (MMP) was increased dose-dependently after 3 h exposure with 24 h cytotoxic doses of H2O2 from EC10 to EC90. The 24 h cytotoxic dose inducing 50 % of cells with collapsed MMP at 3 h was 3.67 mM. Intracellular superoxide anion production was increased dose-dependently, while reduced glutathione was decreased dose-dependently at 3 h with H2O2 from EC10 to EC90. Exposure to 24 h hypoxia did not cause cell death but induced intracellular acidification. The 24 h EC50 of H2O2 under hypoxia was increased to 4.7 mM while the range EC10-EC90 was increased to 0.9 mM - 25.1 mM. We conclude that hypoxia induces anaerobic metabolism and increases tolerance to H2O2-induced cell death in celomocytes of Themiste petricola preserving the immune functions and providing an advantage to survive under low oxygen tension.Fil: Lombardo, Tomás. Consejo Nacional de Investigaciones Cientiâ­ficas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral "profesor R. A. Margni"; ArgentinaFil: Peralta, Diego Matias. Consejo Nacional de Investigaciones Cientiâ­ficas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral "profesor R. A. Margni"; ArgentinaFil: Kornblihtt, L.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Blanco, Guillermo Armando C.. Consejo Nacional de Investigaciones Cientiâ­ficas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral "profesor R. A. Margni"; Argentin

Modelling of chlorophyll-a and Microcystis aeruginosa decay under the effect of different oxidants in culture media

Blooms of the cyanobacterium Microcystis aeruginosa are common in many eutrophic freshwater bodies and pose a serious threat to water quality, potentially giving rise to high turbidity, food web alterations, increased production of toxic microcystin (MC-LR) and odorous compounds. The comparative effectiveness of oxidant treatment of M. aeruginosa cells in culture media was evaluated by applying a mathematical model of chlorophyll-a (Chl-a), cells and MC removal. The oxidants were chlorine (1–5 mg∙L-1), hydrogen peroxide (HP: 50–150 mg∙L-1), percitric acid (PCA: 10–50 mg∙L-1), and peracetic acid (PAA: 1.5–7.5 mg∙L-1). The Weibull distribution model was applied to assess the degree of inactivation of M. aeruginosa viability under different oxidant treatments. First-order kinetics was successfully applied to the experimental data for Chl-a decay. Keywords: Microcystis aeruginosa microcystin mathematical model oxidants chlorophyll-a deca

Protein deficiency during Trichinella spiralis infection impairs lung immunity against newborn larvae

The goal of this study was to analyse the effects of a protein-deficient (PD) diet on antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) in vitro against newborn larvae (NBL) of Trichinella spiralis in the lungs of infected rats. Two groups of weaning Wistar rats received a PD diet (6.5% casein) and other two received a control diet (C, 20% casein). After ten days, one group of each diet was infected (PDI and CI) with muscle larvae. Lung tissue extracts (LTE) and lung cell suspension (LCS) were obtained. PDI had lower titres of anti-NBL antibodies in LTE than CI. In ADCC assays using control cells, NBL mortality percentage was lower with LTE from PDI than LTE from CI (P <.01). In assays using control cytotoxic sera, ADCC was exerted by LCS from CI at all days post-infection (p.i.), but only by LCS from 13 days p.i. from PDI. ADCC assays combining LTE and LCS from the same group showed a lower response for PDI than for CI (P <.0001). LCS from PDI contained lower numbers of neutrophils, eosinophils and FcεRI+ cells than CI. PD may diminish ADCC activity against T spiralis NBL in lungs through alterations in specific antibodies and effector cells.Fil: Vila, Cecilia Celeste. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Saracino, María Priscila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Lombardo, Tomás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Falduto, Guido Hernán. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Díaz, Mariángeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Calcagno, Marcela Adriana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Pallaro, Anabel Nora. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Sanidad Nutrición Bromatología y Toxicología; ArgentinaFil: Baldi, Pablo Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; Argentin

SOCIO-DEMOGRAPHIC VARIABLES, FEAR OF COVID-19, ANXIETY, AND DEPRESSION: PREVALENCE, RELATIONSHIPS AND EXPLANATORY MODEL IN THE GENERAL POPULATION OF SEVEN LATIN AMERICAN COUNTRIES

The COVID-19 pandemic has gravely impacted Latin America. A model was tested that evaluated the contribution of socio-demographic factors and fear of COVID-19 on anxiety and depression in samples of residents in seven Latin American countries (Argentina, Ecuador, Mexico, Paraguay, Uruguay, Colombia, and El Salvador). A total of 4,881 individuals, selected by convenience sampling, participated in the study. Moderate and severe levels of depressive symptoms and anxiety were identified, as well as a moderate average level of fear of COVID-19. In addition, it was observed that about a quarter of the participants presented symptoms of generalized anxiety disorder and a major depressive episode. Fear of COVID-19 significantly and positively predicted anxiety and depressive symptoms, whereas the effects of socio-demographic variables are generally low [χ2(287) = 5936.96, p < 0.001; RMSEA = 0.064 [0.062, 0.065]; CFI = 0.947; and SRMR = 0.050]. This suggests the need for the implementation of preventive actions in the general population of these countries, with the aim of reducing the prevalence of depressive, anxious and fearful symptoms related to COVID-19

Cross-national measurement invariance of the Purpose in Life Test in seven Latin American countries

"The Purpose in Life Test (PIL) is a measure of purpose in life widely used in many cultures and countries; however, cross-cultural assessments are scarce. The present study aimed to evaluate the cross-cultural measurement invariance of the PIL in the general population of seven Latin American countries (Colombia, Ecuador, El Salvador, Mexico, Paraguay, Argentina, and Uruguay). A total of 4306 people participated, selected by non-probabilistic convenience sampling, where Uruguay has the highest mean age (M = 41.8; SD = 16.6 years); while Ecuador has the lowest mean age (M = 24.6; SD = 7.8 years). Furthermore, in each country, there is a higher proportion of women (>60%) than men (<40%). Using Multi-Group Confirmatory Factor Analysis, the factorial structure does not show evidence of invariance among the included countries. However, based on the Multi-Group Factor Analysis Alignment, there is evidence that a three-dimensional structure of the PIL (Meaning of existence, Freedom to make meaning in daily life and Will to find meaning in the face of future challenges) is the same in the participating countries. Results based on item response theory indicate that most PIL items can significantly differentiate responses according to the level of life purpose. In addition, people with low life purpose will tend to choose the lower response alternatives on the PIL; while people with higher life purpose will choose higher response alternatives. The findings indicate that the PIL has the potential to increase knowledge about how people conceive and experience their purpose in life in different countries.

Fluid challenges in intensive care: the FENICE study A global inception cohort study

Fluid challenges (FCs) are one of the most commonly used therapies in critically ill patients and represent the cornerstone of hemodynamic management in intensive care units. There are clear benefits and harms from fluid therapy. Limited data on the indication, type, amount and rate of an FC in critically ill patients exist in the literature. The primary aim was to evaluate how physicians conduct FCs in terms of type, volume, and rate of given fluid; the secondary aim was to evaluate variables used to trigger an FC and to compare the proportion of patients receiving further fluid administration based on the response to the FC.This was an observational study conducted in ICUs around the world. Each participating unit entered a maximum of 20 patients with one FC.2213 patients were enrolled and analyzed in the study. The median [interquartile range] amount of fluid given during an FC was 500 ml (500-1000). The median time was 24 min (40-60 min), and the median rate of FC was 1000 [500-1333] ml/h. The main indication for FC was hypotension in 1211 (59 %, CI 57-61 %). In 43 % (CI 41-45 %) of the cases no hemodynamic variable was used. Static markers of preload were used in 785 of 2213 cases (36 %, CI 34-37 %). Dynamic indices of preload responsiveness were used in 483 of 2213 cases (22 %, CI 20-24 %). No safety variable for the FC was used in 72 % (CI 70-74 %) of the cases. There was no statistically significant difference in the proportion of patients who received further fluids after the FC between those with a positive, with an uncertain or with a negatively judged response.The current practice and evaluation of FC in critically ill patients are highly variable. Prediction of fluid responsiveness is not used routinely, safety limits are rarely used, and information from previous failed FCs is not always taken into account